FLT3-ITD阳性与阴性急性髓细胞白血病的实验室特征及预后比较

目的 比较伴FLT3基因突变(FLT3-ITD+)与不伴FLT3基因突变(FLT3-ITD-)的急性髓细胞白血病(AML)患者的实验室特征、疗效以及预后.方法 2010年10月-2012年10月收治的初诊AML患者93例,年龄10～66岁,包括21例FLT3-ITD+ AML(22.6％)和72例FLT3-ITD AML(77.4％,对照组)列入分析.比较两组患者的临床表现,HOX11、EVI、ETO、MLL、NPM1基因表达情况,细胞学抗原(CD34/CD38、淋巴抗原、CD7和CD4)表达情况,细胞遗传学表现(正常核型、复杂核型),2年无事件生存(EFS)和2年总生存(OS)情况.结果 FLT3-ITD+AML初诊时合并外周血白细胞增高(＞100×109/L)及出血者多于FLT3-ITD-组(P＜0.01,P=0.004),但两组在年龄、免疫表型及染色体异常等方面无明显差异.FLT3-ITD+AML完全缓解(CR)率28.57％,显著低于FLT3-ITD-AML的55.56％(P=0.03).FLT3-ITD+AML 2年无事件生存率为29.2％,低于FLT3-ITD-AML组(37.7％,P=0.04).FLT3-ITD+AML联合表达NPM1者占33.33％,明显高于FLT3-ITD-AML组(1.39％,P=0.001).FLT3-ITD+AML中表达NPM1的患者均未达完全缓解.结论 FLT3-ITD+AML易合并白细胞增高,完全缓解率低,无事件存活率低,预后差.     

流式细胞术分析106例急性髓细胞白血病免疫表型特点

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)的免疫表型特点。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门流式细胞术对106例初诊AML患者进行免疫表型分析。结果 106例AML患者中M_2最常见。(1)髓系抗原CD33、CD13和CD117在AML中高表达,阳性率依次为95.3%、92.5%和82.1%。CD64在M_3中阳性率最高为100%。CD14仅在M_4、M_5中表达,阳性率分别为60%和27.3%。(2)造血干/祖细胞分化抗原CD34、HLA-DR和CD38的阳性率分别为56.6%、54.7%和48.1%。M_3患者CD34和HLA-DR呈低表达。(3)淋系抗原CD4、CD56、CD7和CD19在AML患者中阳性率依次为34%、34%、20.8%和14.2%。结论 CD33、CD13和CD117是AML最常见的髓系标志。CD34、HLA-DR在M_3患者中低表达。     

FLT3基因突变对急性髓系白血病的影响

目的 探讨FMS样酪氨酸激酶3（FMS-like tyrosie kinase3,FL T3）基因突变对急性髓细胞样白血病（acute mye-loid leukemia,AML）的影响.方法 采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）结合直接测序和克隆测序对50例初诊AML患者FLT3突变进行研究,并结合临床资料进一步分析.结果 正常核型AML患者FLT3基因内部串联重复（internal tandem duplication,ITD）阳性检出率20％,高于异常核型（6.25％）;与野生组相比,FLT3-ITD（＋）突变患者初诊时白细胞计数、血红蛋白及骨髓原始细胞比例均高,缓解率低.结论 FLT3突变是正常核型AML患者的主要分子标志,其对疾病预后及靶向治疗具有重要意义.     

急性淋巴细胞白血病免疫表型分析及其临床意义

目的探讨急性淋巴细胞白血病免疫表型及其临床意义。方法对43例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫表型检测,记录结果并给予统计学分析。结果 CD34、HLA-DR表达均为阳性患者RR率30.00%,CD34、HLA-DR表达均为阴性患者RR率72.73%,提示CD34、HLA-DR表达均为阳性患者为临床RR率反而降低（P〈0.05）。结论临床医师应利用急性淋巴细胞白血病免疫分型特点准确诊断病情并采取有效措施,保障患者治疗效果及生命安全。     

CD7在非M3急性髓系白血病中表达及其意义

目的探讨CD7在非M3急性髓系白血病患者中的表达及其对患者预后的意义。方法选取2011—2015年收治的198例原发性非M3急性髓系白血病患者,应用流式细胞术检测骨髓样本中白血病细胞中CD7的表达,根据结果将患者分为CD7~+组与CD7~-组。回顾性分析两组患者的临床与实验室检查特点及生存状况等资料。结果 CD7在非M3急性髓系白血病患者中的表达比例为34.8%;CD7~+组发病年龄(49岁)高于CD7~-组(44岁)、白细胞数(29.5×10~9个/L)高于CD7~-组(11.7×10~9个/L)、遗传学危险度分层差于CD7~-组,差异均有统计学意义(P<0.05);但两组诱导缓解率、3年无复发存活率、5年总存活率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);移植可明显改善两组患者预后。结论 CD7与非M3急性髓系白血病部分高危因素相关,但不能作为独立预后因素。     

应用细胞周期阻断法分析初诊白血病患者骨髓及外周血微核率

目的：对初诊白血病患者骨髓及外周血进行微核分析。方法：应用细胞周期阻断法对54例初诊白血病患者骨髓及外周血与30例健康人外周血淋巴细胞进行微核检测。结果：54例初诊白血病患者骨髓及外周血淋巴细胞微核率（MNR）和微核细胞率（MCR）,与30例健康人外周血相比,P〈0.01。同一患者骨髓与外周血淋巴细胞MNR和MCR相比,P〉0.05。急性淋巴细胞白血病（ALL）、急性髓细胞白血病（AML）与慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓及外周血淋巴细胞MNR和MCR相比,P〈0.05。结论：白血病患者发病初期即存在染色体不稳定现象,不同类型白血病患者微核检测结果间有差异,推测与白血病的发病机制密切相关。     

乙型肝炎病毒表面抗原对实体肿瘤患者CIK细胞诱导培养及表型分析的影响

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原阳性患者与阴性患者细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer cells,CIK）体外培养过程中个细胞增殖情况和淋巴细胞亚群的变化。方法选取海军总医院2012年10月-2013年6月住院的肿瘤患者,共50例,根据乙型肝炎病毒表面抗原表达情况分为阴性组和阳性组。分别抽取患者外周血进行CIK细胞诱导培养,在第1、5、7、9、11、13、15天进行细胞活力检测并计数,第5、7、10、13、15天进行各细胞亚群的表达分析。结果两组患者CIK增殖情况单个时间点比较无显著性差异,但是在第15天的增殖倍数阳性组显著高于阴性组（280倍比180倍）;细胞亚群分析中CD3+T细胞、CD8+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3+CD56+T细胞比例均随培养时间延长而升高,CD4+T细胞、CD3+CD4+T细胞随培养时间延长而降低,阳性组更显著;其中CD8+T细胞和CD3+CD4+T细胞在两组间比较差异有统计学意义（P<005）。结论乙型肝炎病毒表面抗原阳性患者CIK细胞较阴性患者扩增能力更强,效应细胞表型表达更有利于杀伤作用的发挥。     

原代白血病细胞IL-6受体α表达的实验研究

目的：分析不同类型原代白血病细胞IL-6R基因及IL-6R蛋白的表达情况。方法：采用RT-PCR方法对取自29例白血病患者的原代白血病细胞和8例健康人外周血单个核细胞的IL-6R基因表达情况进行了分析，并应用原位杂交技术和免疫组织化学方法对细胞表面的IL-6受体蛋白进行了检测。结果：20例急性髓细胞白血病均明显表达IL-6R mRNA；9例急性淋巴细胞白血病中有2例为阳性，其余7例为阴性；8例正常人PBMC中6例阴性。2例有弱表达。免疫组化和原位杂交结果与RT-PCR实验结果相一致。结论：IL-6R可作为急性髓系白血病免疫治疗的候选靶位点。     

成人急性白血病初诊骨髓MRI及临床应用研究

目的：研究成人急性白血病（acute leukemia,AL)患者初诊自然病程状态下骨髓的MRI表现及其临床应用价值。方法：搜经细胞形态学及免疫表型综合分析确诊的成人AL54例,其中髓细胞白血病（AML）28例、急性淋巴细胞白血病（ALL）26例,行骨盆及股骨中上段骨髓MRI,采用SE序列及短时反转恢复（STIR）序列行冠状面扫描,选取15例正常志愿者作为对照组,搜集AL患者同期骨髓象及血常规结果与MRI对比分析。结果：患者骨髓MRI表现按浸润程度和范围分为5级,AML患者23（82％）例属Ⅰ-Ⅲ级病例,2型患者MRI分级总体的分布差异有非常显著性意义（U＝4．233）,P＜0．01）。分别比较2型AL患者各临床诊断指标,显示2屠 骨髓象白血病细胞计数（BMT）、外周血白血病细胞计数（PBT）、外周血白细胞计数（WBC）之间差异有显著性意义（t值分别为4．336、2．008、3．420,P值均＜0．05）。MRI分级与临床诊断指标比较,两者间具有非常显著的一致性（U＝6．099,P＜0．01）。,MRI分级为Ⅳ级的AML患者,缓解率较Ⅰ-Ⅲ级者低（P＜0．05）,MRI分级为Ⅴ级的ALL患者与Ⅳ级患者缓解率的差异无显著性意义（P＞0．1）。结论MRI能反映2型AL不同的骨髓浸润特征,能为AL确诊提供影像学依据。初诊AML患者骨髓MIR对病情的评估,缓解的预测有重要的临床应用价值。     

β-arrestin1和β-arrestin2在白血病中的表达及意义

目的探讨β-arrestin1和β-arrestin2在白血病患者中的表达及意义。方法收集初发白血病患者95例(Leu组),根据白血病类型不同分为:急性髓细胞白血病(AML)亚组(30例),急性淋巴细胞白血病(ALL)亚组(44例)和慢性粒细胞白血病(CML)亚组(21例);以非恶性血液病患者36例(NL组)作为正常对照。收集患者的骨髓和外周血标本,分离单个核细胞。采用实时定量PCR法检测β-arrestin1、β-arrestin2的mRNA表达,采用Western blotting和免疫荧光法检测β-arrestin1、β-arrestin2蛋白表达的变化。结果Leu组和NL组的骨髓和外周血单个核细胞中,均检测到β-arrestin1、β-arrestin2mRNA和蛋白的表达,Leu组显著高于NL组(P<0.01)。与NL组比较,AML、ALL和CML各亚组的骨髓和外周血中β-arrestin1、β-arrestin2的mRNA和蛋白表达水平均有明显升高(P<0.05或P<0.01),但三个亚组间无明显差异(P>0.05)。结论白血病患者骨髓和外周血单个核细胞中β-arrestin1、β-arresti...     

前列腺原发淋巴瘤转白血病研究

 目的 提高对前列腺原发淋巴瘤转白血病的认识.方法 对1例前列腺原发淋巴瘤转白血病临床资料进行分析,并对其骨髓细胞做细胞免疫学、遗传学和分子生物学检查.结果 患者经病理检查初诊为前列腺T细胞淋巴瘤,3个月后骨髓细胞形态学提示白血病,细胞免疫分型考虑急性双系列白血病(T-淋巴细胞、髓系白血病),染色体核型分析提示复杂变异,融合基因筛查结果SET/CAN阳性、BCR/ABL及其他融合基因阴性,IgH基因重排阳性, TCRγ、TCRδ阴性.最后确诊为急性难定系列白血病(acute leukaemias of ambiguous lineage,ALAL).结论 前列腺原发淋巴瘤罕见,该病进展快,预后差,在前列腺疾病的诊断时应考虑到它的可能并及早明确诊治.     

First demonstration of leukemia imaging with the proliferation marker 18F-fluorodeoxythymidine

Acute myeloid leukemia (AML) is a neoplasm of hematopoietic stem cells with partial or complete loss of the ability to differentiate but with preserved proliferation capacity. The aim of our study was to evaluate if the in vivo proliferation marker 3'-deoxy-3'-18F-fluorothymidine (FLT) is suitable for visualizing leukemia manifestation sites and if 18F-FLT is a surrogate marker for disease activity. METHODS: In this pilot study, 10 patients with AML underwent pretherapeutic imaging with 18F-FLT PET or 18F-FLT PET/CT. The biodistribution of 18F-FLT was assessed 60 min after intravenous injection of the radiotracer. Standardized uptake values were calculated for reference segments of bone marrow, spleen, and normal organs. 18F-FLT PET in 10 patients with benign pulmonary nodules and the absence of malignant or inflammatory disease served as controls. RESULTS: Retention of 18F-FLT was observed predominantly in bone marrow and spleen and was significantly higher in AML patients than in controls (mean 18F-FLT SUV in bone marrow, 11.5 and 6.6, P < 0.05; mean 18F-FLT SUV in spleen, 6.1 and 1.8, P < 0.05). Outside bone marrow, focal 18F-FLT uptake showed extramedullary manifestation sites of leukemia in 4 patients (meningeal disease, pericardial, abdominal, testicular, and lymph node), proven by other diagnostic procedures. CONCLUSION: This pilot study indicated that PET using 18F-FLT is able to visualize extramedullary manifestation sites of AML and reflects disease activity. Because 18F-FLT uptake in bone marrow is caused by a combination of both neoplastic and normal hematopoietic cells, the correlation of 18F-FLT uptake in bone marrow and leukemic blast infiltration did not reach statistical significance.     

NPM1基因突变在急性髓系白血病中的作用

 目的 探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中NPM1基因突变发生情况,并了解其临床特征及预后.方法 采用基因组DNA-PCR方法扩增39例初发AML患者骨髓单个核细胞NPM1基因,直接测序法检测AML患者NPM1基因第12外显子的突变情况.结果 (1)39例初发AML患者中NPM1突变7例(17.9%),其中A型突变6例,B型突变1例.(2) NPM1突变在22例染色体正常核型AML中的发生率27.3%(6/22),显著高于异常核型7.7%(1/13)(P<0.01).(3)临床数据显示NPM1基因突变患者外周血白细胞计数高于野生型患者,NPM1基因突变患者具有较高的临床完全缓解率(CR).结论 NPM1基因突变是AML尤其是正常核型AML患者常见的分子学异常,单纯NPM1基因突变患者外周血白细胞数比例较高,预后较好.     

急性粒细胞白血病基因表达谱的研究

目的在急性粒细胞白血病M2a亚型的治疗中,首次完全缓解持续时间(CCR)是和预后相关的最重要的指标。运用基因芯片技术,研究拥有不同CCR病人的基因表达谱差异,从而寻找影响AML预后相关基因。方法收集3例CCR6个月内复发(A组)和3例CCR12个月以上(B组)的AML患者初诊时骨髓单个细胞,纯化mRNA,分别用Cy3和Cy5标记,和Agilent Human1B寡核苷酸基因芯片杂交,研究基因表达谱差异。结果在检测的20173个基因中,筛选出共同差异表达基因21个,其中在A组各例都表达上调的基因有10个,同时表达下调的基因有11个。结论 APP等21个基因与采用标准化疗的AML首次完全缓解持续时间有关,这些基因可能成为早期诊断难治性AML和判断预后的指标。     

急性早幼粒细胞白血病的临床和实验室观察

总结了急性早幼粒细胞白血病发病时的临床特点：全血细胞减少，尤其是血小板减少，及多部位的出血表现；骨髓细胞以含粗大而丰富的嗜天青颗粒的早幼粒细胞为主要细胞成分，细胞化学反应过氧化酶强阳性和非特异性酯酶阳性又可被氟化钠抑制，而区别于急性单核细胞类型的白血病。