小大黄对药物性肝细胞损伤影响的实验研究

目的:探讨小大黄(PSL)对药物性肝细胞损伤的影响及其作用机制.方法:采用离体肝细胞原代培养技术,以硫代乙酰胺(TAA)复制体外培养SD乳鼠肝细胞损伤模型,通过检测3组(正常对照组、损伤组、小大黄治疗组)培养液中乳酸脱氢酶(LDH)逸出量及四甲基偶氮唑盐(MTT)显色反应,了解肝细胞的损伤和增殖情况,并同时检测了培养液中超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)的含量变化.结果:TAA可使培养液中LDH活性增加,肝细胞增生指数下降,SOD减少,NO增加,应用小大黄后可逆转这些改变.结论:小大黄不仅可有效阻止TAA导致的急性肝细胞损伤,而且具有促进肝细胞再生的作用.     

姜黄素对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的影响

目的：研究姜黄素对四氯化碳（CC14）损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用。方法：原位灌流分离大鼠肝细胞培养36h后加入姜黄素，同时造成CC14损伤，于损伤3h后测培养液中丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的含量，谷丙转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性，并用MTT法测肝细胞存活率。结果：姜黄素明显改善细胞存活率，抑制CC14引起的ALT、LDH活力的升高，同时抑制MDA、NO的产生及提高SOD活力。结论：姜黄素能有效抑制CCl4造成的原代培养大鼠肝细胞损伤。     

丹参酮ⅡA对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的影响

目的：研究丹参酮ⅡA对四氯化碳(CCl4)损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用。方法：原位灌流分离大鼠肝细胞培养36h后加入丹参酮ⅡA，同时造成CCl4损伤，于损伤3h测培养液中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量，谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性，并用MTT法测肝细胞存活率。结果：丹参酮ⅡA明显改善细胞存活率，抑制CCl4引起的ALT、LDH活力的升高，同时抑制MDA、NO的产生及提高SOD活力。结论：丹参酮ⅡA能有效抑制CCl4造成的原代培养大鼠肝细胞损伤。     

人参二醇组皂甙促进缺血再灌注性血清致人肾小管细胞损伤后增殖作用研究

目的：研究人参二醇组皂甙（PDS）促进正常的和缺血再灌注血清致伤后的人肾小管细胞增殖的作用及机制。方法：两肾缺血后再灌注兔血清（缺血血清）与人肾小管细胞共培养96h，测定细胞株吸光度（A）值以判定其增殖活性；生化法测定培养液或肾小管细胞中MDA和NO含量以及SOD、LDH、Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活力。结果：10mg／L的PDS组A值高于对照组（P〈0．05）；缺血血清组A值低于缺血血清加PDS组；缺血血清使培养液中MDA含量、细胞内NO含量和LDH活力升高，使细胞内的SOD、Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活力降低，而PDS则具有抑制缺血血清效应发挥的作用。结论：PDS可促进正常培养的和缺血血清处理后的人肾小管细胞增殖，减轻缺血血清致人肾小管细胞的损伤，其机制可能同增强SOD活力、减轻氧自由基和NO对细胞的损伤、增强ATP酶活性等作用有关。     

罗布麻总黄酮对过氧化氢致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的：探讨罗布麻总黄酮对过氧化氢（H2O2）所致的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用。方法：采用MTT法观察不同浓度罗布麻总黄酮对HUVEC增殖的影响,流式细胞仪检测不同浓度罗布麻总黄酮对HUVEC细胞周期变化的影响,采用比色法分别检测细胞培养液NO和SOD的活性、MDA和LDH的含量,免疫组化法测定NF-κB的表达。结果：正常细胞组比,200μmol．L—H2O2模型组细胞增殖活性下降,细胞凋亡率明显增加,G0／G1期细胞比率增加,S期细胞和G2／M期细胞比率明显降低,培养上清液中NO和SOD活性明显下降,MDA和LDH的释放量明显增加,NF—κB的表达时明显增加（P〈0．01）。不同浓度的罗布麻总黄酮作用后,与模型组比较,可明显提高细胞增殖活性,降低细胞凋亡率,降低G0／G1期细胞比率,增加S期细胞和G2／M期细胞比率;并可提高细胞上清液中NO水平和SOD活性,降低MDA和LDH的释放,可抑制H2O2引起的NF-κB的过度表达。其中,中、高剂量组有显著性差异。结论：罗布庥总黄酮对H2O2引起HUVEC损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与其抗氧化作用及调节有关NF—κB的表达有关。     

梓醇对高糖所致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的：探讨梓醇对高糖损伤的血管内皮细胞（ECV-304）的影响。方法：体外培养ECV-304细胞,采用MTT法测定细胞的增殖,分光光度计法检测一氧化氮（NO）、乳酸脱氢酶（LDH）,观察梓醇对高糖损伤的ECV-304的影响。结果：各浓度组梓醇对糖含量正常培养液中培养的ECV-304细胞活力无明显改变。与空白组比较,高糖损伤模型组细胞活力明显下降（P<0.01）, NO释放显著减少（P<0.01）, LDH释放水平显著升高（P<0.01）;与高糖损伤模型组比较,低、中剂量组细胞活力和NO未见改变,但LDH水平下降（P<0.01）;与高糖模型组比较,高剂量梓醇组细胞活力明显增加（P<0.01）, NO释放增加（P<0.05）,LDH水平明显下降（P<0.01）。结论：梓醇可能通过调节NO和LDH水平,实现对高糖诱导ECV-304的损伤保护效应。     

心肌缺血再灌注损伤时钙离子、氧自由基及一氧化氮变化的意义

目的：探讨心肌细胞缺血再灌注(Ischemia／Reperfusion，I／R)损伤时的钙超载、氧自由基(Oxygen Free Radical OFR)、一氧化氮(NitricOxide，NO)变化的意义及其相互关系。方法：应用体外培养的原代大鼠心肌细胞，建立I／R损伤模型。观察心肌细胞生长情况及存活率，检测培养液中NO、一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase，NOS)、乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase，LDH)、超氧化物歧化酶(Super Oxide Dismutase，SOD)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)的水平，以及细胞内Ca^2 浓度。结果：缺血和I／R组心肌细胞存活率明显降低，培养液中NO、NOS、LDH、MDA水平明显升高，SOD水平明显降低，细胞内钙离子明显升高。结论模拟I／R时心肌细胞钙离子超载，NO、OFR大量产生，三者的关系呈正相关，NO可能起到细胞毒性作用。     

冠心平对H2O2致乳大鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的：观察冠心平对过氧化氢（H2O2）所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用。方法：原代培养的新生SD乳大鼠,随机分为正常组、模型组、维拉帕米组、和冠心平3个剂量组。用比色法观察乳鼠心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌酸激酶（CK）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性,并用光镜观察心肌细胞形态学改变。结果：损伤组乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK-MB、CK和MDA含量非常显著增高,SOD活性非常显著降低（与对照组相比,P〈0.01）,心肌细胞损伤严重;冠心平保护组与H2O2损伤组相比,LDH、CK-MB、CK和MDA明显降低,SOD活性显著升高（P〈0.01,P〈0.05）,心肌细胞形态学变化减轻。结论：冠心平对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化损伤有关。     

姜黄素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究姜黄素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤的保护作用。方法：以体外培养的HUVECs细胞为研究对象,建立H202损伤模型,观察姜黄素对H2O2诱导HUVECs损伤模型细胞形态以及培养液中LDH活力、NO和MDA含量的影响。结果：经姜黄素预处理的HUVECs能显著改善H2O2对细胞形态学的损伤,姜黄素中、高剂量可明显降低培养液中LDH活力：姜黄素高剂量能显著提高培养液中NO含量,降低MDA含量。结论：姜黄素对H2O2诱导HUVECs损伤具有一定保护作用。     

大豆异黄酮对氧化损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的：探讨大豆异黄酮对氧化损伤的血管内皮细胞的保护作用。方法：体外培养内皮细胞，将细胞分为7组，即空白对照组（control）、溶剂对照组（DMSO）、氧化损伤组（H2O2）、氧化损伤加入槲皮素对照组（Quercetin＋H2O2）、氧化损伤加入大豆异黄酮低、中、高浓度组（1sonavone—L＋H2O2、Isoflavone--M＋H2O2、Isoflavone-H＋H2O2）。将750μmol／LH2O2作用于加入槲皮素及不同浓度大豆异黄酮预培养24小时的内皮细胞，继续培养18小时，以一氧化氟（N0）、丙二醛（MDA）、SOD、GSH—PX、流式细胞凋亡率为检测指标。结果：大豆异黄酮呈剂量依赖性降低H2O2对抗氧化酶SOD、GSH—PX的活力的影响，降低MDA量，增加培养液中No^2-／No^3-含量，并显著减少细胞凋亡数量，各指标差异有显著性（P〈0．01）。结论：大豆异黄酮可保护和修复过氧化氢诱导的血管内皮细胞的损伤，其作用可能与抗氧化、促进NO释放，增强抗氧化酶SOD、GSH-PX的活力有关。     

双黄连注射剂及其与头孢拉定合用对人正常肝细胞的毒性作用研究

目的：研究双黄连注射剂及其与头孢拉定联合应用对人正常HL-7702肝细胞的毒性作用。方法：不同浓度的双黄连注射剂（0.125、0.25、0.5、1.0、2.0mg/mL）及其与头孢拉定（0.046mg/mL）联合应用处理HL-7702肝细胞,四甲基噻唑蓝比色法（MTT法）测定含药培养液对细胞生长抑制率的影响,计算IC50,并测定药物作用后培养上清液中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）和乳酸脱氢酶（LDH）的活性。同时采用细胞爬片法,光学显微镜下观察细胞形态的变化。结果：MTT法实验中细胞生长抑制率与双黄连注射液剂量成正相关性,IC50为1.185mg/mL;头孢拉定联合应用可增加双黄连注射液的肝细胞毒性,IC50为0.442mg/mL。高浓度双黄连组及其与头孢拉定合用组培养上清液中AST、ALT和LDH活性显著升高,细胞形态发生明显改变,细胞出现大量的凋亡与坏死。结论：高浓度的双黄连注射液对体外培养的肝细胞有一定损伤,且与头孢拉定联合应用可增加肝细胞毒性。     

广枣总黄酮对阿霉素致大鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的：研究TFFC对大鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用。方法：将TFFC应用于ADR致过氧化损伤的大鼠,测定大鼠血清中LDH、AST、CK的活性,心肌组织中SOD、GSH－Px的活性以及MDA含量,并利用培养的乳鼠心肌细胞,观察培养液中LDH活性、MDA含量。结果：ADR组大鼠血清中LDH、AST、CK活性及心肌中MDA含量比正常对照组显著增高（P＜0．05,P＜0．001）,而心肌中SOD、GSH－Px活性下降（P＜0．001）。乳鼠心肌细胞加ADR培养组培养液中LDH活性、MDA含量显著高于正常对照组（P＜0．001）。当TFFC干预后血清中LDH、AST、CK活性和MDA含量逐渐回落,SOD、GSH－Px活性上升;细胞培养液中LDH活性、MDA含量逐渐下降（P＜0．001,P＜0．001）。结论：TFFC通过清除自由基,抑制脂质过氧化反应,维持心肌细胞膜结构和功能的完整性,而对心肌起保护作用。     

葛根素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用及机制的实验研究

目的：探讨葛根素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法；60只SD大鼠被随机分为3组：假手术（sham）组、缺血再灌注损伤（IR）组、葛根素（PI）组。建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，检测血清SOD、MDA、LDH和CK水平；观察心肌损伤的形态学改变。结果：与IR组比较，PI组SOD活力显著升高（P〈0．05），MDA、LDH和CK含量显著降低（P〈0．01），形态改变显著减轻（P〈0．05）。结论：葛根素对缺血再灌注损伤的心肌有保护作用，其机制可能与增加SOD活性、稳定生物膜有关。     

女贞子对MPP＋诱导的PC12细胞氧化应激损伤保护作用研究

目的：探讨女贞子是否对Mpp＋诱导的PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用.方法：采用Mpp＋诱导的PC12细胞作为帕金森病体外模型,同时给予不同浓度的女贞子醇提液、水提液.通过MTT法测定细胞存活率,通过超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）及乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒来检测女贞子对细胞氧化应激损伤的影响.结果：与正常组相比,模型组细胞的细胞存活率显著下降,SOD抑制率、NO含量、MDA含量及LDH水平显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,浓度为1mg/mL的女贞子水提液显著提高细胞存活率,显著降低SOD抑制率、NO含量、MDA含量及LDH水平.结论：女贞子水提液对细胞的氧化应激损伤具有一定的保护作用.     

红花水提物对ox-LDL损伤心肌微血管内皮细胞的保护作用及ESR谱研究

目的：观察红花水提物对氧化低密度脂蛋白（OX—LDL）致体外培养大鼠乳鼠心肌微血管内皮细胞损伤的保护作用，并初步探讨其抗氧化作用机靓。方法：采用第3代大鼠乳鼠心肌微血管内皮细胞，用红花水提物预处理（500，100，20mg&#183;L^-1）24h后，OX—LDL（100mg&#183;L^-1）孵育24h进行损伤，实验结束后取上清液，测定细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）和黄嘌呤氧化酶（XOD）活性，用自旋捕集技术结合电子自旋共振波谱技术（electronspinresonance，ESR）检测各组细胞悬液中氧自由基信号的强弱。结果：红花水提物各剂量组能够明显减少内皮细胞LDH的释放，降低培养液中MDA含量和XOD的活性，同时提高SOD，NO，NOS和GSIt—Px的活性，使细胞悬液中的ESR自由基信号明显减弱。结论：红花水提物具有抗OX—LDL致体外培养大鼠乳鼠心肌微血管内皮细胞损伤的作用，其机制与其减少氧自由基产生、增强自由基的清除、增强内源性抗氧化剂的活性，使高毒性的自由基转化成无害物质等有关。     

诃子提取物对乌头碱所致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的：研究诃子提取物对乌头碱所致心肌细胞损伤的保护作用。方法：采用乌头碱处理培养心肌细胞,造成乌头碱损伤模型,通过检测细胞培养液中LDH、CK漏出量,MDA含量和SOD活性及MTT代谢率,反映诃子提取物对乌头碱损伤模型的影响。结果：与模型组相比,诃子提取物能显著减少LDH、CK漏出量（P〈0．01）,升高A值（P〈0．01）;降低培养液中MDA含量（P〈0．05,P〈0．01）,升高SOD活性（P〈0．01）。结论：诃子提取物可减轻乌头碱对心肌细胞的损伤程度,对心肌细胞具有保护作用,其机制可能与稳定细胞膜和抗氧化有关。     

水苏碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究水苏碱对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法：冠脉结扎法复制大鼠急性心肌缺血再灌注模型.测定给药后145min血清和心肌组织中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌钙蛋白（cTnT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）.结果：水苏碱（3、6、12mg/kg,iv）可降低缺血再灌注损伤时LDH、CK活性和cTnT浓度,减少MDA含量,升高SOD活性及NO水平.结论：水苏碱对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤具有保护作用.     

化瘀祛痰方药对H2O2诱导人脐带静脉内皮细胞氧化应激保护作用的研究

目的探讨化瘀祛痰方药含药血清对H2O2诱导人脐带静脉内皮细胞（EA.hy926细胞）氧化应激的保护作用。方法体外培养EA.hy926细胞,随机分为5组。正常对照组：仅用DMEM完全培养基培养,不加任何药物;H2O2刺激组：培养液中加入终浓度为300μmol/L H2O2;含药血清低剂量组、含药血清中剂量组、含药血清高剂量组分别使用5%、10%、20%含药血清预处理24 h后加入终浓度为300μmol/L H2O2。各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用MTT法检测细胞活性,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力,2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶（LDH）活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮（NO）活性。采用细胞活性氧检测试剂盒,通过荧光显微镜观察细胞内活性氧水平的变化。结果与正常对照组相比,H2O2刺激后细胞活性明显下降,SOD、NO活性显著降低,而LDH活性、MDA含量则显著增加,活性氧水平明显升高。10%、20%化瘀祛痰方药含药血清可显著提高细胞存活率及SOD、NO活性,而显著降低LDH活性、MDA含量及活性氧水平。结论化瘀祛痰方药对H2O2诱导EA.hy926细胞氧化应激具有保护作用,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

升清胶囊对人L-02肝细胞氧化损伤模型生化指标的影响

目的：研究升清胶囊对肝细胞氧化损伤模型生化指标的影响。方法：本实验分为正常组、模型组、空白血清组和升清胶囊药物血清组4组,空白血清组和升清胶囊药物血清组给予相应血清干预,观察4组相关生化指标（细胞外LDH,细胞内MDA、GSH和SOD）的变化。结果：LDH、MDA在模型组中达到较高的水平,而GSH、SOD活力处于较低的水平,相对于模型组,升清胶囊血清组细胞外LDH、细胞内MDA的含量降低（P〈0．01）,细胞内SOD、GSH的含量增高（P〈0．01）。结论：表明升清胶囊可以减轻肝细胞的氧化损伤程度,提高肝细胞的抗氧化能力,有利于细胞损伤的修复。     

电针夹脊穴对腰椎间盘突出症患者血浆一氧化氮及自由基代谢的影响

目的：观察电针夹脊穴对腰椎间盘突出症（LDH）患者血浆一氧化氮（NO）和自由基代谢的影响及其疗效。方法：将68例LDH患者随机分为治疗组36例和对照组32例进行比较，于治疗前、后分别测定患者NO、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量，并应用杨氏评分法进行疗效评定。结果：2组治疗后血浆SOD含量增高，NO和MDA含量减少，且治疗组与对照组相比，有显著性差异（P〈0．05）。结论：电针夹脊穴可提高LDH患者血浆SOD活性，降低NO和MDA水平，增强机体抗氧化能力，减轻自由基的损害，临床疗效优于对照组。