RBC花环法识别精液中T淋巴细胞的研究

目的：研究一种识别精液中T淋巴细胞的方法，方法：以96例男性不育症门诊病人为测试对象，用冻干抗人T淋巴细胞单克隆抗体致敏的RBC与处理后的精液混合，置于显微镜下观察结果。结果：丹粘附3个以上致敏RBC者为淋巴细胞，未粘附RBC者为生精细胞。结论：用RBC花环法识别精液中的T淋巴细胞可以作为一种切实可行的方法在临床上应用。     

入淋巴细胞CD2胞内区结合蛋白的分子克隆

CD2分子,又称E受体,分布于胸腺细胞及所有成熟T淋巴细胞和大部分NK细胞的表面,是T淋巴细胞的粘附和信号分子,在T淋巴细胞分化、成熟、识别、粘附、激活和凋亡等方面都具有重要作用.CD2分子的胞内区含有能调节细胞识别作用、粘附作用和细胞信号传递作用的不同功能区.近年的研究发现,CD2与其配体CD58、CD48的结合介导T细胞识别、粘附和激活作用.而以抗CD2不同抗原决定簇的单克隆抗体处理T细胞,则引起T细胞的不同应答反应.T112和T113处理T淋巴细胞引起细胞激活,而T11l和D66处理T淋巴细胞引起细胞激活后凋亡(activation induced cell death),其原因尚不明了.本实验室在多年研究的基础上推测,CD2胞内区可能传递不同的刺激信号,从而引起不同的细胞应答反应.为了验证这一假说,本研究采用酵母双杂交系统(two hybrid system),首次克隆得到了一与CD2胞内区结合的下游蛋白,并对该蛋白的功能进行探讨,结果如下:采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人外周血淋巴细胞mRNA中扩增了CD2胞区cDNA片段,并将其命名为CD2c.     

煤矿工人红细胞免疫粘附功能变化的探讨

目的:探讨煤矿工人红细胞免疫粘附功能的变化。方法:采用补体致敏酵母菌凝聚花环法测定了某煤矿井下采煤工人和煤工尘肺病人血液红细胞免疫粘附功能。结果:接煤尘组和煤工尘肺RBC.C_3b.RT显著低于对照组(P<0.01)。接煤尘组和煤工尘肺组RBC.IC.RT显著高于对照组(P<0.01)。结论:煤尘导致煤工尘肺的发展过程中,红细胞免疫系统及其功能可能发生改变,表现为继发性红细胞免疫功能低下。     

共聚物-1致敏T淋巴细胞保护MPTP帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元

目的明确C57BL/6J小鼠MPTP模型保护黑质多巴胺(dopamine,DA)神经元的共聚物-1(Copolymer-1,Cop-1)致敏淋巴细胞的类型。方法将80只雄性C57BL/6J小鼠分为Cop-1/BSA致敏淋巴细胞移植组、Cop-1/BSA致敏T淋巴细胞移植组、去T淋巴细胞Cop-1/BSA致敏淋巴细胞移植组、MPTP模型组和正常对照组,每组10只。C57BL/6J小鼠1d内接受4次MPTP(18mg.kg-1)腹膜腔注射,每次注射间隔2h,正常对照组动物仅接受等量的0.9%氯化钠注射液注射。MPTP末次注射后,除MPTP模型组和正常对照组动物外,其他组动物立即分别接受不同的Cop-1/BSA致敏淋巴细胞移植。细胞移植7d后处死动物,取脑。酪氨酸羟化酶免疫组化及体视学方法定量分析黑质DA神经元数。结果黑质DA神经元定量分析显示,MPTP注射使模型对照组黑质DA神经元减少到正常对照组的37.68%,BSA致敏淋巴细胞移植组(38.15%)、BSA致敏T淋巴细胞移植组(41.44%)和去T淋巴细胞的Cop-1/BSA致敏淋巴细胞移植组结果(Cop-1:40.06%,BSA:34.81%)和模型对照组类似。而Cop-1致敏淋巴细胞移植和Cop-1致敏T淋巴细胞移植组黑质DA神经元数为正常对照组的74.38%和84.64%,DA神经元数明显高于模型对照组、BSA致敏淋巴细胞移植组和去除T淋巴细胞的BSA/Cop-1致敏淋巴细胞移植组(P<0.01)。结论在MPTPC57BL/6J小鼠模型,Cop-1致敏T淋巴细胞可有效对抗MPTP毒性,保护黑质DA神经元。     

用白细胞粘附抑制法鉴定HBV—TF特异免疫活性

选用白细胞粘附抑制试验来鉴定乙肝特异性转移因子(HBV-TF)免疫活性。实验结果表明:经HBV-TF致敏的淋巴细胞与乙肝抗原(HBV-Ag)孵育后,显示出明显的粘附抑制活性,而非特异性转移因子(TFn)致敏淋巴细胞与乙肝抗原孵育、HBV-TF致敏淋巴细胞与甲肝抗原(HAV-Ag)孵育或HBV-TF致敏淋巴细胞与1640液(代替抗原液)孵育时均不能表现出这种抑制作用,说明HBV-TF具有抗原特异性免疫活性。实验证明,本法是体外鉴定HBV-TF免疫活性简便易行的方法。     

肿瘤抗原致敏DC诱导T淋巴细胞增殖及杀伤效率

目的:探讨胃癌细胞抗原致敏的树突状细胞(DC)诱导T淋巴细胞(T lymphocyte)增殖和杀伤胃癌细胞的效率.方法: 应用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,经重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhlL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),体外诱导培养获取成熟DC,流式细胞术检测DC表面CD83,CD80,CD86及HLA-DR表型;同时经重组人白细胞介素2(rhlL-2)诱导扩增T淋巴细胞,检测CD3,CD4,CD8及CD56表型.以人胃癌OCUM-2MD3细胞株冻融抗原致敏DC,然后刺激T淋巴细胞,得到肿瘤抗原特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL).MTT法检测致敏DC对T淋巴细胞增殖的影响和致敏DC活化的特异性CTL对胃癌细胞的体外杀伤效率.结果: 体外诱导人外周血单个核细胞,可获得大量形态典型、具备强烈刺激增殖能力、且高表达CD80,CD86的DC及高表达CD3的T淋巴细胞;MTT法检测结果发现胃癌细胞抗原致敏DC组刺激T淋巴细胞增殖指数显著高于未致敏DC组和对照组(P<0.01);流式细胞术检测结果发现胃癌细胞抗原致敏DC主要刺激T淋巴细胞增殖为CD8 的CTL(60.58±8.43)%,经胃癌细胞抗原致敏DC刺激后,对胃癌细胞的杀伤效应显著增加,致敏DC组对胃癌细胞杀伤活性(71.57±4.83)%,较未致敏DC组(12.53±1.62)%和单纯T淋巴细胞组(10.45±1.40)%作用更为显著(P<0.01),而且随着效靶比增加,其杀伤效应亦显著增加.结论: 胃癌细胞抗原致敏DC可显著刺激T淋巴细胞增殖为CD8 CTL,进而发挥其高效杀伤胃癌细胞的作用.     

致敏树突状细胞介导CTL抗骨髓瘤免疫的实验研究

目的比较两种树突状细胞(骨髓瘤致敏DC和未致敏DC)诱导的细胞毒T淋巴细胞抗自身骨髓瘤的细胞免疫：方法用多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓CD34^ 细胞诱生DC,将MM患者骨髓瘤冻融物冲击致敏DC。MTT法检测骨髓瘤抗原致敏和未致敏DC诱导的自身T细胞对患者骨髓瘤细胞的杀伤率。结果骨髓瘤冻融物致敏DC诱导的自身T细胞对患者骨髓瘤细胞的杀伤率远大于非致敏DC。结论患者骨髓瘤冻融物致敏的DC能有效诱导自身T细胞抗骨髓瘤免疫。     

致敏树突状细胞介导CTL抗骨髓瘤免疫的实验研究

目的比较两种树突状细胞(骨髓瘤致敏DC和未致敏DC)诱导的细胞毒T淋巴细胞抗自身骨髓瘤的细胞免疫.方法用多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓CD34+细胞诱生DC,将MM患者骨髓瘤冻融物冲击致敏DC.MTT法检测骨髓瘤抗原致敏和未致敏DC诱导的自身T细胞对患者骨髓瘤细胞的杀伤率.结果骨髓瘤冻融物致敏DC诱导的自身T细胞对患者骨髓瘤细胞的杀伤率远大于非致敏DC.结论患者骨髓瘤冻融物致敏的DC能有效诱导自身T细胞抗骨髓瘤免疫.     

食管贲门癌患者红细胞免疫功能和T淋巴细胞亚群检测及其意义

目的观察和探索食管贲门癌患者红细胞免疫功能和T淋巴细胞亚群手术前后的变化及其临床意义。方法按郭峰法，由上海长海医院免疫室提供冻千致敏酵母菌试剂测定RBC—C3bRR、RBC—ICK、CIC；由上海华美公司提供单克隆抗体，使用间接荧光法测定T淋巴细胞亚群，对30例食管贲门癌患者和20例对照组进行检测。结果术前RBC—C3bRR％降低、CIC％增高，术后值相反（P〈0．01）；T淋巴细胞亚群CD3^＋、CD4^＋,CD4^＋／CD8^＋，术前与对照组相比均降低，CD8^＋增高（P〈0．01），术后差异无显著性。结论红细胞免疫功能和T淋巴细胞亚群检测可为食管贲门癌患者的辅助诊断、效益评定和预后监测提供一项免疫学参考指标。     

M蛋白致敏树突状细胞诱导的抗骨髓瘤细胞效应

目的:探讨M蛋白致敏树突状细胞(DC)诱导激活的自体T细胞对骨髓瘤细胞特异性免疫杀伤效应.方法:取多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单核细胞经GM-CSF、IL-4和TNF-α体外联合诱导生成DC,用DEAE-纤维素提取法自MM患者血清中分离、纯化M蛋白.以M蛋白冲击致敏DC(同时设未致敏的DC为对照),流式细胞术分析DC免疫表型,并与自体T淋巴细胞进行混合淋巴细胞反应.51Cr释放法测定T细胞对不同靶细胞(患者骨髓瘤细胞、U266细胞)的杀伤活性.结果:经M蛋白致敏的DC激发自体T细胞增殖的能力明显强于未致敏的DC(P＜0.05);同时负载M蛋白DC激活的T细胞杀伤活性也明显强于对照组(P＜0.01),而两组T细胞对U266细胞均无明显杀伤活性.结论:M蛋白致敏DC能有效诱导自体T细胞对骨髓瘤细胞的特异性杀伤作用.     

顽疣净对郎格汉斯细胞刺激T细胞增殖和分泌Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察顽疣净含药血清对对郎格汉斯细胞(LC)刺激T细胞增殖和分泌Th1/Th2细胞因子的影响。方法:以顽疣净含药血清干预分离的人表皮LC。用同种异体混合T淋巴细胞反应,观察顽疣净含药血清对LC刺激T淋巴细胞增殖的影响;用ELISA法检测混合T淋巴细胞反应上清中IFN-γ和IL-10表达,了解顽疣净含药血清对LC调节Th分化的影响。结果:顽疣净含药血清干预后的LC刺激T细胞增殖能力提高,能提高混合T淋巴细胞反应上清中IFN-γ表达,抑制IL-10分泌。结论:顽疣净含药血清体外具有调整LC功能的作用。     

精液中分类白细胞对精液质量参数的影响

60例男性不良患者精液标本,采用一种免疫组织化学技术分析精液中白细胞类型和数量。结果显示高浓度的中性粒细胞和单核/巨噬细胞可减少精液量;高浓度的中性粒细胞对精子总数和总活动精子数有降低作用。高浓度的T淋巴细胞可显著的降低精子活率。     

T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶测定法——咸宁地区122名健康人的正常值

<正> 据Kulenkempff J等报导,T淋巴细胞中酸性α-醋酸萘酯酶(Acid α-Naphthyl Acetate Esterase简称ANAE),能将结构中具有酯键的化合物水解为酚和酸性离子,即R—CooR′+HOH→RCooH+R′OH。例如:α-醋酸萘酯可被酯酶水解为α-萘酚和乙酸离子,然后α-萘酚与六偶氮副品红偶联形成棕红色,根据这个原理进行试验,可以反映机体T淋巴细胞的免疫功能。因     

嵌合锚定T细胞致癌胚抗原阳性胃癌细胞的凋亡效应

目的探讨CEA靶向性嵌合锚定T细胞的制备方法,并检测其活化功能及诱导CEA阳性胃癌细胞的杀伤活性。方法分离外周血单个核细胞（PBMC）,然后用免疫磁珠分离得到CD8^＋T细胞。将重组真核表达载体抗-CEA-scFv-CD3 zeta-pcDNA3．0采用脂质体转染上述T细胞以制备CEA靶向性的嵌合锚定T细胞;用流式细胞仪检测其CD69的表达,以检测嵌合锚定T细胞活化功能;将嵌合锚定T细胞与胃癌细胞HGC-27、SGC-7901共培养,检测后者膜联蛋白V的表达,分析嵌合锚定T细胞致胃癌细胞的凋亡效应。结果将已制备的CEA靶向性嵌合锚定T细胞培养12h、24h后,检测T细胞的活化信号CD69表达率分别为40．5％±3．4％、48．3％±2．8％,证明嵌合锚定T细胞具备活化功能。检测与嵌合锚定T细胞共培养的胃癌细胞HGC-27、SGC-7901,凋亡率分别为47．8％±4．2％、18．7％±2．8％,两者之间有统计学意义（P〈0．05）。结论CEA靶向性嵌合锚定T细胞可特异性识别CEA阳性胃癌细胞并促使后者凋亡,这种治疗策略将为胃癌的临床诊治提供一种有希单的涂释。     

用等电聚焦免疫印迹法测精液(斑)、阴道液以及混合斑中T_f的亚型

作者用等电聚焦免疫印迹法（ＩＥＦＩＢ）对人类精液（斑）、阴道液及混合斑中转铁蛋白（Ｔｆ）亚型进行了检测，结果发现８份精液和室温下保存３２周的精斑与同一个体血清的Ｔｆ亚型相同，用ＩＥＦＩＢ法未测出阴道液及含少量精液的混合斑中Ｔｆ的亚型。结果提示：Ｔｆ在精斑中稳定，ＩＥＦＩＢ法可检测强奸案的精斑和含精液较多的混合斑中Ｔｆ的亚型。     

应用E-玫瑰花环试验检测动物T细胞

[目的 ]对人和几种动物的淋巴细胞数目进行测定 .[方法 ]应用T淋巴细胞玫瑰花环实验 .[结果 ]马的淋巴细胞与豚鼠的红细胞结合好 ,但不能与绵羊的红细胞结合 .牛的淋巴细胞与绵羊红细胞及豚鼠红细胞结合好 .豚鼠淋巴细胞与兔红细胞结合率高 .[结论 ]在测定动物的T细胞数时 ,必须同时测试几种动物的红细胞 ,否则T细胞数目将不准确     

SIMULTANEOUS DETECTION OF T, B, D, AND N LYMPHOCYTES IN HUMAN CEREBROSPINAL FLUID BY MIXED ROSETTE (E-YC 3) ASSAY

An E-YC mixed rosette assay for detecting T, B, D and N lymphocytes in human cerebro- spinal fluid (CSF) simultaneously is simple and reproducible9 and it requires less CSF. The mean values of lymphocyte subpopulations in 20 cases of various nonimmune diseases of the nervous system were counted by the method. Compared with the bloo-d values, the percentage of T- lymphocytes in CSF was higher, B- and N-lym- phocytes were lower and D-lymphocytes were the same. Several explanations are sugZested for these results.     

多排螺旋CT和超声内镜诊断胃肠道神经内分泌肿瘤的对比分析

目的探讨多排螺旋CT和超声内镜对胃肠道神经内分泌肿瘤的诊断价值。方法回顾性分析38例经手术后病理证实的GI-NEN的MSCT和超声内镜资料,并与手术病理结果相对照;分析统计两种影像方法对GI-NEN的检出率、T3、T4和N分期的符合率。结果 MSCT、EUS对GI-NEN的检出率分别为81.6%、94.7%(P=0.041),MSCT低于EUS;MSCT和EUS对肿瘤T3、T4和N分期的符合率分别为T3:81.8%、63.6%(P=0.039),T4:77.8%、44.4%(P=0.034),N:68.8%、43.8%,(P=0.033),MSCT的符合率高于EUS。结论 EUS可作为检出GI-NEN首选的影像学检查     

3种精子优化处理方法处理精液效果评价

目的：为了解上游法、Percoll梯度离心法、Isolate密度梯度离心法等精子优化处理方法处理精液的效果。方法：选取120例女性原因引起继发不孕的夫妇,将男方的精液标本按处理方法不同随机分4组,即为上游组、Percoll组、Isolate组和对照组,应用指标精子密度、a＋b级活力、正常形态率和绿色荧光精子百分率,对精液处理后的效果进行比较。结果：上游组、Percoll组和Isolate组,富集的精子a＋b级活力、正常形态率、绿色荧光精子明显高于对照组（P〈0.01）,Percoll组和Isolate组的精子密度与对照组无明显差异（P〉0.05）,但上游组的精子密度很明显低于对照组（P〈0.01） 上游组、Percoll组及Isolate组之间比较,富集的精子a＋b级活力、正常形态率没有明显差异（P〉0.05）,但精子回收Percoll密度梯度离心法和Isolate密度梯度离心法明显高于上游法（P〈0.01）,Isolate密度梯度离心法富集绿色荧光精子最多,上游法次之,Percoll密度梯度离心法最低。结论：Isolate密度梯度离心法处理精液效果较好。     

微粉化对马钱子溶出度的影响

目的 考察微粉化时制马钱子中士的宁、马钱子碱溶出度的影响.方法 采用《中华人民共和国药典》2010年版二部附录溶出度浆法,用HPLC测定,分别在人工胃液和人工肠液(无酶)模拟体内环境的溶出介质下,转速50r/min,体积为900 mL,比较微粉化前后马钱子粉的溶出行为.结果 以T50、Td、T90为溶出度参数,在人工肠液中,以马钱子碱、士的宁为考察指标,马钱子超微粉分别为0.38、1.33、19.50,0.39、1.31、17.63 min;马钱子粗粉分别为19.43、44.53、249.12,20.84、44.96、229.95 min.在人工胃液中,以马钱子碱、士的宁为考察指标,马钱子超微粉分别为0.32、1.25、20.60,0.45、1.41、20.81 min;马钱子粗粉分别为20.53、43.31、220.30,20.76、46.02、241.82 min,两者比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 微粉化能提高马钱子中士的宁、马钱子碱的溶出量与溶出速度.