GPC5基因表达水平与肺腺癌淋巴结转移

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)在非小细胞肺腺癌中的表达水平及其临床意义.方法 应用Real-time PCR的方法检测134例非小细胞肺腺癌组织及其对应的正常肺组织中的GPC5基因的表达情况.应用免疫组化方法验证GPC5蛋白在人肺腺癌组织芯片(包含75对腺癌组织标本)中的表达情况.结果 (1) GPC5 mRNA表达水平在非小细胞肺腺癌组织中较正常肺组织显著下降(P＜0.001).(2)有淋巴结转移组较无淋巴结转移组GPC5 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).(3) Spearman相关性分析显示GPC5 mRNA表达水平与淋巴结转移、病理分期和分化程度呈显著正相关(P＜0.05).(4) Kaplan-Meier生存曲线分析示GPC5蛋白表达与肺腺癌患者长期预后相关(P =0.036).结论 GPC5的表达水平与非小细胞肺腺癌的淋巴结转移密切相关,可作为评估预后的辅助标志物.     

检测甲状腺滤泡状腺癌的远处转移

甲状腺滤泡状腺癌一般预后良好,但由于常伴随远处转移,临床治疗方案不易决定.作者设想卵磷脂相关的麦芽凝集素(WGA)结合在组织上以及涎酸含量与远处转移的发生有联系.作者选择160例甲状腺滤泡状腺癌的手术病人,常规切取标本作病理检查,用UE凝集素-1卵磷脂和第8因子相关抗原染色标本以观察血管受侵程度;第Ⅰ型指血管受侵呈扩张型,局限于肿瘤包膜的外方;第Ⅱ型指浸润邻近包膜;第Ⅲ型指浸润至包膜下或肿瘤之内.分别测血清涎酸32例和肿瘤组织涎酸10例,血清涎酸的正常值为44～71mg/dl.应用WGA卵磷脂检查结合肿瘤细胞的WGA糖蛋白.结果:在160例中,观察到血管受侵共95例(59.4%),计Ⅰ型25例(26.3%)、Ⅱ型47例(4.95%)和Ⅲ型23例(24.2%).共有远处转移25例,其中     

肾切除后肾腺癌的远处转移

肾腺癌容易转移,但还不清楚手术如何影响其转移方式。作者通过尸检记录对肾腺癌行肾切除后的转移情况进行调查研究。分析1828例肾腺癌患者手术与肿瘤转移率的关系,这些病人中有424例做了肾切除,其中31例未发生转移,比未行肾切除组少一些;40例有单一器官转移,与未行肾切除组几乎相同。这二组中转移发生率与性别和患肾为哪侧无关,但与年龄有关,肾切除组中70～79岁这一年龄组转移发生率最低。将1571例发生转移者分为二组,肾切除组393例,     

下调PDEF表达可增强前列腺癌细胞的侵袭力及间质细胞基因的表达

上皮特异性ETs转录因子PDEF在前列腺癌和乳腺癌中发挥重要作用,但具体功能尚未明了。前列腺癌中PDEF通过与雄激素受体及NKX3.1相互作用,参与调节前列腺特异性抗原(PSA)的表达。抗增殖剂可下调PDEF的表达。本研究中作者发现下调PDEF的表达可引起前列腺癌细胞形态学改变、细胞迁移和侵袭能力增强。提示其可能参与调节转化生长因子-β(TGF-β)的功能,诱导发生上皮细胞-间质转化(EMT)。作者证实抑制PDEF表达可导致TGF-β信号通路相关基因的转录,从而促进肿瘤细胞的迁移、侵袭、粘附以及上皮分化。本研究证实PDEF是前列腺癌细胞…     

封闭乳腺癌转移抑制基因1的表达可抑制乳腺癌细胞MCF-7的转移

目的 构建乳腺癌中乳腺癌转移抑制基因1( BRMS1)反义基因重组腺病毒载体,并观察其对乳腺癌细胞MCF-7转移能力的影响。方法 应用基因重组技术将BRMS1反义基因构建于腺病毒载体pAD-X,转染293包装细胞得到高滴度重组腺病毒,并用real-time聚合酶链反应(PCR)进行BRMS1基因表达的验证。将重组腺病毒pAD-aBRMS1感染MCF-7细胞后,应用Tran-°swell小室法观察对细胞侵袭和运动能力的影响。结果 酶切结果与预期相符,real-time PCR可检测到感染BRMS1反义基因重组腺病毒后MCF-7细胞没有BRMS1基因表达。病毒转染后Transwell 小室可见,MCF-7细胞的侵袭和运动能力均受到显著的抑制(P值均＜0.01)。结论 重组反义BRMS1腺病毒载体正确构建,其对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭和运动都有抑制作用。     

转移抑制基因nm23在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：探讨转移抑制基因ｎｍ２３与膀胱移行细胞癌转移之间的关系。方法：应用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ技术分析１２例膀胱移行细胞癌和６例肉眼未见异常的癌旁膀胱粘膜ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的表达。结果：膀胱移行细胞组ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平较癌旁膀胱粘膜组显著升高,有盆腔淋巴结转移的膀胱移行细胞癌组的ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达显著高于无盆腔淋巴结转移组（Ｐ〈０．０５）,而ｎｍ２３－Ｈ２     

Runt相关转录因子2蛋白表达与肺腺癌侵袭转移的关系

目的探讨肺腺癌组织中Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白的表达与肿瘤侵袭转移的关系。 方法收集49例肺腺癌患者的临床资料及病理标本(包括肺腺癌组织、癌旁组织及正常肺组织)。应用免疫组织化学和Western blotting方法检测各相关组织中Runx2蛋白的表达,对Runx2蛋白表达与临床病理参数的关系进行统计学分析。 结果Runx2蛋白在肺腺癌组织、癌旁组织、正常肺组织中的阳性表达率分别为57.1%、8.2%、0,差异具有统计学意义(P<0.001);Runx2蛋白高表达与浸润性腺癌(26/34,76.47%)、有淋巴结转移(13/15,86.67%)、低分化(14/14,100%)、随访期内出现复发转移(8/8,100%)显著相关(P<0.001,P＝0.006,P＝0.006,P＝0.007)。 结论肺腺癌组织中Runx2蛋白高表达,且与肿瘤的低分化、高侵袭转移特性及复发的关系密切。     

新的肿瘤转移抑制基因LASS2在不同侵袭潜能的膀胱癌细胞中表达的体外研究

目的探讨新发现的肿瘤转移抑制基因人源性长寿保障基因Ⅱ型(homo sapiens longevity assurance homologue2,LASS2)与人膀胱癌细胞侵袭潜能的关系。方法通过细胞生长曲线和体外侵袭实验,确定膀胱癌BIU-87、EJ、T24和EJ-M3细胞的增殖和侵袭能力;运用实时定量PCR法和Western blot法检测4株细胞中LASS2基因的表达。结果 4株膀胱癌细胞中,EJ-M3的增殖和侵袭能力最强;增殖和侵袭能力高的细胞系EJ-M3和BIU-87的LASS2mRNA表达降低(P<0.001),而在低转移能力的人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中则相对较高表达。结论 LASS2基因表达的降低,可能与膀胱癌细胞的增殖和侵袭有关。     

凋亡抑制基因x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因在肝癌细胞中的表达及临床意义

目的探讨x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因（XIAP）mRNA及蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况，及其与肝癌发生的关系。方法肝癌患者手术切除标本10例，应用半定量逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测肝癌组织和癌旁组织细胞XIAP mRNA基因的相对表达量，并通过免疫组织化学SP法检测10例肝癌组织和癌旁组织标本XIAP蛋白的表达情况。结果（1）半定量RT-PCR显示：XIAP基因在肝癌组织中均呈高表达，相对表达量为3．211±2．43，而在对应的癌旁组织中呈低表达或无表达，相对表达量为1．947±1．890，两组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）免疫组织化学及图像分析结果显示：在肝癌组织和癌旁组织中XIAP蛋白平均灰度扫描值分别为161．800±29．470和144．240±26．290，两组之间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论XIAP在肝癌中的表达明显增高，可能在肝癌的发生、发展过程中发挥重要作用。     

siRNA沉默HYAL1基因表达对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

目的研究RNA干扰对透明质酸酶基因HYAL1的表达以及对人乳腺癌细胞侵袭力的影响。方法体外化学合成HYAL1序列特异性双链RNA（dsRNA）,在脂质体（SiPORT Lipid）的介导下转染人人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MDA—MB-453S、ZR-75和ZR-75-30。荧光共聚焦显微镜下观察转染效率,RT—PCR分析HYAL1 mRNA的表达,体外实验测定肿瘤细胞穿透matrigel的能力。结果4种乳腺癌细胞株的HYAL1基因的表达均被HYAL1-siRNA有效封闭,HYAL1 mRNA相对水平明显降低（P〈0．05）。转染48h后4种人乳腺癌细胞的侵袭力均明显降低（P〈0．01）。结论HYAL1-siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞株HYAL1基因的表达,降低人乳腺癌细胞的侵袭力。     

转移抑制基因Kai1在前列腺癌中的表达

目的了解转移抑制基因Ｋａｉ１蛋白在前列腺癌（ＰＣａ）中的表达。方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法分别测定５例正常前列腺、１０例前列腺增生症（ＢＰＨ）和３４例ＰＣａ（均为腺癌,临床Ｃ期或Ｄ期）新鲜前列腺组织中Ｋａｉ１蛋白的表达。结果Ｋａｉ１蛋白分布在腺上皮细胞膜的细胞与细胞连接部,正常前列腺和ＢＰＨ的Ｋａｉ１蛋白染色连续均匀一致,而在ＰＣａ则染色分布不连续,并且染色强度较ＢＰＨ明显降低,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。癌细胞Ｋａｉ１蛋白染色强度与病理分级呈负相关（Ｐ＜０．０５）,与临床分期无相关（Ｐ＞０．０５）。结论Ｋａｉ１蛋白表达下降可能预示ＰＣａ转移,成为临床判断ＰＣａ预后的分子指标。     

Cortactin过表达对结肠癌细胞转移能力的影响

目的:通过诱导皮层肌动蛋白(cortactin)的过表达分析其在结肠癌细胞侵袭迁移以及肝转移过程中的作用。方法:构建含CTTN基因和绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体,转染293T细胞。取含CTTN基因和绿色荧光蛋白的病毒上清液转染结肠癌细胞株SW1116使cortactin稳定表达。蛋白印迹实验检测cortactin的表达,通过Transwell实验评估结肠癌细胞侵袭迁移能力的改变。利用SW1116细胞株使裸鼠皮下成瘤,取肿瘤组织种植新一批裸鼠结肠壁并观察结肠癌肝转移的情况。结果:成功构建cortactin过表达的SW1116细胞。侵袭和迁移实验中,过表达组穿膜细胞数分别为(147±12)个、(286±17)个,而阴性对照组为(83±10)个、(112±11)个,空白对照组为(75±7)个、(103±9)个,后两组与过表达组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:上调cortactin的表达能显著促进结肠癌细胞的侵袭迁移和肝转移能力,提示cortactin在结肠癌的转移过程中发挥重要作用。     

EPHX2基因过表达质粒的构建及意义探讨

目的：构建LETO、OLETF大鼠EPHX2基因过表达重组质粒,观察其在人胚肾细胞（human embryonic kidney 293T,HEK293T）中的表达,及对HEK293T细胞NF-κBp65 mRNA表达的影响.方法：提取LETO、OLETF大鼠肾脏组织总RNA,RT-PCR方法扩增编码EPHX2基因的cDNA,克隆至T-载体并测序,经亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建两型大鼠EPHX2过表达重组质粒,酶切鉴定并测序,采用磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞系.Western Blot方法检测EPHX2融合蛋白的表达,RT-PCR方法检测EPHX2基因过表达对HEK293T细胞NF-κBp65表达水平的影响.结果：（1）两个重组质粒均含有完整EPHX2 cDNA,测序证实OLETF型大鼠较LETO型大鼠EPHX2重组质粒有五个核苷酸位点的改变.（2）转染HEK293T细胞后,Western Blot证实融合蛋白成功表达;（3）TNF-α刺激增加HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达;（4）EPHX2基因过表达促进TNF-α刺激后的HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达升高（P〈0.05）.结论：成功构建LETO型及OLETF型大鼠EPHX2过表达重组质粒（L-EPHX2/V5、O-EPHX2/V5）,可在HEK293T细胞中过表达.为进一步探讨EPHX2基因在糖尿病肾病发生发展中的作用奠定了基础.     

microRNA-130a抑制KGN细胞FOXL2基因的表达及对细胞增殖的影响

目的:研究外源性microRNA-130a在卵巢颗粒细胞KGN中过表达对FOXL2基因表达的影响,探索microRNA-130a对KGN细胞增殖的影响。方法:人工设计合成靶向FOXL2基因的microRNA-130a模拟物,脂质体法将microRNA-130a模拟物转染入KGN细胞中,Trizol法和RIPA蛋白裂解法分别获取高纯度的细胞总RNA和总蛋白,实时荧光定量聚合酶联反应(FQ-PCR)检测microRNA模拟物转染后细胞中FOXL2基因mRNA表达水平,Western Blot检测FOXL2蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测microRNA-130a转染后KGN细胞的增殖情况。结果:成功转染KGN细胞后,阴性对照组FOXL2基因mRNA和蛋白的表达水平与空白对照组相比无明显的差异(P0.05),mi R-130a转染组能显著抑制FOXL2 mRNA和蛋白的表达,与空白对照组和阴性对照组相比均有统计学差异(P0.05)。MTT法检测各组KGN细胞的OD值及细胞增值率,microRNA-130a转染后能明显促进KGN细胞的增殖,与与空白对照组和阴性对照组相比均有统计学差异(P0.05)。结论:外源性的mi R-130a对FOXL2基因mRNA和蛋白表达有明显的抑制作用,且能明显促进KGN细胞的增殖。     

转移抑制因子1在胆管细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨转移抑制因子1(MTSS1)在胆管细胞癌组织中的表达及临床意义。方法:前瞻性收集2012年1月—2014年1月收治的89例胆管细胞癌患者作为研究组,同时收集因胆结石行胆囊切除的患者89例作为对照组。比较两组患者病理组织中MTSS1表达的差异,并进一步分析MTSS1与胆囊癌患者临床病理因素及预后的关系。结果:与对照组比较,研究组患者MTSS1阳性率明显降低(20.22%vs.58.43%,P=0.000),MTSS1阳性细胞百分比显明降低(9.47%vs.43.95%,P=0.000)。与MTSS1阳性的胆管细胞癌患者比较,MTSS1阴性者肿瘤大小明显增加(3.84 cm vs.2.46 cm,P=0.000)、肿瘤分期为III或IV期的患者比例明显上升(70.42%vs.27.78%,P=0.001)、淋巴结转移率明显增加(77.46%vs.44.44%,P=0.028)、2年内病死率明显增高(42.25%vs.16.67%,P=0.045)、肿瘤细胞为低分化者明显增加(P=0.001)。Logistic回归分析显示MTSS1阴性是胆管细胞癌患者死亡的独立危险因素(P=0.000),Wilcoxon检验显示MTSS1阳性患者生存率明显高于MTSS1阴性的患者(P=0.041)。结论:MTSS1表达下降或缺失与胆管细胞癌的发生和发展密切相关。     

乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体的构建及鉴定

目的构建乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)真核表达载体pcDNA3.1/myc-BRMS1,为研究抑制恶性肿瘤转移的机制奠定基础。方法设计含有HindⅢ和XhoⅠ酶切位点的一对引物,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人乳腺癌细胞株MCF-7中扩增到BRMS1的cDNA基因片断,经回收、纯化、酶切后,连接到质粒pcDNA3.1/myc-His( )A上,鉴定正确后并转染人胚肾细胞HEK-293进行Western blot验证其是否表达。结果琼脂糖凝胶电泳及基因测序证实重组的pcDNA3.1/myc-BRMS1cDNA的碱基组成与GenBank中的人BRMS1cDNA的基因片断组成相同。结论成功构建了乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体并测序鉴定。     

T_1、T_2肺鳞癌及腺癌淋巴结转移特点及其临床意义

目的　研究T1、T2 肺鳞及腺癌淋巴结转移频度、分布范围及特点 ,为广泛清扫提供依据。　方法　按Naruke肺癌淋巴结分布图对 2 5 4例T1、T2 肺鳞癌及腺癌施行了手术切除及广泛肺内、叶间及纵隔淋巴结清扫术并对其进行统计分析。　结果　清除淋巴结 16 85组。N1淋巴结转移率 2 0 0 % ,N2 淋巴结转移率为 10 2 %。T1、T2 间淋巴结转移率差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。T1鳞癌无N2 转移 ,N2 转移在鳞癌、腺癌分别为 2 2 0 %和 40 9% ,差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。6 4 3%的鳞癌为某 1组N2 转移 ,腺癌≥ 3组转移占 46 2 % ,跳跃式转移占N2 转移的 5 7 5 %。N2 阳性上叶肺癌下纵隔转移占 13 6 % ,N2 阳性的下叶肺癌上纵隔转移占 5 1 6 %。　结论　随着瘤体增大 ,淋巴结转移频度增加 ,腺癌比鳞癌淋巴结转移更加活跃 ,任何部位的肺癌都可跨区域纵隔转移。除T1鳞癌外 ,只有广泛清扫同侧肺内及纵隔淋巴结才能达到根治。     

转移抑制基因nm23—H1在人非小细胞肺癌中的表达研究

目的探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平与肺癌发生、发展和转移的关系。方法应用免疫组织化学法研究人非小细胞肺癌细胞中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平。结果ｎｍ２３－Ｈ１在肺癌组织中的表达水平（５４．０３％）明显低于癌旁正常肺组织（７３．４８％，Ｐ＜０．０１）。有淋巴结转移的原发癌ｎｍ２３－Ｈ１表达水平明显低于无淋巴结转移的原发癌（Ｐ＜０．０１）；转移癌组织表达水平明显低于原发癌组织（Ｐ＜０．０１）；低分化肺癌明显低于中－高分化肺癌（Ｐ＜０．０１）。结论ｎｍ２３－Ｈ１基因可能参与肺癌的发生、发展和转移过程的调控，ｎｍ２３－Ｈ１基因表达水平降低，预示肺癌的转移和预后不良。