非小细胞肺癌中表皮生长因子受体基因拷贝的检测及其临床意义

目的 检测国人非小细胞肺癌标本中表皮生长因子受体(EGFR)基因高拷贝的发生率及与临床特征的关系.方法 236例非小细胞肺癌标本制作成组织微阵列,使用Vysis公司的荧光原位杂交探针检测EGFR基因拷贝数.结果 193例标本得到结果 ,检测到EGFR基因高拷贝81例(占42.0%),其中42例(21.8%)为高多倍体,39例(20.2%)为基因扩增.其发生与病理、分期、性别、吸烟等临床特征无明显相关,与患者的1-3年生存率无明显相关.结论 国人肺癌中EGFR基因拷贝数的分布情况与西方人类似,与临床特征及预后无明显相关.     

表皮生长因子受体基因突变非小细胞肺癌腹膜转移5例预后分析

目的分析表皮生长因子受体(EGFR)基因突变阳性的非小细胞肺癌(NSCLC)腹膜转移患者的预后因素。 方法收集2014—2019年收治的EGFR突变阳性NSCLC腹膜转移患者的临床资料。主要观察和分析指标为中位生存期(mOS ),其中mOS1表示从确诊不可切除的中晚期肺癌开始或根治性切除术后发生复发和/或转移开始接受一线酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗至出现肿瘤耐药的时间,mOS2表示从确诊腹膜转移开始至死亡或随访终点的时间。 结果共收集5例患者,均为异时性转移,第一代TKI治疗耐药后出现腹膜转移。耐药后再次基因检测发现EGFR T790M突变阳性3例。mOS1：总体为14.4个月;EGFR 19外显子突变者为18.8个月,21外显子突变者为16.3个月,18外显子突变者为15.6个月。mOS2：总体为7.5个月;EGFR T790M突变阳性者为10.4个月,EGFR T790M突变阴性者为5.2个月;接受靶向治疗联合血管抑制剂治疗者为12.6个月,单纯靶向治疗者为9.3个月,血管抑制剂联合化学治疗者为6.2个月,单纯血管抑制剂治疗者为4.2个月。 结论EGFR突变阳性NSCLC患者腹膜转移后再次行基因检测非常必要,靶向治疗联合血管抑制剂治疗策略可能使患者获得更长的生存期。     

非小细胞肺癌中表皮生长因子受体基因及蛋白的异常

目的 检测国人非小细胞肺癌标本中表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂疗效预测指标:EGFR蛋白过表达、基因高拷贝和基因突变的发生特点及相互关系.方法 226例肺腺、鳞癌标本制作成组织微阵列,使用免疫组织化学检测EGFR蛋白表达、荧光原位杂交检测基因拷贝数,其中94例腺癌标本进行EGFR基因突变检测.结果 国人非小细胞肺癌中EGFR蛋白过表达率为55.3%,鳞癌中的过表达率高于腺癌(P=0.001);EGFR基因高拷贝发生率42.0%,与各临床特征无显著相关(P>0.05);EGFR基因突变在腺癌标本发生率为42.6%,与女性和非吸烟显著相关(P=0.002);EGFR蛋白过表达与基因高拷贝显著相关(P=0.005),但EGFR基因突变与基因高拷贝和蛋白过表达均无相关(P>0.05).结论 EGFR抑制剂疗效预测指标中,EGFR蛋白过表达和基因高拷贝的发生情况在国人非小细胞肺癌与西方病人相近,仅EGFR基因突变的发生率高于西方病人.     

支气管内超声引导纵隔淋巴结穿刺活检术检测非小细胞肺癌表皮生长因子突变

目的 探讨经气管超声引导内镜穿刺(EBUS-TBNA)纵膈淋巴结穿刺标本中表皮生长因子受体(EGFR)突变检测的可行性.方法 收集2010年2月至2010年7月全部26例经EBUS-TBNA纵膈淋巴结穿刺诊断为肺腺癌的标本.穿刺针为EBUS标准22G针,待涂片快速细胞学病理诊断腺癌后,在同一部位穿刺,将穿刺标本推入生理盐水中.经离心后首先提取组织DNA,采用胸外科优化的突变体富集法检测外显子19及21的突变.首先经过特异性消化野生型EGFR基因的限制性内切酶切割,再进行聚合酶链反应(PCR)扩增.因绝大部分野生型基因已断裂,无法作为PCR反应模板,使得扩增产物中突变型基因的比例大大增加.结果 全部26例患者均成功提取DNA,男16例,女10例,平均年龄62.1岁(34～ 79岁).经EBUS穿刺2组、4组、7组或10组淋巴结,诊断为肺腺癌,涂片标本均显示淋巴细胞背景中可见多量腺癌细胞.经改良突变体富集法检测示其中12例存在EGFR突变,突变率达到46.2％,7例为外显子19突变,5例为外显子21突变,余14例阴性全部标本均进行测序验证,14例阴性者测序也为阴性,12例突变者测序仅7例为阳性,余5例测序为阴性.全部12例EGFR突变患者中4例患者通过新辅助化疗后进行了根治性手术,术后对肿瘤标本再次检测EGFR基因突变,检测结果与术前相同.结论 采用EBUS-TBNA穿刺纵膈淋巴结组织标本来检测EGFR突变是可行的,通过高灵敏度的检测方法可获得更高的检出率.     

K-ras突变导致肺癌细胞对表皮生长因子受体抑制剂耐药的机制

目的 比较不同细胞株引入K-ras突变质粒前后对表皮生长因子受体(EGFR)信号传导通路活性的变化,探讨K-ras突变对于EGFR抑制剂耐药的机制.方法 通过噻唑蓝(MTF)比色法检测HCC827及H292细胞在转染K-ras基因前后的EGFR下游AKT及STAT通路抑制剂敏感性变化,免疫印迹法(Western blot)检测EGFR下游通路激活状态变化.结果 转染后HCC827细胞对于AKT和STAT通路抑制剂敏感性仅下降1.9和5.3倍,H292细胞对于AKT和STAT通路抑制剂敏感性仅下降3.0和2.5倍,远低于吉非替尼敏感性下降程度,转染K-ras的HCC827细胞AKT通路和STAT3通路持续激活,而转染K-ras的H292细胞AKT通路和STAT3通路的活性降低.结论 K-ras导致EGFR抑制剂耐药的原因可能还存在其他耐药机制,携带EGFR基因突变或野生型的肺癌细胞中,K-ras突变对于AKT和STAT通路的影响可能存在不同.

Abstract：

Objective By comparing the activity of signaling pathway in different cell lines affected by K-ras mutation, to investigate the resisitance to epidermal growth factor receptor (EGFR) inhibitors due to K-ras mutation. Methods Methyl thiazol tetrazolium (MTF) method was used to mensure the sensitivity and half maximal inhibitory concentration ( IC50 ) of AKT and STAT inhibitors after transfection of K-ras or blank plasmid into HCC827 and H292 cells. Western blotting was used to compare the activity of downstream signaling pathway in different cell lines. Results After transfection of mutant K-ras, the IC50 of AKT and STAT inhibitors in HCC827 cells was reduced by 1.9 and 5.3 times respectively, and that in H292 cells was reduced by 3.0 and 2. 0 times respectively. The activity of AKT and STAT pathways in HCC827 cells transfected with mutant K-ras was continuously activated, while that in H292 cells was suppressed. Conclusion K-ras-induced resistance to EGFR inhibitors may be related to other mechanisms. In the tumor cells bearing mutant or wild-type EGFR gene, there may exist different influences of K-ras mutations on AKT and STAT pathways.     

非小细胞肺癌中人表皮生长因子的表达及其临床意义

本研究旨在探讨erbB-2／HER-2在肺癌组织中的表达情况与临床病理的关系。 一、材料与方法 1．材料：研究材料取自武汉协和医院胸外科1999年至2004年的105例非小细胞肺癌患者，人选患者诊断明确，术前均未做过放疗、化疗并，病理类型均由术后病检证实，[第一段]     

非小细胞肺癌患者围术期内皮抑素和表皮生长因子受体水平对生存的影响

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床和病理特征、围术期血清内皮抑素和表皮生长因子受体(EGFR)水平对患者生存的影响。方法收集2008年1月至12月在上海交通大学附属第六人民医院胸外科接受手术治疗的50例NSCLC患者,从术后开始随访至2014年1月,平均随访时间为36.44个月。采用多因素回归分析方法分析50例NSCLC患者生存的相关因素。结果50例NSCLC患者的5年生存率为53.7%,中位生存期为50.6个月。肿瘤最大径3.5cm的患者生存率显著优于肿瘤最大径≥3.5cm的患者(χ~2=8.086,P=0.004);肺腺癌患者的生存率显著优于肺鳞癌患者(χ~2=7.527,P=0.006);术后病理分期Ⅰ期的患者生存率显著优于Ⅱ和Ⅲ期患者(χ~2=4.681,P=0.03;χ~2=7.990,P=0.005);术前内皮抑素水平20.4ng/ml的患者生存率显著优于内皮抑素水平≥20.4ng/ml的患者(χ~2=5.213,P=0.022);术后EGFR水平≥44.7pg/ml的患者生存率显著优于EGFR水平44.7pg/ml的患者(χ~2=13.908,P=0.000),差异均有统计学意义。多因素回归分析显示术后EGFR水平是影响预后的独立因素(P=0.000)。结论术前内皮抑素水平低的患者和术后EGFR水平高的患者具有更好的生存优势。     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂与非小细胞肺癌的临床研究现状

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)能显著改善EGFR激活突变的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的生存期。几乎所有EGFR突变的NSCLC肿瘤最终都获得了对EGFR-TKIs的耐药性,而获得EGFR-TKIs耐药性是目前治疗EGFR突变的NSCLC面临的巨大挑战。近几年来,在EGFR-TKI药物的研究及NSCLC的治疗方面有了新的突破,该文就EGFR-TKI与NSCLC的相关临床研究及应用取得的进展进行阐述。     

非小细胞肺癌患者中B细胞淋巴瘤-2、人体第二表皮生长因子受体蛋白表达的比较研究

目的 研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、人体第二表皮生长因子受体（Her-2）蛋白的表达情况及临床意义.方法 应用组织芯片、免疫组化技术检测208例NSCLC患者的肿瘤组织、150例癌旁组织以及17例良性肺疾病肺组织中的Bcl-2、Her-2蛋白的表达情况.结果 ①NSCLC癌组织中Bcl-2蛋白表达率明显高于癌旁组织及肺良性疾病肺组织（ P〈0.05）;Bcl-2蛋白表达水平与NSCLC临床分期及淋巴结转移有相关性（P〈0．05）.②NSCLC癌组织中Her-2蛋白的表达率明显高于癌旁组织及肺良性疾病肺组织（P〈0.05）;Her-2蛋白表达水平与NSCLC分化程度差异有统计学意义（P〈0．05）.结论 ①Bcl-2、Her-2蛋白在NSCLC组织中均高表达,提示Bcl-2及Her-2基因的表达异常与NSCLC的发生发展密切相关;②Bcl-2蛋白表达程度与NSCLC的临床分期及淋巴结转移有关,Her-2蛋白表达程度与NSCLC的分化程度有关,提示两者均与肿瘤恶性生物学行为密切相关.     

胸腔镜肺叶切除手术治疗非小细胞肺癌新进展

当今,包括肺叶切除、食管切除等绝大部分胸外科手术均可以通过胸腔镜完成,特别是胸腔镜肺叶切除手术已经分别于2006年、2007年成为美国国家综合癌症网络(NCCN)和美国胸部医师协会(ACCP)肺癌治疗指南中肺癌的标准手术方式.     

手术切除的非小细胞肺癌XRCC1和TYMS基因多态性检测结果分析

目的 总结分析手术切除的非小细胞肺癌患者肿瘤组织标本XRCC1基因399密码子多态性检测、TYMS基因5'非翻译区增强子序列多态性检测表达规律,探讨其在指导手术切除的非小细胞肺癌以术后化疗个体化为目的肿瘤标志物联合检测中的临床意义.方法 回顾性总结分析首都医科大学附属北京友谊医院胸外科2010年2月-2014年6月150例NSCLC患者手术切除的肿瘤组织XRCC1和TYMS基因多态性检测结果.应用SPSS 21.0进行统计分析.结果 XRCC1 399基因型常见的有Arg/Arg、Arg/Gln和Gln/Gln,分别为88例(58.7％)、55例(36.7％)和7例(4.6％).TYMS携带5'-UTR串联重复序列常见的是3R/3R、2R/3R和2R/2R基因型分别为106例(70.7％)、38例(25.3％)和6例(4.0％).结论 手术切除的NSCLC中,XRCC1 399基因型Arg/Arg最为常见,其次为Arg/Gln型;TYMS基因型3R/3R占70％以上,尤其是腺癌中比例更高.不建议将XRCC1 399 Arg/Gln基因型作为排除铂类化疗的标志物,同时也不建议将TYMS 3R/3R基因型作为排除培美曲塞化疗的标志物.     

高龄非小细胞肺癌患者的手术治疗及预后

目的比较年轻和高龄非小细胞肺癌（NSCLC）患者的临床基本特征与生存率,探讨高龄患者围手术期的处理特点。方法根椐上海市疾病预防与控制中心数据统计,选取我院2002年1～12月手术的178例非小细胞肺癌患者的临床资料,依据年龄分为年轻组（〈50岁,89例）和高龄组（〉70岁,89例）。回顾性分析两组患者相关临床指标、手术方式、术后并发症,用Kaplan—Meier法进行生存率计算。结果高龄组患者中鳞状细胞癌比例高于年轻组（Х^2=9．281,P=0．000）,而性别、吸烟人数、病理类型、TNM分期、手术方式、术后放化疗等临床特征及分布差异无统计学意义（Х^2≤5．569,P〉0．05）。术前合并心血管疾病、慢性支气管炎者高龄组高于年轻组（Х^2=14．053,13．044,P=0．000）,术后并发症发生率高龄组高于年轻组（Х^2=12．842,P=0．000）;高龄组术后1、3、5年生存率分别为71．43％,33．53％和27．83％;年轻组分别为77．78％,46．67％和44．07％,两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论高龄非小细胞肺癌患者术后风险相对较高,应加强围手术期的处理,手术可获得与年轻患者接近的长期生存率,仍是值得首选的治疗方式。     

全胸腔镜手术治疗非小细胞肺癌62例

我院2010年7月至2011年3月期间收治62例非小细胞肺癌患者行电视胸腔镜手术(VATS),效果良好,现总结其经验. 1 临床资料与方法 1.1一般资料 全组共62例,男33例,女29例;年龄35～81岁.以"咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、呼吸困难"等症状入院,术前行胸部增强CT、气管镜以及头部、骨、肝、胆、脾、肾上腺等检查排除转移,病变位于右肺上叶22例,右肺中叶4例,右肺下叶23例,左肺上叶5例,左肺下叶8例.术前cTNM分期:Ⅰa期8例,Ⅰb期17例,Ⅱ期37例. 1.2手术方法 腋中线第7～8肋间1 cm切口作为胸腔镜观察孔,腋前线第3、或4肋间做4 cm左右切口作为主操作孔,腋后线或肩胛下线第8～9肋间2 cm切口,作为副操作孔.VAST过程与文献[1]描述一致,需在胸腔镜下完成探查、分离、止血、缝合等操作.采用专用的腔镜下切割缝合器分别处理肺静脉、肺动脉和肺叶支气管,对于肺叶裂发育较差的肺裂,也采用腔镜下切割缝合器处理.     

胸腔镜肺叶切除治疗早期非小细胞肺癌

2008年6月至2009年5月我科开展全胸腔镜肺叶切除治疗早期非小细胞肺癌(均为周围型)26例,现总结其初期开展全胸腔镜肺叶切除的经验,以供初学者交流.     

表皮生长因子对人小细胞肺癌细胞Survivin表达的影响及其机制

目的 探讨表皮生长因子(EGF)对人小细胞肺癌NIC-H446细胞中凋亡抑制因子Survivin表达的影响及其调控Survivin的机制.方法 噻唑蓝(MTT)法测定EGF对细胞增殖率的作用.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)方法测定EGF对NIC -H446细胞Survivin表达的影响.Western blot方法测定EGF对NIC-H446细胞p38丝裂原活化激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、磷酸化JNK (p-JNK)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)信号通路蛋白的表达影响.结果 EGF可促进NIC-H446细胞增殖,具有浓度-时间依赖性.与对照组(0.36±0.06、0.57 ±0.15)比较,EGF组Survivin mRNA(0.69±0.12)和蛋白(0.89±0.19)表达明显升高(P＜0.01).与对照组(0.29±0.08)比较,EGF组p-p38MAPK蛋白表达水平(0.68±0.27)明显上升(P＜0.01),其他蛋白表达均无明显变化.EGF+ SB203580组Survivin蛋白表达(0.56±0.17)、p-p38MAPK蛋白表达(0.41±0.11)显著低于EGF组(0.92 ±0.21、0.72 ±0.19,P＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义.结论 EGF通过活化p38MAPK信号通路上调小细胞肺癌细胞中Survivin的表达,促进细胞增殖,这可能是小细胞肺癌发展的重要机制.     

乳腺癌表皮生长因子受体的检测及意义

表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）具有酪氨酸激酶活性，与表皮生长因子结合激活后，具有促有丝分裂作用而增强细胞分裂。我们以免疫组化法对４６例原发性乳腺癌检测其ＥＧＦＲ表达，结果显示其阳性表达与组织学分类无关（Ｐ＞０．０５），与组织学分级有显著相关，恶性程度越高，阳性率越高（Ｐ＜０．０１），与组织学分级指标中的有丝分裂核和核的多形性二项显著相关（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１），提示ＥＧＦＲ与乳腺癌细胞的生长分化密切相关。认为ＥＧＦＲ可能对预测乳腺癌的潜在恶性程度有较重要的参考价值，在临床上可能预测出某些一般预测因素未能确认的早期复发预后不良患者。     

EGFR突变在Ⅰ期非小细胞肺癌患者中的分布趋势

目的 检测Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)的突变情况,初步探讨EGFR突变的分布特征.方法 收集272例术后病理为Ⅰ期非小细胞肺癌患者肿瘤组织标本,提取DNA,采用ARMS法对EGFR基因的第18、19、20及21外显子片段进行检测,根据阳性质控、阴性质控和DNA质控对EGFR突变类型分析判断.结果 272例Ⅰ期NSCLC患者肺癌组织中,154例(56.62％)存在EGFR的体细胞突变.其中,2例(1.3％)18号外显子上发生替代突变(G719S),53例(34.4％) 19号外显子上发生缺失突变(19-del),6例(3.9％)20号外显子上发生插入突变(20-ins),97例(63.9％) 21号外显子上发生替代突变(L858R).2个外显子同时突变11例.21外显子突变(敏药突变)合并20外显子突变(耐药突变)率(4/11,36.3％)显著高于19外显子突变(敏药突变)合并20外显子突变(耐药突变)率(1/11,9.1％),P＜0.05;肺腺癌的突变率(148/223,66.4％)显著高于肺鳞癌突变率(2/40,5％);肺腺鳞癌突变率(4/4,100％)显著高于肺腺癌、鳞癌和大细胞癌(0/5,0％)的突变率.结论 Ⅰ期NSCLC患者EGFR突变率56.62％,肺腺鳞癌、腺癌提示突变的高发性,EGFR突变多集中在19和21号外显子,21外显子突变比19外显子突变更易合并20外显子突变(耐药突变).     

手术切除的T4卫星灶非小细胞肺癌的预后分析

目的 研究手术治疗后T4卫星灶非小细胞肺癌的生存和预后.方法 回顾性分析1995年1月至2005年3月经手术切除的42例T4卫星灶N0-2M0非小细胞肺癌患者的术后生存情况,评价各临床病理因素与预后的关系,并与同期32例手术切除的T4局部器官侵犯N0-2M0的非小细胞肺癌进行生存比较.结果 T4卫星灶组无手术死亡,术后早期并发症率为14.3%,1、3、5年生存率分别为76.2%、57.1%和46.0%;T4局部器官侵犯组术后早期并发症率为28.1%,1、3、5年生存率分别为62.3%、31.5%和20.0%;两组生存率有明显差异(P<0.05).根据淋巴结转移情况进一步分组,两组中N0M0患者的生存率均高于同组的N1-2M0患者(P<0.05).单因素分析显示,组织学类型、原发灶大小、有无淋巴结转移及是否术后辅助化疗与T4卫星灶患者的5年生存率相关;多因素分析显示原发灶大小、有无淋巴结转移及是否接受术后化疗是独立的预后影响因素.结论 原发灶直径3 cm、淋巴结转移以及未接受术后化疗的T4卫星灶非小细胞肺癌预后不佳,经手术完全切除的T4卫星灶非小细胞肺癌的预后好于T4局部器官侵犯者.     

全胸腔镜肺段切除手术治疗早期非小细胞肺癌的现状

全胸腔镜(VATS)肺段切除手术成为目前肺癌手术中最为微创的术式之一，由于适应证严格，对术者的要求较高，未获广泛推广。近年来，随着VATS肺段切除术治疗早期肺癌经验的累积，其优势也逐渐显现。现对VATS肺段切除手术治疗早期非小细胞肺癌的现状，予以综述如下。     

K-Ras突变对表皮生长因子受体抑制剂敏感细胞株的影响

目的 观察K-Ras突变对于携带表皮生长因子受体(EGFR)突变细胞的EGFR抑制剂敏感性的影响.方法 构建K-Ras突变真核表达质粒,采用脂质体转染技术转染肺癌细胞HCC827(EGFR突变,K-Ras野生)和H292(EGFR、K-Ras均野生),噻唑蓝(MTT)比色法测定转染K-Pas突变质粒和空白质粒后各细胞对EGFR抑制剂的半数抑制浓度(IC_(50)).结果 真核表达质粒构建成功.细胞HCC827未转染K-ras突变质粒对吉非替尼(Iressa)的IC_(50)为0.007,转染后对Iressa的IC_(50)为12.3,差异有统计学意义(P<0.01).细胞H292未转染K-ras突变质粒对Iressa的IC_(50)为0.04,转染后对Iressa的IC_(50)为12.0,差异有统计学意义(P<0.01).细胞A549(K-Ras突变)对Iressa的IC_(50)为12.8,与转染K-ras突变质粒的细胞HCC827及H292比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 野生型或突变型EGFR出现K-Ras突变均可引起吉非替尼耐药,其程度与K-Ras突变的细胞株相当.