Effects of dexamthasone with different doses on aquaporin-4 in brain of intracerebral hemorrhage rats

Objective:To determine the relationship between the expression of aquaporin-4(AQP4) after intracerebral hemorrhage and dexamethasone treated. Methods:Collagenase Ⅶ was injected in caudate nucleus in a stereotaxis frame to establish the intracerebral hemorrhage(ICH) animal models. The intracerebral hemorrhage(ICH) rats were randomly divided into four groups: the sham group (group A), the ICH group(group B), low dose-treated group(group C), moderate dose group(group D) and high dose group(group E). The groups were respectively received an intraperitoneal dexamethasone injection with 1 mg/kg, 15 mg/kg, 30 mg/kg, twice a day for three days. The brain water content(BWC), the permeability of blood-brain barrier(BBB) and the expression of AQP4 were observed. Results:Both the BBB disruption and AQP4 expression decreased in treated groups, and the AQP4 expression had a dose-dependent manner in the dexamethasone treatment. And it seemed that low dose dexamethasone was in favor of brain swelling elimination, but the higher dosage had not similar effect. Conclusion:Dexamethesone may play a critical role on expression of AQP4 in the physiopathology of hemorrhagic edema.     

大鼠脑出血后脑含水量变化及其与凝血酶关系的研究

目的　探讨大鼠脑出血后脑含水量变化及凝血酶与脑水肿的关系。方法　以SD大鼠为研究对象,随机将大鼠分为生理盐水组、脑出血组、凝血酶组。以自体血、凝血酶注入大鼠尾状核,建立脑出血模型,采用干湿重法观察脑水肿情况。每组每时相(4h ,12h ,2 4h ,4 8h ,72h ,7d)各6只大鼠。结果　在4h、12h、2 4h、4 8h、72h脑出血组和凝血酶组脑含水量比生理盐水组高(P <0 .0 5 ) ,而7d这个时相点各组间无明显差异(P >0 .0 5 )。脑出血组与凝血酶组脑含水量各时相间无明显差异(P >0 .0 5 )。结论　大鼠脑出血早期(4h)引起明显脑水肿,其高峰时间为2 4～4 8h ,3天后水肿开始消退,7天后逐渐趋于正常,其中凝血酶在脑水肿中起关键作用。     

阿托伐他汀对脑出血大鼠脑组织病理变化及血浆MMP-9水平的影响

目的：探讨不同剂量阿托伐他汀对大鼠脑出血（ICH）后脑组织水肿、神经细胞凋亡、血浆基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的影响．方法：采用胶原酶注入法建立大鼠ICH模型,干湿重法测定各组脑组织含水量、电镜观察脑组织超微结构变化、ELISA法检测血浆MMP-9的水平．结果：阿托伐他汀可明显减少大鼠ICH后脑组织含水量,阻断神经元细胞凋亡,降低血浆MMP-9水平．血浆MMP-9水平与其脑组织含水量之间呈正的直线相关关系．结论：阿托伐他汀能明显减轻大鼠ICH后脑水肿,降低MMP-9引发的脑损伤,保护大脑神经元细胞．     

凝血酶与出血性脑组织损伤的相关性动物实验研究

目的 观察大鼠脑内注入凝血酶或全血后神经细胞凋亡和脑组织水肿的动态改变，并观察凝血酶特异性抑制剂（水蛭素）能否减轻凝血酶对脑组织的损伤。方法 成年168只SD大鼠随机分为5组，即凝血酶组、脑出血组、凝血酶加水蛭素组、脑出血加水蛭素组和生理盐水对照组，分别向大鼠右侧基底节区注入凝血酶、全血、凝血酶加水蛭素、全血加水蛭素和生理盐水，于注射后6、24、72h，7d取脑组织，检测脑组织水含量（干湿重法）、神经细胞的凋亡情况（Tunel法）。结果 与生理盐水对照组比较，凝血酶组和脑出血组的脑组织水含量及凋亡细胞数明显增加。时效学研究显示脑出血组脑组织水肿和神经细胞凋亡开始于术后6h，72h达高峰，7d后下降；凝血酶组开始于术后6h，24h达高峰，72h下降。与生理盐水对照组比较，脑出血组术后6h凋亡细胞数无统计学差异（P〉0、05），凝血酶组注入凝血酶后6h凋亡细胞数有明显增加（P〈0、05）。水蛭素干预后脑出血组和凝血酶组的脑组织水含量和神经细胞凋亡数明显降低（P〈0、05）。结论 大剂量凝血酶诱导的组织水肿和细胞凋亡在24h达高峰，脑出血后组织水肿及细胞凋亡均于72h达高峰可能与脑出血后凝血酶逐渐由血肿释放有关，水蛭素能显著减轻脑组织水肿和神经细胞凋亡。     

溶解红细胞对大鼠脑出血后脑水肿的影响

目的：研究溶解红细胞对脑出血后脑水肿的影响.方法：运用立体定向技术分A、B、C 3组制作大鼠脑出血模型,向大鼠基底节分别注入50μl生理盐水、自体全血、溶解红细胞.观察各组大鼠脑组织病理改变、脑含水量和伊文斯兰含量的变化以及血红素环解加氧酶（HO-1）阳性细胞表达及细胞凋亡程度变化.结果：A、B、C 3组脑含水量（%）,伊文斯兰含量（μg/g）,HO-1染色阳性细胞数,凋亡染色阳性细胞数均依次增高,3组间比较差异具有统计学意义（P＜0.05）.B、C组均可见脑细胞高度水肿,细胞间隙明显增大,C组最明显,B组次之.结论：溶解红细胞能造成脑损伤,脑出血后脑水肿的形成与溶解红细胞具有密切关系.     

地塞米松对脑出血大鼠脑AQP4影响的研究

目的通过建立大鼠自体血脑出血(ICH)模型,观察地塞米松对水孔蛋白4(AQP4)表达的影响及血脑屏障(BBB)的通透性与AQP4表达的关系。方法建立自体血ICH模型后,大鼠随机分为脑出血模型对照组(ICH组)和脑出血加地塞米松干预组(DEX组),观察脑出血后12h、1d、3d、5d、7d各点大鼠BBB通透性及AQP4的表达。结果ICH组大鼠BBB通透性从12h开始明显增加,1d达高峰(20.350±1.294),灶周AQP4的蛋白及其mRNA光密度值均至第3天达到高峰(0.806±0.113,1.112±0.072),BBB通透性的变化与AQP4蛋白及其mRNA的变化成正相关(r=0.898和r=0.847,P<0.01)。脑出血12h后DEX组BBB通透性和AQP4的表达均较ICH组降低。结论地塞米松可以保护脑出血大鼠BBB,并降低AQP4的表达,并且BBB通透性与AQP4及其mRNA成正相关。     

强啡肽A1～13与大鼠脑出血后脑水肿关系的实验研究

目的；建立稳定的大鼠脑出血模型，研究强啡肽Ａ１￣１３对大鼠胶原酶诱导的脑出血后脑水肿的影响，寻找治疗脑出血后脑水肿的特异性药物。     

局部应用重组水蛭素治疗脑出血后脑水肿的实验研究

目的 探讨局部应用凝血酶特异性抑制剂（重组水蛭素）治疗脑出血后保护机制。方法 成年雄性SD大鼠随机分为生理盐水组、脑出血组和水蛭素组（出血后3h）。以50m自体血注入大鼠尾状核方法建立脑出血模型，应用干一湿重法观察脑水肿变化，前肢放置实验观察行为学。每组每时相点（1、2、3、7、14、28天）各6只大鼠。结果 脑出血组和水蛭素组脑含水量与生理盐水组在24h、48h、72h比较P〈0．05，7天时各组间无明显差异（P〉0．05）；脑出血组大鼠前肢放置实验结果与生理盐水组比较（P〈0．05），水蛭素组与脑出血组比较P〈0．05。结论 脑出血后24～48h水肿达高峰；重组水蛭素可明显减轻脑水肿，同时可以改善脑出血后的神经功能缺损。     

红细胞对创伤性脑出血大鼠脑含水量与TNF-α表达的影响

目的:观察创伤性脑内出血(TICH)模型中红细胞对脑含水量和TNF-α表达的影响,探讨红细胞在TICH后脑水肿形成中的作用机制.方法:120只大鼠随机分为创伤性脑损伤组(TBI组),TBI加注全血组(WB组),TBI加注溶解红细胞组(LRBC组)和TBI加注压积红细胞组(PRBC组),每组30只.4组均采用自由落体打击法造成大鼠脑外伤.后3组借助立体定向仪分别向伤区脑皮质内注射全血、溶解红细胞和压积红细胞,造成TICH模型.于伤后1 d、3 d、5 d分别处死10只大鼠,5只用于测伤区脑组织含水量,5只用于免疫组化法检测TNF-α的表达.结果:伤后不同时点比较:TBI、WB和PRBC 3组第3 d的脑含水量最高,LRBC组第1 d的含水量最高;4组间比较:1 d时LRBC含水量最高,3 d时PRBC和WB组含水量均高于另2组.在WB、PRBC和LRBC组,TNF-α的阳性表达与脑含水量的变化相一致.结论:红细胞可使TICH大鼠的脑含水量增加,TNF-α表达增强,且2者的变化趋势一致,提示红细胞在TICH后迟发性脑水肿的形成中有重要作用,其机制与炎症反应关系密切.     

脑出血患者脑水肿的无创动态监测

目的　观察脑出血患者不同病程脑水肿变化情况及脑水肿无创监测的灵敏性、稳定性。方法　采用BOEN BE无创脑水肿动态监护仪 ,通过观察双侧大脑半球脑阻抗值的变化 ,测定 3 5例脑出血患者脑水肿情况 ,并与头颅CT检查显示的血肿周围低密度容积进行比较。结果　脑出血患者病程 1、3、7d所测阻抗值出血侧大脑半球均显著高于健侧 (P<0 .0 1) ,病程 3、7d出血侧阻抗值显著高于病程 1d (P <0 .0 1) ,与头颅CT检查显示的血肿周围低密度变化一致。相关分析显示出血侧大脑半球阻抗值的变化与头颅CT检查显示的血肿周围低密度容积具有显著的正相关关系 (P <0 .0 1) ,但与脑出血量无显著相关性 (P >0 .0 5 )。结论　脑出血患者出血侧大脑半球阻抗值显著增高 ,无创脑水肿动态监护仪可灵敏、客观地反应脑出血患者脑水肿情况     

大鼠脑出血后MMP-9的表达与脑含水量变化的关系

目的:探讨大鼠脑出血(ICH)后基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达和脑含水量变化的关系.方法:采用未抗凝新鲜自体股动脉血注入大鼠尾状核建立脑出血动物模型.湿重-干重法测定脑含水量的变化.结果:MMP-9在ICH后6 h开始表达,24～48h最明显(P＜0.01),6 d仍有较低水平表达.脑组织含水量ICH后6 h开始增加,24～72 h达高峰(P＜0.01),6 d基本恢复正常水平.结论:MMP-9可能参与急性期脑水肿的形成.     

脑出血大鼠脑组织水肿与脑脊液ApoE多态性关系

目的探讨脑出血大鼠脑脊液载脂蛋白E基因（ApoE）多态性与周围脑组织水肿的关系。方法对ApoE基因扩增DNA进行Afl Ⅲ和Hae Ⅱ双酶切技术检测16例脑出血大鼠ApoE基因型频率，根据脑出血大鼠标本切片计算脑水肿指数，统计学分析他们之间的关系。结果脑水肿指数与ApoE3呈负相关，而与ApoE4呈正相关，两者差异有显著性，脑出血大鼠脑脊液ApoE3和ApoE4与周围脑组织水肿具有相关性。结论脑出血大鼠脑脊液ApoE多态性可能是影响周围脑组织水肿的因素之一。     

红细胞致脑出血后血肿周围脑组织迟发性损伤的氧化机制

目的　研究脑出血 (intracerebralhemorrhage ,ICH)后血肿内的红细胞致血肿周边脑组织迟发性损伤的氧化机制 ,观察不同时间点脑组织含水量、血肿周边脑组织自由基含量的动态变化。方法　采用立体定向技术将自体浓缩红细胞注入大鼠脑基底节区制作实验动物模型 ,将动物随机分为假手术对照组、ICH组 ,在不同时间点断头取脑 ,应用干湿重法测定脑组织含水量、生化方法测定血肿周围脑组织匀浆中丙二醛 (MDA)的含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活力的变化。结果　ICH组大鼠脑组织含水量在 2 4h内无明显变化 ,4 8h时有所增加 ;在 72h脑组织含水量明显增高并达峰值 (P <0 .0 1) ;随后逐渐下降 ,在 16 8h含水量缓慢恢复到假手术对照组水平。ICH组大鼠脑组织MDA在脑出血后 6h无明显变化 ;在 12h有所增加 ;于 72hMDA达到高峰 (P <0 .0 1) ,随后逐渐下降接近假手术对照组水平。SOD在脑出血后 6h无明显变化 ,与假手术对照组相比无统计学差别 (P >0 .0 5 ) ;随后逐渐下降 ,至第 4 8～ 72h下降达到最低值 (P <0 .0 1) ,后逐渐恢复 ,至第 16 8h接近假手术对照组水平。脑出血后血肿周围脑组织MDA的变化与脑组织含水量的变化呈正相关 (r =0 .82 3,P <0 .0 5 ) ,血肿周围脑组织SOD的变化与脑组织含水量的变化呈负相关 (r =- 0 .77     

活络益脑汤择时用药对实验性大鼠脑出血模型血流变学指标的影响

目的通过测定血液流变学指标和脑组织含水量,探讨活络益脑汤择时给药对大鼠脑出血急性期的治疗作用机理及最佳用药时间点。方法将造模成功的脑出血大鼠随机分为模型3 d组、模型生理盐水组、汤药3个时间用药组,分别于造模后3 d与15 d后测血液流变学指标、脑系数与脑组织含水量。结果给药15 d后各治疗组大部分血液流变学指标恢复正常值上下,而以9时用药组更接近正常值。结论活络益脑汤对大鼠脑出血的血液流变学指标和脑水肿有明显改善作用。     

安宫牛黄丸全方及简方对大鼠脑出血损伤的影响

目的探讨安宫牛黄丸对大鼠脑出血损伤的保护作用,并比较安宫牛黄丸全方和简方(不含朱砂和雄黄)的作用差异。方法采用大鼠尾状核内注入胶原酶诱发脑出血模型,术后3 h灌胃给药1次,每天给药1次,连续3 d,观察安宫牛黄丸全方及简方对脑出血大鼠神经功能、脑系数、脑含水量及血液流变学等指标的影响。结果安宫牛黄丸全方(0.2、0.4 g/kg)及简方(0.32 g/kg)能明显改善脑出血大鼠的神经功能障碍,降低脑系数和脑血肿周围脑组织的含水量,提高红细胞变形能力。结论安宫牛黄丸全方及简方对大鼠脑出血损伤有保护作用,安宫牛黄丸全方的作用优于简方,但并无明显的统计学差异。     

蒺藜皂苷对大鼠实验性脑出血的脑保护作用

目的探讨注射用蒺藜皂苷(GSTT)对大鼠实验性脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)的脑保护作用.方法建立血淤模型,1d后应用大脑立体定位技术,自大鼠尾动脉取不抗凝血液50μl缓慢注入尾状核;建立大鼠实验性脑出血模型,观察其脑出血后脑水肿的变化及其行为学的影响;检测大鼠不同切变率的全血黏度,检测大鼠血浆及脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织匀浆中一氧化氮(NO)的含量.结果 GSTT可明显降低出血脑组织的脑水分含量,明显改善神经行为,降低全血黏度,并可升高血浆及脑组织匀浆中SOD活性,降低MDA含量,降低脑组织匀浆中NO含量,与模型组比较有显著差异(P＜0.05或P＜0.01).结论 GSTT可减轻脑出血后神经细胞损伤、降低脑水肿、改善神经行为,降低全血黏度、改善血液流变性,其抗损伤机制可能与抗自由基、降低NO毒性有关.     

大鼠脑出血后脑含水量的变化及水蛭素的干预作用

目的：探讨大鼠脑出血（ICH）后脑含水量与血脑屏障（BBB）通透性之间的变化及水蛭素对ICH后脑水肿的作用.方法：采用自体动脉血注入大鼠尾状核建立脑出血模型,将75只大鼠分成：对照组、脑出血组、水蛭素组,各实验组分6 h、1 d、3d、5 d、7 d等5个时间点.采用干湿重法测定不同时间点的脑含水量;按BELAYEV法使用伊文思蓝测定BBB通透性.结果：脑水含量和BBB通透性在ICH后6 h开始升高,3 d达到高峰,5 d到7 d开始下降,二者之间存在明显的相关性（r=0.815,P＜0.01）.水蛭素能够降低各个时间点的脑水含量和BBB通透性.结论：BBB通透性增高与脑水肿的形成密切相关;水蛭素可抑制ICH后的脑水肿形成,抗凝血酶治疗可能成为ICH后脑水肿的一种可行治疗方法.     

血清AQP4水平与脑出血周围水肿体积相关性的研究

目的探讨急性脑出血患者发病第3、7天的血清水通道蛋白4（AQP4）水平与脑组织水肿体积的相关性。方法对50例自发性脑出血患者采用ELISA法检测出血第3、7天血清AQP4水平,通过头颅CT计算脑出血和脑水肿体积,计算相对水肿体积并分析其与AQP4水平的关系。结果脑出血后第7天AQP4水平与相对水肿体积均较第3天升高,差异有统计学意义（均P＜0.05）;第3天与第7天AQP4水平的改变与相对水肿体积差值呈正相关（r=0.555,P＜0.01）。结论脑出血后血肿周围水肿的形成及发展与血清AQP4的异常表达密切相关,减少AQP4的过度表达有可能成为脑出血后脑水肿治疗新途径。     

甘露醇疗程对自发性脑出血患者血肿周围水肿程度的影响

目的:探讨自发性脑出血患者较长时间应用甘露醇是否会加重血肿周围水肿的严重程度.方法:82例自发性脑出血患者出血量均大于3 mL,并于发病24 h内及发病后4～7d行头颅CT扫描.将所有病例根据甘露醇应用情况分为甘露醇治疗不满3d组与甘露醇治疗满3d组,比较两组血肿周围水肿程度的差异有无统计学意义.结果:甘露醇治疗不满3d组血肿周围水肿严重程度为(21.7±12.7) mL,与甘露醇治疗满3d组血肿周围水肿严重程度(27.7±17.8)mL比较,两者差异无统计学意义(P=0.158).结论:对存在颅高压的自发性脑出血患者连续较长时间(＜7 d)应用甘露醇脱水降颅内压,无明显扩大水肿的作用.     

NEC-1在大鼠ICH后继发性脑损伤中的作用研究

目的 探讨NEC-1对大鼠自发性脑出血后继发性脑损伤的治疗作用及机制。方法 成年SD大鼠随机分为假手术组,脑出血+生理盐水组和脑出血+NEC-1组。采用测大脑干湿重法检测大鼠脑组织含水量,应用Western blotting法检测脑组织中RIP1/RIP3,TNF-α, IL-1β蛋白水平的表达情况,采用TUNEL法检测脑组织神经细胞凋亡情况。结果 与生理盐水组相比,NEC-1能够明显减轻大鼠脑组织含水量,下调RIP1/RIP3, TNF-α, IL-1β蛋白的表达,减少神经细胞凋亡,组间差异比较有统计学意义（P<0.05）。结论 NEC-1能够减轻ICH继发性脑损伤后脑水肿,具有显著的神经保护作用,可能是通过调节RIP1/RIP3的作用,为继发性脑损伤的治疗提供了新的思路。