骨髓增生异常综合征112例临床分析

目的：临床研究和分析骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）１１２例。方法：总结自１９８２年１０月至１９９７年１０月期间ＭＤＳ１１２例的一般情况、临床和实验室检查特点及治疗。结果：５５例（４９％）在４０岁以下，１１１例（９９．１％）和９５例（８４％）分别有贫血和全血细胞减少，全部病例骨髓红系有巨幼样变，粒系病态造血达９２％，骨髓活检发现不成熟前体细胞异常定位（ＡＬＩＰ）者为３９％（１４／３６），难治性贫血（ＲＡ）和难治性贫血伴环状铁粒幼细胞（ＲＡＳ）型病人用雄性激素治疗后７８％（６６／８５）血红蛋白有提高，而血小板无明显变化，原始细胞增多型难治性贫血、转化中的原始细胞增多型难治性贫血和慢性粒单细胞白血病型病人主要死于急性白血病。结论：骨髓病态造血和ＡＬＩＰ对诊断有重要价值，雄性激素可改善ＲＡ和ＲＡＳ型病人的贫血，但如何防止ＭＤＳ转化成急性白血病仍需研究     

骨髓增生异常综合征患者的基因表达谱研究

目的 研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者的基因表达谱,试图发现与MDS发病相关且具有诊断意义的基因改变。方法 应用含500个基因克隆的定制cDNA芯片分析10例MDS患者(4例难治性贫血、1例难治性血小板减少症、4例伴有原始细胞增多的难治性贫血和1伴有原始细胞增多的难治性贫血转化型)骨髓单个核细胞(BMNC)的转录谱,并应用半定量RT-PCR检测5个基因在50例MDS中的表达水平。结果 在5例以上MDS患者中均有表达差异的基因共有95个,累及细胞生长和分化调控、细胞周期调节、信号传导、氧化还原反应等过程;聚类分析将不同阶段MDS患者分在两个组内,同时也将1例难治性血小板减少症患者与其他难治性贫血聚在2个独立的亚组。半定量RT-PCR揭示5个所选基因中3个基因(60％)的表达水平与芯片结果一致;RNA螺旋酶相关蛋白(RNAHP)、G1／S期转化因子(GSPTI)和DNA损伤诱导的转录因子(DDIT3)在MDS患者与正常对照中具有不同的表达态势。结论 MDS患者BMNC具有其内在的分子性质,检测DDIT3和RNAHP等基因的表达可能对MDS具有辅助诊断意义。     

沙利度胺综合治疗骨髓增生异常综合征24例

目的探讨沙利度胺综合治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效。方法根据FAB分型将46例MDS患者分为低危组和高危组,低危组24例包括难治性贫血(RA)和伴环状铁粒幼红细胞的难治性贫血(RAS),采用沙利度胺加司坦唑醇治疗;高危组22例包括未成熟红细胞过多的难治性贫血(RAEB)和伴过度性未成熟红细胞红细胞的难治性贫血(RAEBT)的用沙利度胺加高三尖杉酯碱化疗。根据国内MDS疗效标准判断疗效。结果低危组总有效率79.15%,缓解率54.17%;高危组总有效率63.64%,缓解率45.45%。两组比较无显著差异(P>0.05)。结论沙利度胺对MDS有肯定疗效,可有效延长生存期,改善生存质量。     

Transformation of myelodysplastic syndromes into acute myeloid leukemias

Background Myelodysplastic syndromes (MDSs), also called preleukemias, are a group of myeloid hematopoietic malignant disorders. We studied the transformation of MDS into acute myeloid leukemia (AML).Methods Leukemic transformation in 151 patients with MDS was dynamically followed up. The clinical manifestation, peripheral blood and bone marrow condition, karyotypes, immunophenotypes, response to treatment, and prognosis of AML evolution from MDS (MDS-AML) were also observed.Results During the course of this study, over the past eight years and seven months, 21 (13.91%) of 151 MDS patients progressed to overt leukemia, with a median interval of 5 (1-23) months. There were no significant differences between rates of leukemic transformation in comparison with the refractory anemia (RA), RA with excess of blasts (RAEB), and RAEB in transformation (RAEB-t) patient groups. Transformation occurred either gradually or rapidly. There were five parameters positively correlated to leukemic transformation: under 40 years of age, pancytopenia of 3 lineages, more than 15% blasts in the bone marrow, at least two abnormal karyotypes, and treatment with combined chemotherapy. All of the 21 patients with leukemia suffered from MDS-AML, and most of them were M2, M4, or M5. Two (9.52%) MDS-AML patients developed extramedullary infiltration. Leukopenia was found in 47.62% of these patients. Two thirds of these patients, whose bone marrows were generally hypercellular, suffered from neutropenia. After developing AML, 8 (47.06%) patients developed abnormal karyotypes. High expression of immature myeloid antigens, including CD33 ［(49.83±24.50)%］, CD13 ［(36.38±33.84)%］, monocytic antigen CD14 ［(38.50±24.60)%］, and stem cell marker CD34 ［(34.67±30.59)%］, were found on bone marrow mononuclear cells from MDS-AML patients after leukemic transformation. In some cases, lymphoid antigens, such as CD5, CD7, CD9, and CD19, coexisted with myeloid antigens. A low complete remission rate (31.25%) and a short survival time, with median survival of 6 (1-28) months, were found in patients with MDS-AML treated by induction chemotherapy.Conclusions MDS has a high risk of developing into AML, either gradually or rapidly. Patients with MDS-AML have specific biological characteristics and a worse prognosis.     

恶性血液病降钙素基因高度甲基化的研究

目的 探讨降钙素（CT）基因高度甲基化在恶性血液病中的临床意义。方法 采用限制性内切酶（HPaⅡ）消化DNA和聚合酶链反应技术检测73例恶性血液病、6例正常人以及24例非恶性血液病的CT基因的基化程度。结果 12/14例（85.7%)急性淋巴细胞白血病、9/15例（60%）急性非淋巴细胞白血病、8/10例（80%）慢性粒细胞白血病、5/15（33.3%)淋巴瘤、2例（2/5）骨髓增生异常综合征、1例（1/2）恶性组织细胞病、1例（1/3）慢性淋巴细胞白轿病和1例（1/9）多发性骨髓瘤的病人出现CT基因高度甲基化阳性,而6例正常人和24例非恶性血液病无一例阳性。结论 CT基因高度甲基化可作为恶性血液病恶性克隆增殖的分子基因标志,从而为恶性血液病的诊断、微小残留病的监测及疾病的发展预测提供了一种有用手段。     

骨髓增生异常综合征患者HLA-DR15基因的表达

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者HLA-DR15基因的表达状况。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)检测MDS患者(n=59)HLA-DR15基因的表达,并与健康对照组(n=104)进行比较。结果MDS组HLA-DR15基因表达率为44.07%,明显高于健康对照组的12.5%(P<0.01)。其中难治性贫血(RA)患者HLA-DR1的表达率为16/34,环状铁粒幼细胞性贫血(RAS)患者为4/6,原始细胞过多难治性贫血及其转化型(RAEB/RAEB-T)患者为4/12,CMML患者为2/7。低危组HLA-DR15表达比例高于高危组(P<0.05)。MDS核型异常和核型正常者HLA-DR15基因表达无差异(P>0.05)。结论MDS患者HLA-DR15阳性率明显增高;HLA-DR15基因可能是MDS的易感基因,可能可作为MDS的一个预后评价指标。     

骨髓增生异常综合征血清铁蛋白检测的临床意义

目的　探讨骨髓增生异常综合征 (myelodysplasticsyndromes ,MDS)血清铁蛋白检测与预后的关系。 方法　采用液相平衡竞争放射免疫分析法 (radio immunityanalysis,RIA)对 6 1例MDS患者进行血清铁蛋白检测 ,并进行追踪随访观察。结果　环形铁粒幼红细胞增多性难治性贫血 (refractoryanemiawithringsideroblasts,RAS)、原始细胞增多性难治性贫血 (refractoryanemiawithexcessofblasts,RAEB)、转化型原始细胞增多性难治性贫血 (refractoryanemiawithexcessofblastsintransformation ,RAEB T)、慢性粒 单核细胞白血病 (chronicmyelomonocyticleukemia ,CMML)中血清铁蛋白 (serumferritin ,SF)均明显增高 ,与对照组比较差异有显著性。难治性贫血 (refractoryanemia ,RA)中有 7例的血清铁蛋白升高 ,最高值为 2 30 μg/L ,但无一例转化为急性白血病。但是RAEB、RAEB T的SF均大于 4 0 0 μg/L ,差异有显著性 ,尤其是RAEB T的SF最高值达 92 0 μg/L ,且都转化为急性白血病 ,死亡率高达 83.3%。死亡组和转化为AL组的SF均明显升高 ,差异有显著性。结论　血清铁蛋白水平与MDS转化为急性白血病呈正相关 ,且与死亡率有关。     

HpaⅡ—PCR检测慢性髓细胞白现降钙素基因甲基化

采用ＨｐａⅡ－ＰＣＲ检测３１例不同病期慢性髓细胞白血病降钙素基因甲基化。结果显示：降钙素基因的高甲基化与慢性髓细胞白血病恶性程度密切相关,加速期与夺始细胞危象期检出率远高于慢性期。提示检测降钙素基因甲基化水平期预测疾病转变和选择骨髓移植病例有参考价值。     

急性白血病相关基因WIT-1的克隆及临床意义

目的：克隆白血病相关基因及白血病相关基因甲基化的临床意义。方法：应用新的分子克隆技术ＲＬＧＳ及ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ技术自急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）骨髓标本中克隆白血病相关基因对该基因的甲基化进行检测。结果：克隆到一个长度为２２１ｂｐ因ＮｏｔⅠ酶切位点甲基化所致的ＤＮＡ片段,序列分析结果表明其来源于急性白血病相关基因（ＷＩＴ－１基因）第二外显子,ＷＩＴ－１基因甲基化发生率在原发难治性ＡＭＬ中明显     

CD133 在骨髓增生异常综合征患者中的表达及临床意义

摘要：目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓中CD133的表达及其临床意义。方法应用流式细胞仪采用直接
免疫荧光标记法,分别测定31例难治性贫血伴幼稚细胞增多（RAEB）、10例难治性血细胞减少伴多系发育异常（RCMD）
以及11例再生障碍性贫血患者骨髓中CD133+细胞和CD34+/CD38-细胞比例,对比分析CD133及CD34/CD38在不同亚型
MDS中的表达及临床意义。结果在RAEB型MDS患者骨髓有核细胞中,CD133阳性细胞平均占6.75%,RCMD患者平
均占1.41%,而再生障碍性贫血对照组占2.70%,RAEB组显著高于其他两组（P<0.05）;再障对照组与RCMD组之间无显
著性差异（P>0.05）;CD34+/CD38-细胞比例在3组中均小于1%,统计学上无显著性差异（P>0.05）。结论CD133在MDS
的进展类型RAEB患者骨髓细胞中高表达,CD133有助于RAEB分型诊断;而CD34+/CD38-标记在MDS分型诊断中并无
价值。     

骨髓增生异常综合征患者N－ras原癌基因突变的研究

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及直接测序法研究ＭＤＳ患者Ｎ－ｒａｓ原癌基因点突变。检测２６例（２８例次），发现Ｎ－ｒａｓ原癌基因第１外显子突变者１４例（５０％），统计表明Ｎ－ｒａｓ原癌基因突变与ＭＤＳ白血病转化及患者生存期缩短均有相关性（Ｐ＜０．０５），对预测ＲＡ、ＲＡＳ转化白血病有参考价值。对１例发现突变的标本进行直接测序证实为１２密码子第２碱基的Ｇ→Ａ转换。     

MDS患者P15基因高度甲基化的研究

目的 :研究P15基因通过甲基化失活在骨髓增生异常综合征 (MDS)发病中的作用。方法 :用甲基化敏感的限制性核酸内切酶消化 ,结合聚合酶链反应 (PCR)技术。结果 :2 0例MDS患者中发现有 9例 (45 % )存在P15基因高度甲基化 ,且多为高危MDS (RAEB、RAEB_t) (P <0 .0 5 )。结论 :P15基因可通过甲基化而失活 ,可能与部分MDS的发生及发展有关。     

骨髓增生异常综合征患者血浆白细胞介素12的检测及临床意义

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者血浆白细胞介素12(IL-12)的水平及其临床意义。方法:用酶联免疫夹心法(ELISA)检测25例MDS患者及24名正常人血浆中IL-12(p70)水平,用流式细胞仪检测T细胞亚群。结果:MDS难治性贫血(RA)组患者血浆IL-12(p70)水平明显高于正常对照组及MDS难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)/转变中的RAEB(RAEB-t)组(均为P<0.01),RAEB/RAEB-t组患者血浆IL-12(p70)水平低于对照组(P<0.05)。MDS患者IL-12(p70)水平与CD8细胞表达率呈正相关(r=0.41,P<0.01),与CD4表达率呈负相关(r=-0.53,P<0.01)。结论:IL-12与MDS的发生、发展密切相关。     

急性白血病钙素基因甲基化的PCR检测

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和２２例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）降钙素（ＣＴ）基因的甲基化程度。结果表明,７例ＡＬＬ与１６例ＡＭＬ的ＣＴ基因都发生了高度甲基化。临床完全缓解的３例ＡＭＬ和２例ＡＬＬ中有１例ＡＬＬ为阳性,另有１例阴性的ＡＭＬ于１个月后转为阳性,随后出现临床复发。提示急性白血病ＣＴ基因高度甲基化的ＰＣＲ检测,对ＡＬＬ与ＡＭＬ微小残留病有很重要的诊断价值,特别为缺乏恒定肿瘤细胞标志的ＡＭＬ提供了一个新的分子基因标志。     

Expression and function of c-kit receptor in bone marrow mononuclear cells of patients with myelodysplastic syndromes

目的　了解骨髓增生异常综合征 (MDS)骨髓单个核细胞c kit受体的表达与功能。方法　采用免疫荧光方法测定c kit受体蛋白 (CD117)的表达 ;逆转录 聚合酶链反应方法测定c kitmRNA的表达 ;细胞培养检测c kit受体的功能。结果　CD117表达率正常人为 3 0 4 %± 1 4 9% ,MDS患者为 8 58%± 5 2 8% ,两者差异有显著性 (P <0 0 5) ;RA患者为 5 12 %± 2 13% ) ,RAEB RAEB t患者为 10 0 1%± 5 0 7% ,两者差异有显著性 (P <0 0 5) ;MDS继发白血病患者为 32 4 3%± 18 16 %。MDS患者c kit基因mRNA表达与CD117表达相一致。正常骨髓单个核细胞体外半固体培养 ,在加入造血干细胞因子、白细胞介素 3、红细胞生成素 (SCF IL 3 Epo)后形成的粒 巨噬细胞集落 (CFU GM)较仅加入IL 3 Epo显著增多 (P <0 0 5) ,红系爆式集落 (BFU E)数量极显著增多 ,且BFU E体积显著增大(P <0 0 1)。MDS患者在上述相同条件下CFU GM数量无明显变化 (P >0 0 5) ,与正常对照比较 ,CFU GM和BFU E数量均显著减少 (P <0 0 5)。结论　MDS患者骨髓单个核细胞CD117表达明显高于正常对照 ,且与病情进展相关 ;c kitmRNA表达与CD117表达相一致 ;MDS患者骨髓单个核细胞体外培养时 ,SCF协同IL 3、Epo促进造血干 祖细胞增殖分化能力较正常对照明     

白血病细胞多巴胺受体基因甲基化研究

目的：探讨多巴胺受体（ＤＲＤ４）基因第一外显子中ＮｏｔＩ酶切位点甲基化与急性非洒巴细胞白血病（ＡＭＬ）的关系。方法：应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印记杂交与ＤＮＡ序列分析技术对ＡＭＬ患者骨髓标本进行分析。结果：在２７例白血病患者骨髓标本中１６例ＤＲＤ４基因甲基化（５９％），其中初治化疗敏感患者ＤＲＤ４基因甲基化发生率为５０％（９／１８），复发及难治患者甲基化发生率为７８％（７／９），而９例正常人骨髓标本ＤＲ     

BURDEN OF ABNORMAL HEMATOPOIETIC CLONE IN PATIENTS WITH MYELODYSPLASTIC SYNDROMES

MYELODYSPLASTIC syndromes (MDS) is agroup of clone hematopoietic stem cell diseasescharacterized by dysplasia and ineffective hem-atopoiesis in one or more of the myeloid cell lines·1Studiesindicated that recurring chromosomal abnormalities werefound in4…     

骨髓增生异常综合征骨髓上清骨髓基质细胞衍生因子1α检测及临床意义

目的探讨骨髓基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)在骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓上清中的表达水平。方法采用酶联免疫夹心法(ELISA)检测12例MDS患者骨髓上清的SDF-1α水平并与正常对照比较。结果 MDS难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)组患者骨髓上清的SDF-1α水平明显低于难治性贫血(RA)+环形铁粒幼细胞性难治性贫血(RAS)组和正常对照组(均为P<0.05)。MDS患者骨髓上清的SDF-1α水平和MDS患者骨髓原始细胞比例呈负相关(r=-0.585,P=0.046),并和其国际预后评分系统(IPSS)积分呈负相关(r=-0.657,P=0.02)。但MDS患者骨髓上清的SDF-1α水平和其外周血中的白细胞计数、血细胞数量及血红蛋白浓度均无明显的相关性(均为P>0.05)。结论 MDS患者SDF-1/CXCR-4系统存在着异常,检测SDF-1α水平是否有助于MDS的诊断、了解发病机制、判断其预后及为治疗提供新的思路,还需进一步探讨。     

N-ras mutations in 43 Chinese cases of acute myeloid leukemia.

OBJECTIVE: To detect 3 kinds of N-ras mutations in Chinese patients with acute myeloid leukemia (AML). METHODS: In vitro DNA amplification followed by oligonucleotide dot analysis were used to study N-ras gene mutations in 43 cases of acute myeloid leukemia (AML). 25 healthy people were used as controls. Patients were selected in the Beijing district and consisted of 19 males and 24 females. The average age was 37. The controls were healthy individuals with the average age of 36.5 from the same region. 3 oligonucleotide probes were artificially synthesized to detect mutations in codon 12 and 13 of N-ras. RESULTS: Five out of 43 AML samples have been found contain G-->A mutation in codon 12.2 have G-->T mutation in codon 12. One has G-->A mutation in codon 13. The mutation rate was 18.6%. None of the controls presented these mutations. The frequency of mutation of N-ras in the AML samples showed statistical differences with that of the controls. CONCLUSION: Analysis of the results suggests the N-ras mutations may have some relationship with the etiology of acute myeloid leukemia.     

Immunohistochemical study of T lymphocyte subsets on frozen substituted plastic embedding section of the bone marrow from patients with myelodysplastic syndrome and its clinical implication

Ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅｓ（ＭＤＳ）ａｒｅｕｓｕａｌｌｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｃｙｔｏｐｅｎｉａ,ｔｒｉｌｉｎｅａｇｅｄｙｓｐｌａｓｉａａｎｄｈｙｐｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ（ＢＭ）．Ａｃｃｏｒｄ－ｉｎｇｔｏｔｈｅＦｒｅｎｃｈ,Ａｍｅｒｉｃａ－Ｂｒｉｔｉｓｈｃｌａｓｓｉｆｉ－ｃａｔｉｏｎ［１］,ＭＤＳｆａｌｌｓｉｎｔｏｆｉｖｅｓｕｂｇｒｏｕｐｓ：ｒｅ－ｆｒａｃｔｏｒｙａｎｅｍｉａ（ＲＡ）,ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙａｎｅｍｉａｗ…