PITC柱前衍生HPLC测定柴胡炮制前后17种氨基酸含量

目的:建立一种同时测定鳖血柴胡中17种氨基酸含量的方法,为该药材的质量控制提供参考。方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,采用Prevail C18色谱柱,流动相[乙腈-水(4∶1)]-[乙酸钠缓冲溶液(p H 6.5)-乙腈(97∶3)]梯度洗脱,检测波长254 nm,测定柴胡炮制前后氨基酸的含量。结果:17种氨基酸在32 min内可良好分离;样品平均加样回收率93.4%~107.1%,RSD 1.8%~3.9%。结论:与其他柱前衍生测定氨基酸含量的方法相比,该方法具有可操作性强、成本低、易推广等优势,可作为柴胡及其炮制品中氨基酸的含量测定方法。     

柱前衍生化RP-HPLC测定白芷中氨基酸含量

目的建立柱前衍生RP-HPLC法测定白芷中游离氨基酸含量的方法,并测定不同产地的白芷样品中游离氨基酸含量。方法样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,经与白芷中氨基酸柱前衍生,并以高效液相色谱法测定其含量,色谱条件采用Waters Symmetry RP18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相以[50mmol/L乙酸钠缓冲液(以冰醋酸调至p H6.5)](A)-[乙腈-甲醇-水(60:20:20)](B)进行梯度洗脱,柱温35℃,流速1.0 m L/min,检测波长254nm。结果 17种氨基酸均能达到基线分离,17种氨基酸的平均回收率在95.48%~104.30%之间,RSD在3.2%~4.9%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏,准确,重现性和稳定性良好,适用于对白芷中的氨基酸含量进行研究,为白芷药材的质量控制和评价提供了科学依据,不同产地的白芷样品中氨基酸的含量存在差异,必需氨基酸的比例也存在差异。     

柱前衍生化HPLC法测定不同基原珍珠粉及贝壳粉中7种氨基酸的含量

目的:建立柱前衍生化HPLC检测不同基原珍珠粉及贝壳粉中7种主要氨基酸的方法。方法:以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,流动相A:0.1 mol/L醋酸钠溶液(用醋酸调p H值至6.5),流动相B:乙腈,梯度洗脱,检测波长254 nm。结果:氨基酸衍生溶液在24 h内保持稳定,7种氨基酸线性相关系数均大于0.9995,加样回收率在93.16%~103.31%之间。结论:本方法分离效果好,精密度和重复性良好,可用于珍珠粉及贝壳粉中7种水解氨基酸含量的测定。     

不同采摘期金银花中氨基酸含量的PITC柱前衍生HPLC法测定

目的建立柱前异硫氰酸苯酯(PITC)衍生HPLC测定金银花中水解氨基酸的方法,并比较不同采摘期对金银花氨基酸的含量影响。方法 6 mol·L-1盐酸水解金银花蛋白,以PITC为柱前衍生试剂,采用HPLC法测定不同采摘期金银花中氨基酸的峰面积并计算其含量。结果 18种氨基酸的分离良好,线性关系良好,精密度RSD在0.28%~0.86%之间,重复性RSD在0.92%~2.01%之间,稳定性RSD在0.67%~1.21%之间,加样回收率96.58%~103.52%之间且RSD均小于5%。金银花中18种氨基酸的总量、药用氨基酸合计和增味剂氨基酸合计都是幼蕾期最高,二白期次之。结论该方法简便、快捷,能准确的测定金银花氨基酸的含量。二白期氨基酸含量较佳,适合作为金银花的采收期,为山东金银花的规范化种植提供了理论依据。     

柱前衍生化RP-HPLC法分析龟板中氨基酸

目的采用柱前衍生RP-HPLC法对龟板中13种氨基酸进行分析。方法用6mol/L HCl水解提取龟板中总氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用外标法,梯度洗脱的方式分析。结果13种氨基酸在40min内均可得到很好的分离,回收率(除甘氨酸外)为91.68%~106.26%,RSD为0.718%~4.386%。结论所建立的方法分离效果好、灵敏、准确、简便,且采用普通的C18色谱柱,可广泛用于含有多种氨基酸样品的分析。     

柱前衍生RP-HPLC法测定黄芩中氨基酸含量

目的采用柱前衍生RP-HPLC法对黄芩中游离及总氨基酸进行测定。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱为Ultimate Amino Acid氨基酸分析专用柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈-水(80∶20,V/V),B为三水合醋酸钠缓冲溶液(pH 6.5)-乙腈(93∶7,V/V),梯度洗脱;检测波长为254 nm。结果 21种氨基酸在0.002 5~2.500 0 mmol/L内呈良好的线性关系(R20.999 0)。21种游离氨基酸平均回收率在93.72%~105.03%之间,RSD在0.81%~3.15%之间(n=6);总氨基酸平均回收率在95.22%~102.04%之间,RSD在0.47%~2.44%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合黄芩中氨基酸含量测定。     

青葙子中氨基酸的柱前衍生化HPLC-DAD法测定

目的建立柱前衍生HPLC-DAD法测定中药青葙子中游离氨基酸和水解氨基酸的含量方法。方法采用超声提取法和盐酸水解法制备青葙子的2类氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯柱前衍生HPLC-DAD法分析青葙子中的氨基酸。结果 18种氨基酸的分离良好,空白无干扰,线性关系良好,精密度RSD在0.30%~1.58%之间,重复性RSD在0.47%~1.92%之间,稳定性RSD在0.42%~1.71%之间,加样回收率96%~103%之间且RSD均小于5%,游离和水解氨基酸的含量分别为0.4022%、6.9082%,药用氨基酸和必需氨基酸含量较高。结论该方法简便、快捷,能准确地测定青葙子中游离和水解氨基酸的含量,为青葙子及其制剂的质量控制提供了依据。     

PITC柱前衍生反相高效液相法测定生制仙茅中氨基酸的含量

目的:考察生制仙茅中氨基酸含量的变化情况。方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析。采用Ecosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温41℃,检测波长254 nm,流速1.0 mL·min-1,二元梯度洗脱,测定仙茅酒炙前后氨基酸的含量。结果:17种氨基酸在7.51~144.96 mg·L-1呈良好的线性关系(r=0.996 7~0.999 6);平均回收率在95.3%~104.8%,RSD均<3.0%;仙茅酒炙后17种氨基酸总量增加23.39%,其中人体必需的7种氨基酸总量酒炙后增加36.19%。结论:酒制可使仙茅氨基酸含量增加,并增强滋补作用。     

柱前衍生RP-HPLC测定女贞子中21种氨基酸含量

目的:建立一种采用柱前衍生RP-HPLC检测女贞子中游离氨基酸和水解氨基酸含量的方法。方法:采用HPLC,用异硫氰酸苯酯进行柱前衍生,采用梯度洗脱的方法,检测女贞子中游离氨基酸和水解氨基酸含量。结果:21种氨基酸线性范围在0.002~0.270 mmol·L~(-1),r均≥0.999 5;21种游离氨基酸的平均加样回收率在88.33%~99.88%,RSD为0.6%~2.5%,水解氨基酸的平均加样回收率在90.32%~99.91%,RSD为0.5%~2.5%。结论:该方法适合测定女贞子中游离及水解氨基酸的含量。     

柱前衍生化RP-HPLC同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量及其多元统计分析

目的:建立柱前衍生化反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量的方法并进行多元统计分析。方法:采用柱前衍生化RP-HPLC检测,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Wonda Sil C18-WR色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相A为0.05 mol·L^-1乙酸钠缓冲液(pH 6.5),流动相B为乙腈-甲醇-水(3∶1∶1),梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温35℃。建立主成分分析(PCA)及系统聚类分析(HCA)模型进行多元统计分析并进行质量评价。结果:从锁阳中共分离鉴定了17种氨基酸,含7种人体必需氨基酸。17种氨基酸在各自质量浓度范围内呈良好线性关系,r在0.9990~0.9999;平均回收率在98.03%~103.89%,RSD均<3.5%。PCA和HCA结果基本一致,均可将12个市级产区明显区分为6个区域;PCA可根据不同市级或省级产区对锁阳进行聚类,而HCA可根据省级产区对锁阳进行归类,说明不同市级、省级产区锁阳的氨基酸含量具有产区差异性,且含量分布表现出明显的地域聚集性特点;PCA表明甘肃、内蒙古所产锁阳氨基酸含量较高,质量较佳。结论:所建方法可用于不同产区锁阳中17种游离氨基酸的含量测定,为其综合质量评价提供参考。     

柱前衍生化RP-HPLC测定铁皮石斛中的氨基酸的含量

目的:测定不同产地的铁皮石斛样品中氨基酸的含量。方法:样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,与铁皮石斛中氨基酸柱前衍生,采用高效液相色谱法测定其含量,采用CAPCELL PAK C18SG300色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相[0.05 mol·L-1乙酸钠缓冲液(以乙酸调p H 6.5)-乙腈(1∶1)](A)-[0.05 mol·L-1乙酸钠缓冲液(以乙酸调p H6.5)](B)梯度洗脱,柱温25℃,流速0.6 m L·min-1,检测波长254 nm。结果:游离氨基酸和总的氨基酸的回收率范围分别为92.48%~97.30%和90.95%~95.63%,RSD都小于3.0%,9个不同产地的样品游离氨基酸的含量范围在0.210 5%~0.571 2%,总的氨基酸含量范围在3.670 8%~6.890 4%,必需氨基酸占总的游离氨基酸的比例为0.094 4%~0.186 0%;必需氨基酸占总的氨基酸的比例范围为0.338 5%~0.374 1%。结论:该方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于铁皮石斛中氨基酸的检测,不同产地的铁皮石斛样品其氨基酸的含量存在差异,必需氨基酸的比例也存在差异     

HPLC法同时测定不同厂家珍珠明目滴眼液中17种氨基酸的含量

目的建立HPLC法同时测定珍珠明目滴眼液中17种氨基酸的含量,比较9个不同生产厂家的19批珍珠明目滴眼液中17种氨基酸的含量差异。方法以异硫氰酸苯酯为衍生化试剂,对样品进行衍生处理后,采用HPLC法测定。色谱柱为Venusil-AA氨基酸分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为0.1 mo L·L~(-1)醋酸钠缓冲液(pH 6.5)-乙腈(93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min~(-1);检测波长:254 nm;柱温:38℃。结果 17种氨基酸质量浓度在相应的范围内呈良好的线性关系(0.993 0);17种氨基酸平均回收率在90.3%~108.4%之间,RSD在0.30%~3.31%之间。结论不同厂家的珍珠明目滴眼液中游离氨基酸含量存在较大差异。     

PITC柱前衍生HPLC测定复方氨基酸注射液中18种氨基酸的含量

目的：建立柱前衍生高效液相色谱法同时测定复方氨基酸注射液（18AA）中18 种氨基酸含量的方法。方法：样品采用异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生,以Unitary-C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,检测波长为254 nm,醋酸钠缓冲盐及乙腈、甲醇和水的混合体系为流动相,梯度洗脱。结果：优化了衍生试剂用量、衍生时间、缓冲盐浓度以及pH 值和柱温等影响因素,最终在40 min内实现了18种氨基酸的分离,在9~1 021 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,且相关系数大于0.997 7,平均回收率为92.6%~110.7%,相对标准偏差（RSD）为0.01%~5.68%。其定量限（LOQ,S/N=10）为0.02~13.41 μg·mL-1。结论：该方法操作简便、灵敏度高、准确度和精密度好,可用于复方氨基酸注射液中氨基酸的含量测定。     

黄精炮制前后氨基酸含量的柱前衍生化高效液相色谱法测定

目的以水解氨基酸为指标,考察两种不同炮制方法对三种黄精中氨基酸成分含量的影响。方法采用柱前衍生化HPLC法测定三种黄精炮制前后水解氨基酸的含量,色谱柱为Sepax AAA氨基酸专用色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为乙酸钠缓冲液(A)-甲醇(B)进行梯度洗脱,流速1.0ml·min-1,柱温:40℃,检测波长:254nm。结果三种黄精中总氨基酸含量差异显著,黄精多花黄精滇黄精。炮制后各品种黄精中总氨基酸都有相应的增加,蒸制品炆制品。结论不同的炮制方法氨基酸成分含量的变化不同。     

蚕蛹蛋白氨基酸含量的高效液相色谱法测定

目的 建立蚕蛹蛋白氨基酸含量的测定方法.方法 采用柱前衍生反相高效液相色谱法.结果 在给定的色谱条件下,18种氨基酸在35 min内获得了较好的分离,在一定浓度范围内,氨基酸的峰面积与浓度的线性相关系数在0.990 6～0.999 8之间,相对标准偏差为2.02%～5.45%(n=5).并测定了蚕蛹蛋白中氨基酸的组成和含量.结论 该方法准确可靠、重复性好,可用于蚕蛹蛋白中氨基酸含量的测定.     

柱前衍生RP-HPLC测定仙灵骨葆胶囊中16种氨基酸

目的:建立柱前衍生RP-HPLC同时测定仙灵骨葆胶囊中16种氨基酸的方法。方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生剂,用高效液相色谱测定仙灵骨葆胶囊中水解氨基酸的量。采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1 mol·L-1乙酸钠溶液-乙酸(7∶93∶0.05)为流动相A,乙腈-水(80∶20)为流动相B进行梯度洗脱,体积流量1 m L·min-1,检测波长254 nm,柱温40℃。结果:33 min内可完成仙灵骨葆胶囊中16种氨基酸的分离测定,线性关系良好(r0.996 8),回收率97.5%~100.7%,RSD5%。结论:该方法简便快速、准确可靠,可用于仙灵骨葆胶囊中氨基酸的含量测定。     

虎掌南星中氨基酸含量测定

目的:建立虎掌南星中各氨基酸含量测定的方法。方法:采用柱前衍生化后进行高效液相色谱法定量分析。色谱柱为Diamonsil C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),柱温35℃;以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂;乙腈-醋酸铵缓冲液(pH=6.5)为流动相体系,梯度洗脱,流速1.0mL·min~(-1);检测波长254nm。结果:谷氨酸和色氨酸在2μg·mL~(-1)~100μg·mL~(-1)浓度范围内,精氨酸在6~300μg·mL~(-1)浓度范围内,其他氨基酸在0.8~40μg·mL~(-1)浓度范围内均与峰面积呈良好线性关系,相关系数均不低于0.999 5,平均回收率均在93.43%~111.01%之间,RSD均小于3%。结论:该方法灵敏、准确,重现性好,可用于虎掌南星中各氨基酸含量的测定。     

利用柱前在线衍生-高效液相色谱法测定培植牛黄及天然牛黄中18种氨基酸的含量

目的:建立1种利用高效液相色谱同时测定培植牛黄药材中18种氨基酸含量的方法。方法:以邻苯二甲醛(OPA)和9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)为柱前衍生化试剂。色谱柱为AJS-02氨基酸分析专用柱C18(150 mm×4.6 mm,3μm);流动相A为磷酸氢二钠-四硼酸钠缓冲液(pH 8.2),流动相B为甲醇-乙腈-水(9∶9∶2),梯度洗脱;流速为1.6 mL·min^-1;柱温为50℃;检测波长为338 nm(一级氨基酸)和262 nm(二级氨基酸)。结果:各个氨基酸在线性浓度范围内,峰面积与内标比值与浓度呈良好的线性关系(除Lys外,r>0.9990),平均回收率为90%~110%。结论:本方法准确、灵敏、简便,适用于培植牛黄药材中门冬氨酸等18种氨基酸的含量测定。     

柱前衍生和柱后衍生法检测生制桑螵蛸中氨基酸

目的比较氨基酸分析仪(HPCEC法)和高效液相色谱仪(RP-HPLC法)在氨基酸测定上存在的异同,以及生制桑螵蛸中氨基酸的种类和含量的差异。方法采用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC)和柱后衍生高效阳离子交换色谱法(HPCEC)。结果两种方法在测定同一样品时,在部分氨基酸的检测上存在一定的差异,并且生制桑螵蛸中氨基酸的含量有较大的差异。结论从数据分析结果来看,柱前衍生RP-HPLC法用于分析氨基酸是可行的,另外炮制对桑螵蛸中的氨基酸含量产生较大的影响。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定毛脉酸模根中氨基酸的含量

目的采用柱前衍生法测定毛脉酸模根中氨基酸的含量。方法利用柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定毛脉酸模根中16种氨基酸。采用DikmaC_(18)色谱柱;流动相:A为0.05 mol/L乙酸钠溶液中含1%N,N-二甲基甲酰胺,B为乙腈-水(1:1),梯度洗脱;流速1.0mL/min;检测波长360nm;柱温40℃。结果氨基酸的摩尔浓度与峰面积成良好的线性关系,r均在0.999以上;16种氨基酸的回收率为94.7%～112.9%。结论该方法准确、重现性好,可用于毛脉酸模根中氨基酸的含量测定。