转铁蛋白经TNP化修饰后的间接酶标检测

以三硝基苯磺酸钠(TNBS)修饰铁传递蛋白(Tf)及BSA,并制得高效价的特异性抗TNP血清。运用放射受体分析法比较Tf经TNP修饰前后与人肝癌培养细胞膜上Tf受体(TR)的亲和力,证明Tf经TNP化修饰后未改变其与受体的亲和力。应用TNP-Tf、抗TNP血清为第一抗体的间接酶标法检测人肝癌培养细胞膜上的TR,其检测敏感度是应用Tf及抗TNP血清为第一抗体的间接酶标法的4倍。以硝酸-醋酸纤维素膜作载体,用间接酶标法进行定量比较Tf及TNP-Tf的最小检测量,则Tf的最小检测限为5ng,而TNP-Tf的最小检测限为1ng。     

小鼠脾内TNP抗体生成细胞实验条件的研究

<正> 2、4、6三硝基苯(TNP)和2、4-三硝基苯(DNP)是最常用的半抗原,TNP和DNP的空斑形成细胞(Plaque Forming Cell,PFC)的测定工作国内外已有报道。但往往不同作者报道的数据差异较大,有方法本身的原因,也有实验中其他因素的影响。本文     

小鼠脾内TNP抗体生成细胞的检测

<正> 小分子FNP(三硝基苯酚)与蛋白载体结合,使机体产生特异的抗TNP抗体,可借以研究T、B细胞在免疫反应中的协同作用。目前在免疫学的许多研究领域里,已广泛应用这种检测技术,但在国内应用不甚广泛,而且方法也不统一。本工作试图建立可靠的检测脾FNP抗体生成细胞的方法。     

大鼠新生期皮下注射谷氨酸单钠对成年后下丘脑ACTH神经元和正中隆起CRF神经纤维免疫反应性的影响

本文采用过氧化酶—抗过氧化酶(PAP)的免疫组织化学和荧光免疫组织化学的方法,研究了新生期大鼠皮下注射谷氨酸单纳(MSG)对成年后下丘脑弓状核促肾上腺皮质激素(ACTH)神经元和正中隆起内促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)神经纤维免疫反应的影响。新生期MSG处理后,弓状核中ACTH神经元的数目明显减少,正中隆起CRF样免疫反应末稍也大大减少,减少程度随MSG剂量增大而增加。提示MSG通过损伤前阿黑皮素(POMC)衍生的神经多肽,从而影响下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴的功能。     

BE病毒转化TNP特异性人单克隆B细胞系抗体分泌与细胞增殖的分离

应用TNP-布氏杆菌连续刺激,经EB病毒转化,TNP-SRBC玫瑰花实验筛选及有限稀释克隆化,已建立了一个稳定的人类抗TNPB细胞系。在长时间生长过程中,仅部分克隆细胞与TNP-SRBC细胞形成玫瑰花结并形成溶血空斑(PEC)。抗TNP细胞克隆与TNP-SR-     

应用特异性单克隆抗体对人体消化道癌瘤进行免疫组织化学研究

为了检测小鼠单克隆抗体19—9和17—1—A以及抗癌胚抗原(anti-ACE)抗体在人体消化道腺癌中的特异性,选用了两种免疫组织化学方法,即(1)间接免疫荧光法:能在移植于裸鼠的人肿瘤冰冻切片上和在培养的瘤细胞株悬液中显示出荧光来;(2)免疫过氧化酶法:用辣根过氧化物酶复合物在石蜡切片上进行。     

女性乳腺癌的抗原表达

用石蜡切片间接免疫过氧化酶法检测175例(其中26例为管内癌)根治术后随访满10年的原发性乳腺癌的抗原表达。使用17种乳癌单抗,由荷兰国家肿瘤研究所提供。二抗酶标兔抗鼠为DAKO产品。DAB显     

血管生成抑制剂TNP—470的研究及其在肿瘤治疗中的应用

1971年Folkman首先提出抑制肿瘤的血管生成能用于肿瘤治疗。迄今，已发现数十种物质能抑制血管生成，从而抑制实验动物肿瘤的生长和转移。TNP－470是其中较为有效的一种。因而具有良好的发展前景。本文就TNP－470的抗癌作用及其机理作一综述。1、TNP－470的发现及其理化特性TNP－470是一种合成的烟曲霉素类似物。烟曲霉素是由烟曲霉菌自然分泌的一种抗生素，它开始时用于治疗阿米巴病。发现烟曲霉素的抗血管生成作用是一个偶然的机会。在作血管内皮细胞常规培养时，发现一种霉菌污染的局部有内皮细胞聚集现象，而距离该霉菌污染几个细…     

人和鼠脊髓中CCK样、L-Enk样与SP样阳性结构的研究——PAP法

选用雌性Wistar大鼠12只,年龄在2个月以内,体重200g左右;新生儿2例 (死亡后2h以内取材)。以过氧化酶-抗过氧化酶法 (PAP法),研究了人和鼠脊髓中胆囊收缩素 (cholecystokinin,CCK)、亮脑啡肽     

鼠肾近端小管细胞吞饮的辣根过氧化酶体消退时组织蛋白酶B和H的干扰:Ⅱ.蛋白A——金的常用和连续切片技术免疫细胞化学研究

<正> 作者用蛋白A——金枝术研究鼠肾近端小管溶酶体系统的组织蛋白酶B和H以及注射的辣根过氧化酶的免疫电子显微镜定位。静注辣根过氧化酶后的各种间距灌注固定肾。注射5至15分钟,细胞器——包括顶端小泡,小管和空泡(核内体)——染上辣根过氧化酶,但对两种组织蛋白酶呈阴性。注     

一种高灵敏度的辣根过氧化酶荧光底物及其应用(摘要)

提高酶免疫测定法(EIA)灵敏度是自EIA问世以来,许多学者致力于解决的课题。选择灵敏的辣根过氧化酶(HRP)定量法是提高EIA灵敏度的重要一环。本文介绍使用HRP的荧光底物—对羟基苯丙酸(PHPA)提高EIA的测定灵敏度。这种荧光法EIA应用于胰岛素和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的测定,两者测定灵敏度均获得显著提高。     

化学发光法、放免法检测血清TGA、TPoAb的比较

血清抗甲状腺球蛋白抗体 (ＴＧＡ)和抗甲状腺微粒体抗体(ＴＭＡ)检测在自身免疫性甲状腺疾病的鉴别诊断上具有重要意义。ＴＧ和ＴＭ抗体的检测 ,传统上采用放射免疫法 ,近年随着标记免疫技术的发展 ,全自动化化学发光免疫分析系统Ｉｍｍｕｌｉｔｅ也推出ＴＧＡ和与ＴＭＡ相似的甲状腺过氧化酶抗 　论文指导体 (ＴＰｏＡｂ)的检测技术 ,且以灵敏度高 ,检测范围广 ,速度快而受青睐。但是两种实验方法的结果可比性如何 ,临床需要了解。从实验学来说 ,放射免疫法检测的是ＴＧ和ＴＭ抗体 ,结果以抗原抗体结合率表示 ;发光法检查的是ＴＧ和ＴＰｏ…     

有免疫功能的鼠/人嵌合型抗体的产生

一种有免疫功能的鼠/人嵌合型抗体——由鼠IgM可变区加正常人IgM稳定区组成的新型IgM五聚体已经产生,并对其若干特性进行了研究.用基因工程技术,由杂交瘤细胞Sp6-718品系提供小鼠抗半抗原三硝基苯酚(TNP)的μ链可变区的基因片段,由已克隆的噬菌体λC75提供表达正常人μ链稳     

在鼠松果体的胶质细胞:光学及电子显微镜的免疫组织化学研究

<正> 作者用常规固定、石蜡切片鼠的松果体,免疫过氧化酶法证实三种神经胶质抗原:神经胶质微纤维发蛋白和S-100蛋白     

检测外周血T淋巴细胞亚群四种方法的比较

用单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群的方法报道较多,各有特点。为了选择一种适于常规应用的简便、特异性及重复性较好的检测方法,本文以抗人T细胞单克隆抗体OKT_3(抗人全T)、OKT_4(抗人T辅助亚群)和OKT_8(抗人T抑制杀伤亚群)采用抗生物素-生物素-辣根过氧化酶(ABC)法、间接SPA菌(SACI-Ig) 花环法、间接免疫荧光法(IFA)和红细胞花环试验(RT)同时检测人T细胞总数和亚群,并进行比较。现将结果报道如下。     

氧化修饰的β2-糖蛋白-1诱导抗心磷脂抗体的产生

目的:探讨蛋白质的氧化修饰与体内抗磷脂抗体产生的关系.方法:首先,在体外以次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β2-GP1,然后以氧化的β2-GP1(oxβ2-GP1)免疫同种大鼠,最后以ELISA方法检测被免疫大鼠β2-GP1血清中的抗心磷脂抗体(ACA).结果:氧化的β2-GP1免疫的大鼠血清中产生高滴度的ACA.结论:β2-GP1的氧化修饰在ACA的产生上可能起十分重要的作用.     

大鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

用纯化的小鼠单克隆抗—HBs和纯化的大鼠多克隆抗—HBs免疫LOU/C大鼠,取免疫大鼠脾细胞与IR983F骨髓瘤细胞融合,获得两株(TD_1、TD_2)持续分泌抗—HBs的单克隆抗独特型抗体(抗—Id,Ab_2)杂交瘤细胞系。对TD_2进行了较全面的鉴定,TD_2的Ig类型为IgG,亚类为IgG_(2?),核型分析结果染色体数为65条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,TD_2所分泌的Ab_2既能被不同来源的抗—HBs所中和。又能被HBsAg.所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的TD_2IgG免疫同系大鼠,诱导出了具有抗—HBs活性的抗—抗—独特型抗体(Ab_3)。上述结果证实,TD_2所分泌的单克隆抗体(McAb)是带有HBsAg表位内影像,具有HBsAg免疫源性的抗—HBs的单克隆抗—Id。     

基于巯基和纳米金固定抗体的免疫传感器的初步应用研究

目的 制得乙肝免疫传感器,用于临床检验.方法 以金电极为基底,自组装半胱胺,通过纳米金静电竞争吸附硫堇分子和乙肝过氧化酶酶标抗体,制得乙肝免疫传感器.采用循环伏安法和线形扫描伏安法考察了传感器的组装过程, 响应电流的性质,传感器对乙肝病毒的响应特性.结果 对乙肝抗原进行了定量分析,线形范围为1∶30～ 1∶200 (稀释浓度V);线性相关系数 R 为0.994.取临床血清进行检测,将结果与临床常用的 ELISA 法比较,符合要求.结论 用半胱胺/纳米金方法固定乙肝抗体制得免疫传感器能应用于临床检验.     

抗人精胺氧化酶单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备小鼠抗人精胺氧化酶(SMO)单克隆抗体(mAb),并验证其在Western blot,免疫组织化学等方法中的应用价值.方法:用pET-15b/SMO质粒转化BL2 (DE3)后,IPTG诱导表达带6×His标签的SMO重组蛋白并用Ni-NTA树脂亲和层析纯化.用SMO重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞杂交融合,获得能高效合成和分泌抗SMO mAb的杂交瘤细胞株.所得抗体的特异性和效价用ELISA和Western blot法以及免疫组织化学技术检测.结果:成功建立了稳定分泌鼠抗人SMO的mAb杂交瘤细胞株,获得的mAb效价高、特异性强,可用于ELISA,Western blot,免疫组织化学等分析技术.结论:成功制备出高特异性并能用于多种生物分析技术的SMO mAb.     

鼠肾近端小管细胞吞饮的辣根过氧化酶在溶酶体消退时组织蛋白酶B和H的干扰:Ⅰ.组织化学和免疫组织化学研究

<正> 当经鼠肾近端小管细胞的辣根过氧化酶内化和消退时,作者研究了在这些细胞溶酶体系统的辣根过氧化酶和组织蛋白酶B和H的免疫组织化学定位。静注辣根过氧化酶后的不同间隔进行灌注固定鼠肾。注射后5至15分钟,在擦毛缘下的小颗粒可见吞饮的辣根过氧化酶。30分钟后,积聚大的团粒(巨噬体)该处的酶和抗原两者的活动似乎引起