丙型肝炎病毒抗体的两种检测方法结果比较

目的 比较双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法与间接ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)灵敏度和特异性,为无偿献血的血液筛查提供参考依据.方法 采用双抗原夹心ELISA法和间接ELISA法分别对1500份无偿献血者标本(经血液筛查抗-HCV阴性标本1416份,抗-HCV阳性标本84份)进行检测,记录标本结果与丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)的符合性,评价两种检测方法的差异.结果 双抗原夹心ELISA法检测84份抗-HCV阳性标本的灵敏度为97.6%(82/84),间接ELISA法的阳性检出率为85.7%(72/84),双抗原夹心ELISA法灵敏度高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05);双抗原夹心ELISA法的特异性为100.0%(1416/1416),高于间接ELISA法的85.9%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 双抗原夹心法的灵敏度和特异性优于间接法,可降低间接ELISA法引起的假阳性,减少血液不必要浪费,同时也避免了献血者淘汰.     

双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附试验法检测丙型肝炎病毒抗体的应用效果分析

目的探讨双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒抗体的应用效果,旨在分析两种检测方法的灵敏度及特异度,为血液筛查提供参考。方法选取2016年3月至2018年3月我县无偿献血者血液标本1200例作为研究对象,其中抗丙型肝炎抗体(抗-HCV)阴性标本1123例,抗-HCV阳性标本77例。采用双抗原夹心法与间接ELISA法分别进行检测,记录检测结果与丙型肝炎病毒核酸符合率,并进行统计学分析。结果77例抗-HCV阳性标本中,双抗原夹心法阳性检出率96.1%(74/77)高于间接ELISA法87.0%(67/77),差异具有统计学意义(P<0.05),双抗原夹心法检测及间接ELISA法分别有3份和10份假阴性样本出现;双抗原夹心法检测准确度、灵敏度、特异度均高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在检测丙型肝炎病毒抗体的方法中,相比于间接ELISA法,双抗原夹心ELISA法的检测结果较为理想,能够有效提高其阳性检出率、准确度、灵敏度及特异度。     

胶体金法在HIV抗体检测中的应用

目的:通过ELISA双抗原夹心法和胶体金法检测HIV抗体的比较,评价胶体金法检测HIV抗体的效果。方法:用胶体金法和ELISA法检测HIV抗体。结果:用ELISA法对11497份待测标本进行初筛,有19份标本为阳性;用ELISA双孔实验和胶体金法对这19份阳性标本复查,其中两者复查结果均为阳性5份标本;未出现ELISA双孔实验复查阳性,胶体金法复查阴性的情况。结论:抗-HIV初筛试验阳性S/CO值≥4.0的标本,胶体金法代替ELISA双孔复查是可行的。     

胶体金法在HIV抗体检测中的应用

目的:通过ELISA双抗原夹心法和胶体金法检测HIV抗体的比较,评价胶体金法检测HIV抗体的效果。方法:用胶体金法和ELISA法检测HIV抗体。结果:用ELISA法对11497份待测标本进行初筛,有19份标本为阳性;用ELISA双孔实验和胶体金法对这19份阳性标本复查,其中两者复查结果均为阳性5份标本;未出现ELISA双孔实验复查阳性,胶体金法复查阴性的情况。结论:抗-HIV初筛试验阳性S/CO值≥4.0的标本,胶体金法代替ELISA双孔复查是可行的。     

ELISA间接法检测人轮状病毒血清抗体的研究

本文对ELISA间接法检测人轮状病毒(RV)血清抗体的方法学进行了探讨.结果表明,RV抗原能直接包被酶标反应板,与经免疫血清间接包被者无甚差异;RV抗原经EDTA、硫氰酸钾或盐酸胍预作用后再行包被,可提高抗原的包被效果.以ELISA间接法和间接双抗体夹心法同时检测34份血清标本,两者检出率无差异(P>0.05);进一步检测11份阳性血清的抗体效价,两法GMT分别为755.1和822.1,也无差异(P>0.05).进行ELISA间接法阻断试验,阻断率达95.6%;重复性试验表明变异系数在3.7～8.7%之间.因此,ELISA间接法敏感性高、特异性强和重复性好,可代替ELISA间接双抗体夹心法以检测RV血清抗体.     

双抗体夹心ELISA检测肺炎支原体抗原方法的建立及临床应用

目的　建立检测肺炎支原体抗原的双抗体夹心ELISA ,探讨其临床应用的可行性。方法　采用不同株Mp单抗 ,用双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原 ,优化该方法检测Mp抗原的最佳实验条件。对Mp标准株及 14 7份临床标本进行测定 ,观察双抗体夹心ELISA方法的敏感度和特异度 ,以及该方法与聚合酶链反应 (PCR)检测法的符合率。结果　包被单抗量为 2 0 μg·ml-1,酶标记单抗 1∶2 0 0稀释时 ,阳性对照与阴性对照吸光度之比 (P/N值 )最大 ;检测Mp抗原敏感度达 2 μg·ml-1,和其它支原体没有交叉反应。 14 7份临床标本PCR检测阳性率为 13 .6% (2 0 /14 7) ;双抗体夹心ELISA法检测阳性率为 12 .2 % (18/14 7) ,两者符合率达 95 .9%。结论　建立的双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。     

探讨HIV抗体检测胶体金(硒)法代替酶联免疫吸附试验的可行性

目的探讨在HIV抗体初筛检测及初筛阳性复检试验中用快速检测试剂胶体金(硒)法代替酶联免疫吸附试验(ELISA)法的可行性。方法应用不同厂家的第三代(双抗原夹心法)抗HIV-1/2酶联免疫法试剂和胶体金(硒)法试剂,分别对ELISA法初筛阳性的标本进行胶体金(硒)法和ELISA法复查,将两组结果结合免疫印迹确认试验结果进行比较分析。结果38份初筛阳性标本,用ELISA法复查阳性38份;用胶体金(硒)法复查阳性35份,阴性3份,经确认试验阳性35份,其中ELISA法复查阳性S/CO比值≥6·0的标本35份,确认试验阳性。S/CO比值在1·0～6·0之间的3份标本,确认试验阴性。结论在HIV初筛实验中可以用胶体金(硒)法代替酶联免疫吸附试验法,这样即可保证HIV检测的快速性又可减少实验室感染的危险性。     

血清学方法检测SARS病毒抗体的比较

目的：比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对SARS患者特异性抗体的检出情况。方法：采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、发热非SARS患者、不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果：双抗原夹心法的阳性检出率为73．6％，而间接法的阳性检出率为57．5％，前者对SARS患者各时期特异性抗体的阳性检出率高于间接法，特别是住院第1周的阳性检出率为30％，而间接法对住院第1周的阳性检出率为0％。结论：双抗原夹心法检测SARS患者特异性抗体优于间接法。     

McAb ELISA IgM捕捉法对EHF快速诊断的研究

采用McAb ELISA捕捉法检测流行性出血热(EHF)患者血清特异性IgM抗体,检测EHF病人血清351份,总阳性率为94.58%,而正常人血清和非EHF病人血清146份全部阴性。第2病日血清中即可检出EHF-IgM抗体,第4、6病日阳性率分别为87.50%和96.43%,第8病日26份血清全部阳性。对1例典型EHF病人血清IgM抗体动态观察,发现病后1周抗体滴度最高,病后1个月明显下降,病后3个月转阴。     

呼吸道合胞病毒(RSV)感染的早期快速诊断

本文介绍了三种早期快速诊断呼吸道合胞病毒感染的方法:固相抗人lgM ELISA法检测RSV感染患儿急性期血清特异性IgM;ELISA双抗体夹心法检测鼻咽分泌中RSV抗原;IFA检测鼻咽脱落细胞内RSV抗原。试验结果表明:三种方法与ELISA双份血清抗体检测的诊断符合率皆达85％以上,其中ELISA双抗体夹心法检测鼻咽分泌物中RSV抗原,方法简便、快速、敏感,特异性高,适于推广,是早期快速诊断RSV感染的较理想方法。     

血清学方法检测SARS病毒抗体的效果比较

目的比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对严重急性呼吸综合征(SARS)患者特异性抗体的检出情况。方法采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、肺炎患者、肺结核患者、SARS密切接触医务人员和不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果双抗原夹心法的阳性检出率为64．4％。间接法的阳性检出率为57．5％。双抗原夹心法检测92例健康人有4例阳性，38例SARS密切接触医务人员有2例阳性，而间接法检测健康人和SARS密切接触医务人员均为阴性。结论两种方法检测抗SARS病毒特异性抗体具有较高的一致性。间接法检测SARS特异性抗体的特异性好于双抗原夹心法。     

甘肃省2006年艾滋病病毒抗体复检及确认试验结果分析

目的了解甘肃省艾滋病痛毒(HIV)抗体检测情况,提高全省各级实验室检测水平。方法对甘肃省各筛查(中心)实验室送检的256份本年度筛查阳性标本进行检测分析。结果使用2种筛查试剂对256份标本中的239份进行复检,双阴性129份,筛查假阳性率为53.97%;阳性110份,占46.03%。127份标本经确认,58份为阳性,占45.67%;28份为阴性,占22.05%;41份为不确定,占32.28%。结论HIV抗体复检试验假阳性率较高,确认试验阳性符合率较低,因此,要继续加强实验室的培训和规范化管理及试剂的临床评估。     

血透患者血清庚型肝炎病毒RNA及抗体检测

目的:了解血透患者庚型肝炎病毒(HGV)感染率及与其他肝炎病毒重叠感染的情况。方法:收集57份血透患者血清标本,根据HGV RNA保守片段5′非编码区序列,设计了两对引物,采用逆转录巢式PCR扩增HGV RNA,以及EIA法检测HGV IgG抗体。同时还检测了HBV DNA及HCV IgG抗体。结果:57份标本中,4份HGV RNA阳性(7.0％),2份HGV IgG抗体阳性(3.5％)。HGV RNA与HGV IgG抗体呈“分离”现象。4份HGV RNA阳性标本中2份为HBV DNA阳性,2份为HCV IgG抗体阳性;其中1份标本HBV DNA和HCV IgG抗体均为阳性。结论:血透患者HGV感染率高于健康献血员和正常人群,HGV可与HBV和HCV重叠感染。     

2004～2006年海南省HIV初筛阳性标本的复检及确认情况分析

目的 了解海南省近3年艾滋病病毒（HIV）抗体初筛阳性标本的复检及确认情况,促进实验室网络检测能力提高.方法 对海南省2004～2006年3年艾滋病筛查实验室初筛阳性送检样本及本室初筛阳性的428份样本进行复检与确认,并对其检测结果分析比较.结果 经本室酶联免疫吸附试验（ELISA）复检,由各筛查实验室送检的428份中,有85份HIV抗体阴性（85/414,20.5%）,其中2004年21份（占当年21.4%）、2005年44份（占当年26.2%）、2006年20份（占当年13.5%）;两种E1.1.qA或一种ELISA和一种快速法（雅培硒标或富士PA）均为阳性的240份,一种ELISA或一种快速法为阳性的103份,经WB试验确认277份为HIV-1抗体阳性（80.8%）,13例阴性（3.8%）,53例不确定（15.4%）.13例阴性样本中,ELISA法检测假阳性10例,快速法3例.两种ELISA或一种ELISA和一种快速法双阳性与WB的阳性符合率为93.3%.结论 应进一步加强实验室规范化管理,消除引起初筛试验假阳性结果因素.     

鸡卵黄抗体用于诺如病毒检测的初步研究

目的以鸡卵黄免疫球蛋白IgY代替哺乳动物来源的IgG抗体,建立ELISA双抗体夹心法．探索用于诺如病毒检测的可行性。方法以387型菌株（GⅡ．4型）诺如病毒P颗粒为抗原免疫健康产蛋来航鸡,制备、纯化特异性抗诺如病毒鸡卵黄免疫球蛋白IgY。采用过碘酸钠法对IgY进行酶标。以特异性抗体为捕获抗体,酶标抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测体系。评价其灵敏度、特异度及重复性。并将其与金标准进行比较。结果本实验建立的双抗体夹心ELISA检测体系最低检测限达20ng／ml。批内变异系数为1．021％,批间变异系数为1．150％。临床应用评价显示真阳性率为82．5％,真阴性率为81．82％。与金标准比较,检出率差异无统计学意义（P=0．629）。结论建立了基于特异性抗诺如病毒卵黄抗体IgY的双抗体夹心ELISA检测体系,用于腹泻患者粪便标本诺如病毒的检测具有较好的敏感性和特异性。     

双抗体夹心一步法及两步法测HBsAg的结果分析

目的分别用双抗体夹心一步法及两步法检测200份慢性乙肝患者标本（亦作为阳性对照标本）及临床随机体检标本372份和186份排除乙肝病毒感染的阴性对照标本,并对结果进行分析比较,以寻找一种更适合基层医院的最简便快速价廉的方法。结论根据2种方法的检测结果对双抗体夹心一步法及两步法测HBsAg的结果及方法进行比较后本人认为对于HBeAg阴性的标本,用一步法和两步法检测HBsAg的结果是完全吻合的;而对于极少数皿BeAg阳性珈BsAg阴性的标本可用两步法检测HBsAg,以排除是否HBsAg浓度过高的“帚现象”引起的假阴性亦即钩镰效应。     

兔出血症病毒（RHDV）McAb的研制及初步应用

用酒石酸钾-甘油梯度离心纯化的RHDV抗原免疫BALB／C小鼠．取脾细胞与SP2／0融合，获得4株稳定分泌RHDV McAb的杂交瘤细胞株(1F7，1H4，2A9．2D6)。经检测，所分泌的抗体亚类分别为IgG 2a(1F7．1H4，2D6)和IgG1(2A9)。应用双抗体夹心ELISA法检测70份标本，并与直接免疫荧光法和HA法比较．取得较好的实验结果。     

双单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原的实验研究

间接荧光抗体技术(IFAT)已广泛用于肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原的检测,其不足之处是需用荧光显微镜,有一定主观性及不能检测可溶性抗原。本文建立了以同样的抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb)作为包被和第二抗体,以酶标葡萄球菌A蛋白(SpA)作指示抗体的双McAb ELISA间接夹心法,初步用于感染细胞培养上清及组织标本中HFRS病毒抗原的检测,获得较满意结果。     

微量全血酶联法检测特异性IgM抗体对呼吸道合胞病毒流行病学调查的应用研究

应用本所建立的微量全血酶联(ELISA)法检测特异性IgM抗体技术,对540例急性下呼吸道感染患儿进行呼吸道合胞病毒(RSV)病原检测,其实验室间检测结果重复性良好(X~2=17.86,P>0.05)。20份用滤纸保存1年的外周血进行RSV—IgM抗体再检测,与初次检测结果比较,证实了其抗体活性稳定。提示该项技术和采集标本的方法十分适宜基层卫生单位在RSV流行病学调查中应用。     

不同人群抗SARS冠状病毒特异性抗体血清学检测与分析

目的 :探索不同人群中抗SARS冠状病毒特异性抗体的发生、发展及分布规律 ;评价间接ELISA方法检测SARS冠状病毒IgG、IgM特异性抗体试剂盒及改进方法。 方法 :分别获取SARS流行前无偿献血者标本 3990份 ,一线抗SARS医务人员标本 397份和临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,采用ELISA方法进行SARS冠状病毒特异性抗体检测。结果 :SARS流行前无偿献血者标本 3990份共检出IgG抗体阳性标本 16份 ,阳性率为 0 .4 0 % ;IgM抗体阳性标本 0份 ,阳性率为 0 %。一线抗SARS医务人员标本 397份 ,共检出IgG抗体阳性标本 2份 ,阳性率为 0 .5 0 % ;IgM抗体均为阴性。临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,共检出IgG抗体阳性标本 119份 ,阳性率为 75 .79% ;IgM阳性标本 6 8份 ,阳性率为 4 3.31%。结论 :一线抗SARS医务人员与SARS流行前无偿献血者IgG、IgM抗体阳性率无显著差异 (P =0 .76 >0 .0 5 ) ;采用该SARS冠状病毒 (变异株 )IgG抗体试剂盒检测SARS流行前无偿献血者人群存在一定的阳性率 ,说明该试剂盒包被的抗原与其它免疫球蛋白 (IgG)有交叉反应 ,有待进一步改进