特异性免疫核糖核酸对感染抗氯喹疟原虫小鼠的保护作用

采用抗氯喹伯氏鼠疟模型.实验组小鼠注射特异性免疫核糖核酸,对照组注射盐水,然后接受抗氯喹伯氏疟原虫攻击,用磷酸氯喹30mg base/kg qd×4d 灌胃治疗,结果实验组原虫率低于对照组(P<0.05),且存活时间延长,说明特异性免疫核糖核酸有一定保护作用。     

重症高原病患者红细胞免疫功能变化研究

报道30例高原病患者红细胞免疫功能的研究结果,并与310例高原居住一年以上健康人比较,结果表明:高原病患者红细胞免疫粘附功能明显降低,红细胞免疫复合物花积率(RICA)显著升高17.68±7.36％,健康人10.83±3.07％(P<0.01),血清红细胞免疫调节因子促进率(RFER)明显降低13.26±10.48％,健康人45.01±19.08％(P<0.01);红细胞免疫调节因子抑制率(RFIR)显著升高60.68±21.36％,健康人19.09±10.07(P<0.01);RICA 增高与 RFIR 活性具有显著相关关系(P<0.005)。提示红细胞免疫功能参与了高原病病理发生发展过程。     

激光间质内热疗联合顺铂治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究

目的　评价激光间质内热疗(ILTT)联合顺铂治疗大鼠脑恶性胶质瘤的效果。 方法　SD大鼠64只,尾状核接种C6鼠胶质瘤细胞14天后,随机分为对照组（不接受治疗）、顺铂治疗组、ILTT组、ILTT联合顺铂治疗组,每组16只。每组中10只留作观察生存时间（观察期40天）,6只于治疗后第7天测量肿瘤最大横径。顺铂治疗时大鼠尾静脉注射顺铂1μg/g,2天1次,共计3次。ILTT治疗时将Nd∶YAG激光经光导纤维导入肿瘤区,激光波长1.06μm,功率1.5W,时间120s,间隔120s,共计2次。 结果　（1）大鼠平均生存时间对照组26.1d±3.6d,顺铂组27.3d±3.9d,ILTT组30.4d±5.3d,联合治疗组34.4d±4.0d。联合治疗组与对照组及顺铂组比较,差异有显著意义（P＜0.05）。（2）肿瘤最大横径对照组6.2mm±0.2mm,顺铂组 6.2mm±0.1mm,ILTT组4.8mm±0.2mm,联合治疗组4.9mm±0.1mm。 结论　激光间质内热疗联合顺铂治疗对大鼠脑胶质瘤有较强的抗肿瘤效果。     

消化道肿瘤患者红细胞促淋巴细胞增殖反应的检测及意义

目的 从红细胞促淋巴细胞增殖角度探讨消化道肿瘤患者红细胞免疫功能状况。方法 采用MTT(四甲基噻唑蓝)比色法检测健康人和消化道肿瘤病人红细胞(RBC)促淋巴细胞(PBL)增殖作用。结果 健康对照组RBC促PBL增殖作用(57.3％±10.7％)明显高于消化道肿瘤患者(30.1％±6.8％),P<0.01,而肝癌患者(29.3％±4.3％)与食道癌患者(32.6％±8.6％)之间也有显著性差异P<0.05。结论 检测消化道肿瘤患者RBC促PBL增殖能力,可为临床观察患者RBC免疫功能状况提供新的实验方法。     

胃食管反流与婴幼儿重症肺炎相关性研究

目的 研究胃食管反流与婴幼儿重症肺炎的相关性.方法 选取PICU中确诊为重症肺炎的婴幼儿作为实验组,门诊体检健康婴幼儿作为对照组,用ELISA检测两组对象治疗前、治疗后3 d、治疗后5 d 3个时间点晨起静息时唾液中胃蛋白酶原的浓度,根据检测结果计算两组研究对象胃食管反流发生率及严重程度,进行统计分析.结果 咽腔分泌物检测胃蛋白酶原阳性率实验组婴幼儿为65.0%(37/57),对照组咽腔为20.0%(6/30),(P<0.01),两组研究对象其咽腔分泌物中胃蛋白酶原阳性率具有显著性差异.检测两组研究对象咽腔分泌物中胃蛋白酶原的浓度,治疗前、治疗后3 d、5 d浓度,实验组分别为246.32±34.76、178.54±27.86和153.86±18.65 ng/mL,对照组分别为118.81±18.56、121.28±19.73和119.97±17.98 ng/mL,各个时间点两两比较,治疗前、治疗后3 d两组婴幼儿其咽腔分泌物中胃蛋白酶原浓度具有显著性差异(P<0.05),而治疗5d后两组胃蛋白酶原浓度无统计学差异(P>0.05).结论 胃食管反流与婴幼儿重症肺炎密切相关,重症肺炎患儿唾液中胃蛋白酶原水平显著增高;且随着药物治疗的进行及重型肺炎病情的缓解,其唾液中胃蛋白酶原阳性率也显著降低.     

封闭负压引流技术对猪肢体枪伤感染和愈合时间的影响

目的观察封闭负压引流技术(Vacuum sealing drainage,VSD)对清创后肢体枪伤感染和愈合的影响。方法 20头猪枪击致伤右后肢,6h内彻底清创,随机分为对照组(常规处理)和实验组(VSD治疗),每组10头。比较两组伤道细菌计数、病理形态学及延期缝合时间和愈合时间。结果两组的细菌计数在清创后24、48、72h实验组低于对照组差异有统计学意义(P<0.05)。对照组有3个肢体感染,实验组和对照组延期缝合时间分别为(4.1±0.7)d、(8.2±3.6)d,愈合时间分别为(15.1±1.5)d、(22.2±3.4)d,差异均有统计学意义(P<0.01)。统计分析时不包括3个感染肢体,两组差异也有统计学意义(P<0.01)。病理显示实验组组织炎症反应明显减轻、组织修复加快。结论 VSD可以预防清创后枪伤发生感染,促进枪伤愈合。     

溴己新联合沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入治疗小儿喉炎疗效观察

目的 分析溴己新联合沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入治疗小儿喉炎临床疗效.方法 选择儿科确诊为小儿喉炎患儿56例,将其依据治疗方式的差异,分为对照组和实验组各28例;两组患儿均选用常规药物,实施抗感染、平喘与止咳治疗手段,而实验组患儿在此基础上选用溴己新联合沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入治疗,对比分析两组患儿临床疗效与症状消失时间.结果 实验组患儿临床疗效高于对照组患儿,即实验组患儿临床疗效为97.86％、对照组患儿临床疗效为67.86％;对照组患儿咳嗽、喘憋、肺部啰音消失时间为(5.57±1.79)d、(7.68±1.24)d、(5.13±1.15)d,而实验组患儿临床症状消失时间为(4.02±1.21)d、(4.37±1.16)d、(3.68±1.02)d;药物不良反应对比中,对照组发病率为21.42％,实验组发病率为3.57％.两组数据比较差异存在统计学意义,P ＜0.05.结论 溴己新联合沙丁胺醇及布地奈德雾化吸入治疗可有效缩减患儿临床症状消失时间,提升临床疗效,具有推广价值.     

酶联免疫吸附测定检测人血清胰岛素抗体的研究

报告用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定人血清胰岛素抗体(IAb),批内及批间平均变异系数分别为8.3％、14.6％;阻断试验及交叉反应试验证明有较高的免疫学特异性。用本法调查了177名正常人血清中IAb,P/N值为0.9±0.27((?)±S),以>1.6((?)+2.5S)为阳性,阳性率为1.1％(2/177);接受胰岛素治疗的糖尿病(DM)组血清IAb阳性率为60％(27/45),与非胰岛素治疗的DM组、非DM组及正常对照组差异非常显著(P<0.01);非胰岛素治疗的DM组、肾病组及结缔组织疾病组阳性率分别为11.30％(9/80)、59％(3/51)、25％(5/20),与正常对照组比差异显著(P<0.01、0.05>P>0.01、P<0.01);结果提示ELISA法测IAb具临床特异性。本法简便,可为研究DM患者对胰岛素的免疫应答提供一个实用的工具。     

脊髓牵拉损伤后七叶皂苷钠对细胞凋亡的抑制作用

目的观察脊髓牵拉损伤后七叶皂苷钠对细胞凋亡的抑制作用。方法实验组大鼠脊髓损伤前尾静脉推注七叶皂苷钠6 mg/kg。将T10脊髓水平方向牵拉1.7 mm,持续5 m in。检测神经细胞bc l-2、bax表达;原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导dUTP标记技术观察凋亡细胞。结果(1)bc l-2:实验组7 d达高峰为(43.61±5.89)%;对照组7 d时为(26.85±4.61)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。(2)bax:实验组3 d达高峰为(36.19±5.42)%;对照组3 d时为(44.15±6.81)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。(3)各时间点实验组细胞凋亡指数较对照组低。结论脊髓损伤前应用七叶皂苷钠能抑制因脊髓牵拉损伤引起的神经细胞凋亡。     

用滤纸片采集实验感染的乳鼠全血分离登革病毒的研究

目前,用于分离登革病毒的血清标本,国内外多用静脉采血法。实践证明,此法无论儿童还是成人都不易接受,常因采血困难而影响病原分离。据等报道用滤纸片吸感染森林脑炎病毒的动物血液,放在不同温度下,可保存病毒的活力。但在登革病毒方面,尚无这样的实验记载。为克服现场采集登革病人血清的困难,我们用标准株登革病毒感染乳鼠,并在不同的时间内用滤纸片采集乳鼠全血立即接种自纹伊蚊C6/36细胞分离登革病毒或置-25℃中15～30日后接种细胞分离病毒,以确定在现场试用此法代替静脉采血的可能性。     

登革病毒DNA疫苗的研究进展

目前登革病毒（ dengue virus ）感染已成为全球严重的公共卫生问题,亟待有效的疫苗进行特异性预防。与减毒活疫苗、灭活疫苗等传统疫苗相比,DNA疫苗具有制备简便、价格低廉、无感染风险、便于储运以及长效性好等特点,成为近年来登革病毒疫苗研究的热点。该文综述了登革病毒DNA疫苗构建策略、接种方式、免疫策略、免疫佐剂、免疫效果等方面的研究进展。     

Unexpected death due to dengue virus infection in a non-endemic area

Dengue viral infections are increasing in number globally as more travellers are being exposed to the vector in endemic areas. A 41-year-old previously-well woman is reported who died suddenly and unexpectedly from dengue fever following a holiday overseas. Clinical manifestations prior to her collapse were non-specific, consisting of headaches, fever and diarrhoea. The autopsy findings were also non-specific with no skin rash or evidence of coagulopathy. A rapid immunodiffusion assay for dengue NS1 antigen, however, gave a rapid and strong reaction on two occasions and real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) testing on a post-mortem blood sample confirmed the presence of flavivirus RNA identified as dengue type 1. This case demonstrates the possibility of serious dengue infections being associated with recent international travel. The non-specificity of symptoms, signs and autopsy findings, combined with its occurrence in non-endemic areas, makes a heightened awareness of this condition important in contemporary forensic settings.     

我国几种蚊虫对登革病毒媒介效能的实验研究

本文以蚊体感染率和涎腺感染率为指标,比较了我国6株白纹伊蚊(Aedesalbopictus)和海南株埃及伊蚊(Ae aegypti)对登革2(DEN-2)型病毒的媒介效能。埃及伊蚊的涎腺感染率显著高于各株白纹伊蚊的总涎腺感染率。蚊体感染率则以上海株白纹伊蚊最高,福州株次之。用群体叮吸细胞液的方法首次证明了经口感染的黄斑伊蚊(Ae Jlavopictus)经过15天外潜伏期后,可传播登革病毒。致倦厙蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)(广州株)吸入含有DEN-2型病毒的混合液后,随着时间的延长,阳性率迅速下降,感染后3天和21天分离,均为阴性。     

基于登革2型病毒PrM基因的新型脱氧核酶对病毒RNA降解作用的初步观察

目的:针对登革2型病毒(DEN2)PrM基因设计新型脱氧核酶并观察其抗病毒作用.方法:根据脱氧核酶(DRz)裂解RNA靶位的特异性,选择DEN2 PrM基因中符合5'…R↓Y…3'(R=A/G,Y=U/C)特征且其二级结构中以未配对与配对碱基的磷酸二酯键为靶位,设计合成DEN2特异性脱氧核酶,筛选具有裂解PrM RNA活性的DRz.观察DRz与靶序列浓度比、Mg2 浓度及反应时间对DRz裂解效率的影响.结果与结论:体外裂解实验显示,在所设计合成的8个脱氧核酶中,DRz614对登革病毒的PrM RNA靶序列具有裂解活性,降解效率高达82%.本研究为进一步探讨新型抗登革病毒策略奠定了基础.     

我国登革1型病毒广州株基因组全序列测定与分析

目的：对引起1980年广州登革热流行的登革1型病毒（GZ／80）株的基因组全序列进行测定,为进一步了解病毒基因组结构与功能的关系。从分子 水平探讨登革病毒的传播和流行规律及致病机制提供依据。方法：用广登革热流行期间从患者血清中分离的GZ／80株病毒感染乳腺,聚鼠脑制备病毒RNA。对基因组编码区分段进行RT－CR扩增,非编码区采用RACE法进行cDNA扩增。然后将特异产物纯化后与pGEM-Teasy载体连接,分别进行克隆测序。结果：GZ／80株基因组全长10735ng,5′和3′非编码区长度分别为94nt和465nt基因组单一的读码框架长度为10176ng,编码3392个氨基酸,与登革1型病毒16007株、WestPac74株、新加坡S275／90株和FGA／89株核苷酸序列的同源性分别为94％,93％,95％和91％;推测的氨基酸序列的同源性分别为98．0％,97．9％和97．1％。结论：GZ／80株基因组大小及结构与已知的登革1型病毒其他地区分离株一致。系统发生树分析显示,GZ／80株属于第Ⅱ基因型,与台湾87株、88株和泰国80株为同一基因型。提示广州登革热流行的病原可能来自我国。     

光敏生物素标记核酸探针法检测登革病毒核酸

用光敏生物素标记的核酸探针法检测登革病毒核酸比常规的病毒分离法和免疫学方法快速、简便，而且不存在放射性同位素标记探针的污染问题，敏感性也较高。经实验证实，该方法可从感染６ｈ的Ｃ６／３６细胞中和感染１６ｈ的细胞上清液中检出病毒的基因组序列，尤其适于检测感染１６－４８ｈ的细胞内病毒核酸，并可检出０．０１μｇ病毒中的核酸．     

抗登革病毒单抗的独特型抗体的制备与鉴定

从19种抗登革病毒单克隆抗体(简称单抗)中筛选出4种具有中和活性的单抗。经过纯化免疫新西兰大白兔制备多克隆抗独特型抗体(Ab2)。制备的4种抗独特型抗体血清有很高的特异性,其中具有全交叉反应的3种单抗的抗血青中Ab2的水平较高。采用简便的去除抗血清中的同种型和同种异型抗体的方法,用夹心ELISA法检测Ab2的水平取得了满意的结果。     

含有海肾萤光素酶报告基因的登革4型病毒亚基因组复制子的构建

目的:构建含有海肾萤光素酶(Renilla luciferase, R.luc)报告基因的登革4型病毒亚基因组复制子,为探讨病毒基因组中保守序列和元件在复制和翻译调控机制中的作用提供新的手段.方法:利用定点诱变PCR技术构建prM-E基因缺失的登革4型病毒亚基因组复制子(DENRP),用顺式水解酶元件(cis-acting hydrolase element,CHYSEL)技术将R.luc报告基因插入到DENRP缺失的结构基因区,构建含有R.luc报告基因的复制子(DEN-R.luc2A-RP).将构建的复制子线性化并体外转录成RNA后,经电穿孔转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光、RT-PCR和R.luc检测技术对复制子进行鉴定.结果:所构建的prM-E基因缺失的复制子和含有海肾萤光素酶报告基因的复制子,均可在BHK-21细胞中自主复制并稳定表达病毒特异蛋白.DEN-R.luc2A-RP可持续表达外源R.luc报告基因21 d,在转染后24~96 h R.luc荧光信号呈线性增强.在该区间进行实时检测可显示复制子复制和翻译水平的变化.结论:获得了两株可在BHK-21细胞中稳定表达的复制子,为进一步研究登革4型病毒复制和翻译机制奠定了基础.     

多引物RT-PCR技术用于登革病毒的检测及快速分型

目的：建立登革病毒的多引物ＰＣＲ检测方法,并对不同血清型的登革病毒进行快速分型。方法：根据不同型别登革病毒基因组之间的保守性及型特异核苷酸序列合成相关引物,采用ＲＴＰＣＲ的方法扩增登革病毒ＲＮＡ,电泳观察扩增产物的特异性和分型情况。结果与结论：组合引物的圹增产物具有登革病毒的型别特异性,可对登革病毒进行快速分型,该方法具有敏感、特异、快速等优点。     

我国登革3型病毒广西株基因组非编码区结构特征的研究

应用cDNA末端快速扩增法（RACE）,获得我国登革3型病毒株基因缓 的包括5‘和3‘端非编码区的扩增片段,经琼脂糖凝胶电泳观察其长度分别为710bp和470bp。序列分析表明,与登革3型病毒菲律宾株（H87株）核苷酸序列同源性＞99％。进化树分析提示,该株病毒属于登革3型病毒Ⅰ亚型。基因组的5‘和3‘端有含有较强的二级结构域。