肝缺血再灌注后肺损伤机制及乌司他丁保护作用的实验研究

目的 研究肝缺血再灌注后肺损伤的机制以及乌司他丁的保护作用.方法 新西兰白兔24只,随机分为3组,每组8只.假手术组：麻醉后分离肝门,游离肝动静脉,关腹,120 min后处死.缺血再灌注组：夹闭左侧叶、左中央叶、右中央叶的血管,缺血60 min后再灌注60 min后立即处死.乌司它丁组同缺血再灌注组制作部分肝缺血再灌注模型,但于阻断前15 min注射乌司它丁2万U/kg.测定阻断前（T0）、阻断50min（T1）、再灌注10min（T2）、再灌注60min（T3）四个时点动脉血压、动脉血血气分析和TNF-α、IL-8水平.肝肺病理切片光镜观察、肺干湿重比、肺灌洗液蛋白含量及磷脂水平、肺组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力、髓过氧化物酶（MPO）活力、肺组织SP-A mRNA及SP-A蛋白表达水平.结果 病理结果显示,乌司它丁组缺血再灌注肺损害较轻.缺血再灌注组和乌司它丁组pH阻断后降低,TNF-α和IL-8升高,TNF-α、IL-8水平、干湿重比、MDA、MPO高于假手术组,灌洗液蛋白浓度、PC、PG含量、SOD、SP-A蛋白表达低于假手术组（P＜0.05）,而乌司它丁组各项结果要好于缺血再灌注组（P＜0.05）.结论 肝缺血再灌注会导致肺损伤,缺血前给予乌司它丁可以减轻肺损伤.     

乌司他丁对大鼠机械通气肺损伤时γ-氨基丁酸信号通路的影响

目的探讨乌司他丁对大鼠机械通气引起的呼吸机相关性肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)时γ-氨基丁酸(GABA)信号通路的影响。方法选取健康成年雄性Wister大鼠36只,采用随机数字表法分为三组:正常对照组(C组)、机械通气肺损伤组(VILI组)和机械通气肺损伤+乌司他丁处理组(UTI组),每组12只。VILI组与UTI组采用VT40ml/kg机械通气4h的方法制备大鼠VILI模型。机械通气前1h,UTI组腹腔注射乌司他丁1×10~5 U/kg,C组和VILI组给予等容量生理盐水。收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),检测BALF中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的浓度;取肺组织,检测湿/干重比(W/D)、肺组织IL-1β、TNF-α和ICAM-1 mRNA的表达;采用免疫组化与Western blot法检测肺组织GAD与GABAA受体的表达量,观察病理学结果并进行肺损伤评分。结果与VILI组比较,UTI组W/D(6.7±2.4vs.8.5±2.3)、肺损伤评分[(6.9±2.3)分vs.(11.8±2.7)分]明显降低(P0.05);BALF中IL-1β[(56±11)ng/L vs.(77±15)ng/L]、TNF-α[(105±29)ng/L vs.(158±37)ng/L]及ICAM-1[(205±46)ng/L vs.(293±61)ng/L]浓度明显降低(P0.05);肺组织IL-1β(1.81±0.26vs.2.58±0.34)、TNF-α(1.61±0.15vs.2.94±0.27)、ICAM-1(1.74±0.27vs.2.79±0.31)mRNA表达量明显降低(P0.05);GAD(0.44±0.08vs.0.18±0.04)和GABAA(0.30±0.09vs.0.15±0.04)受体表达量明显增加(P0.05)。结论乌司他丁可减轻大鼠机械通气引起的呼吸机相关性肺损伤,其机制可能与激活γ-氨基丁酸信号通路有关。     

肺泡巨噬细胞Toll样受体4在肝脏缺血再灌注损伤小鼠肺组织中的表达及意义

目的 探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体4在肝脏缺血再灌注损伤小鼠肺组织中的表达及意义.方法 以野生型小鼠C3h/Heouj及TLR4缺失小鼠C3h/Hej复制全肝脏缺血再灌注损伤模型,分别于缺血20 min再灌注1 h,6 h时经支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)获取肺泡巨噬细胞和肺泡灌洗液,采用免疫组织化学法检测肺泡巨噬细胞表面TLR4的表达,并以鲎试剂内毒素检测试剂盒和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测灌洗液中内毒素及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.同时检测肺组织湿/干重比值、肺组织髓过氧化物酶(myeloperosidase,MPO)的含量以及计算肺组织学评分.结果 (1)与假手术组小鼠相比,野生型小鼠(C3h/Heouj)在缺血再灌后各时间点肺泡巨噬细胞Toll样受体4蛋白表达升高,6 h强于1 h,且支气管肺泡灌洗液中TNF-α的水平明显升高,肺组织湿/干重比值持续升高,MPO的含量持续增加(P＜0.05).(2)与C3h/Heouj小鼠相比,C3h/Hq组小鼠在再灌注后支气管肺泡灌洗液中TNF-α的含量明显降低(P＜0.05),肺损伤明显减轻(P＜0.05),肺组织湿/干重比值及MPO的含量明显下降(P＜0.05).(3)各组小鼠缺血再灌注后1 h肺泡灌洗液中内毒素水平与假手术组相比,差异无统计学意义(P＜0.05),而在6 h时则明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 小鼠全肝缺血再灌注过程中,肺泡巨噬细胞表面Toll样受体4激活,并与肺功能损伤有关.     

姜黄素抑制TLR4/HMGB1通路保护脂多糖诱导急性肺损伤的作用

目的探讨姜黄素对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤的保护作用及相关机制。方法将24只SD大鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+姜黄素组,每组8只。检测肺损伤指标(氧分压、肺干湿重比、肺病理评分)、肺组织炎症反应程度[肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1以及肺组织中Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平]。结果LPS组氧分压显著低于对照组(P<0.05),而肺干湿重比、肺病理评分、TNF-α、IL-6、MCP-1、TLR4、HMGB1表达水平显著高于对照组(P<0.05);LPS+姜黄素组氧分压高于LPS组(P<0.05),肺干湿重比、肺病理评分、TNF-α、IL-6、MCP-1、TLR4、HMGB1表达水平显著低于LPS组(P<0.05)。结论姜黄素可能通过抑制TLR4/HMGB1通路,降低肺炎症反应程度,发挥保护LPS诱导急性肺损伤作用。     

小鼠全肝缺血再灌注时肺泡巨噬细胞TLR2的激活与肺损伤的机制

目的：探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体2（TLR2）的激活机制及其在肝脏缺血再灌注（HIR）中肺损伤的意义。方法：用野生型小鼠C3h/Heouj和TLR4缺失小鼠C3h/Hej建立HIR动物模型。于再灌注1，6，12h后经支气管肺泡灌洗液获取肺泡巨噬细胞，采用荧光定量PCR方法检测TLR2/4mRNA的表达。同时检测支气管肺泡灌洗液中内毒素及肿瘤坏死因子（TNF）的水平，肺组织湿干重比值，肺组织髓过氧化物酶的浓度，并进行肺组织学评分。结果：C3h/Heouj组HIR缺血再灌后各时点肺泡巨噬细胞TLR2/4mRNA表达升高，TLR2mRNA表达持续升高，TLR4mRNA6h达到最高值。同时C3h/Heouj组HIR后支气管肺泡灌洗液中TNF水平明显升高，肺损伤加重，肺组织湿干重比值持续升高，肺组织髓过氧化物酶持续增加(P<0.05)。C3h/Hej组HIR后TLR2mRNA表达仅轻度升高，且支气管肺泡灌洗液中TNF水平低于C3h/Heouj组(P<0.05)，肺损伤轻于C3h/Heouj组(P<0.05)。结论：HIR可致肺泡巨噬细胞表面TLR4的激活，可上调TLR2的表达，从而可加重HIR时的肺损伤。     

乌司他丁对大鼠全肝缺血-再灌注肺损伤的保护作用

目的 观察乌司他丁对大鼠全肝缺血-再灌注(I-R)肺损伤的保护作用.方法 24只SD大鼠随机分为全肝缺血-再灌注组(I-R组)、乌司他丁组(U组)及假手术对照组(C组),每组8只.检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量、肺组织干/湿质量比(D/W)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,并以逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测三组大鼠肺组织基质金属蛋白酶(MMP)14 mRNA的相对表达量.结果 与U组和C组比较,I-R组大鼠肺组织BALF总蛋白和MPO含量明显增高,肺组织D/W和SOD显著降低.MMP14 mRNA相对表达量显著增高(P<0.05).结论 乌司他丁可减轻全肝I-R肺损伤;抑制肺组织MMP14 mRNA的表达可能是其机制之一.     

雷公藤甲素对内毒素致大鼠急性肺损伤的影响

目的 评价雷公藤甲素对内毒素(LPS)致大鼠急性肺损伤的影响.方法 雄性SD大鼠65只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组,对照组(C组,n=5):尾静脉注射生理盐水,同时腹腔注射1％二甲基亚砜(DMSO);LPS组(L组,n=15)和不同剂量雷公藤甲素组(TP1～3组,n=15):尾静脉注射LPS 5 mg/kg,同时腹腔分别注射1％ DMSO和雷公藤甲素25、50、100μg/kg.于给药前1h和给药后1、3、6、12 h时行动脉血气分析;给药后12 h时心脏采血后处死大鼠,取肺组织,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法测定血清和BALF中TNF-α浓度;测定肺组织湿重(W)和干重(D),计算W/D比;光镜下观察肺组织病理学结果,并进行弥漫性肺泡损伤评分(DAD评分);采用荧光定量PCR法测定肺组织Toll样变体4(TLR4) mRNA表达;采用Western blot法测定肺组织TLR4蛋白表达.结果 与C组相比,L组和TP1～3组给药后3、6和12 h时PaO2下降,DAD评分及W/D比升高,L组、TP1组和TP2组血清和BALF中TNF-α浓度升高,肺组织TLR4 mRNA及其蛋白表达上调,TP3组血清和BALF中TNF-α浓度降低,肺组织TLR4mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.05).与L组和TP1组相比,TP2组和TP3组给药后6和12 h时PaO2升高,DAD评分、W/D比、血清和BALF中TNF-α浓度降低,肺组织TLR4 mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.05).与TP2组相比,TP3组血清和BALF中TNF-α浓度降低,肺组织TLR4 mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.05).L组和TP1组间、TP2组和TP3组间血气指标、DAD评分及W/D比较差异无统计学意义(P＞0.05).TP1～3组肺组织病理学损伤较L组减轻.结论 雷公藤甲素可减轻LPS诱发的大鼠急性肺损伤,且与剂量有关,其机制与抑制TLR4表达的上调,减少TNF-α的释放有关.     

一氧化氮对重症急性胰腺炎肺损伤的作用及其机制

目的研究一氧化氮(NO)减轻重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的机制。方法采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠注射制造SAP大鼠模型。动物分为假手术组、胰腺炎组、L-精氨酸(L-Arg)治疗组和氯喹(CQ)治疗组。硝酸还原酶法检测肺组织NO的浓度变化,实时定量PCR(RT-PCR)检测肺组织TLR(Toll-like receptor)2／4 mRNA表达变化。结果与假手术组比较,SAP大鼠肺组织NO浓度降低,肺损伤加重;肺组织TLR2／4 mRNA表达增高,肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达升高(P<0．05)。给予不同剂量L-Arg治疗后,肺组织NO浓度明显升高,肺损伤程度减轻;TLR2／4 mRNA表达降低,肺组织TNF-α表达降低(P<0．05)。给予CQ抑制肺组织TLR2／4 mRNA表达后,肺组织内NO浓度升高,肺损伤减轻,TNF-α表达降低(P<0．05)。结论NO可以明显抑制SAP肺组织TLR2／4 mRNA的表达,减少细胞因子的合成及释放,从而减轻肺组织损伤。     

槲皮素对重症急性胰腺炎相关性肺损伤肺泡中性粒细胞TLR4/NF-κB通路的影响

目的探讨槲皮素(Quercetin)对大鼠重症急性胰腺炎相关性肺损伤(SAP-LI)肺泡中性粒细胞(PMN)TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 48只成年SD大鼠随机分为4组,每组12只,假手术(Sham)组、重症急性胰腺炎(SAP)组、槲皮素低剂量组(50 mg/kg)及槲皮素高剂量组(100 mg/kg)。逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立SAP大鼠模型。槲皮素组在胰腺炎模型基础上予槲皮素干预,Sham组、SAP组给予等量生理盐水。计算肺湿/干重比(W/D)和肺通透指数(LPI),经支气管肺泡灌洗分离收集PMN,ELISA检测PMN培养上清液中TNF-α含量,RT-PCR检测PMN TLR4 m RNA表达,Western blotting检测PMN TLR4和NF-κB p65的表达。结果与Sham组比较,其余三组W/D、LPI及TNF-α含量明显升高,TLR4 m RNA及其蛋白和NF-κB p65蛋白表达上调;与SAP组比较,槲皮素处理组W/D、LPI及TNF-α含量降低,TLR4 m RNA及其蛋白和NF-κB p65蛋白表达下调。结论槲皮素减轻SAP引起的肺损伤可能与其抑制PMN TLR4/NF-κB信号通路活化有关。     

乌司他丁对急性重症胆管炎所致肝屏障损伤的作用和影响

目的观察乌司他丁(UTI)对急性重症胆管炎所致肝屏障损伤的作用和影响。方法建立急性重症胆管炎大鼠动物模型,将实验动物分为4组:假手术组(A组)、ACST组(B组)、ACST+小剂量乌司他丁组(C组)、ACST+大剂量乌司他丁组(D组)。检测各组肝功能和内毒素,血浆中TNF-α、IL-10、IL-6水平,汇管区肝屏障细胞的凋亡,紧密连接相关蛋白及核因子p65蛋白表达水平。结果重症胆管炎大鼠肝功能恶化,血内毒素及促炎因子TNF-α、IL-6明显升高,抗炎因子IL-10降低;汇管区肝屏障大量炎性细胞浸润,胆管上皮细胞凋亡,肝屏障紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin表达减少。核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)主要的促炎单位p65蛋白明显升高。而乌司他丁干预后重症胆管炎大鼠肝功能恶化好转,血内毒素及促炎因子TNF-α、IL-6明显下调,抗炎因子IL-10升高;汇管区肝屏障炎性细胞浸润及胆管上皮细胞凋亡好转,肝屏障紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin表达升高。p65蛋白表达下降,其效果随着乌司他丁剂量增加而改善明显。结论乌司他丁可明显改善急性重症胆管炎所致肝屏障损伤,且与乌司他丁剂量呈正相关,乌司他丁对肝屏障的保护机制之一可能是通过抑制NF-κB信号通路来实现的,其具体机制有待于进一步研究。     

MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 探讨MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠78只,体重200～250 g,随机分为4组:对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)、MLK3抑制剂K252a组(MK组,n=24)和p38MAPK特异性抑制剂SB203580组(MS组,n=24).ALI组尾静脉注射内毒素5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,MK组和MS组于注射内毒素前30 min经尾静脉分别注射K252a 75μg/kg、SB203580 10 mg/kg.ALI组、MK组和MS组于注射内毒素后1、3、6、12 h(1-4)时各组随机取6只大鼠,C组于给予生理盐水后即刻处死取肺,采用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度,称重后计算肺湿干重比,采用Western b1ot法测定p-MLK3、p-MKK3/6及p-p38MAPK的表达,观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、MK组和MS组各时点支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度、肺湿干重比、p-MLK3、p-MKK3/6及p-p38MAPK的表达水平升高(P＜0.01);与ALI组比较,MK组上述指标降低,MS组支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度、肺湿干重比、p-p38MAPK表达水平降低(P＜0.05).病理学结果显示:MK组和MS组肺组织损伤较ALI组减轻.结论 MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中起重要作用.     

乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法SD大鼠72只随机分为假手术组（C）、缺血再灌注组（I）和乌司他丁组（U）。采用ELISA和免疫组化方法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1B（IL-1β）、胰腺组织bcl-2蛋白和热休克蛋白70（HSP70）表达的变化;并观察胰腺病理组织学改变。结果缺血再灌注组的各时点TNF-α含量明显高于假手术组和乌司他丁组（P〈0．05）;缺血再灌注组和乌司他丁组的IL－1β含量在6,12,24h较假手术组明显增加（P〈0．05）,但乌司他丁组增高水平明显低于缺血再灌注组（P〈0．05）;乌司他丁组在再灌注6,12,24h时bcl-2蛋白表达明显高于缺血再灌注组和假手术组（P〈0．05）．后两组各时点表达水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）;缺血再灌注组和乌司他丁组HSP70的表达在12,24h较假手术组明显增加（P〈0．05）。病理组织学观察：乌司他丁组炎症反应较缺血再灌注组明显减轻。结论鸟司他丁能降低大鼠胰腺缺血再灌注损伤时血清TNF—α、IL-1β水平和上调胰腺组织bcl-2蛋白的表达,对大鼠胰腺缺血再灌注损伤有明显保护作用。     

乌司他丁对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺微血管通透性的保护

目的探讨乌司他丁对内毒素(LPS)诱导的急性肺损伤肺微血管通透性的影响。方法36只大鼠随机分为A组(对照)、B组(LPS)、C组(LPS+乌司他丁),每组12只,5 h后处死并收集标本行支气管肺泡灌洗(BAL),计数细胞总数和测定总蛋白,行肺微血管通透性指数(PMPI)及病理检查。结果与A组比较,B、C组细胞总数、总蛋白含量及PMPI升高,病理检查显示明显的炎症改变;与B组比较,C组细胞总数、总蛋白含量及PMPI降低,病理检查好转。结论乌司他丁可降低肺微血管通透性,对LPS诱导的急性肺损伤有保护作用。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响

目的:观察白藜芦醇(Res)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响。方法:36只大鼠随机分为假手术组、重症急性胰腺炎模型组(SAP)和白藜芦醇治疗组3组。制模后6h行肺、胰腺组织病程学检查。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,检测支气管肺泡灌洗液中蛋白含量、肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)及一氧化氮(NO)水平。以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺泡巨噬细胞TNF-αmRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达情况。结果:Res处理组6h肺支气管肺泡灌洗液中蛋白含量为(844.7±198.2)μg/mL,显著低于SAP组(P<0.05);Res处理组肺泡巨噬细胞分泌TNF-α和NO水平分别为(544.7±98.4)pg/mL和(31.7±9.8)μmol/L,显著低于SAP组(P<0.05)。Res组肺泡巨噬细胞TNF-αmRNA、iNOSmRNA的表达相对强度,亦显著低于SAP组。SAP大鼠各组指标与假手术组相比差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:Res能显著减轻SAP时肺和胰腺组织损伤,其机制与抑制巨噬细胞功能,抑制TNF-α和iNOSmRNA表达有关。     

氯胺酮复合乌司他丁对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 探讨氯胺酮复合乌司他丁对大鼠内毒素性急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响.方法 成年雄性SD大鼠100只,体重280 g～320 g,采用计算机简单随机分组法随机分为5组(每组20只):对照组(C组)、内毒素组(L组)、氯胺酮组(K组)、乌斯他丁组(U组)、氯胺酮复合乌斯他丁组(K+U组).除C组外,其余大鼠腹腔注射0.03％脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)1 mg/kg,注射后16 h时,由尾静脉再次注射0.1％ LPS 1.5 mg/kg,建立大鼠ALI模型.U组、K+U组分别在第2次注射LPS后经尾静脉注射乌司他丁50 000 U/kg,注射乌司他丁后即刻,K组、K+U组经尾静脉以微量泵持续输注氯胺酮10 mg·kg-1·h-1,其余组注射等容量生理盐水.于第2次注射LPS后1、2、3、4h(T1-4)时,各组取5只大鼠,抽取腹主动脉血样0.5 ml,测定氧分压(PaO2),抽取下腔静脉血样2 ml,测定血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(interleukin,IL)-6浓度;放血处死大鼠,取右肺上叶组织,光镜下观察肺组织病理学结果,进行肺组织病理半定量评分及测定核因子(nuclear factor-κB,NF-κB)抑制蛋白α(inhibitor of nuclear factor κBα,IκBα)表达;取右肺中叶组织100 mg测定肺组织NF-κB活性;取右肺下叶组织,计算肺湿干重比(W/D).结果 与C组比较,L组、K组、U组和K+U组PaO2降低,血清TNF-α、IL-6浓度和肺组织NF-κB活性升高,IκBα表达降低,W/D升高(P＜0.01);与L组比较,K组、U组和K+U组PaO2升高,血清TNF-α、IL-6浓度和肺组织NF-κB活性降低,IκBα表达升高,W/D降低,肺组织病理评分降低(P＜0.05或0.01);与K组和U组比较,K+U组各时点PaO2升高,血清TNF-α、IL-6浓度和肺组织NF-κB活性(2.49±0.23)降低,IκBα表达(35.1±3.4)升高,W/D(4.91±0.16)降低,肺组织病理评分(7.8±0.8)降低(P＜0.05或0.01).结论 氯胺酮复合乌司他丁可减轻大鼠ALI,较两者单独应用效果显著.     

肥胖因素对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响

目的评价肥胖因素对大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)的影响。方法清洁级雄性SD大鼠45只,6～8周龄,按照体重分为3组(n=15):正常体重对照组(C组)、正常体重VILI组(CV组)和肥胖VILI组(FV组)。C组和CV组体重为233～267 g,FV组体重为288～332 g。C组潮气量VT 10 ml/kg,CV组和FV组潮气量VT 40 ml/kg,通气频率40次/min,吸呼比1∶ 2,PEEP 0 mmHg,FiO2 21%,机械通气4 h,制备大鼠VILI模型。分别于气管插管前即刻和机械通气4 h时采集动脉血样行血气分析,记录PaO2;剩余血样收集血浆。机械通气4 h时采血后处死大鼠,分离两侧肺组织,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。采用ELISA法检测血浆瘦素浓度、血浆及BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度。测定肺组织湿重/干重(W/D)比值,HE染色后观察肺组织病理结果并进行肺损伤评分,采用Western blot法检测肺组织NF-κB p65表达水平。结果与C组和CV组比较,FV组血浆瘦素浓度升高(P<0.01)。与C组比较,CV组和FV组机械通气...     

乌司他丁对致死性烫伤大鼠肺微血管通透性和肺组织含水率的影响

目的:研究乌司他丁对50%总体表面积烫伤大鼠炎症介质、肺微血管通透性和肺组织含水率的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为烫伤组和乌司他丁组(n=20),两组均用80℃水浴造成50%总体表面积Ⅲ度烫伤。于烫伤后即刻静脉分别注射生理盐水1ml和乌司他丁40 000U/kg。分别于烫伤后6h、24h采用伊文斯蓝(EB)法测定肺微血管通透性,干/湿重法测定肺组织含水率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织TNF-α、IL-6和IL-8的活性。结果:烫伤后6h、24h乌司他丁组TNF-α、IL-6和IL-8均低于单纯烫伤组,其中烫伤后24h乌司他丁组TNF-α、IL-6和IL-8的变化差异更显著(P<0.01);与单纯烫伤组比较,乌司他丁组肺组织EB含量和含水率均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:乌司他丁能减轻致死性烫伤休克大鼠肺组织炎症水平,抑制血管内皮细胞活化和通透性增加,减少烧伤休克时血容量丢失和补液量,用于烧伤休克的早期治疗和改善存活率有潜在价值。     

善宁联合乌司他丁对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的保护作用

目的探讨大鼠重症急性胰腺炎（SAP）合并肺损伤的发病因素和善宁联合乌司他丁对大鼠SAP合并肺损伤模型的保护作用.方法80只SD大鼠随机均分为5组：假手术组（S）,SAP组,善宁处理组（O）,乌司他丁处理组（U）,善宁＋乌司他丁处理组（O＋U）;每组再分为术后6h和12h亚组.检测血淀粉酶（AMY）,TNF-α,MDA和肺MPO的浓度,并对胰、肺组织进行病理评分,比较各组给药后上述指标的变化.结果（1）O组,U组,O＋U组血AMY,TNF-α,MDA和肺MPO的浓度及胰病理评分与同时点SAP组相比明显降低（P＜0.05）;12h O＋U组肺组织病理评分比同时间SAP组明显下降（P＜0.05）.（2）O＋U组MPO降低较O组更显著（P＜0.05）,O＋U组MDA降低较U组也更显著（P＜0.05）.（3）SAP组,TNF-α在12h比6h明显下降（P＜0.05）.（4）血AMY,TNF-α,MDA和肺MPO浓度与胰、肺病理评分呈正相关（r=0.343～0.781,P＜0.01）.结论（1）TNF-α,MDA和肺组织MPO是引起SAP合并肺损伤的重要因素.（2）善宁和乌司他丁均能减轻SAP合并肺损伤,联合用药效果更佳.     

盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁对体外循环心脏瓣膜置换术患者肺损伤的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁对体外循环(CPB)心脏瓣膜置换术患者肺损伤的影响.方法 择期行CPB心脏瓣膜置换术患者60例,年龄33～64岁,体重47～81 kg,性别不限,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,心功能分级Ⅱ或Ⅲ级,随机分为4组(n=15):对照组(C组)、乌司他丁组(U组)、盐酸戊乙奎醚组(P组)和盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁组(PU组).CPB结束后30 min时,C组将PEEP增至8 cm H2O;U组、P组和PU组分别静脉注射乌司他丁2万U/kg、盐酸戊乙奎醚0.05 mg/kg、盐酸戊乙奎醚0.05 mg/kg和乌司他丁2万U/kg,然后将PEEP增至8 cm H2O.于CPB结束后30 min、3、6 h、术后12和24 h时,测定PaO2,计算氧合指数;于上述时点记录气道峰压和气道平台压,计算肺顺应性;于上述各时点采用ELISA法测定血清TNF-αIL-6、IL-8及IL-10的浓度;于CPB结束后6 h和术后12、24 h时行肺损伤评分.结果 与C组比较,U组、P组和PU组氧合指数和肺顺应性升高,肺损伤评分降低(P＜0.05或0.01);与U组和P组比较,PU组氧合指数和顺应性升高,肺损伤评分降低(P＜0.05).与C组比较,U组、P组和PU组血清TNF-α、IL-6和IL-8的浓度降低,IL-10浓度升高(P＜0.05或0.01);与U组和P组比较,PU组血清TNF-α、IL-6和IL-8的浓度降低,IL-10浓度升高(P＜0.05).U组和P组间上述标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁可减轻CPB心脏瓣膜置换术患者肺损伤,其机制可能与抑制炎性反应有关.     

整合素αvβ6 在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用

目的 探讨整合素αvβ6 在大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用.方法 清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为3组(n=8),对照组(C组)不行机械通气;高潮气量组(H组)行高潮气量(40 ml/kg)机械通气4 h,呼吸频率40次/min,氧浓度21%;高潮气量+阻滞剂S247组(HS组)腹腔注射S247(含有αv 亚单位整合素非特异性阻滞剂)100 mg/kg,1次/d,持续2周,在最后一次腹腔注射S247后30 min行高潮气量机械通气,参数设定同H组.C组和H组于上述相应时点腹腔注射等量生理盐水.通气结束后处死大鼠,观察肺组织病理学,计算肺湿,干重比(W/D),记录支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞(WBC)计数,测定总蛋白(TP)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度、整合素αvβ6 mRNA及其蛋白的表达水平.结果 C组未见肺损伤的发生;H组肺泡结构严重破坏,肺泡内渗出物、出血和间质水肿明显;HS组中等程度炎性细胞浸润,肺泡内出血和肺泡壁增厚.与C组比较,H组和HS组肺W/D、BALF中WBC计数、TP浓度升高,整合素αvβ6 mRNA及其蛋白表达上调,H组BALF中MIP-2浓度升高(P＜0.01);与H组比较,HS组肺W/D、BALF中WBC计数、TP、TNF-α、MIP-2浓度降低,整合素αvβ6 mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.05或0.01).结论 整合素αvβ6参与了大鼠VILI的发生.