加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠TGF-β_1/Smads通路的影响北大核心CSCD

目的:探讨加味茵陈四逆汤预防肝纤维化过程中对TGF-β_1/Smads通路的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.1 g/kg)阳性对照组及加味茵陈四逆汤高(41.6 g/kg)、中(20.8 g/kg)、低(10.4 g/kg)剂量组,每组8只。除正常对照组外,其余各组采用腹腔注射30%CCl4复制肝纤维化模型,造模同时给予相应药物,正常对照组与模型组给予等体积蒸馏水。给药14 d后,比较小鼠体质量和肝脏组织病理学改变;试剂盒检测血清ALT、AST水平;采用RT-q PCR检测肝组织TGF-β_1、TβRⅠ、Smad3 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低,血清ALT、AST水平显著升高,肝组织呈明显的纤维化改变,肝组织TGF-β_1、TβRⅠ、Smad3 mRNA表达显著升高。加味茵陈四逆汤能不同程度提高模型小鼠体质量,降低血清ALT、AST水平,改善肝组织病理学改变,并降低肝组织TβRⅠ、Smad3 mRNA表达。结论:加味茵陈四逆汤能预防CCl4诱导的肝纤维化,其作用机制可能与下调肝脏组织TβRⅠ、Smad3 mRNA的表达,从而阻滞TGF-β_1/Smads通路转导有关。     

白藜芦醇对小鼠肾纤维化TGF-β_1/Smads信号转导通路的干预研究

目的:观察白藜芦醇对单侧输尿管梗阻(UUO)构建的小鼠肾纤维化模型TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响,探讨其对肾纤维化的干预作用及其机制。方法:40只雄性ICR小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组,UUO模型(UUO)组,UUO+白藜芦醇低剂量(20 mg/kg)治疗(ResL)组,UUO+白藜芦醇高剂量(40 mg/kg)治疗(ResH)组,UUO+氯沙坦(10 mg/kg)治疗(Los)组,每组8只。均于术后当天灌胃给药,每24 h 1次。14 d时处死小鼠,留取血清检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾组织行HE和Masson染色,观察病理结果,实时荧光定量PCR检测肾组织TGF-β_1、Smad2、Smad7 mRNA的表达。结果:白藜芦醇可以减轻肾组织纤维化的病理损害,使肾组织TGF-β_1、Smad2 mRNA表达降低,Smad7 mRNA表达升高(P0.05,部分P0.01),以高剂量组改善最显著。结论:白藜芦醇可呈剂量相关性下调TGF-β_1、Smad2及上调Smad7来抑制TGF-β_1/Smads信号转导通路,从而发挥抗肾间质纤维化的作用。     

加味茵陈四逆汤对实验性肝纤维化小鼠MMP1和TIMPs表达的影响

目的:观察预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠肝组织中基质金属蛋白酶-1(MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2)基因表达的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)腹腔注射建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,各组行HE染色,观察肝脏病理组织学改变。RT-q PCR法检测MMP1、TIMP1和TIMP2 mRNA表达。结果:(1)病理结果显示模型组肝纤维化明显,中药高、中、低剂量组较模型组纤维化减轻;(2)MMP1 mRNA模型组表达量与正常组比较明显减少(P0.05),与阳性药物组、中药中剂量和低剂量组相较表达量同样明显减少(P0.05);(3)TIMP1 mRNA、TIMP2 mRNA模型组表达量比正常组明显增多(P0.05),与阳性药物组和中药中、低剂量组相较均表达量减少(P0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠MMP1表达,抑制TIMP1、TIMP2表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。     

基于TGF-β_1/Smads信号通路研究胆通颗粒对胆汁淤积性肝纤维化的影响

目的基于TGF-β_1/Smads信号通路探讨胆通颗粒对胆汁淤积性早期肝纤维化大鼠的抗肝纤维化作用。方法将80只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、消炎利胆片组、胆通颗粒组,每组20只。除空白组大鼠外,其余组大鼠均采用胆总管结扎方法进行胆汁淤积性早期肝纤维化模型建立。末次造模后第1天开始,模型组大鼠灌胃生理盐水,消炎利胆片组大鼠灌胃消炎利胆片(研磨成粉,175 mg/kg,温水融化),胆通颗粒组大鼠灌胃胆通颗粒(200 mg/kg,温水融化),均1 mL/100 g。分别于灌胃1,5,10 d后,每组随机处死6只大鼠,应用ELISA法检测各组大鼠血清TGF-β_1水平,Western Blot法检测肝脏组织中Smad2、Smad3蛋白表达水平。结果灌胃1,5,10 d后,模型组、消炎利胆片组、胆通颗粒组大鼠血清TGF-β_1水平及肝脏组织中Smad2、Smad3蛋白相对表达水平均明显高于空白组(P均0.05);灌胃5,10 d后,消炎利胆片组、胆通颗粒组大鼠血清TGF-β_1水平及肝脏组织中Smad2、Smad3蛋白相对表达水平均明显低于模型组(P均0.05);胆通颗粒组灌胃10 d后血清TGF-β_1水平及灌胃5,10 d后肝脏组织中Smad3蛋白相对表达水平均明显低于消炎利胆片组(P均0.05)。结论胆通颗粒能够通过降低TGF-β_1水平及抑制Smad2、Smad3蛋白表达,从而阻断TGF-β_1/Smads信号通路来实现抗胆汁淤积性早期肝纤维化的作用。     

芦根多糖对免疫性肝纤维化大鼠TGF-β/Smads信号通路的影响

目的：观察芦根多糖抗免疫性肝纤维化作用及对TGF-β/Smads信号通路的影响。方法：采用猪血清腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型,以芦根多糖大剂量（420mg/kg）、中剂量（210mg/kg）、小剂量（105mg/kg）连续灌胃9周。放射性免疫学方法检测血清透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）、IV型胶原（CIV）的水平;取部分肝脏用HE染色观察肝脏病理形态学变化;ELISA法测定肝组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）表达;免疫组织化学方法检测Smad3和Smad7蛋白的表达。结果：芦根多糖各剂量可降低模型大鼠血清HA、LN、CIV水平;减低模型大鼠肝组织TGF-β1和Smad3蛋白的表达,并增强Smad7蛋白的表达。结论：芦根多糖可抑制肝纤维化的形成,其作用机制可能与影响TGF-β/Smads信号通路有关。     

中医药对肝纤维化TGF-β1／Smads信号转导通路的调控作用

目的：研究中医药对肝纤维化TGF-β1/Smads信号转导通路的作用。方法查阅近年文献资料,汇总中医药抗肝纤维化的作用机制,阐述TGF-β1/Smads信号转导通路在肝纤维化中的作用及中医药对其调控。结果 TGF-β1/Smads信号转导通路是肝纤维化发生发展的重要机制,中医药对其有调控作用。结论中医药抗肝纤维化的作用机制之一为其对TGF-β1/Smads信号转导通路的调控。     

调控TGF-β1/Smads信号通路抗肝纤维化的中药有效成分研究进展

肝纤维化是多种因素影响的肝损伤愈合反应,其形成与多种细胞因子和多条信号通路有关,转化生长因子β1(trans-forming growth factor beta1,TGF-β1)是目前已知最强的促纤维化细胞因子之一,几乎参与了肝纤维化的所有关键环节。TGF-β1/Smads信号通路是TGF-β1发挥促纤维化作用最经典的途径,也是肝纤维化形成过程中最重要的信号通路之一,近年来就该信号通路的研究取得了一系列的科研成果。中药具有"多成分-多靶点-副作用小"的优势,在肝纤维化临床治疗中广泛应用。中药有效成分是从中药中提取纯化的单体化合物,其分子生物学的研究已成为当今热点,运用现代先进技术方法和手段,能直接阐明其作用的靶点和调控的信号通路,揭示了中药治病的机制,更有助于中药产业现代化和国际化发展。该文总结了TGF-β1/Smads信号通路的结构、功能及其在抗肝纤维化进展中的应用,并归纳分析了近5年来各类中药有效成分调控TGF-β1/Smads信号通路干预治疗肝纤维化的作用方式及其可能的机制,为靶向治疗肝纤维化的中药新药的创新开拓思路。     

中药干预TGF-β1/Smads信号通路对酒精性肝纤维化的调控作用研究进展

酒精性肝纤维化(alcoholic liver fibrosis, ALF)是长期大量饮酒导致肝脏发生不可逆转的慢性损伤性疾病。目前,ALF机制尚未完全阐明,现代医学对此仍缺乏特异性的治疗药物。近几年因中药在治疗酒精性肝纤维化具有多途径、多靶点、安全性高等优势,引起各界学者们对中药干预TGF—β1/Smads信号通路,从而达到治疗ALF的关注度与日俱增。基于TGF-β1/Smads信号通路,从近几年中药治疗ALF的研究概况加以综述,以期为中医药多靶点、多环节治疗ALF提供参考。     

狗肝菜多糖对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的:以二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化为模型,研究狗肝菜多糖对DMN诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法:将96只大鼠随机分为对照组、模型组、狗肝菜多糖(300 mg/kg,200 mg/kg,100 mg/kg)组和秋水仙碱组(0.12 mg/kg)。除对照组以外,其余各组大鼠均腹腔注射0.5%DMN溶液(1.5 ml/kg),隔天1次,在首次注射DMN同时,各组大鼠灌胃给予相应的药物,而正常组和模型组灌胃给予相应体积的生理盐水溶液,每天给药1次,连续5周,5周末眼球取血,脱臼致死,收取肝脏。生化法检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰氨基转移酶(GGT)水平;酶联免疫法检测(ELISA)血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)含量。苏木精-伊红染色(HE染色)进行肝组织病理学检查;蛋白质印迹法(Western blot)检测肝组织a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad2/3/7的蛋白表达情况。结果:与模型组比较,经狗肝菜多糖(300 mg/kg,200 mg/kg,100 mg/kg)组干预后,血清中ALP、GGT、HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C水平显著降低;肝组织中a-SMA、TGF-β1、Smad2/3的蛋白表达被抑制,而Smad7的表达得到促进;病理切片显示肝纤维化大鼠肝组织炎症坏死程度和肝纤维化病变程度较模型组明显减轻。结论:狗肝菜多糖具有抗DMN诱导的大鼠肝纤维化的作用,其机制与TGF-β1/Smads信号通路相关因子的表达有关。     

芪蚣抗纤方对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响。方法:采用猪血清攻击法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型;用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清LN、HA、TGF-β1含量;免疫组化法观察TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA表达。观察QF抗肝纤维化的分子机制。结果:①血清学指标结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。经QF干预后,大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显下降(P<0.01)。②免疫组织化学结果:模型组大鼠肝组织TGF-β1胞浆强阳性表达,Smad2棕色阳性着色由胞浆转至胞核,Smad7无阳性表达。QF干预组大鼠肝组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达下调(P<0.01)。结论:QF通过调节TGF-β1/Smads信号通路,能保护和修复受损的肝细胞,抑制胶原纤维的形成,发挥抗肝纤维化作用。     

加味茵芍散对肝纤维化家兔TGF-β/Smad信号通路的影响

[目的]从加味茵芍散对TGF-β/Smad信号通路影响的角度探讨该方对肝纤维化病变的作用.[方法]按0.1 ml/kg的用量腹腔注射CCl4诱导复制家兔肝纤维化模型,50只家兔随机分成模型对照组,秋水仙碱组,加味茵芍散高、中、低剂量组5组,每组10只,通过肝脏病理取材确定肝纤维化病变,同时采用实时定量逆转录-聚合酶链反...     

补肾祛毒汤对肾衰竭大鼠TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响

正补肾祛毒汤是本院肾内科治疗慢性肾功能衰竭的经验方,全方以健脾益肾、祛湿泄浊、活血化瘀为法,临床治疗效验颇丰。在临床观察及前期实验中发现其具有明显改善肾功能,抑制TGF-β1表达,促进肾组织肝细胞生长因子的表达,抗肾间质纤维化,延缓肾脏病进展的作用[1]。本实验运用本方干预慢性肾功能衰竭大鼠,观察补肾祛毒汤对大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路的影响机制。1材料与方法     

软肝颗粒对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1/Smads信号通路的影响

目的：探讨软肝颗粒对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads 信号通路的影响。方法105只Wistar大鼠,按随机数字表法随机分为正常对照组,模型组,秋水仙碱组,大黄?虫丸组,软肝颗粒高、中、低剂量组,每组15只。采用四氯化碳和高胆固醇饮食诱导肝纤维化。模型制作后,软肝颗粒低、中、高剂量组分别灌胃软肝颗粒混悬液3.600、7.200、14.400 g/(kg?d);大黄?虫丸组灌胃大黄?虫丸混悬液0.180 g/(kg?d);秋水仙碱组灌胃秋水仙碱混悬液0.108 mg/(kg?d);正常对照组和模型组以等体积蒸馏水灌胃。均连续灌胃8周。采用免疫组化染色法检测肝组织TGF-β1、Smad3、Smad7表达,运用 RT-PCR 技术检测肝组织 TGF-β1、Smad3、Smad7 mRNA 表达。结果与正常对照组比较,模型组TGF-β1[(2.59±0.99)比(0.43±0.21)]、Smad3[(2.56±0.67)比(0.41±0.18)]蛋白及 TGF-β1 mRNA[(2.25±0.21)比(0.71±0.09)]、Smad3 mRNA[(2.34±0.03)比(0.78±0.12)]表达显著升高（P均＜0.01）。与模型组比较,软肝颗粒高剂量组TGF-β1[(1.12±0.27)比(2.59±0.99)]、Smad3蛋白[(1.05±0.34)比(2.56±0.67)]表达下降,Smad7蛋白表达[(2.33±0.62)比(0.36±0.18)]升高（P＜0.01）,TGF-β1 mRNA[(1.09±0.11)比(2.25±0.21)]、Smad3 mRNA[(1.10±0.02)比(2.34±0.03)]表达下降,Smad7 mRNA[(1.18±0.13)比(0.38±0.11)]表达升高（P＜0.05）。结论软肝颗粒可通过下调TGF-β1、Smad3,上调Smad7调节肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路。     

芪卫颗粒对KK-Ay小鼠肾组织TGF-β1/Smads信号转导通路的影响

目的 探讨芪卫颗粒延缓糖尿病肾病(DN)肾间质纤维化的分子作用机制.方法 自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠45只,采用高脂饲料喂养制备DN模型.将造模成功小鼠随机分为模型组、中药组[芪卫颗粒20 g/(kg·d)灌胃]、西药组[缬沙坦胶囊10mg/(kg ·d)灌胃],每组15只,另设C57BL/6J小鼠15只作为正常组,连续给药12周.采用免疫组织化学法检测各组小鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)表达,免疫印迹法检测磷酸化Smad2(P-Smad2)、磷酸化Smad3(P-Smad3)、Smad7及整合素连接激酶(ILK)的表达,实时荧光定量PCR法检测ILK mRNA表达. 结果 模型组小鼠肾组织中TGF-β、P-Smad2、P-Smad3、ILK及ILK mRNA表达较正常组明显增加(P＜0.01),Smad7表达明显下降(P＜0.01).中药组及西药组TGF-β1、P-Smad2、P-Smad3、ILK及ILK mRNA表达较模型组显著减少(P＜0.05或P＜0.01),Smad7表达明显增加(P＜0.01).中药组P-Smad3表达较西药组增加(P＜0.05),其余指标两组比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 芪卫颗粒通过下调TGF-β1、P-Smad2、P-Smad3、ILK的表达,上调Smad7的表达,影响TGF-β1/Smads信号通路,从而延缓了DN肾脏纤维化的发生发展.     

中药对TGF-β1/Smads信号转导通路的干预机制

中药或其提取物可从TGF-β1、TβR、Smads乃至效应因子等多层次多靶点影响TGF-β1/Smads信号转导通路而拮抗脏器纤维化发生.许多中药可从转录和翻译水平抑制信号分子表达,还可通过抑制磷酸化、影响核转位等干预信号转导.多点性、多效性、重叠性和平衡性是其作用特点,但还需在靶点作用的深入性、通路之间的交互性及转导系统的全面性等方面进一步探索其机制.     

肾衰泻浊丸对肾间质纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路的影响

目的：通过实验研究观察肾衰泻浊丸对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的TGF-β1/Smads信号转导通路的影响,探讨肾衰泻浊丸抗肾间质纤维化的机理。方法：采用腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠模型,观察治疗后实验大鼠肾间质纤维化情况;采用免疫组织化学法分别检测肾组织中的TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达,采用Western Blot法检测肾组织内的Smad2/3蛋白的表达,采用半定量RT-PCR检测肾组织内的TGF-β1mRNA的表达水平。结果：肾衰泻浊丸能够减少肾间质纤维化面积;能够降低肾间质纤维化大鼠肾组织中TGF-β1,Smad2/3蛋白的表达,与对照组比较有显著性差异（P〈0.05）;能够下调肾组织中TGF-β1mRNA的表达,与对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：肾衰泻浊丸可能是通过降低Smad2/3、TGF-β1的蛋白表达,从而抑制了TGF-β1信号向细胞核内转导的通路,这可能是其延缓肾间质纤维化进展的机制之一。     

加味六君子汤对腹膜纤维化大鼠TGF-β/Smad信号通路的影响

目的:探讨加味六君子汤对腹膜纤维化大鼠TGF-β/Smad信号通路的影响。方法:用5/6肾切除联合腹腔注射4.25%腹透液+脂多糖(LPS)建立腹膜纤维化大鼠模型,实验分空白组(A组)、模型组(B组)、西药组(C组)、中药高剂量组(D组)、中药低剂量组(E组),Western印迹法检测TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7和α-SMA、E-cadherin蛋白的表达:RT-PCR法测定TGF-β1、α-SMA、E-cadherin m RNA水平。结果:与A组相比,B组、C组、D组、E组TGF-β1、p-Smad2/3、α-SMA蛋白和α-SMAm RNA表达水平升高,有显著性差异(P0.05);与B组相比,C组、D组、E组TGF-β1、p-Smad2/3、α-SMA蛋白和α-SMAm RNA表达水平降低,Smad7和E-cadherin蛋白和E-cadherin m RNA表达水平增高,有显著性差异(P0.05)。结论:加味六君子汤可能通过TGF-β/Smad信号通路,抑制腹膜间皮细胞EMT进程,进而起到一定拮抗腹膜纤维化作用。     

加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠Smad7及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的:探讨预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠Smad7和Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)基因表达的影响。方法:雄性ICR小鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组及加味茵陈四逆汤高、中、低剂量组,每组8只。采用腹腔注射30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,计算肝脏指数;试剂盒检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平;各组行HE染色观察肝组织病理改变并进行肝纤维化分级;RT-q PCR法检测肝组织Smad7、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA表达。结果:(1)加味茵陈四逆汤中、低剂量组肝脏指数和HA、LN水平较模型组显著降低(P0.05);(2)加味茵陈四逆汤各剂量组肝纤维化较模型组减轻(P0.05);(3)与模型组比较,各给药组CollagenⅠmRNA表达显著降低(P0.05),除加味茵陈四逆汤高剂量组外,各给药组Smad7 mRNA表达显著升高(P0.05),除加味茵陈四逆汤低剂量组外,各给药组CollagenⅢmRNA表达显著降低(P0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠Smad7表达,抑制CollagenⅠ、CollagenⅢ表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。     

基于TGF-β1/Smads通路的鹿红方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的观察鹿红方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响,从TGF-β1/Smads通路探讨其作用机制。方法采用左冠状动脉结扎法制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、培哚普利组和鹿红方低、中、高剂量组,鹿红方低、中、高剂量组分别予鹿红方0.625、1.25、2.5 g/kg灌胃,培哚普利组予培哚普利2 mg/kg灌胃,模型组及假手术组予等体积生理盐水,每日1次。灌胃8周后,超声心动图检测大鼠左室射血分数(LVEF)和缩短分数(FS);HE和Masson染色检测心脏组织病理变化,计算心肌胶原容积分数(CVF);PCR和Western blot分别检测心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7m RNA和蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠LVEF、FS明显降低(P0.01),心肌组织局部出现细胞消失,结缔组织内部有大量淋巴细胞浸润,细胞发生肿胀,呈纤维化改变,CVF明显升高(P0.01),心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达升高,Smad7 mRNA和蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,鹿红方低、中、高剂量组及培哚普利组大鼠LVEF、FS明显升高(P0.01),结缔组织增生、淋巴细胞浸润减少,心肌纤维化改善,CVF明显降低(P0.05,P0.01),鹿红方中、高剂量组及培哚普利组大鼠心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达明显降低,Smad7 mRNA和蛋白表达明显升高(P0.01)。结论鹿红方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化有良好的抑制作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smads通路有关。