紫草素诱导白血病HL-60细胞凋亡及其机制研究

目的：研究紫草素在体外对人早幼粒白血病细胞株HL-60增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法：MTT比色法检测紫草素对HL-60细胞增殖的抑制作用;AnnexinV／PI双标记流式细胞术检测紫草素对HL-60细胞凋亡率。结果：MTT测定显示紫草素能够对HL-60细胞起到明显的增殖抑制作用,且呈现剂量一效应依赖关系。AnnexinV／PI显示紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,凋亡率呈剂量依赖性。结论：紫草素能抑制人白血病HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。     

羊栖菜多糖诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对人白血病HL-60细胞系增殖抑制和凋亡诱导作用。方法MTT法检测SFPS对HL-60细胞增殖的抑制作用;扫描电镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果SFPS对HL-60细胞具有显著生长抑制作用,并呈量效和时效关系;药物浓度为300 mg/L和500 mg/L作用HL-60细胞后,观察到典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳呈现梯状条带;DNA直方图出现亚G1峰。在一定浓度范围内,SFPS诱导细胞凋亡的作用呈现浓度和时间依赖性,同时G2/M期细胞比例增多。结论SFPS抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞有关。     

大黄素对HL-60细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨大黄素对人白血病细胞HL-60增殖及凋亡的影响。方法:应用MTT法检测大黄素对HL-60细胞增殖的影响;应用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡;蛋白印迹法(Western-Blot)检测Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:在5～20mg/L浓度范围内,大黄素对HL-60细胞增殖的抑制作用呈时间剂量依赖性20mg/L作用72h后,抑制率分别达到(19.8±2.7)%,(58.8±4.4)%和(73.8±5.7)%;流式细胞术检测发现:大黄素5、10和20mg/L作用24h后,细胞凋亡率分别为(15.5±3.4)%、(56.0±3.4)%和(71.1±5.0)%,与对照组(1.01±0.06)%有显著性差异(P<0.05);DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯形条带。大黄素作用24h后,Bcl-2蛋白的表达水平随药物波度增加呈逐渐下降趋势。结论:大黄素能够抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。Bcl-2基因可能参与了大黄素抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的过程。     

人参诱导早幼粒细胞性白血病细胞凋亡的作用

研究认为,人参的抗肿瘤作用与肿瘤免疫活性、抑制肿瘤转移以及诱导细胞凋亡有关。本次探讨了红参、白参含有的数种皂苷诱导早幼粒细胞性白血病细胞(HL-60)凋亡的作用。 方法:以添加10％FBS的RPMI 1640培养基(37℃,5％CO_2)培养HL-60细胞,每孔2×10~3个细胞分别注入96孔培养板(90μL)。24h后添加10μL     

8-硝基白杨素对HL-60细胞凋亡与PTEN-Akt途径的影响

目的 观察8-硝基白杨素(NOChR)抑制人急性髓性白血病细胞系(HL-60)细胞增殖和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制是否与PTEN-Akt信号传导途径相关.方法 体外培养HL-60细胞.MTT比色法检测增殖活性;流式细胞术(FCM)定量分析细胞凋亡程度;Western Blot分析HL-60细胞PTEN、P-Akt蛋白表达的影响.结果 NOChR显著抑制HL-60细胞增殖,呈浓度依赖性,其IC50值为1.34 μmol/L;NOChR具有诱导HL-60细胞凋亡作用,且呈浓度和时间依赖性.NOChR以浓度和时间依赖方式上调HL-60细胞PTEN蛋白表达和抑制P-Akt蛋白表达,其作用可被PPARγ特异性阻断剂GW9662(10 μmol/L)预孵育拮抗.结论 NOChR诱导HL-60细胞凋亡作用与其活化PPARγ,上调PTEN蛋白表达,抑制抑制Akt磷酸化相关.     

芒果苷对白血病HL-60细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究芒果苷对人髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 用MTT法观察芒果苷对HL-60 细胞增殖的影响;应用细胞形态学、DNA 凝胶电泳和流式细胞术等观察芒果苷对HL-60细胞的诱导凋亡作用;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 检测芒果苷作用前后Bcl-2、survivin基因mRNA 表达水平的变化.结果 芒果苷能明显抑制HL-60细胞的增殖,并能有效诱导HL-60细胞凋亡,随着药物浓度增加和作用时间延长,其抑制作用增强、凋亡率也逐渐上升,呈剂量和时间依赖性;芒果苷作用HL-60细胞后Bcl-2、survivin基因mRNA表达随着药物浓度增加和作用时间的延长而逐渐减弱.结论 芒果苷能有效抑制HL-60细胞增殖,诱导其凋亡;Bcl-2、survivin可能参与了芒果苷抑制HL-60细胞增殖、诱导凋亡的过程.     

清毒片和hTERT反义核酸对HL-60细胞增殖及凋亡的协同作用

目的:探讨清毒片联合端粒酶逆转录酶反义核酸(hTERT ASODN)对HL-60细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养HL-60细胞,分别加入清毒片、hTERT ASODN、清毒片加hTERT ASODN,取培养24、48、72h的细胞,采用四唑盐比色(MTT)法检测细胞增殖、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。以加入阿糖胞苷组为阳性对照,未处理的细胞为空白对照。结果:清毒片、hTERT ASODN(0.5μmol/L)、阿糖胞苷(10μmol/L)均能抑制HL-60细胞增殖、诱导细胞凋亡,其作用随着培养时间的延长增强;HL-60细胞增殖抑制率及诱导凋亡率从高到低依次为:阿糖胞苷组清毒片加hTERT ASODN组hTERT ASODN组清毒片组;清毒片加hTERT ASODN对HL-60细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用明显高于单独使用清毒片或hTERT ASODN(P0.05)。结论:清毒片与hTERT ASODN联合对于抑制HL-60细胞增殖及诱导凋亡具有协同效应。     

紫草素对白血病细胞HL-60增殖及凋亡作用的影响

目的研究紫草素诱导人早幼粒白血病HL-60细胞凋亡的作用机制。方法 MTT比色法检测紫草素对HL-60细胞增殖的影响;Annexin V/PI分析凋亡率;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2基因水平,分析白血病HL-60细胞凋亡作用与bcl-2表达水平关系。结果紫草素在1～8μg/mL浓度范围内能抑制HL-60细胞的增殖,具有时间和浓度的依赖性。2μg/mL紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,凋亡呈时间依赖性。在2μg/mL紫草素作用下,HL-60细胞bcl-2表达明显下调。结论紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,其作用机制与下调bcl-2表达有关。     

罗仙子提取物诱导白血病细胞凋亡作用研究

目的：观察中药罗仙子提取物体外对白血病细胞的凋亡诱导作用。方法：罗仙子提取物处理人白血病HL-60细胞24 h后,MTT法检测细胞活率;采用光学显微镜、荧光显微镜、透射电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：不同浓度罗仙子提取物可抑制HL-60细胞增殖同时诱导典型的细胞凋亡形态学变化,与对照组相比细胞凋亡率显著升高。结论：罗仙子提取可显著抑制白血病细胞增殖、诱导细胞凋亡。     

银杏外种皮多糖对HL-60细胞的体外实验研究

目的:研究银杏外种皮多糖对体外HL-60细胞的作用.方法:运用MTT方法和流式细胞技术,检测HL-60细胞体外增殖、凋亡以及相关基因的表达.结果:银杏外种皮多糖(40～160 m/L,48h)可抑制HL-60细胞增殖及增殖促进基因c-myc的表达,可诱导HL-60细胞凋亡并下调凋亡抑制基因bcl-2的表达.结论:银杏外种皮多糖对HL-60细胞增殖及凋亡的影响涉及增殖促进基因c-myc和凋亡抑制基因bcl-2.     

喜树碱衍生物SN-38对人白血病细胞系HL-60增殖及凋亡作用的实验研究

目的:观察喜树碱衍生物SN-38对人白血病细胞系HL-60细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK法检测SN-38对HL-60细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;特异性荧光底物检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性;观察不同种类Caspase抑制剂对SN-38诱导HL-60细胞的增殖和凋亡作用的影响。结果:CCK法显示SN-38明显抑制HL-60细胞增殖,流式细胞凋亡分析及Caspase抑制剂研究,显示SN-38通过内源性Caspase信号通路诱导HL-60细胞凋亡。结论:SN-38通过内源性Caspase信号通路抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡。     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡机制的探讨

目的：本实验拟用熊果酸干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞,体外培养实验,证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用,并通过免疫细胞化学方法检测bcl-2,survivin在熊果酸与该细胞株作用后表达,探讨熊果酸诱导HL-60细胞调亡可能的分子机制。方法：荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率：琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA;免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Survivin蛋白。结果：荧光显微镜下观察,80gmol／LUA作用24h的HL一60细胞可看到典型的细胞凋亡形态学变化;40umol／L、80umol／LuA可使G0／G1期细胞增多,出现G0／G1期阻滞,S期和G2／M期细胞数减少,凋亡细胞峰（sub-G1）及凋亡率逐渐增高,Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,当UA浓度为40gmol／L时,P〈0．01,有显著性差异。结论：UA呈浓度和时间依赖性抑制HL．60细胞增殖,诱导其凋亡机制可能与下调Bcl-2、Survivin蛋白表达有关。     

双苓扶正抗癌制剂对HL-60细胞的体外实验研究

目的研究双苓扶正抗癌制剂体外对HL-60细胞的作用及其作用机制。方法运用MTT方法和流式细胞技术,检测HL-60细胞体外增殖、凋亡以及相关基因的表达。结果双苓扶正抗癌制剂(80~320 mg.L-1,48 h)可抑制HL-60细胞增殖及其增殖促进基因c-myc的表达,可诱导HL-60细胞凋亡并上调凋亡诱导基因bax的表达。结论双苓扶正抗癌制剂对HL-60细胞增殖及凋亡的影响涉及增殖促进基因c-myc和凋亡诱导基因bax。     

苦参碱对HL-60细胞增殖与分化影响的实验研究

目的 观察苦参碱对HL-60细胞增殖和分化的影响作用.方法 以HL-60细胞为实验对象, 采用体外培养技术, 通过MTT法测细胞活力、细胞周期分析、细胞凋亡检测、硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验、细胞表面分化抗原检测等方法来观察不同浓度苦参碱对HL-60细胞的作用.结果 浓度为 12.5～ 50 μg/ml的苦参碱能明显抑制HL-60细胞的增殖,使细胞周期发生改变,G0/ G1 期细胞增多,S期细胞减少,凋亡细胞明显增多,对NBT的还原能力增强,细胞表面分化抗原CD11b和CD15表达增加.结论 苦参碱对白血病细胞具有一定的抑制增殖、诱导凋亡和诱导分化作用,对白血病的治疗提供有力的实验依据.     

蟾酥注射液抑制白血病HL-60细胞增殖及诱导其凋亡实验研究

目的 :探讨蟾酥注射液 (CHS)体外抑制白血病 HL- 6 0细胞增殖的机制。方法 :采用 MTT法检测 CHS对白血病 HL- 6 0细胞增殖的影响 ;采用 Giemsa染色和透射电镜技术观察 CHS处理的 HL- 6 0细胞形态学和超微结构变化 ;采用琼脂糖凝胶电泳检测 CHS处理的 HL- 6 0细胞的 DNA片段化。结果 :CHS2 4h对白血病细胞增殖出现抑制 (P<0 .0 5 )。 CHS处理的 HL- 6 0细胞光镜和电镜出现核着边、核碎片和凋亡小体 ;CHS处理的 HL- 6 0细胞 DNA电泳出现 DNA梯状图谱。 2 .2 5× 10 - 1 μg/ m l CHS作用 2 4,48,72 h后凋亡指数 (A1)高于阴性对照组 (P均 <0 .0 5 )。 2 .2 5 ,2 .2 5× 10 - 1 ,2 .2 5× 10 - 2 μg/ m1作用 48h的 HL- 6 0细胞 AI高于阴性对照组 (均 P<0 .0 5 )。结论 :CHS体外抑制白血病 HL- 6 0细胞增殖 ,并且诱导其凋亡。诱导凋亡可能是 CHS抑制白血病细胞增殖的机制     

朱砂七总蒽醌抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的:研究朱砂七总蒽醌(ZSQ)对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用,探讨其抗肿瘤作用及其机制。方法:应用MTT法检测朱砂七总蒽醌对HL-60细胞的生长抑制作用,Giemsa染色观察细胞形态学改变,DNA ladder和流式细胞术等方法检测朱砂七总蒽醌诱导肿瘤细胞凋亡及对细胞周期的作用。结果:32、3.2、0.32、0.032mg/ml朱砂七总蒽醌作用HL-60细胞72h后,细胞生长抑制率分别为28.69%,36.84%,63.76%和80.57%,抑制作用呈时间及浓度依赖性,朱砂七总蒽醌在48h的IC50约为3.2mg/ml。形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成。FCM分析发现朱砂七总蒽醌阻断HL-60细胞生长于细胞周期的G2/M期,诱导凋亡作用呈时间及浓度依赖性,能够诱发肿瘤细胞产生凋亡小体、DNA ladder和细胞凋亡峰。结论:朱砂七总蒽醌能抑制HL-60肿瘤细胞的增殖并诱导凋亡。     

六神丸诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:从细胞凋亡角度探讨六神丸治疗白血病的机理,为临床应用提供依据。方法:分别制备六神丸乙醇提取剂和六神丸含药血清,用MTT法检测六神丸对HL-60细胞增殖的抑制作用,吉姆萨染色观察细胞凋亡的形态学变化,原位末端标记(POD)法检测细胞凋亡现象。结果:六神丸乙醇提取剂对HL-60细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈现浓度依赖关系;中剂量组所得六神丸含药血清对HL-60细胞增殖的抑制作用优于低剂量组和高剂量组。吉姆萨染色显示六神丸乙醇提取剂和六神丸含药血清处理过的HL-60细胞均出现典型的凋亡形态。原位末端标记表明,六神丸乙醇提取剂诱导HL-60细胞凋亡在一定范围内呈现时间-浓度依赖关系;六神丸含药血清诱导HL-60细胞凋亡作用优于As_2O_3血清组和空白血清组(P<0.01)。结论:六神丸体外诱导HL-60细胞凋亡可能是六神丸治疗白血病的作用机制之一。     

参附注射液对人白血病细胞生长和凋亡的影响

目的:探讨参附注射液对人白血病HL-60细胞生长抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法检测参附注射液对HL-60细胞生长的抑制作用,流式细胞术分析参附注射液对HL-60细胞凋亡的影响。结果:25 ml/L、50 ml/L、100 ml/L的参附注射液作用48 h,存活率为(87.5±8.02)%、(56.45±5.03)%、(38.38±7.48)%,IC50为68 ml/L。参附注射液50 ml/L作用HL-60孵育48 h后,出现细胞凋亡,G1峰前出现亚二倍体峰。结论:参附注射液对人白血病HL-60细胞生长有抑制作用,其抑制作用与诱导HL-60细胞凋亡有关。     

菱角提取物诱导HL-60细胞凋亡的机制探讨

目的 探讨菱角提取物对人早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60细胞增殖和凋亡的影响及凋亡的分子机制.方法 采用MTT法检测菱角提取物对HL-60细胞的增殖抑制作用;吖啶橙染色和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化;比色法测定Caspase-3、9蛋白活性.结果 菱角提取物能抑制HL-60细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性.菱角提取物可诱导HL-60细胞凋亡并显示一定的剂量依赖关系.与对照组比较,菱角提取物可明显降低HL-60细胞线粒体膜电位,上调Caspase-3、9蛋白活性.结论 菱角提取物可抑制HL-60细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位、激活Caspase-3、9蛋白继而诱导HL-60细胞凋亡有关.     

昆明山海棠根部水提液诱导HL-60细胞凋亡及对c-Myc基因表达的调控

目的 研究昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum(Celastraceae)(THH)根部水提液对早幼粒白血病HL-60细胞凋亡的诱导作用及机制。方法 通过特征性的形态学观察，Annexin—V标记，以及流式细胞仪检测中次G1峰的形成确定THH的诱导细胞凋亡作用；应用Western Blotting研究THH对c—Myc蛋白表达的影响。结果 THH根部水提液可诱导早幼粒白血病HL-60细胞凋亡。在浓度高于18μg／mL时，THH对HL-60细胞的诱导凋亡作用呈现浓度与时间的相关性。在THH处理2～4h后，癌基因蛋白c—Myc表达降低99％以上。结论 THH抑制了c—Myc蛋白的翻译或后翻译过程，从而降低了c—Myc在细胞周期运转中的作用，导致大量细胞凋亡．