钙离子拮抗剂及精氨酸对离体肾小管上皮细胞造影剂损伤的保护作用

随着影像学设备特别是CT及介入放射学的普遍应用,使用造影剂后导致或加重肾功能损害受到人们的关注.目前对造影剂引起肾中毒的机制尚不十分清楚.本研究中,我们探讨造影剂肾病(CAN)的发生机制,同时初步探讨钙通道拮抗剂及精氨酸(L-arginine,L-Arg)对离体肾小管上皮细胞造影剂损伤的保护作用机制.     

钠钙离子交换体介导的钙超载对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

由造影剂导致的急性肾衰竭已成为住院患者获得性急性肾衰的第3位病因；而细胞内钙超载参与了造影剂诱导的肾损伤。现已知钙离子内流的通道有L型、T型及N型钙通道、钠钙离子交换体（NCX）等。研究证实，在缺血再灌注损伤中，NCX是钙离子内流致细胞内钙超载的主要通道。但造影剂诱导的细胞内钙超载经何种通道尚未完全阐明。     

应用钙离子拮抗剂保护离体肾的实验研究

目的 探讨钙离子拮抗剂对离体肾的保护作用。方法 以3月龄的日本纯种大耳兔为实验对象,分为正常组、实验对照组和实验组,实验对照组将肾脏置于4℃高渗枸橼酸盐腺嘌呤器官保存液（HC－A）中保存24h,实验组将肾脏置于4℃含维拉帕米的HC－A液中保存24h。正常组肾切取即刻测定肾细胞线粒体内钙离子及肾组织中三磷酸腺苷（ATP）的含量;实验对照组和实验组保存24h后测定肾细胞线粒体内钙离子及肾组织中ATP的含量。结果 与肾脏切除后立即检测组相比,实验对照组肾细胞线粒体内Ca∧2＋含量明显上升（P＜0．01）,ATP明显下降（P＜0．01）;实验组上述改变可得以显著改善（P＜0．01）。结论 在离体肾保存中,应用钙离子拮抗剂维拉帕米可阻止Ca∧2＋进入细胞线粒体内,防止能量消耗,从而保护离体肾。     

地尔硫革和精氨酸对造影剂相关性肾病的保护作用

目的研究钙通道拮抗剂地尔硫(艹卓)(Diltiazem)及精氨酸(Arginine)造影剂相关性肾病(Contrast medium-associated nephropathy,CAN)的保护作用.方法观察132例患者进行静脉肾盂造影前后的肾小球滤过功能及肾小管功能的变化情况.同时通过在造影前预防性应用Diltiazem 及Arginine,了解它们单独或联合应用对CAN的保护作用.结果原肾功能正常者造影后肾小球滤过功能(Ccr)及肾小管功能(NAG、Ulyr、Umosm)较造影前有明显的下降(P<0.05、P<0.01).Arginine干预组的情况与对照组的情况相类似.但是Diltiazem及Diltiazem+Arginine干预组在造影前后各项观测指标相差无统计学差异(P>0.05).结论造影剂泛影葡胺可引起患者的肾小球滤过功能及肾小管功能损害;原有肾功能减退或有糖尿病病史者更甚.预防性应用Diltiazem可预防CAN的发生.     

地尔硫和精氨酸对造影剂相关性肾病的保护作用

目的:研究钙通道拮抗剂地尔硫艹卓(Diltiazem)及精氨酸(Arginine)造影剂相关性肾病(Contrastmedium -associatednephropathy ,CAN)的保护作用。方法:观察132例患者进行静脉肾盂造影前后的肾小球滤过功能及肾小管功能的变化情况。同时通过在造影前预防性应用Diltiazem及Arginine ,了解它们单独或联合应用对CAN的保护作用。结果:原肾功能正常者造影后肾小球滤过功能(Ccr)及肾小管功能(NAG、Ulyr、Umosm)较造影前有明显的下降(P <0 .0 5、P <0 .0 1)。Arginine干预组的情况与对照组的情况相类似。但是Diltiazem及Diltiazem +Arginine干预组在造影前后各项观测指标相差无统计学差异(P >0 .0 5 )。结论:造影剂泛影葡胺可引起患者的肾小球滤过功能及肾小管功能损害;原有肾功能减退或有糖尿病病史者更甚。预防性应用Diltiazem可预防CAN的发生。     

钙离子拮抗剂对环孢素血浓度的影响

本文从药代动力学、药效动力学和卫生经济学等角度评价钙离子拮抗剂对环孢素血浓度的影响     

钙离子拮抗剂对环孢素血浓度的影响

本文从药代动力学，药效动力学和卫生经济学等角度评价钙离子拮抗剂对环孢素血浓度的影响。     

丹参注射液对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的：研究丹参注射液对造影剂碘海醇诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用并对其作用机制进行探讨。方法：体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）,分为正常对照组、甘露醇对照组（与碘海醇渗透压相当）、造影剂对照组（碘海醇100mg/ml）、丹参防治组（碘海醇100mg/ml＋丹参注射液15mg/ml）。比色法测定细胞培养上清液LDH水平,MTT法测定细胞增殖活力,DCFH-DA荧光探针测定细胞内活性氧（ROS）,硫代巴比妥酸法测定细胞内MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,RT-PCR测定细胞内血红素加氧酶-1（HO-1）mRNA表达,Westernblot检测细胞内HO-1蛋白表达。结果：碘海醇100mg/ml可明显抑制HK-2细胞增殖、引起培养液中LDH水平上升、促使细胞内ROS和MDA含量增高而细胞内SOD活性下降,同时碘海醇可诱导HO-1mRNA和蛋白表达上调。加入丹参可明显降低培养液中LDH水平,促进细胞增殖,同时抑制细胞内ROS的产生,降低细胞内MDA含量,保护细胞内SOD活性,并使HO-1mRNA和蛋白表达进一步增强。结论：丹参对造影剂碘海醇所致肾小管上皮细胞具有明显的保护作用,其作用机制与其抗氧化能力及诱导HO-1表达有关。     

地尔硫(艹卓)和精氨酸对造影剂相关性肾病的保护作用

目的:研究钙通道拮抗剂地尔硫(艹卓)(Diltiazem)及精氨酸(Arginine)造影剂相关性肾病(Contrast medium-associated nephropathy,CAN)的保护作用.方法:观察132例患者进行静脉肾盂造影前后的肾小球滤过功能及肾小管功能的变化情况.同时通过在造影前预防性应用Diltiazem 及Arginine,了解它们单独或联合应用对CAN的保护作用.结果:原肾功能正常者造影后肾小球滤过功能(Ccr)及肾小管功能(NAG、Ulyr、Umosm)较造影前有明显的下降(P<0.05、P<0.01).Arginine干预组的情况与对照组的情况相类似.但是Diltiazem及Diltiazem Arginine干预组在造影前后各项观测指标相差无统计学差异(P>0.05).结论:造影剂泛影葡胺可引起患者的肾小球滤过功能及肾小管功能损害;原有肾功能减退或有糖尿病病史者更甚.预防性应用Diltiazem可预防CAN的发生.     

BQ123对糖尿病大鼠造影剂肾病的保护作用

造影剂肾病(radiocontrastmedi-a-inducednephropathy,RCIN)已经成为医院内发生的急性肾功能衰竭的重要原因之一犤1犦,尤其在已存在慢性肾功能不全和糖尿病患者中。但其发病机制尚不完全清楚。近年来,有研究提示内皮素(ET)在RCIN的发生、发展中起重要作用犤2犦,但尚未得到公认。为此,我们建立了糖尿病模型,并使用选择性内皮素A受体(ETAR)拮抗剂BQ123,来对这一问题做进一步探讨。一、材料与方法1.动物模型的建立与分组:雄性SD大鼠32只,体重220～280g,8只做假手术,余24只接受右侧肾切除术,2周后建立糖尿病模型,具体方法参见文献犤3犦…     

造影剂肾病的诊疗进展

本文综述了造影剂肾病的发病机制、危险因素、临床表现、诊断、治疗及预防。     

造影剂肾病的诊疗进展

本文综述了造影剂肾病的发病机制、危险因素、临床表现、诊断、治疗及预防.     

高糖加重造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡

目的探讨高糖对造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及其分子机制。方法将NRK52E细胞分成6组：正常对照组（A组）;造影剂组（B组）;葡萄糖（5mmol／L）＋造影剂组（C组）;葡萄糖（15retool／L）＋造影剂组（D组）;葡萄糖（30mmol／L）＋造影剂组（E组）;8]3203580＋葡萄糖（30mmol／L）＋造影剂组（F组）。F组SB203580（20μmol／L）在造影剂加入30min前加入。结果C组细胞葡萄糖作用6、12、24h及D、E组细胞葡萄糖作用6h,未见造影剂诱导的肾损伤和肾小管上皮细胞凋亡加重。D、E组细胞葡萄糖作用12h,造影剂肾损伤和肾小管上皮细胞凋亡重于B组,葡萄糖作用24h,肾损伤和肾小管上皮细胞凋亡重于葡萄糖作用12h,且E组重于D组（P〈0．05）。高糖显著增加造影剂诱导的肾小管上皮细胞ROS水平及p-p38和caspase3蛋白表达,SB203580抑制1〉p38和caspase3蛋白表达。ROS与p-p38、caspase3及p-p38与caspase3呈显著正相关（r分别为0．70、0．68和0．65,P〈0．05）。结论高糖以时间和剂量依赖方式加重造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤,其分子机制与高糖显著增加细胞内ROS水平及上调p-p38、caspase3表达有关。     

制大黄-川芎药对对造影剂肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的：探讨制大黄-川芎药对对造影剂肾病（CIN）大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响及机制。方法：将32只雄性SD大鼠分为正常组（A组）、模型组（B组）、药对高剂量组（C组）、药对低剂量组（D组）。C、D组于造模前7天每日灌胃药对水煎液,灌胃量分别为成人标准体重（60kg）常规用量50、20倍。造模后24h处死动物,测定血清肌酐、尿素氮,HE染色观察肾脏病理改变,TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡,western印迹检测肾组织Caspase-3表达。结果：建模后24h与A组相比,B组血清肌酐、尿素氮均明显升高（P〈0.01）;病理形态学检测提示模型大鼠发生明显肾间质水肿、肾小管上皮细胞胞浆空泡样变、肾小管上皮细胞凋亡（P〈0.01）,Caspase-3蛋白表达显著增多（P〈0.01）。与B组相比,C、D组血清肌酐、尿素氮明显回落（P分别〈0.01or〈0.05）,肾脏病理改变显著为轻,肾小管上皮细胞凋亡指数显著减少（P〈0.01）,Caspase-3蛋白表达明显降低（P〈0.01）。结论：caspase3依赖的肾小管上皮细胞凋亡参与了大鼠造影剂肾病的发生,制大黄-川芎药对能通过抑制caspase3抑制肾小管上皮细胞凋亡,并进而保护CIN大鼠肾功能。     

高渗和低渗造影剂对人肾小管上皮细胞的毒性作用

目的 比较高渗造影剂（HOCM，泛影葡胺）和低渗造影剂（LOCM，欧乃派克）对人肾小管上皮细胞的毒性，探讨Bax／Bcl-2，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-3在造影剂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法 以HKC细胞株为研究对象，实验分为7组：HOCM1组（111mgI／ml），HOCM2组（74mgI／m1），LOCMl组（111mgI／m1），LOCM2组（74mgI／ml），甘露醇高渗对照组，甘露醇低渗对照组，培养基对照组。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）试验和乳酸脱氢酶（LDH）检测造影剂对体外培养HKC细胞的毒性作用。采用Hoechst染色、TUNEL染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、电镜和流式细胞仪DNA分析方法观察造影剂对HKC细胞凋亡的作用。采用Westem印迹方法检测Bax和Bcl-2蛋白含量的变化。采用荧光比色法检测caspase-3活性。结果 HOCM和LOCM组培养液中LDH水平较对照组显著增高（P〈0．05），细胞活力较对照组显著降低（P〈0．05），且与渗透浓度，作用时间及碘离子浓度有关。HOCM可诱导肾小管上皮细胞凋亡，且明显高于甘露醇高渗对照（P〈0．05）。LOCM在本实验剂量不能诱导肾小管上皮细胞凋亡。HOCM在诱导HKC细胞凋亡时伴随有Bax、Bcl-2表达的上调，caspase-3活性升高。结论 HOCM和LOCM对肾小管上皮细胞均有毒性作用，LOCM的毒性作用明显小于HOCM。HOCM可诱导人肾小管上皮细胞凋亡且与高渗及碘离子浓度有关。Bax／Bcl-2、caspase-3可能参与了造影剂诱导人肾小管上皮细胞凋亡的调控。     

低渗非离子造影剂对肾小管上皮细胞凋亡的作用及其机制

目的 探讨低渗非离子型造影剂碘必乐诱导体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）凋亡的作用及机制。 方法 体外培养的HK-2细胞,分为阴性对照组、不同剂量（1.16、4.63、18.5、74、296 gI/L）的碘必乐作用组（作用时间为6 h）。通过流式细胞仪、Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的比例和形态学变化;Western印迹方法检测凋亡蛋白天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达水平,并选取作用最强的剂量（296 gI/L）刺激2、4、6、12 h,观察caspase-3表达变化。选取不同剂量碘必乐作用1 h,与阴性对照组比较,观察细胞外信号调节激酶（ERK）和p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路磷酸化水平的变化,并观察不同剂量p38MAPK抑制剂SB203580对碘必乐诱导的caspase-3和Bcl-2表达的影响。 结果 流式细胞仪检测结果示74、296 gI/L碘必乐作用下细胞凋亡率较阴性对照显著升高（均P < 0.05）。Hoechst 33258染色结果示296 gI/L碘必乐可致明显的细胞凋亡形态学改变,凋亡细胞核呈致密浓染或核碎裂。Western印迹检测方法表明,碘必乐以剂量和时间依赖方式诱导细胞内caspase-3表达,以296 gI/L作用12 h表达最强;各剂量碘必乐作用下细胞内ERK1/2磷酸化水平与阴性对照组的差异均无统计学意义（均P > 0.05）,而一定剂量的碘必乐处理组细胞内p38MAPK磷酸化水平较阴性对照组显著升高（均P < 0.05）。应用p38MAPK特异性抑制剂（30 μmol/L）预处理2 h可以阻断细胞内p38MAPK信号通路的磷酸化,抑制碘必乐诱导的细胞内caspase-3表达并部分上调Bcl-2表达,与碘必乐阳性对照组的差异均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 低渗非离子型造影剂碘必乐以剂量和时间依赖方式诱导体外培养的HK-2细胞凋亡,其机制可能与上调caspase-3和下调抗凋亡蛋白Bcl-2有关,而p38MAPK信号通路的激活可能参与了该过程的调控。     

L-精氨酸对梗阻性黄疸大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响及其意义

目的　研究梗阻性黄疸 (简称梗黄 )时大鼠肾小管上皮细胞的凋亡情况 ,并探讨 L -精氨酸 (L - Arg)对其影响及相关机制。方法　将雄性 S- D大鼠随机分为 5组 (n=1 0 ) ,除 1组外 ,采用双重结扎胆总管造成梗黄模型 ,7d后 ,不同组大鼠分别给予 L - Arg和 /或 L -精氨酸甲酯 (L - NAME) ,2 1天后测定肾组织中一氧化氮 (NO)的量 ,分别应用 TU NEL方法及透射电镜检测并观察肾小管上皮细胞的凋亡情况。结果　 NO水平 :3组明显高于 2组 (P<0 .0 1 ) ;2组则高于 1组 (P<0 .0 1 )。通过TU NEL方法显示 :在 1组中凋亡的肾小管上皮细胞最少 ,呈散在分布 ,而 5组出现的则最多。与 2组相比 ,3组中标记阳性的肾小管上皮细胞明显减少。肾小管上皮细胞凋亡计数 ;与 1组相比 ,2、3、4、5组均明显增生 (P<0 .0 1 ) ,3组显著低于 2组 (P<0 .0 1 ) ,5组与 2组相比 ,凋亡细胞增加 (P<0 .0 5 )。与上述结果相对应 ,透射电镜观察显示 ,肾小管上皮细胞的凋亡改变在各组之间的区别也是比较明显的。结论　梗黄可引起肾小管上皮细胞出现明显的凋亡改变 ,而 L - Arg通过 L - Arg- NO通路具有减轻肾小管上皮细胞凋亡的作用     

左旋精氨酸对离体兔肺脏保存质量的影响

目的　观察左旋精氨酸（ＬＡｒｇｉｎｉｎｅ,ＬＡｒｇ） 对离体兔肺脏保存的保护作用。　方法　３０ 只健康家兔随机分成对照组和左旋精氨酸组（ＬＡｒｇ 组） ,每组１５ 只,对照组兔肺脏给予Ｅｕｒｏｃｏｌｌｉｎｓ 液进行灌注,ＬＡｒｇ 组给予含ＬＡｒｇ的Ｅｕｒｏｃｏｌｌｉｎｓ 液进行灌注,灌注总量６０ｍｌ／ｋｇ ,灌注压力１ ．９６ｋＰａ（２０ｃｍ Ｈ２ Ｏ） ,灌注完毕整取下心肺组织浸入４ ℃保存液中冷藏,７ 小时后取肺进行离体复灌,测定肺血管阻力、血气分析、肺血管对乙酰胆碱舒血管反应性、肺组织湿／ 干重比例及肺组织电子显微镜检查等指标。　结果　对照组肺血管阻力、肺组织湿／ 干重比例均高于ＬＡｒｇ 组（ Ｐ＜ ０ ．０５） ,肺血管对乙酰胆碱反应性对照组较ＬＡｒｇ 组差, 血气分析肺静脉血氧分压对照组下降明显（ Ｐ ＜ ０－０１） ,ＬＡｒｇ 组肺组织形态轻微改变,而对照组肺组织水肿明显、渗出严重。　结论　ＬＡｒｇ具有改善离体兔肺脏的保存效果。     

氯离子通道阻断剂对氧化剂诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护 …

研究氯离子通道剂在氧化剂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用。方法以Ｈ２Ｏ２诱导肾小管上皮细胞株损伤，观察Ｃｌ＾－通道阻断剂对受损细胞ＬＤＨ释放量、ＡＴＰ和ＤＮＡ降解程度的影响。结果Ｃｌ＾－通道阻断可使受损伤的ＬＤＨ释放量下降、ＡＴＰ含量回收升和ＤＮＡ降解程度减轻。