肿瘤坏死因子放射免疫分析的建立及初步临床应用

用人重组肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）和特异性兔抗ＴＮＦ血清建立了液相竞争放射免疫分析，最小检出值＞３０ｐｓ／管，标准曲线范围０．３～２４．３ｎｇ／ｍｌ，批内和批间变异系数平均为７．８％和８．４％。本法检测３７名健康献血员血清ＴＮＦ为０．８３±０．２６ｎｇ／ｍｌ，２３例急性黄疸性肝炎、１３例慢性迁延性肝炎、１９例慢性活动性肝炎、２２例肝硬化、２５例肝癌血清ＴＮＦ分别为１．９５±０．５９ｎｇ／ｍｌ，２，０６±０．５１ｎｇ／ｍｌ，１．５８±０．５４ｎｇ／ｍｌ，１．７５±０．６５ｎｇ／ｍｌ和１．５７±０．５３ｎｇ／ｍｌ。２８例肺癌术前血清ＴＮＦ０．９２±０．４２ｎｇ／ｍｌ，２２例肺癌术后血清ＴＮＦ为１．０８±０．２９ｎｇ／ｍｌ。     

成人肝细胞膜肿瘤坏死因子受体放射配体分析法的建立

利用￣（１２５）Ｉ标记肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），建立了原代培养成人肝细胞膜ＴＮＦ受体（ｍＴＮＦＲ）的放射配体分析（ＲＢＡ）法。肝细胞浓度在２×１０￣６～１０×１０￣６／ｍｌ范围内，￣（１２５）Ｉ－ＴＮＦ浓度与受体结合量成正比；４℃条件下反应１２０ｍｉｎ或３７℃反应３０ｍｉｎ可达平衡，反应最适ｐＨ为７．０～８．０。竞争抑制试验证明￣（１２５）Ｉ－ＴＮＦ与受体结合特异性良好。当￣（１２５）Ｉ－ＴＮＦ≤２０ｎｇ／ｍｌ时，ＴＮＦＲ结合参数为：Ｋｄ＿０＝０．１３±０．０２ｎｍｏｌ，Ｒ＿０＝１１６０±２３６个结合位点／细胞，当￣（１２５）Ｉ－ＴＮＦ＞２０ｎｇ／ｍｌ时可测得两种ＴＮＦＲ：Ｋｄ＿１＝０．０７±０．０１ｎｍｏｌ，Ｒ＿１＝８９５±１５４个结合位点／细胞和Ｋｄ＿２＝０．１８±０．０３ｎｍｏｌ，Ｒ＿２＝２０４９±４６３个结合位点／细胞。此法快速，稳定性好。     

同种小鼠皮肤移植时的肿瘤坏死因子水平

ｐ＜０．０１二、红毛五加水提物对血清ＴＮＦ－α的影响ＡＨ各组在延长皮片存活时间同时，血清中ＴＮＦ－α水平随剂量增加而升高，在１．５、３．０、６．０ｇ／ｋｇ剂量时，ＴＮＦ－α水平与ＮＳ组比较，未见显著性差异（ｐ＞０．０５），但是，ＡＨ各组血清ＴＮＦ－α水平与Ａｚａ组比较，有显著性差异（ｐ＜０．０１），结果见表２。表２ＤＢＡ／２受体小鼠血清肿瘤坏死因子变化（ｎｇ／ｍｌ）注：与Ａｚａ组比较，＊ｐ＜０．０１，与ＮＳ组比较ｐ＞０．０５讨论肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）是一种重要的免疫调节因子，可由巨噬细胞、单核细胞、ＮＫ细胞等非特异性免疫细胞产生，个有广泛的生物学效应，并且在器官移植中已开始引起人们的注意［３］。对中药进行筛选，发掘具有免疫抑制作用的药物用于临床，减少器官移植排斥反应是器官移植领域的重要研究内容之一。实验动物皮肤移植模型操作简便，易于观察，是初筛免疫排斥抑制剂的有效方法。Ａｚａ在延长移植皮片存活时间时，血清中ＴＮＦ－α水平明显低于ＮＳ组（ｐ＜０．０１），可见，降低血清ＴＮＦ－α水平与延长皮片存活时间有关。然而，在本实验中，ＡＨ各组在延长皮片存活时间时，一方面，ＴＮＦ－α水平未见降低，另一方面，从ＡＨ量──     

原发性肝癌患者手术治疗前后检测可溶性白细胞介素2受体和肿瘤坏？…

应用双抗体酶联夹心法和放射免疫分析法检测了３０名正常人和３３例原发性肝癌患者血清中ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ含量，结果表明：原发性肝癌患者手术前ｓＩＬ－２Ｒ，ＴＮＦ非常显著地高于正常人（Ｐ〈０．００１，Ｐ〈０．０１）；术后２周，血清ｓＩｌ－２Ｒ与正常人比较有差异（Ｐ〈０．０１），而ＴＮＦ则无差异（Ｐ〉０．０５），ＡＦＰ含量高低与ｓＩｌ－２和ＴＮＦ含量无关（ｒ＝０．３８２６，０．３７２５；Ｐ〉０．０５）。     

病毒性肝炎患者IL－1、IL－6和TNFα活性的检测

检测了甲、乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦα的诱生活性及其血清中活性。结果表明，乙型慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）、乙型肝炎后肝硬化（ＨＣ）和乙型重型肝炎（ＳＨ）ＰＢＭＣｓ经脂多糖诱导后，ＩＬ－１活性分别为３５３１．１±８８２．７Ｕ／ｍ１、２７６９．７±７３０．４±Ｕ／ｍｌ和５３２９．３±１０８９．３Ｕ／ｍｌ，高于正常对照组（Ｐ＜０．０５或（０．０１）；ＩＬ－６诱生活性分别为３８．９０±１４．７５Ｕ／ｍ１、２．４５±１８．８５Ｕ／ｍｌ和７１．９５±２８．０５Ｕ／ｍｌ（与正常对照组相比，ｐ＜０．０５或＜０．０１）；ＴＮＦα诱生活性在乙型慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）、ＣＡＨ、ＨＣ和ＳＨ中分别为３３．２３±７．２５Ｕ／ｍｌ、６．９９±１．８４Ｕ／ｍ１、４．２９±２．１７Ｕ／ｍｌ和８６．７０±２４．１８Ｕ／ｍｌ，与对照组相比Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１。各型患者血清中ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦα活性均有不同程度的增高。文中对ＳＨ患者ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦα之间的相互关系进行了探讨。     

TNF在肾移植患者体内的动态变化及其临床意义

本文检测了４０例肾移植患者血清及尿液中ＴＮＦ的水平。结果发现血清标本中ＴＮＦ，４５例正常人对照组为０．６５±０．１０ｎｇ／Ｌ，３０例术后稳定组为０．９４±０．２１ｎｇ／Ｌ，７例发生急性排斥反应组为１．０３±０．２６ｎｇ／Ｌ。尿液中ＴＮＦ术后稳定组为０．４６±０．２９ｎｇ／Ｌ，排斥组为０．４４±０．３６ｎｇ／Ｌ。肾移植术后２ｄ血清及尿液ＴＮＦ水平开始增高，以后逐渐下降。连续动态检测对了解患者免疫状态、判断手术预后将有重要意义。     

慢性肝病、肝癌患者IL－1、IL－8及TNFα活性测定

对２８例慢性肝炎、２３例肝炎性肝硬化及２６例原发性肝癌患者血清中ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性进行了测定。结果表明，慢性肝炎患者ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性分别为１５３８．３±３８６．５ｐｇ／ｍｌ，５０６．５±１３１．３ｐｇ／ｍｌ及２１２．６±９８．４ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；肝炎性肝硬化患者ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性分别为２１６２．８±４３６．６ｐｇ／ｍｌ，６８２．６±２０４．５ｐｇ／ｍｌ及２４１．５±１０９．６ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；原发性肝癌患者ＩＬ－１、ＩＬ－８活性分别为６３２．６±１０７．６ｐｇ／ｍｌ，３１２．８±９５．８ｐｇ／ｍｌ，与对照组比较，ＩＬ－１活性明显升高（Ｐ＜０．０５），ＩＬ－８活性程度升高，但无明显差异（Ｐ＞０．０５）ＴＮＦα活性为３２１．６±１８３．２ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组。亦对上述３种细胞因子与慢性肝炎、肝硬化发生发展关系进行了初步分析与探讨。     

葡萄胎患者化疗前后SIL—2R和TNF含量检测的临床意义

分析了３２例葡萄胎患者化职前后血清中ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ含量的变化。结果表明：化疗前血清中ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ含量均显著地高于正常对照组（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．００１），化疗后均有明显的下降（Ｐ〈０．０５），ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ与β－ＨＣＧ呈正相关（ｒ＝０．６２６３，ｒ＝０．６１０５，Ｐ〈０．０１）。机理不明。结果提示：血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ可作为葡萄胎患者免疫功能监测指标之一，并可作为疗效判断     

抗Tac单克隆抗体对ConA诱导小鼠实验性肝损伤的影响

本研究采用ＣｏｎＡ诱导，建成小鼠肝损伤模型，并检测其血浆肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）含量的变化，发现模型组鼠血浆ＴＮＦ－α含量为０．１９±０．０６ｎｇ／ｍｌ，而正常对照组未检出ＴＮＦ－α，二者比较有极显著差异（Ｐ＜０．００１）。预先注射抗Ｔａｃ单克隆抗体可减少ＣｏｎＡ注射后小鼠ＴＮＦ－α的产生，与模型组比较（分别为０．０３±０．０２和０．１９±０．０６），二者有极显著差异（Ｐ＜０．００１），而且注射抗Ｔａｃ单抗组无肝损伤发生。上述结果表明，ＣｏｎＡ诱导的肝损伤与ＴＮＦ－α等的介导有关，抗Ｔａｃ单克隆抗体对ＣｏｎＡ诱导的肝损伤有保护作用。     

脑室注射血管紧张素Ⅱ对雄性大鼠血清睾酮含量的影响

雄性大鼠脑室注射２４及１２０ｎｇＡⅡ后４ｈ，血清睾酮含量分别为３．４６±０．９３及１．４９±０．７８ｎｇ／ｍｌ，明显低于生理盐水对照组（５．０６±１．０８ｎｇ／ｍｌ），Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０１。在脑室注射ＡⅡ（１２０ｎｇ）后２ｈ、４ｈ及７ｈ，血清睾酮含量均显著降低（Ｐ＜０．０１），其中以４ｈ降低最为明显，相当于对照组血清睾酮含量的３０．７９％。     

TNFα对微血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制(摘要)

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）作用的靶细胞之一。由ＴＮＦα引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的。ＴＮＦα（简称ＴＮＦ）引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系,试图从中说明ＴＮＦ引起微血管内皮细胞早期损伤的部分分子机制。 １细胞增殖动力学在体外培养的肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）中发现,加入 ＴＮＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）后,细胞形态从圆形、多角形变成梭形,细胞的纵轴拉长,横轴缩小。此种变化从培养６ｈ开始,７２ｈ最显。光镜下未见明显细胞损伤表现,电镜下（透射电镜及扫描电镜）细胞器无明显改变,但见内皮细胞表面微绒毛减少。当ＴＮＦ的浓度增高到４０ｎｇ／ｍｌ以上,将其与ＰＭＶＥＣ共同孵育培养７２ｈ后,ＴＮＦ组内皮细胞总数比对照组（ＰＢＳ组）显著减少（５．２３ ±０．５０减到４．３０±０．３４,Ｐ＜０．０１）。用流式细胞仪分析细胞增殖周期发现,ＴＮＦ组处于Ｇ_１期的细胞明显增多,Ｓ期和Ｍ期的细胞明显减少（Ｐ＜０．０５）。结果提示,高浓度ＴＮＦ抑制内皮细胞增生,使细胞分裂延缓。 ２ ＰＧＩ_２和ｔ－ＰＡ前列腺素Ｐ     

人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立

本文应用兔抗ｈＡＦＰ ＩｇＧ包被板条，以异硫氰酸苯基－ＥＤＴＡ－Ｅｕ＾３＋标记抗ｈＡＦＰ ＭｃＡｂ，建立了固相“夹心”二步法分析ｈＡＦＰ技术，结果显示，分析范围是６．２５ｎｇ／ｍｌ－１００ｎｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９），变异系数在１．６７％－１７．７４％之间，ｈＡＦＰ最小可测值为０．３５ｎｇ／ｍｌ。测定７６例孕妇血清样品，同所购ＤＥＬＦＩＡ ｈＡＦＰ最小可测值为０．３５ｎｇ／ｍｌ。测定７６例孕妇血清样     

再生障碍性贫血患者免疫调节剂治疗前后TNF和IL—2水平变化及意义

为了探讨再生障碍性贫血（ＡＡ）的免疫发病机理及抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体（ＭｃＡｂ－Ｔ）的免疫调节治疗作用，采用放射免疫法检测３０例ＡＡ患者ＭｃＡｂ－Ｔ治疗前后血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和白细胞介素－２（ＩＬ－２）水平及其中１０例ＡＡ外周血核细胞（ＰＢＭＮＣ）体外诱生ＴＮＦ和ＩＬ－２水平的变化。结果表明，治疗前ＡＡ患者血清ＴＮＦ水平显著曾高（Ｐ〈０．０１），ＰＢＭＮＣ诱生的ＴＮＦ和ＩＬ－２水平均明显高     

肾小管损伤时内皮素1、肿瘤坏死因子α的表达及其对离体肾间质成纤维细胞的影响

目的　研究内皮素１（ＥＴ１）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦα） 在肾小管上皮细胞的表达、肾小管的损伤及它们对肾间质成纤维细胞的影响。方法　应用肾小管上皮细胞及肾间质成纤维细胞的体外培养;建立肾小管损伤动物模型;应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 、免疫组化ＳＰ法染色、放射免疫测定（ＲＩＡ） 及双重免疫组织化学染色技术,并测定３ＨＴＤＲ 掺入率。结果　肾小管上皮细胞既有ＥＴ１ｍＲＮＡ和ＴＮＦαｍＲＮＡ 的表达（ＲＴＰＣＲ的扩增片段分别为５４６ ｂｐ 和４１５ ｂｐ） ,还有ＥＴ１ 及ＴＮＦα的蛋白合成及分泌;细胞培养上清中ＥＴ１ 和ＴＮＦα含量分别为１．４２ ｐｇ／ｍｌ 和０ ．５８ ｎｇ／ｍｌ;且肾小管损伤及再生过程中,ＥＴ１ 及ＴＮＦα表达增加。对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞分别加入ＥＴ１ 、ＴＮＦα,３ＨＴＤＲ掺入率较对照组明显增高（ Ｐ＜ ０．０５）;并证明肾间质成纤维细胞有ＥＴ受体（ＥＴＲ） ｍＲＮＡ及ＴＮＦ受体（ＴＮＦＲ１） ｍＲＮＡ的表达（ＲＴＰＣＲ 扩增片段分别为５４４ ｂｐ 和３４７ ｂｐ）。结论　损伤及再生的肾小管上皮细胞较正常时合成和分泌更多的ＥＴ１ 和ＴＮＦα,ＥＴ１ 及ＴＮＦα分别     

狼疮性肾炎患者可溶性IL－2R的检测

为了解可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）与狼疮性肾炎（ＬＮ）活动的关系，对３０例ＬＮ病人血清和尿液ｓＩＬ－２Ｒ含量进行测定。结果显示，ＬＮ活动组（１７例）血清ｓＩＬ－２Ｒ平均值为２７４．７±２０９．７Ｕ／ｍｌ，明显高于ＬＮ非活动组（１３例，平均值１１５．４±８５．ｌＵ／ｍｌ，Ｐ＜０．０２）和正常对照组（２０名，平均值１１３．５±４０．ｌＵ／ｍｌ，Ｐ＜０．０１），血清ｓＩＬ－２Ｒ水平变化与血清补体和肌酐值改变无明显相关性；尿液ｓＩＬ－２Ｒ的变化与血清相似，但两者间无明显相关性，亦与尿蛋白分泌无明显相关性；尿／血ｓＩＬ－２Ｒ比值在正常对照组为０．８８±０．４５，ＬＮ病人平均比值＞１。     

慢性乙型肝炎患者5种细胞因子水平的检测及其意义

目的 探讨病毒性乙型肝炎患者ｍＩＬ－２Ｒ,ｓＩＬ－２Ｒ,ＩＬ－６,ＩＬ－８和ＴＮＦ－α与乙肝发病的关系。方法 采用ＡＰＡＡＰ技术和ＥＬＩＳＡ法,检测９２例慢性乙型肝炎患者ｍＩＬ－２Ｒ,ｓＩＬ－２Ｒ,ＩＬ－６,ＩＬ－８和ＴＮＦ－α的水平。结果 慢性乙肝患者ｍＩＬ－２Ｒ的表达显著低于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,在ＰＨＡ激活后与正常人基本一致,但仍较ＰＨＡ激活前显著增高（Ｐ〈０．０１）;慢性乙肝患者血清     

维甲酸对口腔扁平苔藓患者血清IL—2,sIL—2R,TNFα水平的影响

采用放射免疫分析和酶联免疫分析研究维甲酸对２３例口腔扁平苔藓（ＯＬＰ）患者ＩＬ－２、ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦα水平的影响。结果发现：经维甲酸治疗后，ＯＬＰ患者的血清ＩＬ－２、ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦα水平显著下降（Ｐ〈０．０１），临床显效率６９．６％（１６／２３），有效率２６．１％（６／２３）。提示维甲酸可以抑制ＯＬＰ患者过强的Ｔ细胞增殖反应，减轻细胞因子对口腔粘膜的损害。     

白细胞介素1,肿瘤坏死因子α和脂多糖对人脐静脉内皮细胞表达 …

目的 观察细胞因子白细胞介素１（ＩＬ－１）β、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α和脂多糖（ＬＰＳ）是否诱导人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ及蛋白。方法 选取生长汇合的人脐胸脉内皮细胞,在其培养基中分别加入终浓度为２ｎｇ／ｍｌ的ＩＬ－１β、２０ｎｇ／ｍｌ的ＴＮＦβ和１００ｎｇ／ｍｌ的ＬＰＳ,３７℃共育４ｈ后,按照一步法提取其总ＲＮＡ,用γ－＾２２Ｐ标记的寡核苷酸ｄｏｔ ｂｌｏｔ分析     

肝癌,肝硬变患者血清肿瘤坏死因子,白细胞介素2和可溶 …

用放射免疫分析和酶关免疫吸附分析，对２１例原发性肝炎、２０例肝硬为的ＴＮＡα、ＩＬ－２和ｓＩＬ－２Ｒ进行检测。原发性肝癌、肝硬变患者的ＴＮＦα和ｓＩＬ－２Ｒ均显著高于正常组（Ｐ〈０．０１），而ＩＬ－２低于对照组（Ｐ〈０．０１）。     

食管癌患者五项细胞免疫学指标的测定及其意义

对３５例食管癌（ＥＣ）患者和３０例正常人（ＮＣ）的外周血自然杀伤（ＮＫ）细胞活性、Ｔ细胞亚群、血浆可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）以及外周血诱生γ干扰素（ＩＦＮ－γ）的水平进行了检测。结果显示，ＥＣ患者ＮＫ细胞活性明显降低（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ８＋细胞增多（Ｐ＜０．０６），ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞比值降低（Ｐ＜０．０５）；ｓＩＬ－２Ｒ明显增高（Ｐ＜０．０１）；外周血诱生ＩＦＮ－γ降低（Ｐ＜０．０５）；血浆ＴＮＦ－α升高。表明，上述指标对判断、分析ＥＣ患者细胞免疫功能状况及病变程度有较大的意义。