人巨细胞病毒感染与儿童特发性血小板减少性紫癜的关系

目的探讨人巨细胞病毒(human cyto-megalo virus,HCMV)感染与儿童特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)的关系。方法选择2013-2016年某院诊治的193例ITP患儿作为病例组,同时按照性别相同、年龄相近原则,选择98例体检正常儿童作为对照组,分别采集两组对象的尿样,采用荧光定量PCR检测HCMV-DNA,并比较HCMV阳性患儿与阴性患儿的骨髓巨核细胞计数及治疗效果。结果 ITP患儿HCMV阳性率(61. 14%)高于健康对照组(23. 47%),差异有统计学意义(χ~2=36. 929,P <0. 01)。HCMV阳性ITP患儿的骨髓巨核细胞总数均值少于阴性患儿,差异有统计学意义(t=-5. 19,P <0. 01)。HCMV阳性ITP儿童单纯使用糖皮质激素治疗总有效率仅33. 05%,同时使用更昔洛韦治疗可提高治疗总有效率至75. 42%。结论 HCMV感染可能是诱发儿童ITP的原因之一,临床上对ITP患儿应开展HCMV检测,及时发现,并及时给予更昔洛韦对症治疗。     

IgG抗体亲和力指数在儿童巨细胞病毒感染诊断中的意义

目的探讨IgG抗体亲和力指数(AI)在儿童巨细胞病毒(HCMV)感染诊断中的意义。方法分别收集120例临床疑似HCMV感染患儿的尿液和外周血标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和微粒子酶免化学发光法检测尿液HCMV DNA载量和血清HCMV IgM/IgG抗体;采用尿素变性结合酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HCMV IgG抗体亲和力指数(AI)。结果 120例疑似HCMV感染患儿的尿液HCMV DNA、血清HCMV IgM和HCMV IgG阳性检出率分别为70.83%(85/120)、60.83%(73/120)和76.67%(92/120),差异有统计学意义(χ2=7.252,P=0.027);25例HCMV IgM-/IgG+患儿中,以高亲和力抗体检出为主,占92%(23/25);67例HCMV IgM+/IgG+患儿中,以低、中等亲和力抗体为主,分别占26.87%(18/67)和53.73%(36/67);高、中、低IgG抗体AI患儿尿液HCMV DNA阳性检出率分别为36.11%(13/36)、86.84%(33/38)和100%(18/18),差异有统计学意义(χ2=32.262,P<0.01)。结论 IgG抗体亲和力指数测定能准确地反映HCMV感染的活动状况,有助于HCMV感染的诊断与治疗。     

特发性血小板减少性紫癜患儿血清微小病毒检测

目的 :探讨人微小病毒B19(HPVB19)感染与儿童特发性血小板减少性紫癜 (ITP)发病的关系。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)技术对 4 8例ITP患儿和 32例健康儿童的血清标本进行HPVB19-DNA检测 ,并用酶联免疫法 (ELISA)检测血小板相关抗体。结果 :4 8例ITP患儿血清中HPVB19-DNA阳性率 37.5 % (18/48) ,32例健康儿童HPVB19-DNA均为阴性 ,2组间差异有统计学意义 (P <0 .0 0 5 ) ;ITP组中急性型与慢性型之间HPVB19阳性率差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ;病毒感染阳性患儿的血小板相关抗体明显高于病毒感染阴性患儿 ,差异有统计学意义(P <0 .0 1)。结论 :ITP患儿血清中HPVB19-DNA阳性率高 ,尤其是急性型 ;HPVB19感染可导致血小板相关抗体升高而致血小板减少     

EB病毒感染与儿童急性免疫性血小板减少性紫癜关系的初步探讨

目的探讨Epstein-Barr病毒(EBV)感染与儿童急性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的关系。方法分别用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法和血清酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测115例急性ITP患儿和50例健康儿童的EBV DNA和EBV IgM抗体。结果急性ITP患儿EBV DNA、EBV IgM阳性率均明显高于健康对照儿童,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论儿童感染EB病毒可能是儿童发生急性免疫性血小板减少性紫癜的重要因素之一。     

婴儿急性特发性血小板减少性紫癜与巨细胞病毒感染关系探讨

目的:探讨婴儿期急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)与人巨细胞病毒(CMV)感染及免疫功能的关系.方法:对52例ITP患儿(病例组)及32例正常婴儿(对照组)检测血清CMV-DNA及CMV-IgM、IgG抗体,比较两组差异;对52例ITP病例组患儿进行末稍血T细胞亚群检测,比较CMV-IgM阳性者与阴性者T细胞亚群差异;对CMV-IgM阳性者分更昔洛韦(GCV)治疗组和非GCV治疗组,比较两组治疗后末稍血血小板数量.结果:两组患儿CMV-DNA阳性数、CMV-IgM、IgG抗体阳性数比较,差异有统计学意义(均P<0.01);病例组CMV-IgM阳性者与阴性者T细胞亚群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比较,差异有统计学意义(均P<0.01);对CMV-IgM阳性者加用GCV治疗,血小板计数有明显改善.结论:CMV是ITP的重要致病因素之一,在临床上建议对CMV相关性ITP加用GCV治疗.     

肝、肾移植术后受者人巨细胞病毒巢式PCR检测

目的 探讨巢式PCR（Nest PCR)检测器官移植术后受体人巨细胞病毒（HCMV）DNA，并与传统ELISA法作方法学对照。方法 巢式PCR针对HCMV AD169株IEA基因设计内外两对引物，对59例肝、肾移植术后受体（肝移植27例、肾移植32例）血、尿标本进行HCMV DNA检测。分离血清作ELISA检测IgG、IgM。结果 血液Nest PCR阳性率肝移植62.9%，肾移植46.8%；ELISA法阳性率：IgG35.5%,IgM27.1%,IgG IgM18.6%，IgM阳性标本（16例）DNA检测皆为阳性，6例IgG、IgM皆阴性标本DNA检测仍为阳性。结论 巢式PCR是一种敏感特异、简便快速诊断HCVM感染的方法，灵敏度及特异性高于传统ELISA，能弥补ELISA的假阴性，更适用于临床检测器官移植术后HCMV感染。     

细胞毒素相关蛋白A与特发性血小板减少性紫癜相关性研究

目的 幽门螺杆菌(HP)可能通过细胞毒素相关蛋白A( cagA)参与特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病.比较ITP患者不同血小板分组血小板抗体IgG(PA-IgG)、CagA定量,Hp、CagA阳性率,探索CagA与ITP相关性.方法 ITP组(93例)总体Hp、cagA阳性率与健康组(49例)、非血液系统疾病血小板减少组(55例)比较.ITP组按血小板数值分为PLT≤20×109/L,20×109/L＜PLT＜50×109/L,50×109/L≤PLT三组.快速尿素酶试验( RUT)及14C尿素呼气试验(UBT)检测Hp,酶联免疫法测定外周血cagA、PA -lgG.比较各组间PA-IgG、cagA定量及Hp、cagA阳性率.结果 ITP组Hp、cagA阳性率明显高于健康组、非血液系统疾病血小板减少组,差异有显著性,P ＜0.05;健康组Hp、cagA阳性率较非血液系统疾病血小板减少组差异无显著性,P＞0.05.ITP三组间PA- IgG、CagA定量,CagA阳性率比较,血小板低组,PA-IgG、CagA定量,cagA阳性率高,差异有显著性,P ＜0.05;50×109/L≤PLT组Hp阳性率明显低于PLT≤20×109/L组,P＜0.05;PLT≤20×109/L组与20×109/L＜PLT＜50×109/L组,20×109/L＜PLT＜50×109/L组与50×109/L≤PLT组HP阳性率差异无显著性,P ＞0.05.结论Hp参与ITP发病,ITP血小板计数与Hp感染率不完全一致,与PA-IgG、cagA存在相关性.提示,HP可能因CagA致PA-IgG升高,导致血小板降低.     

HCMV-IgM定量检测在低龄儿童HCMV原发感染诊断中的作用

目的探讨HCMV-IgM定量检测和HCMV-IgG亲和力检测在低龄儿童HCMV原发感染诊断中的关系、作用及意义。方法收集临床诊断为HCMV感染患儿血、尿标本各84例,年龄为0.5~1岁,采用全自动化学发光法分别定量检测HCMV-IgG和HCMV-IgM抗体水平,及HCMV-IgG亲和力指数,并同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)检测患儿尿液标本。结果 HCMV-IgG+患儿亲和力检测结果发现,其中Ig M-/IgG+的8例患者都为高亲和力IgG,而IgM+/IgG+的63例,患者中24例是低亲和力IgG,占38.1%。根据IgM定量检测结果进一步将此71例HCMV-IgG+患儿由低至高分成5组,分别为IgM阴性组(30AU/mL),30~100AU/mL组,100~150AU/mL组,150~250AU/mL组及大于250AU/mL组。随着IgM抗体水平的增加,低亲和力样本所占比例有增高趋势,经卡方检验,差异有统计学意义(x~2=12.32,P0.05)。结论在0.5~1岁婴儿中,HCMV-IgG亲合力指数能准确反映HCMV感染活动状况,而HCMV-IgM水平与HCMV原发感染则呈正相关,临床同时参考Ig M定量检测和HCMV-IgG亲合力检测结果,将对0.5~1岁以内婴幼儿近期HCMV感染发生时间的判定起到有益的互补作用。因此先对HCMV患儿进行HCMV-IgM定量测定,再针对阳性病例进行Ig G亲和力检测是对低龄儿童HCMV原发性感染检测的可行方案。     

肺癌与人类巨细胞病毒感染关系的初步研究

目的：探讨肺癌与人类巨细胞病毒（HCMV）感染的关系。方法：对88例肺癌及117例肺非癌患者，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清HCMV－IgG，IgM抗体，用聚合酶链反应（PCR）法检测尿HCMV－DNA。同时检测其中64例肺癌及67例肺非癌患者的病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA。对肺癌组中抗癌化疗的患者于每一化疗周期复查血清HCMV－IgM，尿HCMV－DNA。结果：肺癌组血清HCMV－IgM阳性率26．1％，病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA阳性率26．6％，均显著高于肺非癌组（P＜0．01）；血清HCMV－IgG及尿HCMV－DNA阳性率两组未见明显差别。42例肺癌到化疗第二周期时，血清HCMV－IgM16例由阴性转阳性，尿HCMV－DNA6例转阳性。结论：肺病与HCMV感染有统计学上的相关性；抗癌化疗使肺癌患者HCMV活动性感染明显增多，值得重视。     

109例儿童弓形虫感染者血清学标志模式与Toxo-DNA的对比分析

目的 探讨弓形虫IgG、IgM、CAg及Toxo—DNA对弓形虫感染的诊断意义。方法 采用ELISA法检测弓形虫IgG、IgM和CAg,PCR法检测Toxo—DNA。结果 109例弓形虫感染儿童中,弓形虫IgG、IgM、CAg及Toxo—DNA阳性率分别为63．3％、43．1％、38．5％和41．3％,后三项阳性率相互比较无统计学差异。71例弓形虫IgM( )和／或CAg( )(模式2、3、4、6、7、8)患中,Toxo—DNA阳性38例,IgM和CAg同时阳性18例,IgM单项阳性29例,CAg单项阳性24例。6例弓形虫IgG(-)、IgM(-)和CAg(-)(模式1)患Toxo—DNA均阳性。32例IgG( )、IgM(-)、CAg(-)(模式5)患中有1例Toxo—DNA呈阳性。结论 弓形虫急性感染指标的弓形虫IgM、CAg及Toxo—DNA阳性检出率接近,但仅在部分病例可见2项或3项同时阳性,即三符合率不是很高,提示联合检测弓形虫血清学标志及Toxo—DNA．有助于减少假阴性结果．     

HCMV感染在小儿特发性ITP中的作用及机制

目的：探讨小儿血小板减少性紫癜（ITP）与巨细胞病毒（HCMV）感染的相关性。方法：选取52例ITP患儿为研究对象,根据临床分度将其分为急性型（AITP）21例以及慢性型（CITP）31例,同时选取g0例健康体检儿童为对照组,采用二步免疫组化法测定各组骨髓中HCMV—IgM及采用ELISA免疫法测定各组血清中HCMV—IgM,并对各组临床特点进行分析。结果：AITP组及CITP组骨髓中HCMV阳性率显著血液中HCMV阳性率,差异有统计学意义（P〈0.05）;CITP骨髓及血液＋HC—MV阳性率均高于AITP及对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;AITP及cITP组中骨髓HCMV（＋）者平均年龄、IL-6、TNF—a水平均高于骨髓HCMV（-）者,而血小板计数少于HCMV（-）,差异有统计学意义（P〈0．05）;而CITP组中骨髓HCMV（＋）者IL-6、TNF—a水平高于AITP组HCMV（-）者,而血小板计数少于AITP组HCMV（-）者,差异有统计学意义（P〈0．05）;AITP及CITP组中血液HCMV（＋）者平均年龄、血小板计数、IL-6、TNF—a水平均与血液HCMV（-）者相比,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：骨髓HCMV感染可能是引起ITP发病的重要因素之一。骨髓HCMV感染可能是引起ITP患儿病情加重及慢性化趋向的重要因素,骨髓HCMV感染在ITP患儿发病机制中可能通过破坏患儿免疫系统从而影响血小板的生成,并不是抑制红细胞的生成。     

Early diagnosis and monitoring of active HCMV infection in children with syste miclupus erythematosus

Objective To investigate the prevalence and features of active human cytomegalovirus (HCMV ) infection in children with systemic lupus erythematosus (SLE) and evaluate the diagnostic value of the HCMV using antigenemia assay, serum polymerase chain re action (PCR) and serology test. Methods Twenty- one SLE children undergoing immunosuppressive therapy were enrolled in t his study. Immunofluorescence assay, PCR and serology tests were used to deter mine HCMV pp65 and p72 antigens in leukocytes, HCMV DNA in sera, and HCMV specif ic IgM and IgG antibodies, respectively. As a control group, twenty- one immuno competent children with skeletal malformation were involved in this study. Stat istical analysis was performed using Chi- square test or Fisher’s exact test (Sy stat, USA), P values less than 0.05 were considered significant. Results Active HCMV infection was diagnosed in 28.6% (6/21) of SLE patients, with none in the control group; the difference between the two groups was significant (P =0.027). Two out of 6 SLE patients developed active HCMV infection before im munosuppressive therapy and the remaining 4 patients developed SLE after immunos uppressive therapy. Among the 21 SLE children, HCMV pp65 antigenemia was detect ed in 5 patients, p72 antigenemia in 3 patients, serum HCMV DNA in 9 patients, s erum HCMV- specific IgM in 2 patients, and IgG in 19 patients. The sensitivity and specificity for diagnosis of active HCMV infection were 83.3% and 100%, res pectively for pp65 antigenemia; 50% and 100% for p72 antigenemia; 100% and 80% f or serum PCR; 33.3% and 100% for HCMV IgM serology; 50% and 100% for HCMV IgG s erology. Conclusions Compared with the control group, active HCMV infection is much more frequent in SLE children, and can occur before treatment with immunosuppressive agents, b ut most often occur after immunosuppressive therapy. In comparison with the other techniques used in this study, the pp65 antigenemia assay seems to be a b etter method for the early diagnosis and monitoring of active HCMV infection in children with SLE.     

特发性血小板减少性紫癜与HCMV活动性感染

用间接ＥＬＩＳＡ法对３８例临床确诊为特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患儿和３１例健康儿童血浆（血清）进行人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＩｇＧ、ＩｇＭ检测，其中３０例患儿同时进行了血灰黄层白细胞病毒分离。结果：ＩＴＰ患儿中有１５例检出高效价ＨＣＭＶＩｇＧ，阳性率为３９．４７％；有６名检出ＨＣＭＶＩｇＭ，阳性率为１５．７９％；健康儿童中高效价ＨＣＭＶＩｇＧ检出者仅２例，阳性率为６．４５％；ＨＣＭＶＩｇＭ均为阴性。经统计学处理两组ＩｇＧ差异有高度显著性，说明ＩＴＰ患儿有ＨＣＭＶ活动性感染且可能是ＩＴＰ反复发作的重要原因之一。提示对ＩＴＰ患儿进行ＨＣＭＶ活动性感染的检测，可为临床预测、诊断及治疗提供有价值的参考依据。     

儿童特发性血小板减少性紫癜病因学的初步研究

应用 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 技术对３２ 例急性特发性血小板减少性紫癜（ Ｉ Ｔ Ｐ） 患儿的外周血进行了人细小病毒 Ｂ１９（ Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９） 、 Ｅ Ｂ 病毒（ Ｅ Ｂ Ｖ） 、巨细胞病毒（ Ｃ Ｍ Ｖ） 及乙型肝炎病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 系列检测。结果：病例组 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ Ｄ Ｎ Ａ 阳性８ 例（２５ ．０ ％ ） ,与正常对照组比较有显著性差异（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。 Ｅ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 阳性２ 例, Ｃ Ｍ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 阳性３ 例, Ｈ Ｂｓ Ａｇ 和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 同时阳性２ 例,４种病毒的总阳性率为４６ ．９ ％ （１５／３２ 例） 。提示：近半数儿童 Ｉ Ｔ Ｐ 病例的发生可能与上述病毒感染有关,而 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ 较其他病毒与 Ｉ Ｔ Ｐ 的关系更为密切。     

用多聚酶链反应方法检测IUD诱发出血的子宫内膜人巨细胞病毒感染的研究

用聚含酶链反应(PCR)技术检测73份置宫内节育器(IUD)诱发出血人群及50例置IUD后月经周期正常人群的子宫内膜病毒分离培养物中的HCMV—DNA,有9份为HCMV—DNA 阳性,其中8份是病毒分离阳性,用细胞学鉴定及单克隆抗体鉴定为HCMV,有1份为病毒分离阴性,而PCR检测为阳性.     

活动性巨细胞病毒感染患儿免疫状态的变化及其意义

目的研究活动性人巨细胞病毒(HCMV)感染患儿的免疫功能状态。方法以68例活动性HCMV感染患儿为观察对象,44例潜伏型HCMV感染者及40例健康儿童为对照组;采用ELISA检测HCMV-IgM、IgG,用PP65抗原血症监测法测HCMV-Ag,用PCR方法检测尿HCMV-DNA,血清免疫球蛋白测定采用琼脂单扩散法,外周血T细胞亚群检测采用单克隆抗体标记的间接ABC免疫法。结果三组体液免疫功能测定差异无显著性(P>0．05);HCMV 感染组CD3、CD4、CD4/CD8比潜伏型CMV感染组及健康对照组明显降低(P均<0．01)。结论 HCMV感染患儿体液免疫功能基本在正常水平,不起主要作用;HCMV感染主要影响细胞免疫功能,细胞免疫功能低下是HCMV感染存在的结果也是前提条件。因而治疗上给予免疫调节剂是必要的。     

双黄连治疗人巨细胞病毒小鼠肺炎的实验研究

目的研究双黄连粉针剂对人巨细胞病毒(HCMV)感染的小鼠肺组织病理改变和病毒DNA载量的影响。方法取4周龄SPF级Balb/c小鼠60只随机分成6组,建立HCMV小鼠肺炎模型。然后分别进行双黄连及更昔洛韦腹腔注射治疗。用药10d后,处死小鼠,对小鼠肺组织进行电镜和光镜病理检查,同时用荧光定量PCR方法检测小鼠肺组织HCMV DNA载量。结果双黄连大、中剂量治疗组小鼠肺组织病理损害较感染模型组明显减轻,HCMV DNA载量分别为1628.80 copies/100mg和1869.37 copies/100mg,较感染模型组(468527.40 copies/100mg)有显著性降低(P<0.001),与更昔洛韦治疗组(1521.61 copies/100mg)相比差异无显著性(P>0.05),双黄连小剂量组小鼠肺组织病理损伤及DNA载量(462547.90 copies/100mg)与感染模型组相比差异无显著性(P>0.05);正常对照组肺脏未见异常改变。结论双黄连能明显减轻HCMV急性原发小鼠肺部炎症损害并降低HCMV感染小鼠肺组织中病毒DNA载量。     

人巨细胞病毒对脐血多向祖细胞体外生长的影响及干预研究

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)对脐血多向造血祖细胞(CFU-Mix)体外增殖的影响及黄芪对此的保护作用.方法采用甲基纤维素半固体培养技术,培养、观察、计数HCMV-AD169感染的CFU-Mix集落数、抑制率、集落峰值及集落维持时间;用聚合酶链反应(PCR)和荧光定量PCR技术检测集落细胞内HCMV-AD169DNA.在110感染组中加入黄芪,观察黄芪对HCMV-AD169感染的CFU-Mix集落增殖抑制的干预作用.结果 HCMV-AD169感染的CFU-Mix集落数较对照组明显减少(P＜0.05),集落数随病毒感染滴度的增高而减少,抑制率随病毒感染滴度的增高而逐渐增加;感染组集落维持时间较对照组明显缩短(P＜0.01),但各组集落峰值出现时间无明显差异(P＞0.05);用PCR技术在感染组集落细胞内检测到HCMV-AD169DNA;在110感染组中加入黄芪后,CFU-Mix集落数明显提高,集落增殖提高率为38.9%,集落维持时间较110感染组明显延长(P＜0.01),荧光定量PCR技术检测集落细胞内HCMV-DNA copies较110感染组明显减少.结论在体外HCMV-AD169对CFU-Mix生长和集落形成有明显的抑制作用,HCMV能直接感染多向造血祖细胞,此可能与临床HCMV感染引起贫血、血小板减少和粒细胞减少有关;黄芪在体外有明显的抗HCMV作用.