反复呼吸道感染患称T细胞增殖及胞浆游离钙浓度的变化

目的：探讨反复呼吸道感染（ＲＲＴＩ）患儿Ｔ细胞增殖（ＴＬＰ）及其胞浆游离钙浓度（〔Ｃａ＾２＋〕ｉ）的关系。方法：采用ＭＴＴ比色法测定３０例ＲＲＴＩ患儿及３１名健康儿童ＴＬＲ，使用ＦＵＲＡ－２／Ａｍ做荧光探剂，双波长荧光分光光度仪测定Ｔ细胞活化及未活化时〔Ｃａ＾２＋〕ｉ。结果：ＲＲＴＩ患儿ＴＬＰ明显低于对照组，Ｔ细胞未活化时两组间〔Ｃａ＾２＋〕ｉ的差异无统计学意义，当Ｔ细胞活化时ＲＲＴＩ患儿〔Ｃａ＾     

淋巴细胞[Ca~(2 )]i变化在小儿反复呼吸道感染发病机制中作用的探讨

目的：探讨反复呼吸道感染（ＲＲＴＩ）患儿Ｔ淋巴细胞增殖及胞浆游离钙浓度［Ｃａ２＋］ｉ的变化,及其在发病机制中的作用。方法：选取ＲＲＴＩ患儿３０例,健康儿童３１例为对照组,测定外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中Ｔ细胞增殖、Ｔ细胞活化及未活化时［Ｃａ２＋］ｉ的变化。结果：ＲＲＴＩ与对照组相比,Ｔ细胞增殖明显降低（Ｐ＜００１）;Ｔ细胞未活化时两组间［Ｃａ２＋］ｉ无明显差异（Ｐ＞００５）;当Ｔ细胞活化时,ＲＲＴＩ组［Ｃａ２＋］ｉ明显低于对照组（Ｐ＜００１）。结论：ＲＲＴＩ患儿Ｔ细胞增殖能力降低,细胞免疫功能低下,这是患儿易发生反复感染的原因之一。Ｔ细胞活化过程中Ｃａ２＋动员存在一定程度异常,这是其增殖能力降低的原因之一。     

淋巴细胞[Ca^2＋]i变化在小儿反复呼吸道感染发病机制 …

目的：探讨反复呼吸道感染患儿Ｔ淋巴细胞增殖及胞浆游钙浓度「Ｃａ＾２＋」ｉ的变化,及其在发病机制中的作用。方法;选取ＲＲＴＩ患儿３０例,健康儿童３１例为对照组,测定外周血单个细胞中Ｔ细胞增殖,Ｔ细胞活化及未活化时「Ｃａ＾２＋」ｉ的变化。结果：ＲＲＴＩ与对照组相比,Ｔ细胞增殖明显降低;Ｔ细胞未活化时两组间「Ｃａ＾２＋」ｉ无明显差异;     

粉防己碱抑制心肌细胞〔Ca~(2 )〕_i的瞬间变化

用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ做荧光指示剂，测量粉防己碱对电刺激诱导的〔Ｃａ２＋〕ｉ瞬间变化的作用。粉防己碱３—１００μＭ浓度和时间依赖性地抑制电刺激诱导〔Ｃａ２＋〕ｉ的瞬间变化幅度，而没有影响静息〔Ｃａ２＋〕ｉ水平。该浓度的粉防己碱抑制ＫＣｌ除极化所致的细胞〔Ｃａ２＋〕ｉ增加。高浓度的粉防己碱（６０—１００μＭ）明显延长〔Ｃａ２＋〕ｉ衰减的时间，也减少Ｃａｆ－ｆｅｉｎｅ诱导〔Ｃａ２＋〕ｉ瞬间变化幅度。结果提示粉防己碱除了抑制Ｃａ２＋内流外，在高浓度也影响心肌细胞肌质网Ｃａ２＋的摄取或释放     

环孢素A对血管平滑肌细胞,肾小球系膜细胞的间接收缩作用

研究环孢素Ａ（ＣｙＡ）引起肾毒性和高血压毒性的可能机制。在培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ），血管有平滑肌细胞（ＳＭＣ）中，加入ＣｙＡ作用的内皮细胞上清液及内皮素（ＥＴ），在光镜下动态观察上述两种细胞的收缩反应，以微尺测量细胞表面面积，并以Ｆｕｒａ－２ＡＭ荧光负描法测细胞内游离钙（〔Ｃａ＾２＋ 〕ｉ）。结果：ＧｙＡ作用的内皮细胞上清液与ＥＴ一样，可使ＭｓＣ、ＳＭＣ的人〔Ｃａ＾２＋〕ｉ明显增加并产生     

粉防己碱抑制心肌细胞[Ca^2＋]i的瞬间变化

用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ做荧光指示剂，测量粉防己碱对电刺激诱导的〔Ｃａ＾２＋〕ｉ瞬间变化的作用。粉防己碱３－１００μＭ浓度和时间依赖性地抑制电刺激诱导〔Ｃａ＾２＋〕ｉ的瞬间变化幅度，而没有影响静息〔Ｃａ＾２＋〕ｉ水平。该浓度的粉防己碱抑制ＫＣｌ除极化所致的细胞〔Ｃａ＾２＋〕ｉ增加。高浓度的粉防己碱（６０￣１００μＭ）明显延长〔Ｃａ＾２＋〕ｉ衰减的时间，也减少Ｃａｆｆｅｉｎｅ诱导〔Ｃａ＾２＋〕ｉ瞬间变化     

缓释异搏定治疗高血压病逆转左室肥厚的动态观察及其机制

３３例高血压病左室肥厚（ＬＶＨ）患者，用缓释异搏定治疗一年，定期检测左室重量指数（ＬＶＭＩ）和淋巴细胞〔Ｃａ＾２＋〕ｉ。结果发现：①ＬＶＭＩ和〔Ｃａ＾２＋〕ｉ在治疗６个月时明显降低；②ＬＶＭＩ与〔Ｃａ＾２＋〕ｉ，ＭＡＰ呈正相关；③治疗一年，△；ＬＶＭＩ与△〔Ｃａ＾２＋〕ｉ，△ＭＡＰ呈正相关（ｐ〈０．０１）。表明缓释异搏定逆转ＬＶＨ的机制除血压下降的作用外，〔Ｃａ＾２＋〕ｉ降低是一个非常重要的因素。     

创伤后活化T细胞内游离钙,钙调素,钙调素依赖的蛋白激酶…

研究了创伤小鼠活化Ｔ细胞内游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）、钙调素（ＣａＭ）、钙调素依赖的蛋白激酶（ＣａＭ－ＰＫ）活性的变化及其与Ｔ细胞功能之间的关系。结果显示，创伤后活化Ｔ细胞内［Ｃａ＾２＋］ｉ降低，且这一变化同创伤小鼠Ｔ细胞白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ、ＩＬ－２受体α（ＩＬ－２Ｒα）ｍＲＮＡ水平降低，ＩＬ－２生成减少，ＩＬ－２Ｒα表达受抑，Ｔ淋巴细胞转化（ＴＬＴ）降低密度相关。创伤后活化Ｔ细胞内     

应用Fura-2/AM测定兔视网膜细胞内游离钙的方法

目的：建立适宜条件下，用荧光指示剂Ｆｕｒａ－２测定乳兔视网膜细胞内游离钙（简称［Ｃａ２＋］ｉ）的方法。方法：用酶解制备视网膜细胞悬液。Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载进行荧光测定。结果：经０．０５％胰蛋白酶消化１０分钟，可使细胞存活率达９０％以上。在３７℃条件下与Ｆｕｒａ－２／ＡＭ温育４０分钟，于３０分钟内测定为最佳条件。结论：静息状态下（［Ｃａ２＋］ｉ）水平为（２２３±２７）ｎｍｏｌ／Ｌ，其值在文献报道范围内。高钾去极化，在Ｋ＋为２５ｍｍｏｌ／Ｌ和５０ｍｍｏｌ／Ｌ时，分别使（［Ｃａ２＋］ｉ）增加了５９％和１４８％，由此证明视网膜细胞悬液制备和测定方法是可行的。     

心衰患者心功能与血淋巴细胞内游离钙浓度的相关性及索洛尔对二者的影响

目的 探讨心力衰竭患者应用比索洛尔后心功能及血淋巴细胞内游离钙（〔Ｃａ＾２＋〕ｉ）含量的变化。方法 应用超声心动图及荧光分光光度计分别测定４０例心力衰竭患者和１５例健康人的左室舒缩功能和血淋巴细胞内〔Ｃａ＾２＋〕ｉ。其中２０例心衰患者在强心、利尿、扩血管等治疗基础上加用比索洛尔５ｍｇ／ｄ,另２０例仅常规治疗。３周后重复各项检查。结果 心衰患者血淋巴细胞内〔Ｃａ＾２＋〕ｉ显著高于正常对照组。比索洛尔治疗３周后,心功能改善;血淋巴细胞内〔Ｃａ＾２＋〕ｉ明显降低（Ｐ〈０．０１）;心功能改善的程度与〔Ｃａ＾２＋〕ｉ降幅呈正相关（ｒ＝０．６８５）。结论 比索洛尔能显著改善心力衰竭患者的心功能,其机制可能与抑制过亢的交感神经活性,逆转心肌细胞内Ｃａ＾２＋超负荷有关。     

用Fura-2/AM检测巨噬细胞〔Ca~(2 )〕_i影响因素分析

用Ｆｕｒａ┐２／ＡＭ检测巨噬细胞〔Ｃａ２＋〕ｉ影响因素分析王斌１杜冠华２陈敏珠１作者单位：１安徽医科大学临床药理研究所，合肥２３００３２２中国医学科学院药物研究所，北京１０００５０用Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ检测活细胞胞浆游离钙浓度（〔Ｃａ...     

内皮素-1对成纤维细胞内游离钙的影响

目的研究内皮素（ＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎＥＴ）对成纤维细胞（ＨＬＦ）内钙离子浓度（［Ｃａ＋２］ｉ）的影响及维拉帕米（Ｖｅｒ）对ＥＴ促［Ｃａ＋２］ｉ效应的阻断作用。方法采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ钙荧光指示剂测定ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度。结果ＥＴ在很短时间内即可明显提高ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度（Ｐ＜０．０１～０．００１）。并且在细胞外液无Ｃａ＋２存在情况下，亦可提高［Ｃａ＋２］ｉ，且有明显的量效关系（Ｐ＜０．０５～０．０１）。同时，Ｖｅｒ对ＥＴ的上述作用具有显著的作用（Ｐ＜０．０５）。结论ＥＴ对Ｖｅｒ的调控作用是通过［Ｃａ＋２］ｉ转运而产生的。     

白细胞介素1β对谷氨酸诱导的培养海马神经元单细胞游离钙离子浓度的影响

应用ＥＰＣ－９光电联合检测系统检测白细胞介素１β（ＩＬ－１β）对培养海马神经元单个细胞内游离钙离子（〔Ｃａ２＋〕ｉ）浓度的影响,以及ＩＬ－１β与谷氨酸（Ｇｌｕ）共同作用对神经元〔Ｃａ２＋〕ｉ浓度的影响。结果,神经元胞浆〔Ｃａ２＋〕ｉ的基础水平为（０．...     

aFGF对肺腺癌AGZY—83A细胞株TPK,PKC活性及Ca^2＋浓度的影响

目的：观察ａＦＧＦ与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径，探讨ａＦＧＦ导致细胞增殖的机理。方法：以不同浓度的ａＦＧＦ处理ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞，利用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶活性（ＴＰＫ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性；用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：随着ａＦＧＦ浓度增加，ＴＰＫ及ＰＫＣ活性随之升高。当ａＦＧＦ浓度为１．１２μｇ／ｍｌ时ａＦＧＦ处理组的ＴＰＫ是对照组的４倍；膜ＰＫＣ活性也是对照组的４倍，胞浆ＰＫＣ活性是对照组的１．７５倍。［Ｃａ２＋］ｉ是对照组的３倍。结论：该细胞株中ａＦＧＦ受体具有ＴＰＫ活性。ＴＰＫ激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化，而使ＰＫＣ活性及［Ｃａ２＋］ｉ升高，即ＰＫＣ和Ｃａ２＋是ＴＰＫ的下游信号分子，进一步促进ｃ－ｆｏｓ、ｊｕｎ基因表达增加，导致细胞增殖     

糖尿病患者血小板游离钙变化与血栓素B2生成的关系

为了探讨糖尿病患者血小板胞浆内游离Ｃａ￣（２＋）浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ）与血栓素Ｂ＿２（ＴＸＢ＿２）生成的关系，及其在糖尿病微血管病变发病中的作用，作者用Ｃａ￣（２＋）荧光指示剂ｆｕｒａ－２直接测定２７例糖尿病患者（合并微血管病变苔１３例，无微血管病变者１４例）血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ，并且同步测定ＴＸＢ＿２。结果：以钙载体Ａ＿（２３１８７）诱导，糖尿病组血小板［（Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为１１４７±５２ｎｍｏｌ／Ｌ，高于对照组（８９７±４９ｎｍｏｌ／ＬＰ＜０．０１），且与ＴＸＢ，生成呈正相关：而用花生四烯酸诱导，糖尿病组血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为３５３±１４ｎｍｏｌ／Ｌ，虽高于对照组（３１２±１６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０５），但与ＴＸＢ＿２生成未呈显著相关。上述改变在糖尿病有或无微血管病变两组之间比较无显著性差异，提示糖尿病患者血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ变化可能通过膜磷脂酶环节致使ＴＸＢ＿２生成增多，参与微血管病变的发病。     

急性胰腺炎时胰腺细胞内钙离子变化的初步观察报告

近来的研究提示在急性胰腺炎（ＡＰ）病理生理过程中可能有钙离子内流的参与。使用ＳＤ大白鼠胆胰管逆行加压注射牛磺胆酸制成ＡＰ模型，用荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／Ａｍ测定游离胰腺腺泡活细胞内游离钙离子浓度（〔Ｃａ＾２＋〕ｉ）。结果显示ＡＰ后的２和３小时胰腺呈急性出血坏死性胰腺炎早期改变，ＡＰ组〔Ｃａ＾２＋〕ｉ较对照组明显增高（Ｐ〈０．００１）。本实验结果提示ＡＰ发生发展过程中存在着明显的钙离子内流。     

反复呼吸道感染患儿机体免疫功能观察

目的：观察反复呼吸道感染（ＲＲＴＩ）患儿体液免疫和细胞免疫功能。方法：选择符合诊断标准的ＲＲＴＩ患儿５３例为观察组,健康儿童３１例为对照组,测定血清免疫球蛋白和Ｔ细胞亚群,并行ｔ检验。结果：ＲＲＴＩ患儿血清ＩｇＧ低于对照组（Ｐ＜０．０５）,ＩｇＡ、ＩｇＭ与对照组无差异。Ｔ细胞亚群ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８低于或明显低于对照组,而ＣＤ８高于对照组。结论：本组ＲＲＴＩ患儿反复呼吸道感染的原因与细胞免疫功能低下密切相关,与血清ＩｇＧ含量下降也有一定关系。     

成年大鼠脑细胞内钙的测定

目的：探讨成年大鼠脑细胞分离及其细胞内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的测定。方法：低浓度胰蛋白酶消化及机械吹打等方法分离脑细胞，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为Ｃａ２＋－敏感的荧光指示剂，应用荧光分光光度计测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：分离的脑细胞存活率在９５％以上，在细胞外Ｃａ２＋１ｍｍｏｌ／Ｌ的情况下［Ｃａ２＋］ｉ为（２７０±３５）ｎｍｏｌ／Ｌ，高钾使［Ｃａ２＋］ｉ急剧增加。结论：本方法分离成年大鼠脑细胞简单、可靠，且能准确反映［Ｃａ２＋］ｉ的变化。     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

谷氨酸对体外培养大鼠神经细胞毒性机理的研究

为进一步探讨谷氨酸（ Ｇｌｕ）的神经毒性机理,采用体外培养大鼠大脑皮质神经细胞１２～１４天,再分别加入 Ｇｌｕ（ Ｇｌｕ 组）, Ｇｌｕ＋ 尼莫地平（拮抗剂Ⅰ组）, Ｇｌｕ＋ Ｍ Ｋ８０１（拮抗剂Ⅱ组）,检测各组神经细胞胞浆总钙（ Ｔ Ｃａ）及游离钙（ Ｃａ２＋ ｉ）．结果显示： Ｇｌｕ 组 Ｔ Ｃａ 和 Ｃａ２＋ ｉ明显高于正常对照组（ Ｐ＜ ０．０５）,拮抗剂Ⅰ、Ⅱ组 Ｔ Ｃａ、和 Ｃａ２＋ ｉ均高于正常对照组（ Ｐ＜ ０．０５）而低于 Ｇｌｕ 组（ Ｐ＜ ０．０５）。提示：谷氨酸通过 Ｃａ２＋ 电压通道和受体依赖通道的激活,导致细胞内 Ｃａ２＋ ｉ沉积而产生神经毒性。