寻常型银屑病不同证型蛋白组学表达的比较研究

目的 对寻常型银屑病(血热证、血瘀证、血虚证)患者与正常人差异蛋白进行分析,探求三证之间差异性表达蛋白,从蛋白质组学角度揭示三证之间的差异.方法 取寻常型银屑病血瘀证、血虚证、血热证患者的血清,应用蛋白提取、定量、双向电泳技术、质谱鉴定和数据库检索,寻找出三证之间的差异蛋白和共有蛋白,并将这些蛋白进行组间比较.结果 发现了15种显著性差异蛋白(P<0.05),其中补体C3、凝聚素、血清转铁蛋白、间-α-胰蛋白酶抑制剂H4重链(片段)、载脂蛋白E、 补体C4-B、 甘露糖结合蛋白C及富亮氨酸-α-2-糖蛋白在血虚型银屑病患者血清表达水平高于血热型和血瘀型(P<0.05).纤维蛋白原β链、血液接合素、纤维蛋白原γ链、HPX蛋白、α-抗胰蛋白酶、甲状腺素转运蛋白及载脂蛋白Ⅳ在血热型银屑病患者血清中的表达水平高于血瘀型患者(P<0.05).共同蛋白有5种(P<0.05),分别为血液结合素、纤维蛋白原γ链、HPX蛋白、α-抗胰蛋白酶、载脂蛋白A-Ⅳ.结论 寻常型银屑病(血热证、血瘀证、血虚证)血清中存在表达差异性蛋白质,可能与寻常型银屑病的发病机制和银屑病不同证型的物质基础有关.     

蛋白质组学技术分析银屑病皮损组织中的蛋白质表达

目的:分析银屑病皮损组织中的蛋白质表达.方法:对研究蛋白质组学的关键技术二维凝胶电泳(2-DE)过程进行改良.结果:建立了寻常型银屑病皮损和非皮损组织的蛋白质组2-DE方法.结论:本实验为研究影响银屑病的表皮细胞增生差异蛋白质组学奠定了技术基础.     

基于核磁共振的寻常型银屑病患者血浆代谢组学研究

目的 通过基于核磁共振氢谱(nuclear magnetic resonance 1 H spectroscopy,1 HNMR)的代谢组学技术寻找寻常型银屑病患者血浆潜在生物标记物,探讨其相关代谢通路并进行分析.方法 应用1 HNMR技术对10例寻常型银屑病患者和12例健康志愿者血浆进行检测,对所得数据分别采用主成分分析法(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析法(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)进行模式识别分析,寻找寻常型银屑病患者与健康者血浆差异性代谢物,根据差异性代谢物的变化构建相关代谢通路图并进行分析.结果 模式识别分析具有较好的区分度和预测性,寻常型银屑病患者血浆中极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂类、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、β-羟基丁酸、乳酸、丙氨酸、精氨酸、N-乙酰糖蛋白、乙酰乙酸、谷氨酸、丙酮酸、谷氨酰胺、柠檬酸、肌酸、肌酐、葡萄糖、天冬氨酸和苯丙氨酸含量明显增高.结论 寻常型银屑病患者不仅存在脂类代谢、糖代谢和氨基酸代谢的紊乱,还伴随着炎症反应发生和肝肾功能损害.该结果加深了对寻常型银屑病发病机制的认识,为疾病的诊断和治疗提供了新思路和新方法.     

寻常型银屑病患者血清S100A12水平的测定及临床意义

目的了解寻常型银屑病患者血清中S100A12水平及其临床意义。方法 ELISA法检测50例寻常型银屑病患者和50例健康对照组血清S100A12水平,并计算患者银屑病面积和严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)。使用Pearson分析法分析S100A12水平与PASI相关性。结果寻常型银屑病组血清S100A12水平为(154.4±114.9)ng/mL;对照组血清S100A12水平为(72.6±62.8)ng/mL。寻常型银屑病组S100A12水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。Pearson分析结果显示寻常型银屑病组S100A12水平与PASI评分之间呈正相关性(r=0.436,P0.05)。结论银屑病患者血清S100A12水平明显高于健康人,与疾病严重程度相关,可作为判断银屑病严重程度的指标。     

寻常型银屑病患者BMD、ALP、Ca、P、TRACP-5b的检测及其意义

目的检测寻常型银屑病患者骨代谢生化指标及骨密度的情况,以了解寻常型银屑病患者的骨代谢异常状况。方法采用双能X线吸收法对48例寻常型银屑病患者（实验组）和40例健康对照者（对照组）行腰椎、股骨颈、左前臂骨密度检测;在相同条件下用贝克曼自动生化分析仪检测两组血液中ALP、Ca、P的浓度;ELSIA法检测两组血清中抗酒石酸酸性磷酸酶-5b（TRACP-5b）的浓度。结果寻常型银屑病患者血清TRACP-5b、ALP的浓度明显高于对照组（P〈0.05）,差异具有统计学意义;血清Ca浓度较正常对照组低,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清P的浓度和正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,腰椎、股骨颈、左前臂的骨密度及T值与对照组比较,具有统计学意义（P〈0.05）。结论寻常型银屑病患者骨形成和骨吸收相关酶较正常人的血清水平升高,骨密度较正常人降低,说明寻常型银屑病患者骨代谢异常并已致骨量减少。血钙异常可能是寻常型银屑病骨代谢异常的原因之一,而血P在寻常型银屑病骨代谢异常中无影响。     

40例寻常型银屑病患者血清锌和PASI评分相关性分析

目的:观察寻常型银屑病患者进展期、稳定期、消退期血清锌与银屑病的相互关系,进一步探明银屑病的病因和发病机制.方法:对40例银屑病患者各期行PASI评分,对银屑病患者各期和对照组用原子分光光度法检测血清锌值.结果:银屑病患者在病程中血请锌较对照组显著降低,各组间有显著性差异(P<0.01);对银屑病患者血清锌与PASI评分进行直线相关分析得:进展期R=0.641、稳定期R=0.749、消退期R=0.717,P<0.01.结论:银屑病患者血清锌较正常人显著降低;锌与PASI评分呈正比关系.     

寻常型银屑病血热证患者外周血Th17细胞活化和增殖相关因子的表达

目的探讨Th17细胞活化和增殖相关因子在寻常型银屑病血热证发病机制中的作用以及寻常型银屑病血热证的物质基础与辨证依据。方法收集我院皮肤科门诊寻常型银屑病血热证患者12例为观察组,11例正常人为对照组。通过多色流式细胞术检测两组外周血Th17细胞活化相关因子HLA—DR、增殖因子Ki-67表达水平。结果观察组外周血Th17细胞活化因子HLA—DR的表达及增殖因子Ki-67的表达均高于对照组（P〈0．05）;但活化因子HLA—DR及增殖因子Ki-67与银屑病的病情及严重程度指数（PASI）评分均无相关性（r1=-0．021,r2=0．098,均P〉0．05）。结论Th17细胞活化因子HLA—DR和增殖因子Ki-67在银屑病血热证患者外周血中表达上调,提示银屑病血热证患者外周血Th17细胞处于高活化状态且增殖活跃,二者可能间接参与了银屑病血热证的发病过程,是银屑病血热证新的物质基础与辨证依据。     

寻常型银屑病TWEAK/CD163在外周血中表达的初步研究

目的 初步探讨肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)及CD163在寻常型银屑病（psoriasis vulgaris，PV）中的作用。方法 2016年6~12月间共收集28例PV患者和15例健康对照者外周血，ELISA法测定血清TWEAK及CD163的表达水平，real time-PCR法测定外周血TWEAK mRNA及CD163 mRNA的表达水平，流式细胞仪检测外周血中TWEAK及CD163的蛋白在单核细胞的表达比例。分析PV患者银屑病严重程度（PASI评分）与TWEAK、CD163表达的相关性。结果 纳入时28例PV均处于进展期，治疗后随访到恢复期的有10例。PV进展期血清TWEAK水平较正常对照组升高，而血清CD163水平较对照组下降，PV恢复期血清TWEAK水平较进展期下降而血清CD163水平升高；TWEAK mRNA 水平在PV低于对照组，而CD163 mRNA水平在PV和对照无明显差异；TWEAK 在单核细胞的表达率在PV进展期和恢复期均高于对照组，而CD163在单核细胞的表达率在PV进展期和恢复期均低于对照组。PV进展期和对照组单核细胞的TWEAK和CD163共表达率均高于PV恢复期（P＜0.05），而PV进展期和对照组比较差异无统计学意义。血清TWEAK水平、血清CD163水平、TWEAK及CD163在单核细胞的各自表达率和共表达率均与PV严重程度无相关性（P>0.05）。结论 TWEAK/CD163炎症信号通路可能参与了PV的发病。     

甲氨蝶呤对寻常型银屑病患者外周血IL-8表达的影响

目的探讨甲氨蝶呤（Methotrexate,MTX）对寻常型银屑病患者外周血中自细胞介素8（Interleukin 8,IL-8）表达调控作用。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）技术检测19例寻常型银屑病外周血治疗前,MTX治疗8周后及19例正常对照者外周血IL-8的表达。结果IL-8在寻常型银屑病外周血中治疗前的表达水平为76．84±31．05pg／ml,经过MTX治疗8周后的表达水平为43．25±31．64pg／ml,正常对照者的表达水平为34．79±15．75pg／ml。IL-8在寻常型银屑病外周血治疗前的表达水平明显高于治疗后及正常对照者的表达水平（P〈0．01）,治疗后的表达水平与正常对照者的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MTX能抑制寻常型银屑病患者外周血IL-8的表达,这可能是MTX治疗银屑病的作用机制之一。     

帕金森病患者血清低分子量蛋白质差异表达分析

目的探讨帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者区别于正常人的血清蛋白质差异表达。方法选择原发性PD患者35例和正常人35例,用弱阳离子交换(weak cationic exchange,WCX)磁珠捕获血清蛋白质组分,用MALDI-TOF-MS(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometer)检测各样品的蛋白质质谱,统计学筛选差异表达分子,监督神经网络算法建立区分模型,盲法验证。结果在PD组和对照组之间筛查到8个差异分子(非参数检验Z值范围为-4.458～-3.059,P<0.05)。以监督神经网络算法建立区分模型,其判断正确率为81.4%。对25例新样本的盲法验证结果显示,模型的正确率为76.0%。结论PD患者血清蛋白质的表达谱有别于正常人。蛋白质组学数据结合生物信息学方法可能有助于PD的诊断。     

SERUM APOLIPOPROTEIN LEVELS OF PSORIATIC PATIENTS WITH NORMAL SERUM LIPID LEVELS

INTRODUCTIONPreviousstudiesshowedthattherewasahighinci-denceofocclusivevascu1ardiseasesinpsoriasis(1,2).Alteredserumlipidlevelsmaybethecauseofthein-creasedriskofatherosclerosisinpsoriaticpatients.Apolipoproteins(apos)areproteinconstituentsoflipoproteins.Aposplayanimportantroleinthemetabolismoflipoproteinsinserum.Todeterminetheserumapolevelsofpsoriaticpatientsisimportantforstudyingthecharacteristicsofmetabolismoflipoproteininseruminpsoriasis.Ontheserumapolevelsinpsoriasis,thereareonlytwor…     

银屑平丸治疗寻常型银屑病的疗效及对血清IL-8的影响

目的 现察银屑平丸治疗寻常型银屑病血热证的临床疗效及其对血清IL-8含量的影响.方法 将70例患者随机分为两组,治疗组口服银屑平丸,对照组口服复方青黛丸,疗程均为8周,同时设立20名健康体检者作对照.计算治疗前后PASI(银屑病面积和严重程度指教)评分及检测外周血血清IL-8含量.结果 两组治疗后PASI积分均有明显下降(P＜0.01),治疗组下降较对照组更明显(P＜0.01).两组患者治疗前血清IL-8含量明显高于正常人(P＜0.01),治疗后两组血清IL-8含量明星下降(P＜0.01),治疗组较对照组更明显(P＜0.01).结论 银屑平丸能同时降低寻常型银屑病的PASI积分及血清IL-8含量,临床疗效确切.     

中性粒细胞弹性蛋白酶在银屑病患者血清及皮损中的表达

目的观察中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在银屑病患者皮损及血清中的表达水平,探讨其相关性。方法采用双抗体夹心ELISA法对20例寻常性银屑病患者(寻常性组)血清及皮损处组织液中NE的表达量进行检测,并与20名健康体检者(对照组)比较。银屑病患者病情严重程度采用银屑病皮损面积和严重性指数(PASI)评估。结果寻常性银屑病患者血清及皮损处组织液中NE表达水平显著高于对照组(P0.01),其中进行期寻常性银屑病患者血清及皮损组织液中NE的表达水平要显著高于静止期,差异均有统计学意义(P0.05)。寻常性银屑病患者血清中NE的表达水平与患者相应的PASI呈正相关(P0.01)。结论NE可能参与了银屑病的发病,并与银屑病严重程度相关。     

基于隐结构法的寻常型银屑病常见证候要素的研究

目的运用隐结构法提取寻常型银屑病常见证候要素及其对应症状。方法用统一制定的临床信息采集表收集寻常型银屑病患者的症状信息,建立数据库并进行数据的录入与预处理,用隐结构法分析数据,并结合中医专业知识对获得的隐结构模型进行诠释。结果寻常型银屑病隐结构模型中共计有43个隐变量和111个隐类,经结合专业知识诠释,初步获取寻常型银屑病涉及的病位类证候要素为:血分、肝、肾、脾,病性类证候要素为:血热、血瘀、血虚、血燥、阳虚、气虚、阴虚、湿、火(热)。结论通过隐结构法分析寻常型银屑病的前瞻性无监督数据发现,隐结构法的模型构建与中医理论有相似之处,且比有监督的数据分析有更好的客观性。本研究为进一步建立寻常型银屑病的症候诊断标准提供了依据。     

祛银合剂治疗银屑病疗效观察

目的：评价祛银合剂治疗银屑病的临床疗效，方法：将250例寻常型银屑病患者随机分为两组，分别口服祛银合剂（129例）和复方青黛丸（121例）。3例红皮病型银屑病患者口服祛银合剂治疗。结果：两组总有效率比较有显著性差异（P＜0．01）；3例红皮病型银屑病均得以治愈。结论：祛银合剂治疗寻常型银屑病疗效确切，未发现副作用，值是临床应用，同时为红皮病型银屑病提供了新的治疗方法。     

寻常型银屑病患者生活质量调查

目的：对寻常型银屑病患者的生活质量进行调查研究。方法：对266例寻常型银屑病患者进行皮肤病生活质量指数（dermatology life quality index,DLQI）问卷调查;同时对患者病情进行评分,根据银屑病皮损面积及严重程度指数（psoriasis area and severity index,PASI）分值情况判断病情严重程度,并针对不同严重程度患者的生活质量进行比较。结果：寻常型银屑病患者DLQI分值从大到小排序为：治疗（2.00±0.87）,心理（1.76±0.93）,穿衣（1.59±0.90）,生理（1.52±0.81）,社交娱乐（1.59±0.90）,家庭（1.43±0.76）,饮食（1.31±0.87）,工作学习（1.30±0.75）,日常活动（1.29±0.79）,性生活（0.93±0.91）,运动（0.91±0.89）。且不同严重程度患者的DLQI分值相比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：寻常型银屑病患者在治疗和心理方面受影响较大,并且病情越严重可能会对患者的生活质量影响越大。     

Expression of IRF-4 and IBP in skin lesions of patients with psoriasis vulgaris

The expression of the interferon regulatory factor 4 (IRF-4) and the IRF-4-binding pro-tein (IBP) in psoriatic skin lesions was investigated. The expression of IRF-4 and IBP in skin lesions of 20 patients with psoriasis vulgaris were immunohistochemically dectected. Normal skin from 10 healthy people was used as normal control. The study showed that expression of IRF-4 was increased significantly in keratinocytes and inflammatory cells in the lesions of psoriasis vulgaris than that in the normal control. The detection revealed that IBP expression in keratinocytes, lymphocytes, hair follicles, and sebaceous glands in normal skin was significantly lower than that in the lesions of pso-riasis vulgaris (P<0.05). Both IRF-4 and IBP might be involved in the pathogenesis of psoriasis vul-garis.     

急性运动轴索型神经病患者血清对大鼠脊髓运动神经元凋亡相关蛋白表达的影响

目的采用蛋白质组学技术研究急性运动轴索型神经病(AMAN)患者血清对大鼠脊髓运动神经元凋亡相关蛋白表达的影响。方法分别以16例AMAN患者和16名健康献血者的血清对原代培养大鼠脊髓运动神经元进行干预,24 h后行双向凝胶电泳,MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定神经元发生变化的蛋白,表达水平上升或下降超过30%的点判定为差异蛋白质点。结果 AMAN患者血清干预与健康献血者血清干预的大鼠脊髓运动神经元比较,有21种差异表达蛋白,其中内质网蛋白29、不均一核糖核蛋白H、蛋白酶体α亚基1、3-磷酸甘油醛脱氢酶、电压门控阴离子选择性通道蛋白1为凋亡相关蛋白。结论在AMAN患者血清作用下,大鼠脊髓运动神经元的细胞凋亡相关蛋白表达发生了变化。     

乳腺癌血清标志物的TMT标记定量蛋白质组学筛选及分析

目的 探讨乳腺癌患者血清中蛋白的表达变化,筛选并分析乳腺癌诊断的生物学标志物.方法 采用定量蛋白质组学串联质量标签(TMT)标记技术对68例Ⅱ期乳腺癌患者及62例健康女性的血清蛋白进行检测,并进行蛋白质定量分析,筛选乳腺癌患者血清中发生显著变化的差异蛋白.利用UniProt数据库和Proteome Discoverer软件及在线工具STRING对差异蛋白进一步行生物信息学分析,应用蛋白质印迹法和qPCR对变化倍数显著的差异蛋白VIME(上调为健康对照女性的3.918倍)和RAF1(下调为健康对照女性的0.251)进行验证.结果 共获得67种差异蛋白,其中26种表达上调,41种表达下调.基因本体论(GO)注释分析和功能聚类分析显示上述差异蛋白与肿瘤的血管生成、新陈代谢进程、生物黏附能力等相关.蛋白质印迹法和qPCR验证结果显示RAF1蛋白和mRNA在Ⅱ期乳腺癌患者血清中的表达水平均低于健康对照女性,而VIME蛋白和mRNA的表达均高于健康对照女性,与筛选结果一致.结论 定量蛋白质组学TMT法能有效筛选Ⅱ期乳腺癌患者血清中的差异蛋白,其中VIME和RAF1蛋白有望成为乳腺癌淋巴结转移的候选血清标志物.     

寻常型银屑病患者血清及皮肤组织中PLA2活性研究

应用快速简便微量滴定法测定寻常型银屑病患者和正常人血清中及皮肤组织中磷脂酶A2 (PLA2 )活性 ,结果发现 ,寻常型银屑病患者血清及皮肤组织中PLA2 活性均高于正常对照组 ,进行期和皮损面积 >30 %组的患者血清中PLA2 活性明显高于静止期和皮损面积 <30 %的患者 ,但患者血中PLA2 水平与病程无关。提示血清中PLA2 活性可能与银屑病的病情活动性有关 ,PLA2 在银屑病的发病机制中起着一定的作用。