内皮素阻断对糖尿病高血压大鼠肾脏AT1受体表达的影响

目的 观察糖尿病高血压大鼠肾脏AT1受体的改变以及内皮素受体阻断剂波生坦的影响。方法 将自发性高血压大鼠建成链脲佐菌素诱导的糖尿病模型（SHR－DM）,设柳平舒组、波生坦＋氨氯地平（络活喜）组、络活喜组和非治疗组,4 一采用免疫组织化学、Western印迹法及逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）方法检测肾脏AT1受体基因和蛋白表达。结果 与WKY大鼠对照组相比,SHR－DM大鼠存在明显的蛋白尿和肾功能减退,肾脏AngⅡ水平明显升高,ＡＴ１受体的mRNA和蛋白表达则显著下降。波生坦能使上述异常显著减轻。结论 糖尿病高血压大鼠肾脏ＡＴ１受体表达明显下调;波生坦可减轻ＳＨＲ－ＤＭ大鼠肾脏损害并防止ＡＴ１受体表达下调。     

幼龄SHR大鼠肾脏内皮素系统的改变

目的 观察幼龄高血压大鼠肾脏内皮素－1（ET－1）及其A、B受体的改变。方法 采用免疫组化和RT－PCR方法检测7周龄SHR大鼠肾脏ET－1及其A、B受体mRNA和蛋白水平。结果 与WKY对照组相比,SHR大鼠存在明显的高血压和尿钠、尿量排泄下降,血浆及肾组织中ET含量无显著异常,但是肾血管ETA受体的mRNA和蛋白水平明显升高,而肾脏ET－1及B受体的表达无改变。结论 肾血管ETA受体明显上调可能参与了幼龄高血压大鼠肾脏水钠潴留。     

内皮素与糖尿病造影剂肾病发生的关系研究

目的 :探讨内皮素 (ET)系统与糖尿病 (DM )造影剂肾病发生的关系。方法 :建立单侧肾切除糖尿病肾病模型 ,观察静脉注入 76 %泛影葡胺 (10mg/kg)后血肌酐、肌酐清除率和血浆ET - 1的变化情况 ,以及肾脏ET- 1、ET受体A、B(ETR -A、ETR -B)的表达情况。结果 :单侧肾切除糖尿病大鼠喂养 8周时 ,血肌酐较正常大鼠升高 ,肌酐清除率、血浆内皮素 - 1浓度较正常大鼠明显降低 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;糖尿病大鼠禁水2 4h后注射 76 %泛影葡胺 ,血肌酐升高 ,内生肌酐清除率下降 ,与糖尿病对照组有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,血浆ET - 1浓度较糖尿病对照组有所升高 ,但无显著性差异。DM对照组肾小管间质ET - 1、ETR -A、ETR -B表达较正常对照组显著增加 ,注射 76 %泛影胺后表达增加更明显。结论 :糖尿病肾功能不全时 ,造影剂肾病的发生与内皮素系统特别是肾脏局部内皮素系统可能有关。     

自发性高血压大鼠肾组织醛固酮及其受体与肾脏纤维化

目的观察组织醛固酮及其受体在自发性高血压大鼠肾脏纤维化中的作用。方法8周龄雄性自发性高血压大鼠（SHR）8只及同源正常组京都大鼠（WKY）8只，观察8周，检测收缩压、尿蛋白、血白蛋白、尿素氮和肌酐，大鼠肾组织的醛固酮受体和TGF-β，的mRNA和蛋白的表达。结果SHR．组出现明显的蛋白尿（P〈0．05）和低蛋白血症（P〈0．05），肾间质损伤的评分和肾小球内的胶原形成明显高于正常对照组（P〈0．05），肾组织TGF-β，mRNA和蛋白的表达亦明显高于正常对照组（P〈0．05），同时，SHR．组肾组织的醛固酮及其受体mRNA和蛋白的表达水平亦明显高于正常对照组（P〈0．05）。结论肾组织醛固酮及其受体水平升高可以使醛固酮的致纤维化作用加强，可能是高血压肾脏纤维化的部分原因。     

开搏通治疗SHR糖尿病大鼠对肾功能的影响

目的 :研究系统性高血压在糖尿病肾病发病机理中的作用 ,以及血管紧张素转换酶抑制剂开搏通 ( Captopril)治疗自发性高血压 ( SHR)糖尿病 ( DM)大鼠对肾功能的影响。　 方法 :建立起自发性高血压大鼠链脲菌素 ( STZ)诱导的糖尿病动物模型 ( SHR+DM) ,设立开搏通治疗组、常规三联降压组 (利血平 +肼苯哒嗪 +双氢克尿噻 )、未治疗组及正常对照组。测定 4周及 16周时肾功能包括尿白蛋白排泄量、肌酐清除率 ( Ccr)以及肾小球面积。　 结果 :与正常血压 WKY大鼠比较 ,4周及 16周的早期糖尿病 SHR大鼠即已存在肾功能变化 ,提示高血压可能在糖尿病肾病的发展中起重要作用。　 结论 :开搏通及常规三联降压治疗既能使 SHR+DM大鼠的血压降至正常 ,又可使肾功能变化得到改善 ,而前者作用明显优于后者     

缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏Ang Ⅱ、ET及TGF-β1的影响

目的观察不同剂量血管紧张素受体拮抗剂（ARB）缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1（TGF-β1）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）以及内皮素（ET）的影响,进一步探讨ARB对糖尿病大鼠肾脏的保护作用机制。方法制备SD大鼠链脲佐菌素诱导的糖尿病（DM）模型,设正常对照组、糖尿病组、小剂量治疗组（缬沙坦10 mg·kg^-1·d^-1）、大剂量治疗组（缬沙坦50 mg·kg^-1·d^-1）;9周后采用免疫组织化学方法观察肾脏TGF-β1表达情况,放射免疫方法测定肾脏AngⅡ、ET的含量。结果与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾AngⅡ、ET水平及TGF-β1表达明显升高（P〈0.01）;与糖尿病组相比,小剂量治疗组TGF-β1表达明显下降（P〈0.05）;与小剂量治疗组相比,大剂量治疗组AngⅡ、ET水平明显下降（P〈0.05）,但TGF-β1表达明显升高（P〈0.05）。结论缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏保护作用大剂量优于小剂量;ARB对肾脏保护作用不完全,与激活肾内TGF-β1表达有关。     

福辛普利对自发性高血压大鼠主动脉脂联素受体1表达的影响

目的:探讨福辛普利对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉脂联素受体1表达的影响。方法:24只14周龄SHR大鼠随机分成高血压组、福辛普利10 mg组和福辛普利20 mg组;8只同系魏凯式(WKY)大鼠做对照组。从14周龄起,WKY组和SHR组给予蒸馏水灌胃,福辛普利10 mg组和福辛普利20 mg组分别给予福辛普利10 mg/(kg.d)和20 mg/(kg.d)灌胃。8周后采血测定脂联素浓度,取血管组织HE染色后测定中膜厚度(MT)与胸主动脉内径(LD)比值,通过免疫组化法检测脂联素受体1蛋白的表达。结果:8周后,与高血压组相比,福辛普利低剂量组和高剂量组血压水平明显降低,高血压血管重构改善,血清脂联素水平以及主动脉脂联素受体1蛋白的表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:SHR大鼠主动脉脂联素受体1表达下调,福辛普利可通过升高SHR大鼠胸主动脉脂联素受体1的表达而改善血管重构。     

罗格列酮经LRP-1途径降低糖尿病大鼠脑微/小血管中β-淀粉样蛋白含量的研究

目的研究罗格列酮对不同病程糖尿病大鼠脑微/小血管中低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的影响及其清除β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)的机制。方法采用自发性2型糖尿病大鼠(GK大鼠)作为动物模型,将其按病程分为6月龄及3月龄2组,其中6月龄组再随机分为罗格列酮干预组(DM6RSG组)和非干预组(DM6组),3月龄GK大鼠(DM3组)作为病程对照组;采用免疫组织化学法定位检测各组脑微/小血管上Aβ1-40及LRP-1的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组脑组织中Aβ1-40及LRP-1蛋白的表达量,RT-PCR定量检测脑组织中LRP-1mRNA的表达。结果与DM3组相比,DM6组Aβ1-40的表达明显增加(P<0.01);与DM6组相比,DM6RSG组Aβ1-40的表达明显减少(P<0.01),LRP-1和LRP-1mRNA的表达均明显增加(P均<0.05)。结论随糖尿病病程增长,Aβ1-40在脑微/小血管中沉积明显增多,罗格列酮可上调LRP-1和LRP-1mRNA的表达并明显减少Aβ1-40在糖尿病脑组织微/小血管中的沉积。     

糖尿病大鼠肾脏肾素及其受体表达改变

目的 研究链脲佐菌素糖尿病大鼠肾脏肾素及肾素受体表达变化情况.方法 12只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(N组)、糖尿病组(DM组).大鼠左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg建立糖尿病模型.测定第4、8周尿蛋白.8周后心脏取血检测血糖、血肌酐、血钠、血钾;取肾脏行PAS染色观察病理改变;免疫组化检测肾脏肾素和肾素受体表达水平;RT-PCR检测肾脏肾素和肾素受体mRNA表达水平.结果 DM组4周始相同时间段尿蛋白较N组升高(P<0.01),8周时DM组24 h尿蛋白较N组明显升高(P<0.01);DM组8周时肾小球损伤指数明显高于N组(P<0.05);免疫组化和RT-PCR检测显示DM组肾素表达较N组明显升高(P<0.05),而肾素受体表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 肾脏肾素表达增加可能参与糖尿病肾脏早期损伤.     

N-ras在自发性高血压和两肾一夹型高血压大鼠肾脏动脉丛表达的比较研究

目的比较观察N-ras在自发性高血压大鼠(SHR)和两肾一夹型高血压大鼠(2K1C)肾脏血管平滑肌细胞中的表达,探讨N-ras与高血压肾脏血管重构的关系及高血压血管重构发生的机制。方法用免疫组织化学和Western blot方法检测16周龄和24周龄SHR大鼠和2K1C大鼠肾脏血管丛平滑肌细胞以及肾小球内皮细胞中N-ras的表达,同周龄正常血压WKY大鼠作为对照。结果 N-ras在SHR组和2K1C组表达高于WKY组(P<0.05)。N-ras在16周龄和24周龄2K1C组各级肾脏血管丛,包括小叶间动脉、弓形动脉、叶间动脉和入球小动脉的血管平滑肌细胞,以及肾小球内皮细胞的表达均高于SHR组(P<0.05)。结论癌基因N-ras的高表达可能参与了高血压大鼠肾脏的血管重构,两肾一夹型高血压大鼠肾脏中的N-ras表达高于自发性高血压大鼠。     

Endothelin receptor antagonist combined with a calcium channel blocker attenuate s renal injury in spontaneous hypertensive rats with diabetes

Objective To investigate the effects of the mixed endothelin receptor antagonist, bosentan, combined with the long- acting calcium channel blocker, amlodipine, compared to the angiotensin- converting enzyme inhibitor, cilazapril, on the progressive renal injury in spontaneous hypertensive rats (SHR) with diabetes.Methods Diabetic hypertensive rats (SHR- DM) were induced by streptozotozin injected in male SHR (7- week- old), and divided into an untreated and three treated groups: ① cilazapril treated group; ② bosentan+amlodipine treated group; and ③ amlodipine treated group. Wistar Kyoto rats (WKY) and SHR rats served as normotensive and hypertensive control, respectively. The mean arterial blood pressure, renal function, endothelin and angiotensin Ⅱ levels as well as the protein expression of renal extracellular matrix components and transforming growth factor (TGF)- β1 were determined at the end of the 4th week.Results Mean arterial blood pressure significantly increased in SHR and SHR- DM rats compared to WKY rats. All the therapies reduced the blood pressure to normal levels. However, the enhanced urinary protein excretion, the decreased creatinine clearance as well as the increased plasma and intrarenal endothelin and angiotensin Ⅱ levels were found in the untreated SHR- DM and prevented by treatment with bosentan+amlodipine and cilazapril. Similarly, these two kinds of therapies in SHR- DM abolished the overexpression of renal TGF- β1 by Western blot analysis and reduced the accumulation of collagen type Ⅳ, laminin and fibronectin proteins by an immunochemical approach. Amlodipine monotherapy had no detectable effects on the above parameters. Conclusion Bosentan combined with amlodipine can offer similar renoprotective effects on that of cilazapril and may be a potent therapy to attenuate renal injury by reducing renal protein levels of TGF- β1 in diabetes with a hypertensive state.     

Role of endothelin in the pathogenesis of hypertension in spontaneously hypertensive and 2 kidneys 1 clip rats.

The plasma endothelin (ET) level in spontaneously hypertensive rats (SHR) and 2K1C hypertension animal models and its vasoconstrictive effect on renal and tail arteries were studied. The results demonstrated that there was no difference in plasma ET level between the hypertensive groups SHR, 2K1C, normotensive control groups Wistar Kyot (WKY) and Sprague Dawley (SD), while the vasoconstrictive effect of ET in SHR was more dominant than in WKY. The EC50 of the renal and tail arteries in SHR (0.8912 +/- 0.1662 x 10(-8) M, 0.6103 +/- 0.0878 x 10(-8) M) was apparently lower than that in WKY (1.77 +/- 0.2991 x 10(-8) M, 1.2267 +/- 0.2502 x 10(-8) M, P less than 0.05), but no difference was found in 2K1C and SD rats. The four groups of animals exhibited no difference of such effects as response to norepine-phrine (NA). The findings suggested that the increased arteriole sensitivity to ET be an important factor in the pathogenesis of hypertension in SHR.

     

大黄酸治疗大鼠糖尿病肾病的实验研究

目的观察大黄酸对糖尿病大鼠肾脏损害的治疗作用及其对糖尿病大鼠尿、肾脏中内皮素的含量的影响.方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型,观察12周时肾脏损害和尿、肾脏组织内皮素(ET)的变化,以及经大黄酸(70 mg/kg)治疗后的变化.结果糖尿病大鼠12周时肾质量/体质量(RW/BW)降低,肾小球平均面积(MGPA)和肾小球平均体积(MGV)增大,内生肌酐清除率(Ccr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白排泄量(UPE)明显升高(P<0.01).肾组织ET含量、24 h尿ET排泄量(UET)显著升高(P<0.01).经大黄酸治疗的糖尿病大鼠肾质量/体质量、MGPA、MGV降低,Ccr、BUN、UPE减少,UET和肾组织ET含量降低.结论大黄酸能改善糖尿病大鼠肾脏功能,这可能与减少肾脏ET的生成有关.     

Role of endothelin in the pathogenesis of experimental hypertension in rats

The plasma endothelin (ET) level in SHR and 2K1C hypertension animal models and its vasoconstrictive effect in their renal and tail arteries were studied. The results demonstrated that there was no difference of plasma ET level between the hypertensive groups SHR, 2K1C and the normotensive control groups WKY and SD, while the vasoconstrictive effect of ET in SHR was were more predominant than that in WKY. The EC50 of the renal and tail arteries in SHR (0.8912 +/- 0.4398 x 10(-8) M, 0.6103 +/- 0.2633 x 10(-8) M) were apparently lower than those in WKY (1.711 +/- 0.7327 x 10(-8) M, 1.2667 +/- 0.6129 x 10(-8) M, (P less than 0.05); but there was no difference between 2K1C and SD rats. The four groups of animals mentioned above exhibited no differences of such effects in response to norepinephrine (NA). The results suggested that the increased arteriole sensitivity to ET was an important factor in the pathogenesis of hypertension in SHR.     

牛磺酸对糖尿病大鼠血浆、肾脏内皮素和一氧化氮水平的调节作用

目的：观察牛磺酸对糖尿病大鼠血浆、肾脏内皮素（ Ｅ Ｔ）和一氧化氮（ Ｎ Ｏ）水平的调节作用。方法：链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠接受牛磺酸（３００ ｍ ｇ／ｋｇ）处理 ３ 周后,测定血浆 Ｅ Ｔ、 Ｎ Ｏ、尿 Ｅ Ｔ 和肾皮质 Ｎ Ｏ 水平。结果：链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血浆 Ｅ Ｔ、肾皮质 Ｎ Ｏ 水平和尿 Ｅ Ｔ 排泄量均较对照组明显升高,而血浆 Ｎ Ｏ 水平明显降低;牛磺酸处理的糖尿病大鼠上述参数均有不同程度逆转。结论：牛磺酸可影响糖尿病状态下 Ｅ Ｔ 和 Ｎ Ｏ 的合成和／或释放。     

自发性高血压大鼠内皮素不同组织分布及其意义

为探讨内皮素(ET)在自发性高血压大鼠(SHR)与正常血压大鼠(WKY)体内分布规律及其意义。本文选用SHR和WKY大鼠各10只,用放免法测定其血浆、脑组织和主动脉血管组织中内皮素含量的变化。发现SHR血浆、脑和主动脉中ET量均显著高于WKY组(P分别<0.01);WKY组脑较血管组织含量低(P<0.01),SHR组两者无显著性差异(P>0.05)。认为内皮素不同组织分布的变化可能与高血压的发生发展及并发症有关。     

福辛普利和缬沙坦对自发性高血压模型鼠肾损害中的作用

目的探讨福辛普利（FDsinopril）和缬沙坦（Valsartan）对自发性高血压模型鼠肾损害中的作用。方法20只22周龄雄性SHR,随机分为高血压组（SHR组）、福辛普利组（Fos组）、缬沙坦组（val组）和福辛普利＋缬沙坦组（Fos＋Val组）,22周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠（WKY组）5只为对照组。检测各组大鼠体重,尾动脉血压,24h尿蛋白定量,尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG酶）,左肾,体重比值和血肌酐。HE及Masson染色,显微镜下观察肾脏病理改变。结果实验第8周（30周龄）,SHR组收缩压明显高于WKY组,Fos组,Val组及Fos＋Val组（P均〈0．05）,而Fos组,Val组及Fos＋Val组收缩压与WKY组比较无统计学差异（P〉0．05）;Fos组,Val组及Fos＋Val组大鼠血肌酐和尿NAG酶明显低于SHR组（P均〈0．05）,而实验前与实验第8周大鼠蛋白尿排泄量差值（△Upro）均高于SHR组（P〈0．05）。SHR组大鼠肾脏出现高血压肾脏损害的病理特征,胶原沉积增多,经Fos和,或Val干预后,高血压引起的肾脏改变明显改善。结论福辛普利和缬沙坦均有保护肾功能、延缓高血压导致肾间质纤维化的作用,但两者联合应用较单一用药在自发性高血压模型鼠中并不产生更大的降低尿蛋白和肾脏保护作用。