白介素-10与血小板衍生生长因子-BB对肝星状细胞表达细胞间黏附分子-1 mRNA的影响

目的 :探讨白介素 10 (IL 10 )、血小板衍生生长因子 BB (PDGF BB)对体外活化的培养大鼠肝星状细胞(HSC)表达细胞间黏附分子 1(ICAM 1)mRNA的影响。方法 :体外培养激活的HSC (细胞系rHSC 99)随机分为 4组 :对照组 (A组 )、IL 10 2 0ng/ml干预组 (B组 )、PDGF BB 2 0ng/ml干预组 (C组 )及IL 10 2 0ng/ml PDGF BB2 0ng/ml共干预组 (D组 )。加药后 2 4小时 ,采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR )方法 ,检测各组ICAM 1mRNA表达情况。结果 :B组ICAM 1mRNA的表达较A组明显降低 (P <0 0 1) ;C组ICAM 1mRNA的表达较A组明显增强 (P <0 0 1) ;D组ICAM 1mRNA的表达较A组与C组均降低 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,但与B组相比较其ICAM 1mRNA的表达则增强 (P <0 0 1)。结论 :PDGF BB促进肝纤维化与其引起HSC表达ICAM 1增强有关 ,IL 10通过下调HSCICAM 1表达 ,可在抑制肝纤维化中发挥作用。     

核因子-κ B p65反义寡核苷酸对大鼠肝星状细胞转化生长因子β1及细胞间黏附分子1表达的影响

目的 探讨核因子-κB p65反义寡核苷酸(NF-κB 065 ASODN)对大鼠肝星状细胞HSC炎症因子转化生长因子β 1(TGF β 1)及细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响. 方法Ⅳ型胶原酶消化密度梯度离心法分离培养大鼠HSC;人工合成NF-κB p65 ASODN并行全程硫代磷酸化修饰;观察脂质体介导的不同浓度的NF-κB p65 ASODN(0.001、0.010、0.100、1.000μmol/L)对肿瘤坏死因子(TNF)α刺激HSC产生TGF β1及ICAM-1 mRNA和蛋白质表达的影响,蛋白凝胶电脉迁移率变动分析法检测NF-κB p65 ASODN对TNF α刺激HSCNF-κB的活性影响.结果 TNF α刺激HSC后,NF-κB活性和TGF β1、ICAM-1的表达明显增强;应用NF-κB p65 ASODN(0.001～1.000 μmol/L)作用后,NF-κB活性明显减弱,且呈剂量依赖性,灰度值分别为16 070±223,15 715±199,14 999±224,14 447±228,各组比较,P值均<0.05.同时TGF β1、ICAM-1的mRNA及蛋白质表达明显减少,亦呈剂量依赖性,P值均<0.05.结论 NF-κB p65 ASODN可特异性降低HSC的NF-κB的活性,明显抑制TGF β1、ICAM-1的表达,为NF-κB p65 ASODN治疗肝纤维化提供了理论依据.     

白介素—10血小板衍生生化因子对肝星状细胞表达转化生长因子—β1的影响

目的：探讨IL－10，PDGF对体外培养HSC表达TGF－β1的影响。方法：原位灌流分离HSC，体外培养激活，分别用IL－10，PDGF以及两者共干预，采用半定量RT－PCR方法和免疫细胞化学方法检测各组TGF－β1的mRNA及蛋白表达情况。结果：IL－10干预组TGF－β1表达较对照组减弱，PDGF干预组较对照组明显增强，IL－10干预组较IL－10，DGA共干预组明显减弱（P＜0．01）。结论：PDGF可促进HSC表达TGF－β1，而抑制HSC表达TGF－β1可能是外源性IL－10的抗肝纤维化作用机制之一。     

肝硬化患者血清可溶性细胞间黏附分子-1水平变化与肝功能及肝纤维化的关系

细胞间黏附分子 1(ＩＣＡＭ 1)是免疫球蛋白超家族成员。在肝脏疾病中 ,肝脏局部及血循环中ＩＣＡＭ 1表达增加 ,提示ＩＣＡＭ 1可能参与肝脏疾病的发生与发展[1] 。我们通过测定肝硬化患者血清可溶性细胞间黏附分子 1(ｓＩＣＡＭ 1)及Ⅳ型胶原、层黏连蛋白水平变化 ,对ｓＩＣＡＭ 1与肝硬化患者肝功能状态及肝脏纤维化关系作初步探讨。材料和方法一、研究对象5 4例肝硬化 ,男 35例 ,女 19例 ,年龄为 36～ 6 8岁 ,平均5 3岁。对照组为本院献血员 ,17例 ,其中男 11例 ,女 6例 ,年龄为 2 5～ 35岁 ,平均 33岁。两组均无原发性心、肺、肾疾病…     

纤维化大鼠肝星状细胞IL-10/IL-10R的表达及IL-10干预的影响

目的研究实验性肝纤维化大鼠肝星状细胞白介素10(IL-10)/白介素10受体(IL-10R)表达及IL-10干预对其表达的影响。方法60只清洁级SD大鼠,随机分为正常对照(A组)、肝纤维化(B组)和IL-10干预组(C组)。B组和C组以CCl4腹腔内注射构建肝纤维化模型,C组并予IL-10腹腔内注射干预造模。于第7周和第11周分别随机选取一批大鼠,分离肝星状细胞,抽提总RNA,以半定量RT-PCR法检测各组HSC中IL-10和IL-10R mRNA表达情况。结果病理组织学证实肝纤维化模型构建成功,原代HSC分离培养成功,IL-10干预可以减轻其肝纤维化程度。肝纤维化时IL-10和IL-10R的mRNA表达均较正常组有所增强,但随着肝纤维化进展,IL-10的表达逐渐减弱。IL-10干预可以使二者的表达上调,以第11周时变化最为显著。结论大鼠肝HSC可表达IL-10及IL-10R,IL-10可作用于HSC而发挥抗肝纤维化作用。     

细胞间黏附分子-1及细胞因子与心功能不全的关系

本研究通过测定 5 6例不同程度充血性心力衰竭 (心衰 )患者血中细胞间黏附分子 1(ＩＣＡＭ 1)、肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)、白介素 1β(ＩＬ 1β)及干扰素 γ(ＩＦＮ γ)水平 ,旨在研究ＩＣＡＭ 1及细胞因子对心衰的影响 ,探讨心衰监测的新途径。资料与方法　　心衰组 :5 6例 ,均为 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 1年 7月在内科住院的患者。男 34例 ,女 2 2例 ,年龄 4 0～ 85(6 8 32± 8 4 5 )岁。心功能按ＮＹＨＡ分级 :Ⅱ级 17例 ,Ⅲ级 2 3例 ,Ⅳ级 16例。基础疾病为冠心病 2 3例 ,高血压性心脏病 17例 ,风湿性心脏病 10例 ,扩张型心肌病 6…     

细胞间粘附分子-1表达与肝纤维化关系的研究

目的:探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达与肝纤维化的关系。方法:建立四氯化碳大鼠实验性肝纤维化模型。用链酶蛋白和胶原酶原位灌流,Nycodenz密度梯度离心分离正常大鼠HSC,并进行体外培养,应用免疫组织化学方法分别观察静息或活化状态下的HSC及造模肝组织中ICAM-1的表达。结果:肝纤维化模型组织中,ICAM-1表达明显增加,ICAM-1阳性细胞多分布在汇管区周围,肝小叶内炎性细胞浸润区和坏死灶内,其阳性强度及分布与肝脏炎症、肝纤维化程度和分布相一致;静息的HSC不表达ICAM-1,而活化的HSC表达ICAM-I,且随着培养时间的延长ICAM-1表达量逐渐增加。结论:动物体内实验和体外细胞培养表明,ICAM-1表达与HSC活化、肝脏炎性损伤及肝纤维化的发生有关。     

Wnt抑制因子-1对肝星状细胞活化的影响

目的观察wnt抑制因子-1（WIF）对转化生长因子β1（TGF-β1）活化肝星状细胞（HSC）的影响。方法构建真核表达质粒pEGFP-C1-WIF并通过脂质体介导方法,将pEGFP-C1-WIF转染体外培养的HSC-T6细胞株,用TGF-β1刺激转染（试验组）和未转染的HSC-T6细胞株（对照组）,并用逆转录PCR（RT-PCR）和Western blot法检测各组细胞（包括正常细胞组）smad3、β-连环蛋白（β-catenin）mRNA及其蛋白质的表达。结果试验组HSC-T6细胞株smad3、β-catenin mRNA及蛋白质表达明显低于正常组HSC-T6细胞株,更低于对照组HSC-T6细胞株（P〈0.05）。β-catenin和smad3蛋白质的表达均与α-肌动蛋白（α-SMA）蛋白质的表达显著相关（r=0.800,P〈0.01;r=0.743,P〈0.01）。结论 WIF能通过下调wnt/β-catenin以及TGF-β1/smads信号通路的生物学效应抑制HSC-T6细胞的活化,从而延缓肝纤维化的发展。     

细胞间黏附分子-1与缺血性脑损伤

细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是介导白细胞与内皮细胞黏附的主要分子之一。文章重点阐述了ICAM-1在脑缺血时的表达及其在脑缺血中的作用,探讨了脑缺血时ICAM-1与其他炎性细胞因子之间的相互作用。抗黏附分子治疗有望成为治疗缺血性脑损伤的一种有效手段之一。     

白介素-10血小板衍生生长因子对肝星状细胞表达转化生长因子-β1的影响

目的:探讨IL-10、PDGF对体外培养HSC表达TGF-β1的影响.方法:原位灌流分离HSC,体外培养激活,分别用IL-10、PDGF以及两者共干预,采用半定量RT-PCR方法和免疫细胞化学方法检测各组TGF-β1的mR-NA及蛋白表达情况.结果:IL-10干预组TGF-β1表达较对照组减弱,PDGF干预组较对照组明显增强,IL-10干预组较IL-10、PDGF共干预组明显减弱(P＜0.01).结论:PDGF可促进HSC表达TGF-β1,而抑制HSC表达TGF-β1可能是外源性IL-10的抗肝纤维化作用机制之一.     

反转录-聚合酶链反应法研究肝星状细胞与细胞间粘附分子-1表达的关系

目的研究肝星状细胞（ＨＳＣ）与细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）表达的关系。方法用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌流,Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分别分离正常大鼠及四氯化碳实验性大鼠肝纤维化模型中的ＨＳＣ,并进行体外培养,应用免疫组织化学方法和反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术分别观察不同培养时期的ＨＳＣ、正常及造模肝组织中ＨＳＣ的ＩＣＡＭ１的表达。结果正常大鼠新分离的ＨＳＣ中,ＩＣＡＭ１不表达;原代培养第１０天及传代培养第７天的ＨＳＣ表达ＩＣＡＭ１,且随着培养时间的延长ＩＣＡＭ１表达量逐渐增加。四氯化碳实验性大鼠肝纤维化模型中,新分离的ＨＳＣ中即可见ＩＣＡＭ１表达。结论体内动物实验和体外细胞培养表明,ＩＣＡＭ１表达可能与ＨＳＣ活化、肝脏炎性损伤及肝纤维化的发生有关。     

冠心病可溶性细胞间黏附分子-1的检测 及其临床意义

目的　检测冠心病患者可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的变化,探讨其在冠心病发病机理、病情监测中的意义。方法　用酶联免疫吸附法检测50例急性心肌梗死(AMI)、50例不稳定性心绞痛(UA)、30例稳定性心绞痛(SA)、30例健康者血浆sICAM-1水平。结果　AMI、UA、SA患者sICAM-1水平均较正常对照组高,且三组间差异有显著性。AMI患者按心功能分组,各组间差异亦有显著性(P均<0.05)。结论　sICAM-1可能参与了冠心病的发病过程,它可作为病情监测的指标。     

核因子κB、细胞间粘附分子1在吸烟大鼠气道上皮细胞中的表达

目的　探讨核因子κB (NF κB)和细胞间粘附分子 1 (ICAM 1 )在吸烟大鼠气道上皮细胞中表达的变化及其在气道炎症形成过程中的作用。方法　Wistar大鼠 39只 ,随机分为不吸烟组、吸烟1个月组、3个月组 ,每组 1 3只。采用免疫组织化学染色和原位杂交技术半定量检测各组NF κB亚单位p65和ICAM 1的表达。结果　 (1 )吸烟 1个月组、3个月组细支气管上皮细胞NF κB核染色阳性细胞百分比为 (63± 4) %、(51± 5) % ,与不吸烟组 [(2 7± 5) % ]比较 ,差异有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;(2 )吸烟 1个月组、3个月组主、细支气管气道上皮细胞ICAM 1mRNA的表达为 0 .645± 0 .0 38、0 .747±0 0 4 1、0 .688± 0 .0 62、0 .80 9± 0 .0 2 3 ,与不吸烟组 (0 .52 6± 0 .0 2 3、0 .635± 0 .0 4 4 )比较差异有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;而且 3个月组与 1个月组比较差异也有显著性 (P分别 <0 .0 5、0 .0 1 ) ;(3)吸烟 1个月组、3个月组主、细支气管气道上皮细胞ICAM 1蛋白表达为 0 .73± 0 .0 4、0 .94± 0 .0 5、0 .77± 0 .0 4、0 .99± 0 .0 3 ,与不吸烟组 (0 .57± 0 .0 4、0 .83± 0 .0 4 )比较 ,差异也有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;而且 3个月组与 1个月组比较差异也有显著性 (P分别 <0 .0 5) ;(4)各组细支气管上皮     

Effects of interleukin-10 on activation and apoptosis of hepatic stellate cells in fibrotic rat liver

AIM:To study the effects of interleukin-10(IL-10)on the expression of α-smooth muscle actin(α-SMA),nuclear factor-κB(NF-κB)and Fas/Fas ligand(FasL)inhepatic stellate cells of experimental rats with hepaticfibrosis.METHODS:Sixty clean SD rats were randomly dividedinto control group(group N),liver fibrotic group(groupC)and IL-10 treatment group(group I).Control groupreceived intraperitoneal injection of saline(2ml·kg~(-1)),twicea week.Fibrotic group was injected intraperitoneallywith 50% carbon tetrachloride(CCl_4)(2 ml·kg~(-1)),twicea week.IL-10 treatment group was given IL-10 at adose of 4 μg·kg~(-1)20 minutes before CCl_4 administrationfrom the third week.Hepatic stellate cells(HSCs)wereisolated from these rats at the seventh and eleventhweeks during the course of liver fibrosis,respectively.The expression of α-SMA and NF-κB in HSCs wasmeasured by S-P immunohistochemistry.The expressionof Fas and FasL mRNA was measured by RT-PCR.Furthermore,liver tissues were harvested from threegroups at the same time.RESULTS:The CCl_4- induced experimental rat hepaticfibrosis model was established successfully.The purityof extracted hepatic stellate cells was about 95% andthe yield of hepatic stellate cells was 1.2-2.3×10~6/g livertissue averagely.The positive expression of α-SMA andNF-κB was 36.5% and 28.5% respectively in group N.The positive levels of α-SMA and NF-κB were increasedsignificantly in group C compared to group N(P<0.01).The positive signals decreased significantly(P<0.05)ingroup I.In the 11~(th)week,the HSCs of group I becameround with visible pyknotic nuclei.The expression ofNF-μB in group C was significantly increased in a time-dependentmanner(P<0.01),but there was no difference in the α-SMA expression(P>0.05).The mRNA of Fasand FasL in group C was significantly increased in a time-dependent manner compared to that in control group.After treated with IL-10,the expression level of Fas andFasL was higher in group I than in group C.CONCLUSION:The positive expression of α-SMA andNF-κB in hepatic stellate cells is decreased by ectogenicIL-10 in liver fibrosis induced by CCl_4.The expression ofFas and FasL is increased in the course of liver fibrosis,and is further increased by IL-10.IL-10 could inhibitthe activation of HSCs and cause apoptosis of activatedHSCs.     

可溶性细胞间粘附分子与肝硬化及其并发症的相关性研究

目的　探讨血清可溶性细胞间粘附分子 1(sICAM 1)与肝硬化及其并发症的关系。方法　采用酶联免疫吸附法测定 61例肝硬化患者及 3 4名正常人血清sICAM水平。结果　肝硬化患者血清sICAM 1水平 [(1183 .5 7±491.83 )ng/ml]明显高于非肝硬化患者 [(3 72 .3 8± 182 .49)ng/ml,P <0 .0 1] ,并与血清白蛋白 (ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素 (TBiL)及肝功能Child分级之间密切相关 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。伴门脉高压性胃病 (PHG)肝硬化患者血清sICAM 1水平 [(13 5 3 .14± 497.45 )ng/ml]较无PHG的肝硬化患者 [(110 6.3 1± 3 92 .0 8)ng/ml]及正常对照组显著增高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论　sICAM可能参与了肝硬化病变及其并发症的发生和发展     

重型乙型肝炎肝内细胞间粘附分子—1 mRNA的表达

目的 探讨细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）ｍＲＮＡ在重型乙型肝炎肝内的表达水平及其意义。方法 用原位杂交技术检测１１例非肝病对照者,５例慢性无症状ＨＢｓＡｇ携带者（ＡｓＣ）,１５例慢性乙型肝炎和３０例重型乙型肝炎患者肝内ＩＣＡＭ－１ ｍＲＮＡ原位表达。结果 非肝病者和ＡｓＣ肝细胞无ＩＣＡＭ－１ ｍＲＮＡ;重型乙型肝炎患者肝细胞ＩＣＡＭ－１ ｍＲＮＡ表达明显增强,其表达水平显著高于慢性乙型肝炎。结     

Inhibition of high-mobility group box 1 expression by siRNA in rat hepatic stellate cells

AIM:To explore the role of high-mobility group box 1 (HMGB1) protein during liver fibrogenesis and investigate the functional effects of HMGB1 gene silencing in hepatic stellate cells (HSCs) using siRNA.METHODS:Hepatic fibrosis in rats was induced through serial subcutaneous injections of dimethylnitrosamine,and expression of HMGB1 was detected by immunohistochemistry.HMGB1 siRNAs were developed and transiently transfected into HSC-T6 cells using Lipofectamine 2000.HMGB1 expression was evaluated by real-tim...     

胰岛素样生长因子对心力衰竭大鼠心肌细胞黏附分子1表达的影响

目的 观察胰岛素样生长因子干预对心力衰竭大鼠心肌细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响. 方法 应用异丙肾上腺素腹腔注射方法建立SD大鼠心力衰竭模型.大鼠随机分为对照组、心力衰竭组、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)治疗组和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)治疗组.应用生理记录仪检测大鼠血流动力学改变;分别应用放射免疫法和免疫组化法测定血管紧张素Ⅱ含量和大鼠心肌ICAM-1表达的改变. 结果 与模型组比较,ACEI和IGF-1改善心力衰竭大鼠血流动力学,降低异丙肾上腺素AngⅡ含量,抑制ICAM-1的表达.与ACEI组比较,IGF-1改善心力衰竭大鼠的血流动力学参数更加明显,另外,IGF-1降低AngⅡ的浓度(369.2±63.0)ng/L与(384.4±56.2)ng/L使ICAM-1(0.804±0.024与1.254±0.059)表达更加显著(P＜0.01). 结论 IGF-1可明显抑制心力衰竭大鼠心肌ICAM-1的表达,这可能与其抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统系统激活、降低AngⅡ有关.     

他汀类药对人脐静脐内皮细胞细胞间黏附分子—1表达的影响

目的　观察氟伐他汀 (Flu)和辛伐他汀 (Sim)对肿瘤坏死因子 (TNF)α诱导的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)细胞间黏附分子 (ICAM) 1表达的影响 ,探讨他汀类药物可能的非调脂抗动脉粥样硬化作用。方法　体外培养HUVEC ,加TNFα (10 0U/ml)及 1× 10 -8～ 1× 10 -5mol/L浓度Flu或Sim ,共孵育 6、12和 2 4h ,采用细胞ELISA、流式细胞技术和逆转录 聚合酶链反应测定ICAM 1蛋白及mRNA水平表达。结果　Flu和Sim皆对TNFα诱导的ICAM 1蛋白表达及ICAM 1mRNA表达有抑制作用 ,呈浓度依赖性和时间依赖性特征。结论　Flu和Sim抑制TNFα诱导的HUVECICAM 1表达 ,可能对阻止血单核细胞向血管内皮细胞募集和黏附、延缓动脉粥样硬化的发生和发展有一定作用。