巢式PCR检测肺癌患者外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA的临床意义

目的 研究肺癌患者外周血中CK19 mRNA,LUNX mRNA的表达及其联合检测的临床意义.方法 采用巢式PCR技术检测50例肺癌患者、20例肺良性疾病患者和20例健康人外周血CK19 mRNA、LUNX mRNA的表达,结合肺癌患者常规病理检查、肿瘤类型、临床分期对临床检测结果的敏感性、特异性进行统计学分析.结果 50例肺癌患者外周血标本中CK19 mRNA阳性25例(50%),LUNX mRNA阳性29例(58%);20例肺良性疾病中CK19 mRNA阳性2例(10%),LUNX mRNA均为阴性;20例健康人外周血CK19 mRNA、LUNX mRNA的表达均为阴性.在肺腺癌、肺鳞癌中,CK19 mRNA的表达阳性率分别为42.8%,55.2%,LUNX mRNA的表达阳性率分别为66.7%,51.7%.Ⅲ,Ⅳ期肺癌CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达阳性率高于Ⅰ,Ⅱ期.结论 CK19 mRNA,LUNX mRNA可作为检测肺癌患者外周血微转移的标记物,联合检测有助于提高准确性.     

RT-PCR检测外周血中CK19mRNA方法的优化

目的:探讨应用RT-PCR技术检测CK19 mRNA的优化方法.方法:采用RT PCR方法分别检测经病理确诊的胃癌组织及有明确肿瘤病灶的胃癌患者和健康对照者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:通过设计多对引物进行对比及设立未经逆转录的RNA为模板的对照可观察到CK19假基因及基因组DNA的干扰现象.在合理设计错配引物的基础上选择合适的退火温度可消除干扰.结论:在运用RT-PCR法检测外周血中CK19 mRNA表达时常存在基因组及假基因等因素的干扰,通过本方法可有效地克服这种干扰作用.     

早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义

目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义.方法:采用RT - PCR技术对47例Ⅰ a～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测.结果:在Ⅰ a～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89％ (7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0％ (0/37).在Ⅰ a～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P＜0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P＞0.05).结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关;推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标.     

非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

检测胃癌患者腹腔冲洗液CK19 mRNA和CEA mRNA用于预测腹膜微转移

目的:探索检测胃癌患者腹膜微转移的方法.方法:收集67例胃癌和9例胃良性病变患者腹腔冲洗液以及临床病理资料,分别采用巢式RT-PCR 检测腹腔冲洗液中角蛋白19(CK19)mRNA、癌胚抗原(CEA) mRNA、角蛋白20(CK20)mRNA表达;采用时间分辨荧光(TRF)检测腹腔冲洗液上清液中CEA蛋白(P-CEA)含量;采用H-E染色进行腹腔冲洗液细胞学(PLC)检查.结果:患者腹腔冲洗液中CK19 mRNA和CEA mRNA的阳性检出率分别为62.7%和52.2%,明显高于P-CEA(35.8%)、CK20 mRNA(34.3%)和PLC(31.3%)(P<0.01),且阳性率随肿瘤浸润深度、TNM分期及腹膜受累程度增加而增加.结论:巢式 RT-PCR联合检测胃癌患者腹腔冲洗液中CK19及CEA基因,可提高检测腹腔游离肿瘤细胞的灵敏性,适用于预测胃癌患者腹膜微转移.     

检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA微转移的临床意义

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其作为分子标志物检测NSCLC微转移的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测48例NSCLC患者,15例肺良性疾病（BLD）患者和10例健康人外周血CK19 mRNA的表达。结果NSCLC患者CK19 mRNA的阳性表达率明显高于BLD患者和健康对照者,差异有统计学意义（Х^2=24．735,P=0．000）。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率分别为44．4％（8／18）,75．0％（9／12）,92．3％（12／13）,4／5,不同临床分期NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异有统计学意义（Х^2=8．820,P=0．032）;有无淋巴结转移NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异亦有统计学意义（Х^2=6．813,P=0．009）;而不同病理类型、不同分化程度NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异无统计学意义（Х^2=4．655,P=0．459;Х^2=1．204,P=0．548）。结论检测外周血CK19 mRNA表达可作为诊断NSCLC患者微转移的一个有价值的参考指标。     

Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周血中的表达及临床意义

目的 探讨Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周中的表达及其在胃癌诊断及预后方面的价值。方法 利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测89 例胃癌患者及健康对照外周血中SurvivinmRNA 和CK19 mRNA 的表达情况,并利用统计学方法分析血清Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌中的诊断和预后价值。结果 RT-PCR 结果发现胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 的表达均高于健康对照组;ROC 曲线显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 为胃癌有效诊断分子靶点;χ2检验显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 与胃癌患者的TNM 分期呈正相关;Kaplan-Meier 生存曲线显示Survivin 和CK19 双阳性组的胃癌患者术后5 年生存率低于其他各组。结论 胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 表达水平增高,是胃癌早期诊断和判断预后的潜在分子指标。     

乳腺癌患者外周血CK19mRNA检测对辅助化疗有效性监测的临床研究

目的探讨乳腺癌血液微转移发生规律以及辅助化疗对血液微转移的影响。方法以60例乳腺癌术后患者为研究对象,根据临床分期分为3组(0~Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期),运用RT-PCR技术,以CK19mRNA为标志物,分别检测其辅助化疗前后血液微转移发生情况。结果①化疗前血液微转移阳性率为23.33%(14/60),其中0-Ⅰ期0%(0/9)、Ⅱ期16.22%(6/37)、Ⅲ期57.14%(8/14),三组之间差异有统计学意义(P<0.05)。②化疗结束血液微转移阳性率为3.33%(2/60),化疗前后血液阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。结论临床分期越晚,出现微转移可能性越大。辅助化疗能降低血液中微转移阳性率,是减少术后转移改善预后的重要措施。     

实时定量RT-PCR检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及其临床价值

目的：以细胞角蛋白19（CK19）mRNA作为基因标志，建立实时定量RT—PCR方法（QRT—PCR）检测乳腺癌患者外周血中播散的肿瘤细胞，并探讨其在乳腺癌微转移监测及预后预测中的临床应用价值。方法：采用QRT—PCR方法．检测102名正常献血员、177例乳腺原发癌患者及12例有远处转移的乳腺癌患者外周血有核细胞的CK19 mRNA水平。结果：正常对照组、原发乳腺癌组及远处转移组CK19 mRNA的中位数分别为67、542和1082。原发乳腺癌组与另外两组比较，CK19 mRNA平均水平差异具有显著性（P〈0．05）；以正常对照组CK19 mRNA的最大值497拷贝／ml血作为阳性阈值。原发乳腺癌患者外周血肿瘤细胞阳性检出率为52．0％，与正常对照组（0）比较差异具有显著性（P〈0．05），远处转移组肿瘤细胞阳性检出率（83．3％）显著高于r原发乳腺癌组（P〈0．05）；原发性乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及肿瘤细胞阳性率在临床病理因素各组间差异无显著性，但随着临床分期的增加，患者外周血CK19 mRNA水平呈递增趋势。结论：QRT—PCR方法定量检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平可早期发现血行播散的肿瘤细胞，应用于临床可指导个体化治疗方案的选择和疗效的动态监测，同时有望成为有价值的预后预测指标。     

喉癌患者外周血CK19mRNA及CK20mRNA的表达

目的研究喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达,探讨其I临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测喉癌患者术前外周血中CK19mRNA、CK20mRNA的表达。结果48例喉癌患者外周血中CK19mRNA阳性率为37．5％（18／48）,CK20mRNA阳性率45．8％（22／48）。10例肿瘤组织中CK19mRNA阳性率为100％（10／10）。CK20mRNA阳性率80％（8／10）;10例声带息肉患者外周血为阴性对照,CK19mRNA阳性率为10％（1／10）,CK20mRNA阳性率为0。结合临床病理资料,喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA表达与喉癌T分期、临床分期及淋巴结转移存在相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用巢式RT—PCR技术,对喉癌患者外周血单个核细胞CK19mRNA和,或CK20mRNA的检测,在分子生物学水平对喉癌细胞对周围组织的浸润及局部扩散提供了参考,有助于指导临床治疗。     

大肠癌患者外周血中CK20 mRNA检测的临床意义

目的　探讨大肠癌患者外周血微转移的检测及临床意义。方法　应用反转录聚合酶链反应 (RT-PCR) ,检测 4 7例大肠癌患者外周血中CK2 0mRNA的表达。结果　 4 7例病人外周血中查出CK2 0阳性表达 2 7例 ,阳性率 5 7.5 %。CK2 0阳性检出与Dukes分期、淋巴转移有关而与肿瘤病理分化程度无关。结论　CK2 0mRNA可作为检测大肠癌病人外周血中微转移的良好指标 ,外周血中CK2 0mRNA检测有助于识别具有复发或远处转移倾向的大肠癌病人。     

大肠癌患者血清癌胚抗原、CEAmRNA和CK19mRNA检测的临床意义探讨

目的探讨大肠癌患者血清中癌胚抗原（CEA）、CEAmRNA和CK19mRNA检测的临床意义。方法大肠癌患者48例为研究对象,放射免疫分析法检测血清中CEA水平;RT—PCR法检测患者血清中CEAmRNA和CK19mRNA水平。分析血清CEA、CEAmRNA、CK19mRNA水平与大肠癌患者病理因素关系;比较CEA、CEAmRNA、CK19mRNA单独及联合检测的阳性率。结果大肠癌患者血清中CEA、CEAmRNA、CK19mRNA水平在DuckesC＋D期患者的表达率明显高于DuckesA＋B期患者。CEA＋CEAmRNA＋CK19mRNA联合检测阳性率为87．5％,明显高于CEA、CEAmRNA、CK19mRNA任何1项检测的阳性率,也明显高于CEA-i-CEAmRNA、CEA＋CK19mRNA、CEAmRNA＋CK19mRNA任何2项联合检测的阳性率。结论联合检测CEA、CEAmRNA和CK19mRNA可提高大肠癌阳性检出率。     

检测GK19基因对诊断非小细胞肺癌外周血微转移的意义

目的 探讨CK19(cytokeratin19,CK19)基因表达在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)外周血微转移过程中的意义.方法 采用real-time PCR检测NSCLC、肺良性病(benign lung disease,BLD)患者和健康人外周血中CK19基因的表达及其与NSCLC外周血微转移的关系.结果 NSCLC微转移患者的CK19 mRNA的表达水平明显高于BLD患者和健康人(P＜0.05),其中与健康组比较CK19 mRNA表达水平上升了143％,与BLD组比较CK19 mRNA表达水平上升了53％.结论 CK19基因可作为检测非小细胞肺癌外周血微转移的重要指标.     

乳腺癌患者外周血CK-19 mRNA检测的临床意义

目的探讨外周血CK-19mRNA表达与乳腺癌的关系，评价其在乳腺癌诊断上的价值。方法应用RT-PCR技术检测200例乳腺癌患者外周血中CK-19mRNA表达情况，并以66例乳腺良性疾病和60例正常健康女性作为对照。结果200例乳腺癌患者48例外周血CK-19为阳性，66例乳腺良性疾病患者中3例阳性，而同时检查的60位健康者，他们的外周血CK-19均为阴性；不同年龄病人的CK-19检测阳性率对比，彼此之间差异无统计学意义；肿瘤不同分期CK-19阳性率对比差异有统计学意义。结论RT—PCR法检测CK-19mRNA可作为乳腺癌诊断的指标。