中国人食管癌 p16 基因突变分析

为了解ｐ１６基因与中国人食管癌遗传易感性的关系，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法和ＤＮＡ序列测定法对４０例食管癌及相应手术切端正常组织ＤＮＡ标本ｐ１６基因进行研究，结果在４０例食管癌标本ＤＮＡ中共发现ＤＮＡ变异１４例，其中９例存在有ｐ１６基因的错义突变和剪接位点突变，５例分别在密码子４１和１４０存在与白种人已发现的相同的正常多态现象，而相应的正常手术切端组织标本中未发现有错义突变和剪接位点突变。提示：（１）中国人食管癌中存在较高频率的ｐ１６基因突变，并以错义突变为主；（２）高发区和普通人群食管癌标本中ｐ１６基因突变频率未见差异；（３）正常对照手术切端组织未发现相应体细胞突变。表明ｐ１６基因突变在中国人食管癌发展过程中属较晚期的改变。     

广东省潮汕地区食管鳞状细胞癌中p53蛋白的表达

采用ＣＭ－１和ＤＯ－７一抗的免疫组化法，检测了广东省潮汕地区５５例食管鳞状细胞癌中的ｐ５３蛋白 表达的现象。ｐ５３蛋白阳性细胞不但可在呈浸润生长的肿瘤细胞中见到，而且在已具有浸润癌巢ｐ５３蛋白表达的肿瘤癌旁浸润前病变如上皮高度增生，异型增生和原位癌中可出现。     

食管鳞状细胞癌中p16基因甲基化及其表达

目的：探讨食管鳞状细胞癌p16／INK4基因启动子区高甲基化和p16、cyclinD1蛋白表达的意义。方法：用甲基化特异性PCR（MSP）法检测p16／INK4基因启动子区的高甲基化，用免疫组织化学方法检测p16、cyclind1蛋白的表达。结果：30例食管鳞状细胞癌中7例p16免疫组织化学阳性，15例cyclinD1阳性，组织学和统计学分析显示p16与cyclinD1的表达呈负相关。4例检出p16／INK4基因启动子区高甲基化，但与p16失表达无统计学意义。结论：（1）在食管鳞状细胞癌可检出p16／INK4基因启动子区的高甲基化，而甲基化不是引起p16失表达的主要原因。（2）p16与cyclinD1的表达呈负相关，提示细胞周期调控因子之间可能存在相互影响表达的反馈机制。     

食管癌中p16基因研究进展

ｐ１６基因为抑癌基因，其突变与缺失广泛存在于各种肿瘤中。在食管癌细胞系中其缺失率达９２％，在原发癌标本中以突变为常见，突变率达５２％，明显高于缺失率。突变既可发生于内含子，又可发生于外显子，尤以第２外显子为突变热点。突变形式有无义突变、错义突变、移码突变及点突变。由于ｐ１６基因变化与食管癌发生发展关系密切，因而在食管癌诊断、基因治疗及预后判断方面有着极其重要的意义。     

p16—一种新的候选肿瘤抑制基因

ｐ１６基因（也称多肿瘤抑制基因，ＭＴＳ１或ＣＤＫＮ２基因），是１９９４年被鉴定的，定位于人染色体９ｐ２１，所编码的ｐ１６蛋白为细胞周期蛋白Ｄ／ＣＤＫ激酶的抑制因子。ｐ１６基因纯合子的缺失往往导致细胞的恶性转化，在很多肿瘤组织和细胞株中发现ｐ１６异常，提示ｐ１６基因可能是９ｐ２１区域的候补肿瘤抑制基因，它与肿瘤的发生有着十分密切的关系。     

p16基因与人类肿瘤

ｐ１６基因位于人类染色体９ｐ２１，其编码蛋白特异性抑制ＣＤＫ４和ＣＤＫ６的活性，参与正常细胞周期的调控。在肿瘤中，ｐ１６基因存在广泛而频繁的缺失和突变，被认为是新的抑癌基因，成为当前肿瘤研究的一个热点。     

膀胱移行细胞癌中p16基因的改变

目的 明确ｐ１６基因在膀胱移行细胞癌中的改变。方法 采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ甲蜞化分析技术分别检测５２例膀胱移行细胞癌中ｐ１６基因的缺失、突变及５′ＣｐＧ岛甲基化。结果 ５２例膀胱移行细胞癌中１１例（２１．５％）存在ｐ１６基因的缺失;仅１例肿瘤于ｐ１６基因外显子２出现点突变;１９例（３６．５％）肿瘤发现ｐ１６基因５′ＣｐＧ岛甲基化。结     

p63蛋白在食管磷状细胞癌中的表达及意义

目的检测p63蛋白在食管癌组织中的表达情况,并探讨其与食管癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化检测p63蛋白在53例食管磷癌及癌旁组织中的表达情况。结果p63蛋白在食管癌组织中的阳性表达率为71.7%（38/53）,而在癌旁食管组织中的阳性表达率为35.8%（19/53）,两者比较有显著性差异（P〈0.01）。p63蛋白的表达与食管磷癌分化程度密切相关（P〈0.05）,其在低分化磷癌中的阳性表达率（89.5%）显著高于在高分化磷癌中的阳性表达率（46.2%）。p63蛋白的表达与食管磷癌的TNM分期、淋巴结转移、浸润深度均无明显相关性（P〉0.05）。结论p63蛋白在食管磷癌组织中呈高表达,表明其可能参与食管磷癌的发生发展。     

p16基因突变及蛋白表达异常与人胰腺癌关系的研究

目的：研究ｐ１６基因的突变及蛋白表达异常在人胰腺癌发生及侵润转移中的作用。方法：应用ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＤＮＡ测序及免疫组织化学技术,对３５例人胰腺癌的ｐ１６基因第２外显子进行了检测,研究ｐ１６基因的突变及蛋白表达情况。结果：１２例在ｐ１６基因第２外显子部分存在至少５２２ｂｐ的纯合缺失。７例存在２个点突变（突变位点均相同）：其一为第１２６密码子碱基ＧＴＣ→ＡＡＴ的错义突变,氨基酸由缬氨酸（Ｖａｌ）变成了天冬酰胺（Ａｓｎ）;另一为第１２７密码子ＧＣＡ→ＧＣＧ的同义突变。缺失及突变共占５４．３％（１９／３５）。Ｐ１６蛋白三维结构模拟提示,Ｖａｌ１２６Ａｓｎ对蛋白空间结构有一定影响,从而影响Ｐ１６蛋白的功能。１２例缺失标本呈现Ｐ１６蛋白表达阴性,９例标本（其中７例点突变）出现Ｐ１６蛋白表达下降,共占６０％（２１     

食管鳞状细胞癌p53基因突变及其蛋白表达

食管鳞癌常伴有ｐ５３基因突变和（或）ｐ５３蛋白积聚。文献报道ｐ５３基因改变与ｐ５３蛋白积聚常出现不一致的现象〔１，２〕。我们应用ＰＣＲＳＳＣＰ及免疫组化方法探讨食管鳞癌ｐ５３基因突变与ｐ５３蛋白表达的关系。１　材料和方法１１　材料　取食管癌新鲜组织３０例，同一标本分为２份，１份按常规方法提取ＤＮＡ，另１份经福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片。１２　ＰＣＲＳＳＣＰ〔３〕　ＰＣＲ常规扩增反应后，取１０μｌＰＣＲ产物与等量电泳缓冲液混合，９６℃变性５ｍｉｎ后立即置冰浴，电泳后，凝胶经固定、银染、…     

肿瘤中p16基因的研究进展

ｐ１６基因是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子,它作为一种细胞周期调节因子,通过参与细胞周期的调节,广泛的参与肿瘤的发生,本以ｐ１６基因在肿瘤研究中进展作一综述。     

喉癌p16、p15基因纯合性缺失的研究

目的 研究p16、p15基因缺失状态与喉癌发生、发展的关系。方法 提取喉癌新鲜组织中基因组DNA，采用聚合酶链反应技术，分别对80例喉癌进行p16基因第2外显子（p16E2）和67例喉癌进行p15基因第2外显子(p15E2）纯合性缺失研究。结果 检测p16E2弛合性缺失率为12.5%(10/80)，p15E2纯合性缺失率为11.94%（8／67），p16E2、p15E2共同缺失率为5.97%（4／67）。结论 p16E2和p15E2纯合缺失以及二者共同缺失与喉癌发生有相关性，可能在喉癌发生及恶性进展中起一定作用。     

p16与细胞周期调节蛋白在食管癌中的表达

细胞周期的调控异常与肿瘤的发生密切相关。其中，ｃｙｃｌｉｎＤ１细胞周期依赖性蛋白激酶４（ＣＤＫ４）ｐ１６，这一以ＣＤＫ４为中心的细胞周期调控途径较为明确，且其各组分的异常与肿瘤的关系十分密切，我们用免疫组化方法对４３例原发食管癌中的ｐ１６、ｃｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４蛋白的存在状态进行了研究，旨在探索其相互的作用及与食管癌发生的关系。一、材料和方法１．标本：４３例食管癌组织取自河南医科大学第二附属医院和河南省肿瘤医院１９９６～１９９７年的手术切除标本。患者术前未接受过放、化疗。每例标本分别取癌…     

肿瘤中p16基因的研究进展

ｐ１６基因是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子（ＣＤＫ４Ｉ）。它作为一种细胞周期调节因子,通过参与细胞周期的调节,广泛的参与肿瘤的发生。本文对ｐ１６基因在肿瘤研究中的进展作一综述。     

食管鳞状细胞癌p53基因突变与p53蛋白过度表达的关系

p53基因是各种人类肿瘤包括食管癌中最常见有突变的基因之一。我们应用激光显微切割,聚合酶链反应（PCR）-杂合性缺失（LOH）,PCR-单链构象多态性分析（SSCP）,p53测序及免疫组织化学方法,检测了食管癌高发区中国山西省的56例患者食管鳞状细胞癌（ESCC）中p53基因缺失、突变及p53蛋白表达情况,旨在更好理解p53基因突变等变化在食管癌发生发展过程中的作用。     

p16基因与急性白血病

多种肿瘤抑制基因p16在细胞增殖周期调控中发挥重要作用，p16基因及其表达产物的异常改变与肿瘤的发生发展密切相关。急性白血病患者DNA中可检测到p16基因纯合缺失、突变及甲基化等异常变化，导致细胞中p16蛋白表达异常，影响细胞的正常功能。对急性白血病p16基因及其表达产物的研究，为急性白血病的药物及基因治疗提供了理论依据。     

宫颈鳞状细胞癌HPV16/18、p53、p21表达及意义

目的　探讨人乳头状瘤病毒 (HPV) 16型、18型及 p5 3、p2 1基因蛋白的表达情况以及与宫颈癌的关系。 方法　应用免疫组化二步法检测 5 0例宫颈鳞癌、4 0例正常宫颈黏膜中HPV16、HPV18、p5 3、p2 1的表达。肿瘤组分 <6 0岁和≥ 6 0岁 2个年龄组 ,观察HPV感染情况。结果　宫颈鳞癌中HPV16、HPV18、p5 3、p2 1表达分别为 4 8%、2 0 %、5 4 %和 5 0 % ,而正常宫颈黏膜中的表达分别为 10 %、0、0、10 % ,两者经统计学比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;<6 0岁组和≥ 6 0岁组HPV16阳性率分别为 84 2 %和 2 5 8% ,年青组明显高于年老组 ,经统计学比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　 (1)宫颈鳞癌的发生与HPV16、HPV18感染有密切关系 ,提示检测宫颈HPV16、HPV18感染情况对于宫颈鳞癌的随访和早期诊断有着重要的参考价值。 (2 )提示宫颈黏膜在HPV感染后 ,可能在p5 3、p2 1多种癌基因的共同作用导致宫颈鳞癌的发生发展。     

不同年龄段食管鳞状细胞癌中p53蛋白表达及预后意义

目的 探讨在不同年龄段食管鳞状细胞患者中p53蛋白表达与预后的相关性.方法 收集2007～2010年复旦大学附属中山医院未接受新辅助放、化疗的食管鳞状细胞癌根治标本536例,制作组织芯片检测p53的表达,分析其在不同年龄段患者中的预后意义.结果 536例食管鳞状细胞癌中,57.3％的患者≥60岁,男女比为4.5:1.p...     

肾细胞癌p16基因缺失与预后的关系

肾细胞癌ｐ１６基因缺失与预后的关系赵坡钟梅许红民吕亚利陈乐真一、材料与方法１．标本：３１例肾细胞癌取自解放军总医院病理科１９６０～１９８５年存档的福马林固定、石蜡包埋组织标本，其中透明细胞癌２０例，颗粒细胞癌５例，混合细胞癌６例；按分化程度有高分化癌...     

多重肿瘤抑制基因MTS1／p16CDK4I与细胞周期调节

本文介绍了近几年有关ＭＴＳ１／ｐ１６ＣＤＫ４Ｉ（简称ｐ１６）基因的研究工作，特别对ｐ１６基因在肿瘤中的突变以及细胞周期蛋白、ＣＤＫｓ和ｐ１６蛋白等细胞周期抑制因子在肿瘤发生发展中可能的作用机制进行了综述。