原发性肝细胞癌铁蛋白免疫组织化学反应

采用过氧化物酶——抗过氧化物酶方法(PAP法),在40例肝细胞癌组织中21例(52.5％)及癌周36例(90％)肝组织中证实了铁蛋白的存在,癌周阳性率明显高于癌组织,两者比较差别有非常显著性意义(P<0.01)。结果表明,原发性肝细胞癌病人血清铁蛋白升高,可能是癌组织本身产生并分泌至血循环所致。铁蛋白可能是原发性肝细胞癌的一种标志,但不具特异性。在讨论中结合文献强调了酸性同功铁蛋白对原发性肝细胞癌的诊断价值。     

华枝睾吸虫铁蛋白分子生物学特性的研究(英文)

目的华枝睾吸虫铁蛋白的表达,定位和酶特性的进行研究。方法华枝睾吸虫表达序列标志(EST)基因文库中选择克隆,作序列测定及基因分析。经酶切并重组到pRSET质粒,在E.coli BL21[DE3]pLysS菌株中表达和提纯重组蛋白,并用于鼠抗CsFtn重组蛋白免疫血清制备及亚铁氧化酶活性。结果华枝睾吸虫铁蛋白cDNA(CsFtn),具565个核苷酸,编码166个氨基酸。CsFtn核苷酸序列中含一环颈结构类似序列,与铁离子调控序列(iron-responsive element)相似。CsFtn多肽序列与其它吸虫铁蛋白有较高的序列同一性。通过基因亲远关系分析,和多种血吸虫铁蛋白的轻链位于同一簇。CsFtn重组蛋白和马铁蛋白比较,同样具有亚铁氧化酶活性,呈现铁吸收转化能力。免疫组化分析表明,CsFtn重组蛋白定位于肝吸虫成虫卵黄滤泡和虫卵内。结论CsFtn为肝吸虫卵黄铁蛋白的基因。     

肝癌患者放射免疫治疗后血清抗抗体检测

本文采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测10例肝癌患者~(131)I抗人肝癌铁蛋白抗体放射免疫治疗后的血清抗抗体反应。其中6例经肝动脉插管给药,另4例经外周静脉给药。分别收集用药后第7、14、21、30和60天的患者血清标本进行动态检测,结果:静脉给药组4例中,有1例测得抗抗体,而肝动脉插管给药组6例均未测得抗抗体。     

抗中性粒细胞抗体在血栓闭塞性脉管炎中的临床应用

目的:探索抗中性粒细胞胞浆抗体(Antineutrophil cytoplasmic antibody, ANCA)及其特异性抗原在血栓闭塞性脉管炎(Thromboangiitis obliterans,TAO)中的表达.方法:TAO组23例,动脉硬化闭塞组(Arteriosclerosis obliterans,ASO)25例,健康组25例.采用间接免疫荧光法(Endirect immunofluorescence,IIF)检测3组中ANCA.用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked -immu nosorbentassay,ELISA)检测TAO组和健康组ANCA抗蛋白酶3(PR3)、髓过氧化物酶(MPO)、人白细胞弹性蛋白酶(HLE) 、乳铁蛋白酶(LF)、组织蛋白酶G(CG)、杀菌/渗透性增高蛋白(BPI)抗体.结果:(1) 23例TAO组患者中有12例ANCA阳性,检测率为52.2%.25例ASO组患者有1例ANCA阳性,检测率4%.健康组未检测出ANCA阳性.(2) TAO组重度患者ANCA的临床检出率(66.7%;10/15)及ANCA滴度均要高于中度患者(25%;2/8).(3)12例ANCA阳性血清中有5例抗髓过氧化物酶(MPO)抗体为阳性,有3例抗乳铁蛋白酶(LF)抗体为阳性,1例抗人白细胞弹性蛋白酶(HLE)抗体为阳性,1例抗杀菌/渗透性增高蛋白(BPI)抗体为阳性,抗蛋白酶3(PR3)抗体,抗组织蛋白酶G(CG)抗体均为阴性.(4)4种阳性抗体均发现于严重血栓闭塞性脉管炎患者中.结论:ANCA的检测率和抗体水平与疾病的严重程度有关,ANCA的检测对临床血栓闭塞性脉管炎是1个有效的血清学检查.     

乳铁蛋白在肿瘤治疗中的作用机制

 乳铁蛋白具有抗肿瘤活性。乳铁蛋白可通过增强宿主防御、抑制增殖、诱导凋亡,阻断细胞周期、抗血管生成,调控致癌物代谢酶以及清除铁等机制发挥抗肿瘤作用。乳铁蛋白的安全无毒性为人类肿瘤的治疗提供了新的选择。     

肝癌阳性扫描与导向治疗

肿瘤导向研究是近年十分活跃的研究领域,我们自1982年起进行肝癌的阳性显像及导向治疗的研究,对7种亲肝癌物质进行筛选,其中的2种已初步应用于临床。7种亲肝癌物质包括抗肝癌铁蛋白抗体、抗甲胎蛋白抗体、抗甲胎蛋白单克隆抗体(上海生物制品研究所提供)、抗人肝癌细胞单克隆抗体(上海细胞生物研究所提供)以及非抗体类化学物质乙二胺二乙酸(EDDA)、吡哆醛色氨酸(PMT)及罗丹明(Rh-6GDN),其中抗体及罗丹明用~(131)Ⅰ或~(125)Ⅰ标记,EDDA及PMT用~(99m)Tc标记,在裸鼠人肝癌模型及人肝癌细胞株中进行阳性显像研究,对显像效果较好的抗人肝癌铁蛋白抗体及PM     

血清铁蛋白测定在临床中的应用

铁蛋白(Ferritin,Ft)是存在于所有真核细胞中的一种含铁蛋白质,主要以贮存铁的形式存在于肝、脾和骨髓等网状内皮系统内,血清中含量甚微但具有重要的生理功能与临床意义。自从1972年Addison等人将放射免疫分析法(RIA)创用于血清铁蛋白(SF)的测定以来,国外有关SF的研究已有大的进展,已广泛应用于血液学、肿瘤学、营养学、免疫学、生物化学、核医学及临床医学的许多领域中。武汉有关单位从1980年4月开始SF研究,已经建立了从人肝脾提取人铁蛋白的方法,并在此基础上制备特异性人铁蛋白第一抗体与第二抗体、抗原与抗体     

运铁蛋白及其抗血清的制备和癌细胞株运铁蛋白受体的检测

本文介绍用利凡诺(Rivanol)沉淀、硫酸铵盐析及DEAE-SephadexA50层析法提纯人血清运铁蛋白(T_(?)),并用它免疫家兔,制备兔抗人运铁蛋白单价特异抗血清。采用间接免疫酶标法检测人体培养细胞株运铁蛋白受体。证明人宫颈癌培养细胞(Hela细胞)及五株人肝癌培养细胞(BEL-7402、BEL-7405、SMMC-7721、QGY-7703及Mahlavn)的细胞膜上均具有丰富的运铁蛋白受体。     

抗乳铁蛋白单链抗体制备及鉴定

目的制备特异性的可溶性抗乳铁蛋白单链抗体。方法铁蛋白的单链抗体克隆,转化至大肠杆菌HB2151中进行可溶性表达。用固相化的乳铁蛋白从天然噬菌体抗体库筛选出抗乳表达产物以镍离子亲和层析法纯化,并进一步鉴定其纯度、活性等。结果成功筛选并表达了抗乳铁蛋白的单链抗体,该抗体能与乳铁蛋白特异性结合,而与转铁蛋白、溶菌酶、小牛血清白蛋白无交叉反应。结论建立了一种抗乳铁蛋白单链抗体的有效制备途径,为其进一步临床应用的研究奠定了基础。     

抗人胎盘酸性同功铁蛋白单克隆抗体制备及对原发性肝癌诊断的研究

从人胎盘组织中提取纯化出酸性同功铁蛋白（ＡＩＦ），应用杂交瘤技术，获得５株能稳定和抗人胎盘酸性同功铁蛋白单克隆的细胞。５株单抗能识别不同抗原表面，用其中两株单抗４ｇ７和２ｆ８分别作为包被抗体和酶标抗体，建立了测定血清ＡＩＦ的夹心ＥＬＩＳＡ。该法上限为１０μｇ／Ｌ，在１０－２５０μｇ／Ｌ之间，标准曲线有较发的线性关系。临床检测结果：健康献血员、良性肝病和原发性肝癌（ＰＨＣ）患者血清ＡＩＦ分别为３６．     

抗人AFP单克隆抗体酶联免疫检测法的建立及其应用

报道用抗人甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(McAb)标记辣根过氧化物酶(HRP),以纯化之免抗人AFP多克隆抗体包被徽孔条板,建立用于检测血清中AFP的酶联免疫法。结果表明:该方法具有特异、敏感(10ng/ml)、重复性好(变异系数<10％)和简便等优点。在204例临床血清标本的检测中,本方法与放射免疫法(RIA)的结果相符合。     

重组人乳铁蛋白对Tca8113细胞中促炎性反应细胞因子IL-6和IL-8蛋白表达的影响

目的：研究重组人乳铁蛋白(rhLF)对口腔鳞癌Tca8113细胞中促炎症反应细胞因子IL-6和IL-8表达的影响,探讨其抑制肿瘤细胞生长的可能机制。方法：体外培养口腔鳞癌Tca8113细胞,用rhLF处理体外培养的Tca8113细胞,应用酶联免疫吸附试验、免疫组织化学方法检测50 mg·L-1 rhLF和100 mg·...     

用ELISA进行AB型体液与A和B型混和体液的鉴别

AB型人体液中,在同一血型物质分子上,同时含有A和B抗原活性。我们应用这一研究结果,用酶联免疫吸附法(ELISA)来进行AB型体液(斑)与A和B型混和体液(斑)的血型测定和鉴别。用单克隆抗A或抗B抗体进行包被,通过用人抗A、人抗B抗体和酶标抗人IgM来进行A和B血型物质的定量分析。用这种方法10,000倍稀释的体液仍能测出。AB型体液(斑),在单克隆抗A或者抗B包被板,能同时测出A和B型血型物质。然而,A和B型混和体液(斑),在相应的抗体包被板上,则只能测出相应的一种血型物质A或B。     

常规石蜡切片免疫组织化学双标记染色

作者用铁蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,S-100蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,对恶性组织细胞增生症瘤组织常规石蜡切片的免疫组化双标记染色进行了探讨。实验步骤简单,结果明确,是一种较为理想的免疫酶双标记染色。     

急性脑梗死患者血清铁蛋白和神经元烯醇化酶水平变化和临床意义

<正>急性脑梗死是临床常见的脑血管疾病之一,病死率、病残率极高。铁在脑内主要以铁蛋白(serum ferritin,SF)形式存在,铁蛋白在脑损伤中参与自由基的形成,铁催化的氧自由基产物在缺血性脑卒中和再灌注脑损伤中具有非常重要的作用;神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)是神经元的标志酶,主要存在于脑神经细胞和神经内分泌细胞的胞浆内,对维持神经系统生理功能具有重要作     

血清铁蛋白在成人斯蒂尔病诊断中的临床意义

目的:探讨血清铁蛋白在成人斯蒂尔(S till)病诊断中的意义。方法:采用诊断试验的研究方法。研究样本为“不明原因发热”患者,即发热3周以上,住院1周以上未能明确诊断者根据日本成人S till病的Y am aguch i标准和随访的结果,将患者分为成人S till病组和非成人S till病组。分析血清铁蛋白对成人S till病诊断的临床价值。结果:横断面研究资料271例中,56例为成人S till病。在成人S till病中,男女间血清铁蛋白水平差异无统计学意义(P=0.7802,功效=0.81)。成人S till病组血清铁蛋白水平显著高于非成人S till病组(P<0.01)。受试者运算特征(ROC)曲线下方的面积为86.7%(95%可信区间为79.4%~94.6%)提示,血清铁蛋白对成人S till病诊断具有重要意义。根据临床实用意义和ROC曲线,选取血清铁蛋白的3个截断点:750μg/L,1250μg/L,2500μg/L,它们的敏感性分别为81.57%,67.86%和39.28%;特异性分别为82.58%,89.86%和97.42%。血清铁蛋白>1250μg/L能最大程度兼顾敏感性和特异性。如果以Y am aguch i标准为基础,加上血清铁蛋白>1250μg/L结合作为诊断成人S till病的条件,其特异性则由92.1%上升至99.2%。结论:对“不明原因发热”的患者检测血清铁蛋白,对诊断成人S till病有重要的临床意义。     

快速斑点-ELISA法测定体液(斑)血型的建立

本实验应用ABH酶标单克隆抗体,通过斑点ELISA,快速进行体液和体液斑的血型测定。在实验中,将待测抗原滴在硝酸纤维膜上,然后将膜分别放入抗A、抗B和抗H酶标单克隆抗体中,再加二氨基联苯胺底物。抗原抗体反应阳性部位将出现一个清晰的棕褐色斑点。我们共测定521份检材,结果均正确。本方法准确、简便、灵敏、快捷,结果易观察,不需特殊仪器设备,30分钟内即可获得结果。其灵敏度比常规的中和试验、吸收试验高很多。10~(-4)～10~(-5)稀释的唾液、所谓非分泌型人唾液用此方法仍能测定血型。     

人胎盘运铁蛋白受体的提纯、鉴定及其抗血清的制备

以人胎盘绒毛膜为原料提纯运铁蛋白受体,是用1％Triton X-100增溶所得可溶性绒毛膜蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离,再经蛋白质硝酸纤维纸转移电泳后,以免疫酶标染色法及同位素碘标放射自显影法检测出运铁蛋白受体蛋白的区带。切取此区带,用生理盐水浸出,超滤浓缩后得到电泳纯的运铁蛋白受体。每个新鲜人胎盘可提取运铁蛋白受体蛋白约200μg,用SDS-PAGE测定其分子量(MW)为90,000。用卵清蛋白、人血清a_1-酸性蛋白、人IgG竞争抑制试验证明此受体与运铁蛋白特异性结合。用提纯的运铁蛋白受体免疫家兔,得到抗人运铁蛋白受体抗血清。采用间接免疫酶标法检测人宫颈癌培养细胞株(HeLa)及人肝癌培养细胞株(SMMC-7721),证明其细胞膜上运铁蛋白受体含量均增高。     

酶标SpA免疫酶法检测宫颈癌患者血清中单纯疱疹病毒抗体

许多报告认为单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染与宫颈癌的发生有关。应用免疫酶法和免疫荧光法检测 HSV/IgG 抗体已有报道。前者需用荧光显微镜,应用受到限制。免疫酶法检测患者体液中病毒特异性抗体比其它方法简便易行,且敏感性和特异性较好,应用日广。用它检测病毒 IgG 抗体,通常以酶标抗人 IgG(简称酶标抗体)作为第二抗体。本文将辣根过氧化物酶标记葡萄球菌 A 蛋白(简称酶标 SpA)用于免疫酶法