鳖甲煎丸对小鼠Matrigel种植体新生血管的影响

目的:研究鳖甲煎丸对小鼠血管生成及新生血管结构的影响,并探讨可能的作用机制。方法:取Balb/c小鼠32只,采用碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)诱导小鼠腹壁Matrigel种植体方法进行血管生成实验,Matrigel与b-FGF,肝素混合后植入小鼠腹壁正中区域皮下,将小鼠随机分成鳖甲煎丸高、低剂量组(12,6 mg·kg~(-1)),正常组,内皮抑素组(5 mg·kg~(-1)),每组8只,在Matrigel种植前3 d,各组分别给予不同的实验药物,连续给药8 d,第8天取出Matrigel,测量Matrigel种植体中血红蛋白含量,并进行苏木素-伊红(HE)染色及免疫组织化学染色,进行微血管计数(MDC),并观察微血管结构特征及发育阶段。结果:鳖甲煎丸高、低剂量组血红蛋白含量及MDC均低于正常组,且鳖甲煎丸低剂量组血红蛋白含量及MDC较高剂量组低;HE染色显示鳖甲煎丸低剂量及高剂量组可见散在新生血管,新生血管数量较正常组少;CD34免疫组化显示鳖甲煎丸组内皮细胞数量较正常组减少,且血管结构模糊、内皮细胞着色变浅,且鳖甲煎丸低剂量组细胞数低于鳖甲煎丸高剂量组。结论:鳖甲煎丸对新生血管具有抑制作用,抑制作用强度与浓度有关,低剂量鳖甲煎丸抑制血管生成作用强于高剂量鳖甲煎丸。     

鳖甲煎丸对肝癌皮下转移瘤小鼠肿瘤新生血管及微环境的影响

目的研究鳖甲煎丸对肿瘤新生血管结构及功能、肿瘤微环境的影响。方法建立Hepa1-6小鼠肝癌皮下转移瘤模型,将造模成功小鼠随机分为鳖甲煎丸组、贝伐单抗组和对照组,每组15只。鳖甲煎丸组按6 g/(kg·d)予鳖甲煎丸混悬液灌胃,贝伐单抗组腹腔注射贝伐珠单抗注射液5 mg/(kg·d),对照组腹腔注射等量生理盐水,各组连续干预14天。14天后剥取肿瘤组织,免疫组织化学染色法检测肿瘤组织微血管密度计数、周细胞覆盖率和血管基底膜面积,Evans blue法检测血管通透性,免疫荧光检测肿瘤组织的乏氧区域面积。结果与对照组比较,贝伐单抗组和鳖甲丸组微血管密度计数、Evans blue染料含量及乏氧区域面积均降低,周细胞覆盖及基底膜面积均升高(P<0.05或P<0.01)。鳖甲煎丸组Evans blue染料含量及乏氧区域面积较贝伐单抗组高(P<0.01)。贝伐单抗组和鳖甲丸组微血管密度计数、周细胞覆盖及基底膜面积差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鳖甲煎丸对Hepa1-6小鼠肝癌皮下转移瘤具有促使血管结构和功能正常化作用,能够改善肿瘤组织的乏氧状态。     

鳖甲煎丸对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的通过研究鳖甲煎丸药物血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及诱导其凋亡的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的可能作用机制。方法 Wistar大鼠40只,系统随机抽样(抓阄法)分为阴性对照组(NC组)、阳性药对照组(P组)、鳖甲煎丸高(H)、中(M)、低(L)剂量组,每组8只。L、M、H剂量组分别按21.87、43.75、87.50mg/mL灌服鳖甲煎丸混悬液。P组灌胃0.01mg/mL秋水仙碱溶液,NC组灌予等量的生理盐水。每只大鼠每次灌胃2mL,每日2次。每次灌胃间隔12h,连续灌胃7次,制备药物血清。将HSC-T6分为药物血清组(H/M/L/NC组)、秋水仙碱对照组(P组)及空白对照组(BC组),H、M、L、NC及P组给予对应药物血清进行培养,BC组为不含药物血清的培养基。采用CCK8法检测HSC-T6细胞24、48、72h时增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blot法检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果与NC组比较,M、H、P组24h细胞增殖抑制率明显增高(P0.05);48、72h时与NC组比较,L、M、H、P组细胞增殖抑制率明显增高(P0.05)。但24、48、72h各时间点之间L、M、H、P组细胞增殖抑制率差异无统计学意义(P0.05)。与NC组、BC组比较,M、H、P组的HSC-T6早期凋亡与晚期凋亡率明显升高(P0.05),M、H、P组G0/G1期细胞数明显增多(P0.05),L、M、H、P组S期与G2/M期细胞数明显减少(P0.05)。各组间Bcl-2蛋白表达比较,差异无统计学意义(P0.05)。与NC组比较,P、H、M、L组的Bax蛋白表达明显升高(P0.01)。结论鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制可能与其抑制肝星状细胞增殖并诱导其凋亡有关。     

鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血CTGF表达的影响

目的：探讨鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：SD大鼠50只随机分为生理盐水对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、鳖甲煎丸中剂量组、鳖甲煎丸高剂量组,采用博莱霉素气管内注入制备肺纤维化模型,造模后各组分别用生理盐水、西药、中药灌胃,第3、14、28天乙醚麻醉后毛细玻管眼眶静脉丛采血,ELISA法检测CTGF表达明显减少,与模型对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。结果：模型对照组外周血中CTGF表达明显增加,第14天鳖甲煎丸中、高剂量组外周血CTGF的表达。结论：鳖甲煎丸可抑制肺纤维化模型大鼠外周血CTGF的表达,可能是抗肺纤维化作用的机制之一。     

加味鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠血清IgG的影响

目的:观察加味鳖甲煎丸(JWBJ)对肝纤维化大鼠模型血清IgG的影响。方法:用人血清白蛋白和CCl4的方法[1]分别制作大鼠肝纤维化模型,在成模前预防治疗和成模后治疗,用免疫扩散法测定大鼠血清IgG含量。结果:JWBJ预防治疗大,中剂量组及治疗大剂量组与各自的模型组相比均可使白蛋白所致肝纤维化大鼠血清IgG含量明显降低(P&lt;0.05);JWBJ预防治疗大剂量组与模型组相比可使CCl4所致肝纤维化大鼠血清IgG含量明显降低(P&lt;0.05)。结论:JWBJ可降低人血清白蛋白和CCl4所致肝纤维化大鼠过度产生的IgG,表明JWBJ对机体免疫功能有一定的调节作用,对肝纤维化的治疗有一定的参考意义。     

鳖甲煎丸对肝纤维化模型大鼠结缔组织生长因子的影响

目的:探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在肝纤维化大鼠的表达及鳖甲煎丸对其影响作用。方法:采用复合因素建立肝纤维化大鼠模型,用免疫组化方法观察鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠肝组织CTGF表达的影响。结果:CTGF在模型大鼠肝组织中表达明显增加,鳖甲煎丸能明显抑制大鼠肝纤维化组织CTGF的表达。结论:鳖甲煎丸可有效抑制肝纤维化组织CTGF的表达,这可能是该药抗肝纤维化作用的分子机制之一。     

鳖甲煎丸对大鼠肝癌癌前病变血管生成和微环境的机制探讨

目的观察鳖甲煎丸对大鼠肝癌癌前病变各组的血清中TGFβ1、Mmp2、SOD、COX-2、VEGF及肝组织中TGFβ1、Mmp2、SOD、COX-2、VEGF、MVD的影响,探讨鳖甲煎丸通过改变大鼠肝癌癌前病变血管生成和微环境的抗癌的机制。方法选用136只SD大鼠,随机分为3组,正常对照组、模型组、鳖甲煎丸干预组,建立二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌癌前病变组织短期动物模型,在制模过程中给予鳖甲煎丸制剂进行干预,通过观察大鼠动脉血清中TGFβ1、Mmp2、SOD、COX-2、VEGF的变化,免疫组化学染色观察各组大鼠肝组织内TGF、Mmp2、SOD、COX-2、VEGF、MVD的表达水平。结果干预组组织学中TGFβ1、Mpp2、SOD、COX-2、VEGF、MVD的表达水平显著低于模型组、对照组(P0.01),血清中TGFβ1、Mmp2、SOD、COX-2、VEGF也明显低于模型组及对照组。结论鳖甲煎丸有预防或延缓(DEN)诱发大鼠肝癌发生的作用,其机制可能通过改变肝细胞缺氧微环境抑制TGFβ1、Mmp2、SOD、COX-2、VEGF蛋白的表达,改善肝癌细胞微环境,抑制肝脏微血管生成的病理进程,抑制肿瘤的生长,鳖甲煎丸对肝癌裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制作用。     

鳖甲煎丸抗肿瘤血管生成的实验研究

鳖甲煎丸出自东汉医家张仲景所著<金匮要略>,是破瘀化痰,扶正消症之剂.据报道鳖甲煎丸在治疗肝癌、食道癌、白血病、子宫肌瘤等方面有较好的疗效.分析鳖甲煎丸的药物组成,以破血、化瘀、散结之品为多.     

鳖甲煎丸对二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌癌前病变的影响

目的:通过观察鳖甲煎丸对二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌癌前病变组织及血清cyclin D1(细胞周期蛋白1)、CDK4(细胞周期蛋白依赖性激酶)、白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子β(TNF-β)、自然杀伤细胞(NKC)数值改变,探讨鳖甲煎丸对大鼠细胞因子水平及肿瘤抑制的作用机理及抑制肝癌细胞增殖的机制。方法:选用136只SD大鼠,随机分为3组,正常对照组、模型组、鳖甲煎丸干预组,建立二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌癌前病变组织短期动物模型,在制模过程中给予鳖甲煎丸制剂进行干预,通过观察大鼠动脉血清中TNF-β、IL-2、NKC、ALT、AST、AFP、TBIL的变化,免疫组化学染色观察各组大鼠肝组织内Cyclin D1、CDK4、TNF-β、IL-2的表达水平。结果:干预组组织学中Cyclin D1、CDK4、TNF-β、IL-2的表达水平显著低于模型组、对照组(P0.01),血清中TNF-β、IL-2、NKC、ALT、AST、AFP、TBIL也明显低于模型组及对照组。结论:鳖甲煎丸有预防或延缓DEN诱发大鼠肝癌的发生、发展作用,其机制可能通过抑制Cyclin D1、CDK4蛋白的表达,通过阻滞细胞周期,抑制肝癌细胞过度增殖,调整由TNF-β、IL-2和NKC介导的细胞炎症反应,改善肝癌细胞微环境,抑制肿瘤病理进程。鳖甲煎丸对肝癌裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制作用。     

鳖甲煎丸对动脉粥样硬化大鼠血脂及ICAM-1表达的影响

目的 观察鳖甲煎丸对动脉粥样硬化大鼠(atherosclerosis,AS)血脂及主动脉壁细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、治疗组(血脂康组、鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组),对照组给予正常饮食,模型组给予高脂饮食,治疗组在高脂饮食的基础上分别给予血脂康、鳖甲煎丸高剂量、鳖甲煎丸低剂量,12周后测定血脂及免疫组化法观察主动脉壁ICAM-1的表达水平.结果 与模型组相比,血脂康组、鳖甲煎丸高、低剂量组均能降低血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c),升高高密度脂蛋白(HDL-c)(P＜0.05);免疫组化结果显示,模型组大鼠主动脉内皮细胞ICAM-1表达强阳性,血脂康组、高、低鳖甲煎丸剂量组与模型组相比ICAM-1的表达均显著降低.结论 鳖甲煎丸能有效调节AS大鼠血脂的异常,降低ICAM-1表达,减轻血管内皮病变程度,这可能是其抗AS的分子机制之一.     

鳖甲煎丸药理学研究

目的：证实鳖甲煎丸是否具有活血化瘀，软坚散结功能。方法：应用血瘀，大鼠纤维化肝胶原蛋白和尿羟脯氨酸排泄量，抗肿瘤等药理模型其功能。结果：（1）本品具有促羊红细胞与自身血块的吸收作用。（2）本品通过对肝硬变的大鼠治疗后直胶原纤维减少和胶原蛋白含量明显低于肝硬变组，同时能使肝硬变大鼠尿羟脯氨酸排泄量显著性增加，表明药物有促进胶原纤维降解的作用，使已形成的肝胶原重吸收。（3）本品有明显的抑制S180肿瘤生长作用。结论：本品具有活血化瘀，软坚散结作用。     

不同剂量鳖甲煎丸对大鼠血小板聚集功能影响对照实验研究

目的:研究鳖甲煎丸对大鼠血小板聚集功能的影响。方法:将健康SD大鼠随机分4组,空白对照组(生理盐水)、阿司匹林组(阳性对照组)、鳖甲煎丸高、低剂量组(2.0、1.0 g/kg)。以二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶为诱导剂活化血小板,采用比浊法观察空白对照组及不同药物处理组对血小板聚集率的影响。结果:空白对照组经ADP、胶原、凝血酶为诱导剂活化后其血小板聚集率分别为(45.36±0.43)%、(47.14±0.43)%、(46.86±0.41)%,经阿司匹林药物处理后其血小板聚集率明显下降分别为(28.84±0.21)%、(30.62±0.21)%、(29.85±0.21)%,低剂量鳖甲煎丸作用后血小板聚集率分别为(30.39±0.19)%、(32.08±0.15)%、(31.70±0.17)%,经高剂量鳖甲煎丸作用后血小板聚集率(29.74±0.21)%、(31.52±0.21)%、(30.64±0.21)%,3组与空白对照组相比都能够明显降低血小板聚集率,差异有显著性;以ADP和胶原为诱导剂活化的血小板中,阿司匹林组对血小板聚集抑制率[(36.24±0.01)%、(34.93±0.01)%]明显高于低剂量[(32.79±0.01)%、(31.81±0.01)%]和高剂量鳖甲煎丸处理组[(34.22±0.01)%、(32.99±0.01)%];在以凝血酶为诱导剂活化的血小板中,阿司匹林组对血小板聚集抑制率(36.19±0.01)%明显高于低剂量鳖甲煎丸处理组(32.21±0.01)%,而与高剂量鳖甲煎丸处理组(34.49±0.01)%差异无显著性。结论:不同剂量鳖甲煎丸同阿司匹林一样可有效抑制由ADP、胶原、凝血酶诱导的血小板聚集,应用高剂量鳖甲煎丸能够和阿司匹林有相同的血小板抑制效果及祛聚治疗效果。     

鳖甲煎丸的临床应用

鳖甲煎丸为汉代张仲景所创,始载于《金匮要略·疟病脉证并治第四》,原书用以治疗"症瘕"、"疟母"等病症.历代多按《金匮》处方制为成药,应用于临床,至今已有近二千年历史,疗效卓著.近三十年来,本人以辨证论治为原则,以鳖甲煎丸为主,适当配合汤药,治疗肝硬化、恶性肿瘤等病症,每可获效,深感仲景组方之严谨、科学,现将鳖甲煎丸的组方意义、临床应用作一肤浅的介绍.     

鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠MMP-1、TIMP-1的影响

目的:通过研究鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响,探讨其防治肝纤维化的作用机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎丸预防组及鳖甲煎丸治疗组,用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型,给予鳖甲煎丸进行防治,采用免疫组化方法,观测基质金属蛋白酶(MMP-1)及其抑制因子(TIMP-1)在各组大鼠肝脏组织中的表达。结果:与正常对照组比较,其余各组MMP-1表达均增高,差别有统计学意义(P0.05);秋水仙碱、鳖甲煎丸MMP-1表达较模型对照组有所升高,但差别无统计学意义(P0.05);鳖甲煎丸预防及治疗组TIMP-1高于正常对照组,低于模型对照组及秋水仙碱各组,差别均有统计学意义(P值均0.05)。结论:鳖甲煎丸可明显抑制TIMP-1的表达,促进细胞外基质的降解,从而实现对肝纤维化的防治作用。     

鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠肝组织HGF表达的影响

目的:观察鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化模型大鼠肝组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,分析鳖甲煎丸抗肝纤维化的治疗作用并探讨其作用机制.方法:雄性Wistar大鼠90只,随机分为6组:正常对照组、模型组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎预防组、鳖甲煎治疗组,采用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型.各组于10周后随机取8只大鼠断头处死,取血清,检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C);取肝组织,免疫组化染色,用图像分析法检测HGF.结果:各预防组、治疗组血清HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C含量均明显降低(P＜0.01或P＜0.05),但以鳖甲煎预防组、治疗组降低最为明显;各预防组、治疗组大鼠肝脏组织HGF均有表达(P＜0.01或P＜0.05),鳖甲煎预防组、治疗组比秋水仙碱组的表达更为明显.结论:鳖甲煎丸能够抑制肝脏纤维化病理改变,增加HGF的表达,具有明显的抗肝纤维化作用.     

鳖甲煎口服液对大鼠肝纤维化的影响

目的 :研究鳖甲煎口服液抗肝纤维化的作用机理。方法 :用四氯化碳复合因素造模 ,给予鳖甲煎口服液治疗。观察血清透明质酸 (HA)、层粘连蛋白 (LN )的变化 ,部分标本观察肝细胞超微结构的变化。结果 :鳖甲煎口服液能降低血清HA、LN含量 ,减少肝细胞变性、坏死和纤维增生程度 ,减轻超微结构的病理变化。结论 :鳖甲煎口服液对实验性肝纤维化有一定的治疗作用 ,其机理可能与保护肝细胞功能 ,抑制星状细胞合成和分泌过量细胞外基质 ,减轻肝血窦毛细血管化 ,改善肝脏微循环 ,调节机体免疫功能有关。     

鳖甲煎丸对大鼠四氯化碳肝损伤治疗作用的实验研究

采用ｃｃｌ４制成大鼠肝硬变模型，以体重，肝指数，脾指数，ＧＰＴ值，肝内组织纤维化程度为指标，观察鳖甲煎丸治疗作用，结果表明鳖甲煎丸有改善肝内血液循环，减少肝纤维化程度的功效。     

鳖甲煎丸治疗肝癌体会

原发性肝癌是原发于肝细胞或者肝内胆管上皮细胞的恶性肿瘤,是我国最常见的恶性肿瘤之一。全世界每年新发病的肝癌约45%发生在我国大陆地区,每年约有12万人死于肝癌,占全世界恶性肿瘤死亡率的第3位。由于肝癌起病隐匿,恶性程度高,发展变化快,患者就诊时往往已进入中晚期,失去了最佳手术时机。有     

鳖甲煎丸治疗面部黄褐斑

笔者自１９９２年开始运用鳖甲煎丸治疗妇女面部黄褐斑患者,疗效满意。１临床资料７４例均为门诊女性病人,年龄１９－５１岁,病程最长６年,最短２个月。２适应证非妊娠期、非哺乳期面部黄褐斑,影响面部美观;或伴月经不调,乳房胀痛,气滞血瘀诸证。３给药方法采用杭...