胸苷酸合成酶基因多态性对5-氟尿嘧啶治疗效果的临床研究

目的分析胸苷酸合成酶基因多态性对5-氟尿嘧啶临床疗效的影响。方法选取我院服用5-氟尿嘧啶进行治疗的50名食管癌患者,对患者胸苷酸合成酶进行基因分型,其中,将编码基因启动子区域包含两重串连28bp重复片断的纯合子基因型定义为S/S型,将编码基因启动子区域包含三重串连28bp重复片断的纯合子基因型定义为R/R型。杂合子基因型定义为R/S型。通过RT-PCR对mRNA含量进行相对定量。根据患者基因型测定结果,分析遗传学机制对5-氟尿嘧啶临床药物疗效的影响。结果50名患者中,发现R/R型患者20名,总有效率10%,R/S型患者22名,总有效率13.6%,S/S型患者8名,总有效率50%,R/R组与S/S比较以及R/S组与S/S组比较差异有统计学意义(P<0.05)。S/S型患者药物治疗平均生存时间20.3个月,较R/S组平均生存时间8.1个月以及R/R组平均生存时间7.9个月差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸苷酸合成酶基因多态性是一个潜在的影响5-氟尿嘧啶的影响因素。     

胸苷酸合成酶基因多态性与肿瘤化疗敏感性的关系

胸苷酸合成酶（thymidylate synthase,TS）在嘧啶代谢中发挥重要作用,是DNA合成的关键酶.它能与甲基辅基将一磷酸脱氧尿苷（deoxy uridine monophosphate, dUMP）甲基化成脱氧胸苷三磷酸（deoxythymidine triphosphated,dTMP）作为嘧啶的类似物,5-FU代谢物氟脲嘧啶脱氧核苷酸（5-fluoro-2-deoxyuridylate,FdUMP）与TS及甲基辅基形成三聚物,阻断dTMP形成,     

胃肠道恶性肿瘤中胸苷酸合成酶基因多态性与5-FU化疗敏感性的Meta分析

目的 探讨胃肠道恶性肿瘤患者中胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)基因5’-端非翻译区域(5′-untranslated region,5′-UTR)多态性与以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)为基础的化疗敏感性的关系.方法 应用Meta分析随机效应模型对胃肠道恶性肿瘤患者的胸苷酸合成酶基因多态性与5-FU化疗敏感性的文献进行综合定量评价,运用REVMAN5.0进行统计学处理.结果 共入选4篇英文文献,3篇中文文献,483例患者,其中5′-UTR串联重复序列2R/2R、2R/3R基因型279例,化疗有效者122例,合并有效率43.7％,3R/3R基因型204例,化疗有效者71例,合并有效率34.8％,异质性检验显示,I2=72.0％,P=0.001,采用随机效应模型分析,OR为1.87,95％可信区间0.81～4.28,在亚组分析中,亚洲人群、高加索人群、胃癌人群、结直肠癌人群中的OR值分别为4.10(95％ CI:2.19～7.68)、0.75(95％ CI:0.26～2.15)、6.80( 95％ CI:2.33～19.86)、1.09(95％CI:0.38～3.08).结论 胃肠道恶性肿瘤中胸苷酸合成酶基因5｀UTR串联重复序列多态性与5-FU化疗敏感性无明显关系,在亚组分析时发现,亚洲人群和胃癌人群中2R/2R、2R/3R基因型化疗敏感性高于3R/3R基因型.     

胸苷酸合成酶基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病风险的Meta分析

目的 综合评价胸苷酸合成酶（TS）基因del6多态性与儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）易感性的关系。方法 系统检索Pubmed、Science Direct、Google Scholar、中国知网（CNKI）和万方数据库,获取有关TS基因del6多态性与儿童ALL发生风险的文献资料,评估纳入研究的方法学质量并提取相关数据。以比值比（OR）和95%可信区间（CI）作为效应指标评估关联强度,纳入研究之间的异质性检验和合并OR值计算采用Revman 5.3软件,发表性偏倚应用漏斗图评估。结果 共纳入6个病例-对照研究,包括ALL患儿2104例,对照2320例。Meta分析结果显示,在整体人群比较中4种遗传模型均未发现TS基因del6多态性与儿童ALL易感性有显著性关联（杂合子模型：OR=0.99,95% CI：0.85~1.15,P=0.87;纯合子模型：OR=1.11,95% CI：0.90~1.38,P=0.33;隐性模型：OR=0.97,95% CI：0.76~1.25,P=0.84;显性模型：OR=1.01,95% CI：0.88~1.17,P=0.86）;根据种族进行分层分析也未发现显著性关联。漏斗图未检测到显著性发表性偏倚,敏感度分析表明合并结果是稳健可靠的。结论 目前的Meta分析表明TS基因del6多态性与儿童ALL易感性无关联。     

胸苷酸合成酶与结直肠癌患者FOLFOX方案化疗预后的相关性分析

目的 探讨生物标志物胸苷酸合成酶(TS)基因表达与FOLFOX方案化疗后结直肠癌患者短中期预后的关系。方法 纳入本院收治的116例结直肠癌患者,使用改良FOLFOX6(mFOLFOX6)或改良FOLFOX7(mFOLFOX7)方案治疗12疗程后随访1~3年,比较TS的阳性、阴性表达患者的疗效、安全性和3年总生存率。结果 TS+和TS-患者的疗效分布间差异有显著性(χ²=10.510,P=0.015);TS+和TS-患者的恶心呕吐(χ²=18.644,P<0.001)、腹泻(χ²=16.518,P<0.001)和口腔黏膜炎(χ²=23.344,P<0.001)发生的严重程度分布差异有统计学意义;TS+患者的3年总生存率为38.3%,而TS-为31.4%(Log rank χ²=6.417,P=0.011,HR=1.784,5%CI:1.084～2.936)。结论 TS基因表达情况对结直肠癌患者接受FOLFOX方案化疗的疗效和安全性具有一定预测作用,其中TS还可预测患者中期生存情况。     

胸苷酸合成酶、胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶及二氟嘧啶脱氢酶的表达与乳腺癌预后的相关性

目的通过检测乳腺癌标本中胸苷酸合成酶（TS）、胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶（TP）、二氟嘧啶脱氢酶（DPD）表达情况,探讨乳腺癌的生物学行为与上述3个指标之间的相关性.方法采用免疫组织化学（ABC法）检测228例乳腺癌组织中TS、TP和DPD的表达情况.结果 TS、TP与患者的肿瘤大小、淋巴结状态、组织学分级及MVC有明显的相关性,与患者的年龄、激素受体状态（ER,PR）无关;DPD的表达与患者的年龄,肿瘤大小,淋巴结状态,激素受体状态（ER,PR）、组织学分级及MVC等诸多临床病理因素均无相关性;TS、TP表达阳性患者的10年无病生存率和总生存率明显低于表达阴性者（0、0、3.9%、0.9%和25%、25.4%、58.8%、61.8%）,具有显著的统计学差异（均P〈0.01）;DPD表达阳性和阴性患者的10年无病生存率和总生存率为8.8%、16.2%、23.3%、39.5%,均无显著性差异（均P〉0.05）.多因素分析发现：组织学分级、淋巴结状态、TS和TP的表达与患者的总生存率都有十分明显的相关性,而且TS和TP的危险系数分别为0.379、0.219,均小于1,这同样说明这两者对于总生存率来说都是非常强烈的保护因素.结论 TS、TP表达水平的高低有可能是乳腺癌患者一个重要的预后指标;DPD的表达与临床病理因素、10年无病生存和总生存率之间无任何相关性.     

胸苷酸合成酶和二氢嘧啶脱氢酶的表达与乳腺癌临床病理特征及预后的相关性

目的: 探讨胸苷酸合成酶（thymidylate synthase, TS）和二氢嘧啶脱氢酶（dihydropyrimidine dehydrogenase, DPD）在南疆地区乳腺癌患者肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法: 免疫组织化学染色法检测60例乳腺癌患者癌组织及其配对的癌旁组织中TS和DPD的蛋白表达;分析TS和DPD表达与临床病理特征的关系;Kaplan Meier法分析TS和DPD蛋白表达与患者生存时间的关系。结果： 乳腺癌组织中TS和DPD阳性表达率分别为56.67%（34/60）、46.67%（28/60）,均显著高于癌旁组织［36.67%（33/60）、26.67%（16/60）,均P＜0.05］;癌组织TS的表达与临床分期、组织分化程度和淋巴结转移显著相关（P＜0.01或P＜0.05）,而DPD表达仅与淋巴结转移显著相关（P＜0.05）。TS阳性表达患者生存时间显著低于阴性患者（P＜0.05）,而DPD表达与生存期无明显相关（P>0.05）。 结论： 乳腺癌组织中TS和DPD异常高表达,TS表达与部分临床病理特征以及患者生存时间相关。     

胸苷酸合成酶在大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶表达的差异

目的:研究是否存在大肠原发癌与相应淋巴结转移灶胸苷酸合成酶(TS)表达水平的差异.方法:收集石蜡包埋的大肠癌组织51例,淋巴结转移组织21例,正常大肠组织15例,大肠腺瘤组织8例,应用免疫组化方法研究了TS在正常大肠粘膜、大肠腺瘤,原发大肠癌和淋巴结转移癌中的表达规律.结果:(1)正常大肠粘膜组织及腺瘤组织均不表达TS,51例大肠癌组织中30例呈阳性表达,阳性率为58.8%.大肠癌组织TS表达水平与正常大肠粘膜组织及腺瘤组织相比有显著升高(P＜0.01);(2)淋巴结转移灶TS的表达在表达水平、染色范围和染色深度三个方面均高于原发灶,二者TS表达水平存在显著差异(P＜0.05).结论:大肠癌原发灶和淋巴结转移灶之间的TS表达水平存在显著差异,原发灶TS蛋白表达水平不能预测转移灶对以5-FU为基础的化疗的反应,应根据转移灶本身的TS表达水平选择化疗方案.     

胸苷酸合成酶基因5′-端非翻译区域多态性在肺癌诊疗中的应用

目的探讨胸苷酸合成酶(TS)基因5′-端非翻译区域(5′-UTR)多态性在肺癌诊疗中的应用效果。方法回顾性分析2018年8月至2019年6月50例非小细胞肺癌患者临床资料,所有患者均实施顺铂化学治疗方案,化学治疗2~3个周期后对其临床化学治疗总有效率进行评价,根据其化学治疗效果的不同分为A组(化学治疗敏感性高,25例),B组(化学治疗敏感性低,25例),2组均使用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对TS基因5′-UTR多态性进行检测,比较化学治疗敏感性与TS基因5′-UTR多态性与化学治疗敏感性及化学治疗毒性反应的关系。结果A组中TS基因5′-UTR2R/3R+2R/2R的分布率80%(20/25)明显高于B组48%(12/25),差异有统计学意义(P<0.05);非小细胞肺癌患者中TS基因5′-UTR2R/3R+2R/2R对化学治疗的毒性反应明显高于携带TS基因5′-UTR3R/3R,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TS基因5′-UTR2R/3R+2R/2R在化学治疗效果较好的患者中有着较为广泛的分布,并且TS基因5′-UTR3R/3R者对铂类化学治疗具有较强的耐药性。     

胰腺癌细胞胸苷酸合成酶基因多态性与其蛋白表达及5-FU化疗敏感性的关系

Background  Thymidylate synthase (TS) is a key regulatory enzyme for de novo DNA synthesis. TS activity is also an important determinant of the response to chemotherapy with fluoropyrimidine prodrugs, and its expression may be affected by gene polymorphisms. In this study, we investigated the associations between polymorphisms of the TS gene and its protein expression, and the implications on the efficacy of 5-fluorouracil (5-FU) in pancreatic cancer cells.

Methods  Genotypes based on the 28-bp TS tandem repeat for pancreatic cell lines were determined by electrophoretic analysis of PCR products. A single nucleotide polymorphism (SNP) at nucleotide 12 of the second 28-bp repeat of the 3R allele was determined by nucleotide sequencing. The chemosensitivity of pancreatic carcinoma cells to 5-FU in vitro was evaluated using Cell Counting Kit-8 (CCK-8). TS protein expression was analyzed by Western blotting.

Results  Seven pancreatic carcinoma cell lines had different genotypes in terms of the 28-bp TS tandem repeat, as follows: homozygous 2R/2R (T3M4 and BxPC-3 cells), heterozygous 2R/3R (AsPC-1, Capan-1, and SU86.86), and homozygous 3R/3R (PANC-1 and COLO357). The optical density ratio of genotypes 3R/3R, 2R/2R and 2R/3R was 1.393±0.374, 0.568±0.032 and 0.561±0.056, respectively. Cells with the 2R/3R or 3R/3R genotypes were further analyzed for the G to C SNP at nucleotide 12 of the second 28-bp repeat of the 3R allele, yielding heterozygous 2R/3Rc (AsPC-1, Capan-1, and SU86.86), homozygous 3Rg/3Rg (COLO357) and homozygous 3Rc/3Rc (PANC-1). The optical density ratio of homozygous 3Rg/3Rg cells and homozygous 3Rc/3Rc cells was 1.723±0.062 and 1.063±0.134, respectively, and this difference was statistically significant (P <0.05). Cells with the 2R/2R and 2R/3R genotypes of TS were hypersensitive to 5-FU in vitro as compared with those with the 3R/3R cells.

Conclusions  Polymorphisms in the TS gene influenced its protein expression and affected sensitivity of 5-FU in seven pancreatic cancer cell lines. Cells with the 3R/3R genotype had higher TS protein expression than the 2R/2R or 2R/3R genotypes. Cells of the 3R/3R genotype with high TS protein expression were shown lower 5-FU sensitivity than cells with the 2R/2R or 2R/3R genotypes. These data warrant large-scale clinical studies to assess the role of polymorphisms in the TS gene on its protein expression and chemosensitivity to 5-FU in pancreatic cancer.

     

Relationship between the expression of thymidylate synthase,thymidine phosphorylase and dihydropyrimidine dehydrogenase and survival in epithelial ovarian cancer

The mRNA and protein expression of thymidylate synthase (TS), thymidine phosphorylase (TP) and dihydropyrimidine dehydrogenase (DPD) and their relationship with prognosis were investigated. Real-time quantitative RT-PCR (Taqman) was used to detect the mRNA expression of TS, TP and DPD in formalin-fixed and paraffin-embedded 106 samples of epithelial ovarian cancer and 29 normal ovaries. A TATA box-binding protein (TBP) was used as an endogenous reference gene. A relationship between TS, TP, DPD expression a...     

ESR1基因单核苷酸多态性与乳腺癌内分泌治疗疗效的关系

目的了解雌激素受体基因(ESR1)单核苷酸多态性(SNP)位点在乳腺癌患者中的分布及其基因型与内分泌治疗疗效的关系。方法选取ESR1基因15个SNP位点(rs872921、rs2077647、rs3904766、rs2234693、rs11155816、rs827419、rs2347867、rs3798759、rs 1801132、rs985191、rs9340931、rs9397463、rs722209、rs3778099和rs3798577)作为遗传标记,运用PCR-限制性片段长度多态性分析、PCR-测序分析和荧光定量等位基因特异性PCR的方法对240例接受内分泌治疗的乳腺癌患者进行SNP基因分型。结果rs872921、rs3904766位点因多态性低被舍弃,其余位点存在多态性。rs2077647、rs3798759位点的等位基因型及基因型与内分泌治疗疗效相关,差异有统计学意义(P<0.05)。连锁不平衡(LD)分析和单倍型分析显示在ESR1基因上存在4个LD区,rs2077647~rs2234693(LD1)、rs2234693~rs11155816(LD2)、rs9397463~rs722209(LD3)和rs3778099~rs3798577(LD4),其中LD2和LD3组成的单倍型与内分泌治疗疗效相关(P<0.05)。rs11155816~rs827419、rs2347867~rs1801132组成的单倍型亦与内分泌治疗疗效相关(P<0.05)。结论ESR1基因上部分SNP位点及其形成的单倍型与内分泌治疗疗效相关,可能用于预测乳腺癌对内分泌治疗的反应。     

醛固酮合成酶基因多态性与高血压病相关性研究

本研究旨在观察我国华南地区汉族人群醛固酮合成酶 (CYP1 1B2 )基因 344C/T多态性与高血压病 (EH)相关性。　方法　以 1 36例原发性高血压病 (EH组 )和 1 1 0例健康查体者 (对照组 )为对象 ,测定相关临床指标 ;应用多聚酶链式反应 (PCR)、限制性内切酶方法检测CYP1 1B2 基因的多态性分布。　结果　EH组CYP1 1B2 基因 334C/T多态性与对照组比较基因型和等位基因分布均无显著性差异。　结论　CYP1 1B2 基因 344C/T多态性与我国华南地区汉族人群的EH发生无相关性     

食管及贲门癌变患者亚甲基四氢叶酸还原酶、胸腺嘧啶合成酶基因多态性分析

目的:探讨血清叶酸代谢关键酶亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)与胸腺嘧啶合成酶(TS)基因多态性与食管及贲门癌易感性的关系.方法:选取安阳地区病理证实的275例食管鳞癌(SCC)及129例贲门腺癌(GCA)患者和315例年龄性别与其匹配的正常对照人群,采用PCR基础上的限制性片段多态检测法(PCR-RFLP)对其NTHFR和TS各基因型进行分析.结果:①对照组MTHFR677 CC、CT及TT基因型的分布频率分别为24%、45%和31%;SCC组分别为19%、38%和43%;GCA组分别为19%、35%和46%.对照组TSER3R/3R(4R)、2R/3R及2R/2R基因型的分布频率分别为64%、34%和2%;SCC组分别为62%、35%和4%;在GCA组,分别为63%、30%以及7%.②与MTHFR677 CC及MTHFR677 CT两基因型相比,TT携带者患SCC的危险度升高1.62倍(OR=1.62,95%可信区间(CI)为1.15～2.30,P=0.006),而GCA OR=1.81(95%CI为1.17～2.81,P=0.008).③与其他基因型相比,纯合突变型(TSER 2R/2R)患SCC的危险度升高2.44倍(OR=2.44,95%CI为0.89～6.73,P=0.084),患GCA的危险度升高3.94倍(OR=3.94,95%CI为1.29～12.0,P=0.016).④相对于无基因突变者,仅有MTHFR677 TT者患SCC的危险度升高1.60倍(95%CI为1.13～2.28),患GCA的危险度升高1.84倍(95%CI为1.17～2.88),仅有TSER 2R/2R者患SCC的危险度升高1.89倍(95%CI为0.62～5.79),差异无统计学意义,但患GCA的危险度升高3.56倍(95%CI为1.03～12.3),双突变型组合(MTHFR677 TT和TSER 2R/2R)携带者在SCC组中占1.5%,在GCA组中占3.1%,在对照组中未检测到.结论:突变型MTHFR677 TT及TSER 2R/2R增加安阳地区人群SCC与GCA的易感性,当二者共同存在时,肿瘤的易感性更高.MTHFR与TS基因多态的存在可能是SCC与GCA地理分布一致性的遗传学基础之一.     

乳癌组织中TP、TS mRNA及蛋白的表达

目的：探讨乳癌组织中TP、TS mRNA及蛋白表达水平及其与临床病理特征、预后的关系。方法：采用定量PCR及免疫组化技术检测经“微选”的9例正常乳腺组织和86例乳癌组织TP、TS的mRNA和蛋白表达水平。结果：TP、TS mRNA在乳癌及正常组织中的表达水平存在明显的个体差异。TP、TS的mRNA与蛋白表达无相关性(r=0．147,P=0．114和r=0．111,P=0．114)。TP、TS mRNA或蛋白表达与肿瘤体积、淋巴结转移、组织学分级、临床分期均无关。10a随访结果显示TP表达与预后无关,而高TS mRNA或蛋白表达患者总生存期短于低表达者,显示较差的临床预后。结论：乳癌和正常组织巾TP、TS的mRNA、蛋白表达水平变化较大,TS检测可作为判断乳癌预后的指标之一。     

三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌COMT、APOE基因多态性的差异性研究

目的 探讨三阴性乳腺癌(TNBC)与非三阴性乳腺癌(NTNBC)患者COMT、APOE基因多态性的差异,从而解释化疗后认知障碍发生.方法 对60例TNBC和60例NTN-BC化疗后的患者进行COMT(rs165599、rs4680、rs737865),APOE(rs429358、rs7412)5个单核苷酸多态性(SNP)位点的等位基因频率、基因型频率检测.结果 单位点分析结果表明,与NTNBC相比,TNBC在COMT(rs737865)位点上的等位基因分布(P=0.013),基因型分布(P=0.010)方面差异有统计学意义,而在APOE(rs429358,rs7412)方面两组差异无统计学意义.结论 提示TNBC患者COMT基因的多态性可能是其化疗后认知障碍发生的易感性因子.     

中国与北欧乳癌组织TP、TS、DPD mRNA表达比较

目的:检测北欧和中国人乳癌患者TP、TS、DPD mRNA水平的差异。方法:应用定量RT-PCR法检测北欧乳癌患者中3种指标的表达,用半定量RT-PCR法检测中国乳癌患者中3种指标的表达。结果:仅中国标本TP mRNA水平显示肿瘤组织(0.44±0.23)高于正常组织(0.15±0.16),TP mRNA高表达率中国患者(56.67%)高于北欧患者(34.12%),60岁以下患者这种差异消失。TS、DPD mRNA高表达率在二地区无差异。结论:北欧和中国乳癌患者之间TP、TS、DPD mRNA表达无明显种族差异。     

Thymidylate synthase genetic polymorphisms and cancer risk: a meta-analysis of 37 case-control studies

Background  Several studies have evaluated the association between polymorphisms of thymidylate synthase (TS) and cancer risk in diverse populations but with conflicting results. By pooling the relatively small samples in each study, it is possible to evaluate the association using a meta-analysis.

Methods  A comprehensive search was conducted to identify all case-control studies on TS on a 28-bp tandem repeats in 5′untranslated region (5′UTR) and a 6-bp insertion (ins) and deletion (del) mutation in 3′UTR of the gene and cancer risk. Meta-analysis was conducted using a fixed and random effect model.

Results  Our meta-analysis on a total of 13 307 cancer cases and 18 226 control subjects from 37 published case-control studies showed no significant association between the risk of cancer and the 5′UTR 28-bp tandem repeats polymorphism (3R/3R vs. 2R/2R: OR=1.06, 95% CI, 0.93–1.20) or the 3′UTR 6-bp ins/del polymorphism (del6/del6 vs. ins6/ins6: OR=0.93, 95% CI, 0.81–1.08) with significant between-study heterogeneity. In the cancer type- and ethnic subgroup-stratification analyses, we did not find any association between TS polymorphisms and cancer risk either.

Conclusion  TS 5′UTR 28-bp tandem repeats and 3′UTR 6-bp ins/del polymorphisms may not be associated with cancer risk.