Sorcin在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及定位

目的:研究抗药蛋白sorcin(又称可溶性抗药相关蛋白)在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移潜能不同的细胞株Hca-F/Hca-cP中的定位及表达差异,进一步探讨其在肿瘤淋巴道转移中的作用。方法:以小鼠腹水肝癌高淋巴道转移株Hca-F和小鼠腹水肝癌低淋巴道转移株Hca-P为研究对象,采用实时定量PCR技术检测sorcin在Hca-F/Hca-P细胞中基因水平的表达差异;采用Western免疫印迹技术检测sorcin在Hca-F/Hca-P细胞中蛋白水平的表达差异;采用免疫荧光技术检测sorcin在细胞中的定位情况;采用细胞计数试剂盒-8检测肿瘤细胞的增殖能力;应用Transwell小室检测肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。结果:Hca-F细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力都明显高于Hca-P细胞;sorcin在Hca-F细胞中的基因水平和蛋白水平表达分别为Hca-P细胞的1.5和1.8倍;sorcin在两种小鼠腹水型肝癌细胞株中的定位主要位于细胞质。结论:sorcin在Hca-F中呈高表达,主要定位于细胞质,可能在其增殖、迁移和侵袭过程中发挥重要作用,为进一步探讨其作用机制和功能奠定了基础。     

益气养阴方对小鼠肝癌淋巴道转移的影响

目的观察益气养阴方对小鼠肝癌淋巴道转移的影响。方法以腹水型肝癌H22瘤株在小鼠右下肢爪垫内侧皮下注射接种,复制淋巴道转移模型,观察小鼠实体瘤的瘤重量抑瘤率、肺部转移率、淋巴结转移情况等的指标变化。结果益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,抑瘤率明显增加,并且淋巴结转移显著减少。结论益气养阴方对H22肝癌淋巴道转移有一定的抑制作用。     

高分辨CT在淋巴道转移瘤诊断中的应用价值

目的：探讨高分辨CT（HRCT）在淋巴道转移瘤诊断中的应用价值。资料与方法：常规平扫未见转移或可疑有淋巴道转移瘤的患者行高分辨扫描，在小叶结构上对病变征像进行分析，作出诊断及肿瘤分期，并与术后病理对照。结果：对20例可疑患者加用HRCT，结合病史对9例患者作出诊断，在淋巴道转移瘤诊断中得到充分认识，补充了常规CT的不足。     

复方仙草素对肝癌血道肺转移瘤表达的实验研究

目的:研究和探讨复方仙草素抗肝肿瘤转移的作用机理,为临床用药提供理论依据。方法:取小鼠60只,随机分成模型对照组、低浓度组与高浓度组各20只。各组小鼠尾静脉注射W256肿瘤细胞悬液0.25 mL/只,次日开始用药。模型对照组给予生理盐水,低浓度组与高浓度组分别给予不同浓度的复方仙草素,连续给药18 d,于第19天处死动物,剥离肺脏称重,以单盲法计数肺转移瘤结节抑制率、肺转移瘤生长指数抑制率,同时进行转移瘤组织形态学、病理学检验。结果:模型对照组肺组织可见广泛的转移病灶,复方仙草素用药组肺结节转移瘤明显少于模型对照组,且高浓度组优于低浓度组。结论:高浓度复方仙草素对肝癌血道肺转移瘤具有较强的抑制作用。     

IGFBP-2 mRNA表达在胃癌淋巴转移中作用的研究

目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)mRNA在胃癌组织中的表达及其在胃癌淋巴转移中的作用。方法:术中收集35例发生淋巴转移的胃癌患者的正常黏膜、原发灶、淋巴转移灶标本,用实时定量PCR方法测定其IGFBP-2 mRNA表达,同时行病理切片HE染色。结果:IGFBP-2在原发灶中表达与正常黏膜、淋巴转移灶相比均明显增高(P<0.05);IGFBP-2表达在正常粘膜与淋巴转移灶间差异无显著性(P>0.05)。结论:IGFBP-2在胃癌的增生、淋巴转移中可能发挥着一定作用,可为临床预测与治疗胃癌淋巴转移提供新的途径。     

肿瘤淋巴管生成与乳腺癌淋巴道转移关系的研究进展

肿瘤淋巴管的生成在乳腺癌淋巴道转移过程中起着至关重要的作用，淋巴管生成的调控因子的研究近年有了新进展。作者主要对近年来关于肿瘤淋巴管生成与乳腺癌淋巴道转移之间的关系的研究加以综述。     

IGFBP-2蛋白表达在胃癌淋巴转移中的意义

目的 :探讨胰岛素样生长因子结合蛋白 2 (IGFBP - 2 )在胃癌组织中的表达。方法 :对 35例外科切除胃癌标本的正常粘膜、肿瘤原发灶和淋巴转移灶进行IGFBP - 2蛋白的免疫组化染色 ,并用计算机图象分析软件测定其积分光密度。结果 :肿瘤原发灶中IGFBP - 2蛋白表达水平比正常粘膜明显增高 (P <0 0 1) ,淋巴转移灶中IGFBP - 2蛋白表达较原发灶显著下调 (P <0 0 1) ) ;正常粘膜与淋巴转移灶中IGFBP - 2蛋白表达水平之间无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 :IGFBP - 2蛋白表达水平与胃癌细胞的侵袭生长呈正相关 ,而与淋巴转移程度呈负相关 ,在胃癌的侵袭生长中可能发挥着重要作用。     

酒精注射治疗肝癌致针道种植转移4例报告

我院自90年代初应用超声导向经皮穿刺注射无水酒精治疗肝癌(PEI),至今治疗患者402例,其中4例发生针道种植转移,报告如下.     

Hsp5B在骨肉瘤中的表达及其与淋巴转移的关系

目的研究Hsp5B在骨肉瘤组织中的表达及其表达与骨肉瘤淋巴转移的关系,初步探索其作为骨肉瘤淋巴转移及预后判断可能。方法收集骨肉瘤患者的临床资料及肿瘤组织手术标本,采用RT-PCR和Western blot方法检测Hsp5B在骨肉瘤组织表达,Fisher统计分析Hsp5B表达水平与骨肉瘤淋巴转移的关系。结果 RT-PCR和Western blot检测提示Hsp5B mRNA在无淋巴结转移骨肉瘤组织中的表达量明显低于其在有淋巴结转移骨肉瘤组织中的表达量,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论高Hsp5B表达与骨肉瘤淋巴结转移明显相关,Hsp5B表达水平可作为骨肉瘤患者淋巴转移判断的标志。     

乳腺癌前哨淋巴结中细胞角蛋白19的表达及临床意义

目的 检测乳腺癌前哨淋巴结(SIN)组织中细胞角蛋白19(CK19)在mRNA和蛋白水平的表达情况,以探讨检测淋巴结CK19的表达对预测乳腺癌前哨淋巴结微转移的临床价值.方法 本组30例可手术的原发性乳腺癌患者,手术中均行肿块周围或乳晕周围注射亚甲蓝进行SLN定位成功,同时常规行腋窝淋巴结清扫,术后对SLN和非SLN均行常规病理学检测,对SLN同时采用RT-PCR和Western Blot方法检测CK19的表达.结果 30例SLN常规病理检测发现8例阳性SLN,阳性率为26.67%(8/30),1例假阴性.应用RT-PCR方法和Western Blot方法检测30例SLN中CK19的表达,结果HE染色阳性的8例SLN及1例假阴性SLN均呈阳性表达,共有12例SLN CK19mRNA表达阳性,阳性率为40.0%(12/30);Western Blot检测发现1I例SLN CK19呈阳性,阳性率为36.67%(11/30).RT-PCR、Western Blot检测结果分别与HE染色结果比较,差异均有统计学意义(P<0.05),假阴性率为0.结论 CK19mRNA可作为标志物来检测乳腺癌SLN中的微转移情况;RT-PCR方法可检测到SLN微转移灶,通过SLN定位后检测其中CK19mRNA的阳性表达,可明显提高乳腺癌SLN的阳性率,降低SLN单纯病理检测的假阴性率.     

人类ERMAP基因在不同细胞系中表达的研究

为了探讨人类ERMAP基因在不同细胞系的表达谱和表达量的特点,选择血液肿瘤、实体瘤、正常组织细胞等不同类型的15种细胞系,在培养的12、24、36、48、60、72小时共6个时间点采集细胞,用荧光定量PCR检测人类ERMAP基因表达量。结果发现,K562细胞在培养12、24小时时ERMAP基因表达阳性,其表达量分别为(5.092±2.331)×106cps/μlRNA、(5.328±3.916)×106cps/μlRNA;ECV304细胞在培养24小时时ERMAP基因表达阳性,其表达量为(0.84±0.12)×106cps/μlRNA,其余13株细胞系ERMAP基因表达阴性。结论:首次发现人类ERMAP基因在ECV304细胞系中表达,进一步证实ERMAP在K562细胞系中表达。     

液相杂交检测B细胞淋巴瘤细胞系miR-28的表达

microRNA（miRNA）是一组在进化上高度保守、非编码蛋白、参与转录后调节的小分子RNA（19-25核苷酸）。为了进一步明确miRNA的加工机制及功能和定量研究miRNA的表达水平，应用液相杂交和Northern blot两种方法检测miR-28在B细胞淋巴瘤细胞系中的表达并进行了比较。结果表明：液相杂交和Northern blot检测miR-28均显出阳性结果，但液相杂交所用的细胞总RNA量（5μg）明显少于Northern blot（30μg），液相杂交的条带信号也较Northern blot的强。结论：液相杂交是一种较Northern blot更为快速、简便和敏感的检测miR-28的方法。     

人白血病细胞株对L-门冬酰胺酶敏感性与门冬酰胺合成酶表达水平的相关性

本研究探讨人白血病细胞株门冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AsnS)的表达水平及与白血病细胞株对L-Asparaginase(L-Asp)敏感性的关系。用实时定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)检测Jurkat,HL-60,U937,NB4,THP-1,Namalwa,Karpas299和K562等8种细胞株基础的和经L-Asp处理后的AsnS表达水平,用CCK-8实验检测细胞对L-Asp处理的敏感性。结果表明,8种细胞株之间AsnS的基础表达水平存在很大程度的变异,经L-Asp处理后细胞株的AsnS表达显著上调(p0.05),AsnS低水平表达细胞对L-Asp相对敏感,而AsnS高表达细胞对L-Asp相对耐药。在8种细胞株中,U937对L-Asp高度敏感,其AsnS表达水平最低,而K562细胞株对L-Asp天然耐药,AsnS表达水平最高。结论:AsnS在天门冬氨酸耗竭后的细胞生物学行为中起着重要的作用,AsnS的表达水平反映了细胞对L-Asp的敏感性,L-Asp在AsnS低表达白血病的治疗中有潜在的应用价值。     

Wnt5a基因在血液病及白血病细胞株中的表达

本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:5例AML中4例均为阴性或弱阳性,仅1例完全缓解的病例表达呈强阳性。K562、HL-60细胞的Wnt5a表达也为阴性,Jurkat细胞的Wnt5a表达阳性。6例CML的Wnt5a表达均为阴性。4例ALL中3例为表达阳性或弱阳性,1例表达为阴性;2例CLL为阴性表达;2例MM中Wnt5a表达1例为弱阳性,1例为阴性;3例淋巴瘤中有1例为弱阳性,2例为阴性;2例AA、2例IDA、3例ITP、1例ET及PVWnt5a表达均为阳性或弱阳性。结论:在31例血液病标本及髓系白血病细胞株中,除ALL外,有明显的Wnt5a表达缺失或降低,而非恶性血液病例中Wnt5a表达普遍呈阳性,提示Wnt5a的表达下调可能与髓系白血病的发生有关。     

雄黄对急性白血病细胞株存活蛋白(survivin) 基因表达的影响及其意义

为了研究雄黄对白血病细胞抗凋亡基因存活蛋白(survivin)表达的影响，以白血病细胞系HL-60和Jurkat为模型．同时应用Western blot法和免疫荧光法检测survivin的表达；应用免疫组织化学SABC法检测白血病细胞系凋亡前后Fas、caspase-3的表达。结果表明：雄黄作用前两种细胞系survivin表达均呈阳性；Jurkat细胞Fas阳性，但无caspase-3表达；HL-60细胞株均无。Fas和caspase-3的表达。经雄黄作用后，两株细胞系survivin表达水平均降低．以HL-60细胞株降低显著，呈时间-浓度依赖关系。雄黄作用后HL-60细胞caspase-3表达转为阳性，Jurkat细胞caspase-3表达仍为阴性；Fas表达在Jurkat细胞稍减低，HL-60细胞仍为阴性。结论：雄黄可降低白血病细胞survivin的表达；survivin表达下调在雄黄通过线粒体途径促进细胞凋亡中发挥重要作用。     

全反式维甲酸诱导白血病细胞分化对brd7基因表达的影响

为了探讨brd7基因与白血病细胞分化的关系及其在白血病细胞分化中的作用,本研究采用全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60和K562细胞系分化,通过Wright-Giema染色在显微镜下观察细胞形态学变化,应用流式细胞术分析细胞分化抗原CD11b的表达,以鉴定细胞分化程度,并在此基础上通过Western blot检测brd7基因在诱导分化前和细胞分化过程中蛋白表达水平的变化。结果发现,ATRA具有抑制HL-60细胞生长的作用,并可诱导HL-60细胞向粒系分化,在ATRA诱导细胞分化过程中HL-60细胞表面CD11b的表达水平逐渐上调,BRD7蛋白表达随着HL-60细胞的分化而增加;ATRA对K562细胞无诱导分化作用,brd7的表达也无明显变化。结论:随着HL-60细胞的分化,brd7基因表达上调,其机制有待进一步阐明。     

miRNA-663在不同的白血病细胞系的表达水平及其生物学功能的初步研究

本研究通过5-氮杂胞苷(5-aza)处理K562细胞系,寻找去甲基化后表达上调的microRNA(miRNA),检测其在正常人、慢性髓系白血病(CML)病人和白血病细胞系的表达水平,探讨其对K562细胞系增殖的影响。采用miRNA芯片筛选5-aza处理后表达上调的miRNA,结合生物信息学在上调的芯片结果中选取miRNA前体上游带有CpG岛的miR-663、miR-638及miR-92b,通过荧光实时定量PCR的方法验证在芯片结果中这3个上调的miRNA,证实miR-663在去甲基化后表达上调。分别在K562细胞系、U937细胞系、Kasumi细胞系、初治CML患者外周血白细胞及正常人骨髓白细胞检测miR-663的表达水平。通过甲基化特异性PCR(MSP)的方法,在K562细胞系检测miR-663前体上游CpG岛是否存在甲基化。通过瞬时转染的方法在K562细胞系过表达合成的miR-663成熟体,观察其对K562细胞增殖的影响。结果表明:去甲基化后能在K562细胞系上调miR-663的表达水平,与正常人骨髓白细胞相比,初治CML病人的白细胞、白血病细胞系K562、U937及Kasumi的miR-663表达水平相对较低;MSP检测表明,在K562细胞系miR-663上游的CpG岛是甲基化的。体外K562细胞系过表达miR-663可以抑制K562细胞系的增殖。结论:在K562细胞系miR-663上游的CpG岛存在甲基化。与正常人相比,miRNA-663在CML病人、白血病细胞系K562、U937及Kasumi表达水平相对较低,5-aza可以上调miRNA-663在K562细胞系的表达,在K562细胞系过表达miRNA-663可抑制K562细胞的增殖,提示miRNA-663在白血病中可能具有抑癌作用。     

~(125)Ⅰ籽源持续照射对人肺癌细胞凋亡及DNA-PK蛋白表达的影响

目的:探讨~(125)Ⅰ籽源低剂量率持续照射诱导人肺癌细胞凋亡以及对DNA依赖蛋白激酶复合物(DNA-PK)表达的影响。方法:选择A549和NCI-H446两种辐射敏感性不同的人肺癌细胞株,采用9粒~(125)I籽源组成的平面照射装置进行持续照射,吸收剂量为2Gy。应用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化,免疫组化方法检测DNA-PKcs蛋白表达。结果:~(125)Ⅰ籽源照射2Gy后,A549和NCI-H446细胞的凋亡率分别为(11.14±1.11)%和(25.27±5.65)%,分别是对照组的5倍和8倍左右,其中NCI-H446细胞的凋亡率较A549细胞显著升高(P<0.05),显示NCI-H446细胞更敏感。两种细胞的细胞周期均出现明显的G_2/M期阻滞(P<0.05)。A549细胞自身蛋白表达显著高于NCI-H446细胞(P<0.05)。结论:~(125)Ⅰ籽源低剂量率持续照射诱导肺癌细胞凋亡的效果与DNA-PK修复基因的状态和受照射后的变化密切相关。     

C Ⅱ TA基因在5种人类细胞系中的表达及意义

本研究探讨5种细胞株中MHC-Ⅱ类抗原(HLA-DR、DP、DQ)表达及IFN-γ诱导后MHC分子与CⅡTA表达的关系。采用Western blot、免疫组织化学和流式细胞术检测5种细胞株中CⅡTA蛋白及MHC分子的表达,用RT-PCR检测细胞株中CⅡTA基因表达。结果表明:5种细胞株中MHC-Ⅱ类分子与CⅡTA的表达一致;组成型表达CⅡTA的细胞株亦表达MHC-Ⅱ类分子,经IFN-γ诱导后表达CⅡTA的细胞株表达MHC-Ⅱ类分子亦恢复;IFN-γ诱导后仍不表达CⅡTA的细胞株,对IFN-γ促MHC-Ⅱ类分子表达的作用亦无反应。结论:某些肿瘤细胞株不能表达MHC-Ⅱ分子与CⅡTA表达缺陷有关,这表明CⅡTA参与调控细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达,它可能在肿瘤免疫逃逸中起一定作用。