己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的影响

背景：以往实验结果提示淫羊藿总黄酮有提高雌激素预防去卵巢大鼠胫骨上段松质骨丢失的作用,又可减少雌激素在应用于防治绝经后骨质疏松症中对子宫的刺激等不良反应,将两者结合应用是否有协同作用？目的：观察己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的代谢生化指标和骨组织形态计量学的影响.设计：随机对照动物实验.单位：广东医学院药理教研室.材料：4月龄未交配的雌性SD大鼠,体质量（225&;#177;15）g,由中国科学院上海实验动物中心提供,动物级别为清洁级（合格证号：中科动管第003号）.大鼠随机分为5组：假手术组、去卵巢组、己烯雌酚组、淫羊藿总黄酮组与联合用药组,每组10只.方法：除假手术组大鼠外,其余行双侧卵巢切除术,假手术组和去卵巢组给予溶剂对照,其余分别为：己烯雌酚组22.5 μg/（kg&;#183;d）,淫羊藿总黄酮组300 mg/（kg&;#183;d）,联合用药组[己烯雌酚22.5μg/（kg&;#183;d）＋淫羊藿总黄酮300 mg（kg&;#183;d）],均灌胃给药90天.应用骨组织形态计量学方法测量第5腰椎松质骨的动态参数（周长百分数、骨矿化沉积率、骨表面形成率、骨量形成率、骨组织形成率）和静态参数（骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁分离度、单位骨小梁面积破骨细胞数）,同时测量股骨钙、磷及羟脯氨酸含量.主要观察指标：①己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎松质骨的动态参数和静态参数的影响.②己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠股骨生化指标的影响.结果：5组大鼠,每组10只均纳入结果分析.①己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠股骨生化指标的影响：与假手术组比较,去卵巢组大鼠股骨湿重/体质量比、干重/体质量比均明显降低（P＜0.01）,骨钙、磷含量及钙/羟脯氨酸比值均降低（P＜0.05）.与去卵巢组比较,己烯雌酚组大鼠股骨生化指标无明显变化（P＞0.05）;淫羊藿总黄酮组大鼠骨钙、骨磷含量及钙/羟脯氨酸比值明显增加（P＜0.01）.联合用药组骨钙、骨磷含量及钙/羟脯氨酸比值均明显增加（P＜0.01）,而且高于己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组（P＜0.05）.②己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎静态和动态参数的影响：与假手术组比较,去卵巢组大鼠腰椎静态参数中骨小梁面积百分数、骨小梁厚度分别减少35.0%,31.0%,而骨小梁分离度、破骨细胞数分别增加31.6%,106.9%,差异均有显著性（P＜0.05～0.01）;动态参数标记周长百分数、骨量形成率分别增加126.8%,36.6%,差异有显著性（P＜0.01）.与去卵巢组比较,己烯雌酚使去卵巢大鼠腰椎的骨小梁面积百分数增加20.3%,但差异无显著性（P＞0.05）,骨小梁分离度、破骨细胞数分别减少15.1%,47.1%,差异有显著性（P＜0.05）;动态参数标记周长百分数、骨矿化沉积率、骨量形成率分别减少44.3%,28.0%,64.1%,差异有显著性（P＜0.05）.淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠腰椎静态参数和动态参数均无明显影响（P＞0.05）.联合用药使去卵巢大鼠腰椎松质骨的骨小梁面积百分数、骨小梁厚度分别增加52.7%,36.6%,而骨小梁分离度、破骨细胞数分别减少25.5%,61.0%,差异均有显著性（P均＜0.01）;动态参数标记周长百分数、骨矿化沉积率、骨量形成率分别减少56.1%,39.2%和2 80.1%,差异均有显著性（P均＜0.01）.联合用药组的作用明显强于己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组,差异有显著性（P＜0.05）.结论：己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药明显增加去卵巢大鼠腰椎的骨量和骨小梁厚度,减少骨小梁分离度,其增加骨量的效应比单用己烯雌酚和单用淫羊藿总黄酮的作用明显,且可使股骨钙、磷含量及钙/羟脯氨酸比值增加,提示己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的作用具有协同作用.     

雌孕激素合用对去卵巢骨质疏松大鼠的骨保护效果

背景有报道雌激素和孕激素联合应用对防治绝经后骨质疏松症有协同作用,且副作用较小.目的观察炔诺酮和炔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨量的影响.设计随机对照验证性实验观察.单位广东医学院药理教研室.对象清洁级4个半月龄未交配的雌性SD大鼠24只,体质量(23O±l5)g.方法实验于2002-05/11在广东医学院药理教研究空完成.大鼠随机分成3组假手术组,去卵巢组,复方炔诺酮组,每组8只,前2组采用体积分数为0.056的乙醇溶液5mI/(kg·d)灌胃,复方炔诺酮组采用炔诺酮60μg(kg·d)和炔雌醇3.5μg/(kg·d)灌胃(实验用药剂量参照人的用药20～35 ug雌激素十孕激素).所有动物给药时间为90d.给药结束后取胫骨标本,采用全自动图像分析系统对胫骨近端次级骨小梁形成区进行破骨细胞和有关动静态参数的测量;另取肱骨标本用电感偶合等离子体直读光谱仪测定钙含量和测定羟脯氨酸含量.同时测定尿中的钙和羟脯氨酸的含量.主要观实指标①各组大鼠骨小梁面积、骨小梁厚度、骨小梁数目、骨小梁分离度、破骨细胞周长的静态参数变化.荧光周长百分数、矿化沉积率、骨形成率动态参数变化.②血清碱性磷酸酶、骨和尿中钙含量和羟脯氨酸含量变化.结果24只大鼠均进入结果分析.①去卵巢大鼠与假手术组大鼠相比,骨小梁面积百分数下降,骨小梁数目降低和骨小梁分离度增加,伴随明显的破骨细胞周长增加(P＜0．01);骨形成指标明显增加荧光周长百分数和矿化沉积率增加(P＜0．05),骨形成率(BFR/BV)明显增加(P＜0．01).②复方炔诺酮组与去卵巢组比较,骨量和骨小梁数目增加,骨小梁面积增加82％和骨小梁数目增加83%(P＜0.05),骨小梁分离度降低51％(P＜0．05);破骨细胞周长降低52.05%(P＜0.01);同时骨有机质含量增加和尿羟脯氨酸排出量减少(P＜0.05).结论炔诺酮和炔雌醇联合应用可防治去卵巢大鼠骨质疏松,增加骨量和骨有机质含量,且不明显抑制骨形成.实验提供的药物剂量参照人的用量,20～35μg雌激素结合一种孕激素,其效果良好时即可提供一种最好的骨保护作用.     

被动吸烟大鼠骨量与骨生物力学指标的相关性及淫羊藿黄酮的干预效应

目的:作者已通过实验证实,被动吸烟可以增加大鼠骨吸收,最终导致骨质疏松.淫羊藿黄酮有促进骨形成防止骨丢失的作用.观察淫羊藿黄酮干预对被动吸烟大鼠骨密度与骨生物力学指标的影响,并分析骨密度占骨生物力学指标的相关性.方法:实验于2005-01/12在中南大学湘雅医学院附属湘雅医院动物实验室和中心实验室完成,对动物的处置方法符合动物伦理学要求.选择SD大鼠60只,按随机数字表法分成6组(n=10):即空白对照组、被动吸烟组、被动吸烟 钙组、淫羊藿黄酮75,150,300mg/(kg·d)组,后5组大鼠按密室熏烟法被动吸烟4个月,每天灌服钙剂及淫羊藿,给药4个月.干预完毕后测定股骨和腰椎骨密度、L4椎体力学性能指标、股骨结构力学性能指标及材料力学性能指标,并分析骨密度与骨生物力学指标的相关性.结果:60只大鼠全部进入结果分析.①与空白对照组比较,被动吸烟组大鼠的股骨和腰椎骨密度、L4椎体力学性能指标、股骨结构力学性能指标及材料力学性能指标均明显降低(P＜0.05);与被动吸烟组比较,被动吸烟 钙组、淫羊藿黄酮各剂量组上述指标均得到改善(P＜0.05).②股骨和腰椎骨密度分别与腰椎体力学性能指标中弹性模量、最大载荷、最大应力、变形位能、结构刚度,股骨结构力学性能指标中最大载荷、破坏载荷、变形位能、结构刚度和股骨材料力学性能指标中弹性模量、最大应力、最大应变、破坏应力呈正相关(股骨骨密度:r=0.802～0.822,P＜0.05;腰椎骨密度:r=0.784～0.843, P＜0.05).结论:淫羊藿黄酮可改善和提高被动吸烟大鼠骨密度、椎骨力学性能、股骨结构力学性能和材料力学性能,且骨密度与骨生物力学指标之间存在明显的相关性.     

仙珍骨宝胶囊对去卵巢大鼠股骨颈骨代谢的影响

背景:用骨组织形态计量学方法探讨中药对去卵巢大鼠股骨颈骨质疏松的影响,可为采用中药防治绝经后妇女骨质疏松性股骨颈骨折提供实验依据.目的:观察仙珍骨宝胶囊对去卵巢大鼠股骨颈松质骨的影响.方法:3月龄SD雌鼠随机分为4组:基础对照组于实验开始时处死取材,去卵巢组和仙珍骨宝组去卵巢造模,仙珍骨宝组在去卵巢后灌胃仙珍骨宝,去卵巢组和年龄对照组灌胃生理盐水,90 d后处死,取股骨颈经不脱钙骨制片进行骨组织形态计量学参数测量.结果与结论:与年龄对照组比较,去卵巢大鼠静态参数的骨小梁面积百分数和骨小梁数量明显减少(P < 0.01),骨小梁间隙明显增大(P < 0.01);动态参数的每毫米破骨细胞数和破骨细胞贴壁表面长度明显增加(P < 0.01),骨矿化沉积率明显减少(P < 0.01).说明去卵巢能导致大鼠股骨颈骨量显著减少.给予仙珍骨宝治疗后,大鼠的骨小梁厚度及骨小梁面积明显增加(P < 0.05),每毫米破骨细胞数和破骨细胞贴壁表面长度有所减少,标记周长百分数则有所增加.说明仙珍骨宝能阻止去卵巢所致的大鼠股骨颈骨量丢失.     

黄芪和司坦唑醇复方制剂干预去卵巢骨质疏松症大鼠胫骨中段皮质骨及上段松质骨形态计量学参数的变化

目的:观察黄芪和司坦唑醇复方制剂对去卵巢骨质疏松症模型大鼠胫骨中段皮质骨和胫骨上段松质骨形态计量学参数的影响,并与己烯雌酚作用结果进行比较。方法:实验于2005-05/12在广东医学院药理学实验中心完成。①选用SPF级3月龄Wistar雌性大鼠40只。按随机抽签法分为4组:假手术组、模型组、复方制剂组、己烯雌酚组,每组10只。假手术组行去卵巢假手术;其他3组均行去势手术(结扎子宫,削除卵巢),造成骨质疏松症模型。术后1d,假手术组及模型组、复方制剂组、己烯雌酚组分别以生理盐水、黄芪和司坦唑醇复方制剂(自制复方,生药含量为2kg/L)、己烯雌酚0.5g/L(广东华南药业集团,批号050103,1mg/粒)按大鼠5mL/kg灌胃给药,饲养8周后全部处死。②取大鼠胫骨上段松质骨和中段皮质骨硬组织包埋、切片、染色、图像分析松质骨、皮质骨形态计量学参数,即松质骨静态及吸收参数:骨小梁面积百分数,骨小梁数量,骨小梁分离度,破骨细胞数量,破骨细胞周长百分数;松质骨动态参数:骨小梁荧光周长百分数,骨矿化沉积率,骨形成率/组织参数、骨形成率/小梁面积和骨形成率/周长;皮质骨静态参数:皮质骨面积,皮质骨面积百分数,髓腔面积百分数,内骨膜面骨吸收参数;皮质骨骨形成动态参数:皮质骨内外骨膜荧光标记周长百分数,皮质内外骨膜骨矿化沉积率,皮质内外骨膜骨形成率。结果:大鼠40只均进入结果分析。①4组大鼠皮质骨面积及其百分数、骨髓腔面积参数差异不明显。己烯雌酚组和复方制剂组大鼠内骨膜面骨吸收参数明显低于模型组(P<0.05)。②复方制剂组大鼠皮质骨内、外骨膜骨形成参数均明显高于假手术组和模型组(P<0.05～0.01)。己烯雌酚组皮质骨内骨膜骨形成参数明显低于模型组(P<0.05～0.01),皮质外骨膜骨形成率明显高于模型组(P<0.05)。③复方制剂组和己烯雌酚组骨小梁面积百分数和骨小梁数量明显高于模型组(P<0.05～0.01),骨小梁分离度明显低于模型组(P<0.05,0.01)。复方制剂组和己烯雌酚组破骨细胞数量和破骨细胞周长百分数均明显低于模型组(P<0.01)。④复方制剂组大鼠胫骨上段松质骨形态计量学动态参数均明显高于假手术组(P<0.05～0.01),与模型组比较,差异不明显(P>0.05)。结论:①实验8周时间内,黄芪和司坦唑醇复方制剂和己烯雌酚对骨质疏松症大鼠皮质骨内骨膜面骨吸收功能有明显抑制作用。②黄芪和司坦唑醇复方制剂能促进骨质疏松症大鼠皮质骨内、外骨膜面骨形成,而己烯雌酚无该作用。③黄芪和司坦唑醇复方制剂和己烯雌酚均能促进骨质疏松症大鼠胫骨上段松质骨骨小梁面积、数量和降低破骨细胞的吸收功能。④黄芪和司坦唑醇复方制剂和去卵巢手术均有促进骨形成的作用,而己烯雌酚无该作用。     

雌孕激素合用对去卵巢骨质疏松大鼠的骨保护效果

背景：有报道雌激素和孕激素联合应用对防治绝经后骨质疏松症有协同作用，且副作用较小。目的：观察炔诺酮和炔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨量的影响。设计：随机对照验证性实验观察。单位：广东医学院药理教研室。对象：清洁级4个半月龄未交配的雌性SD大鼠24只，体质量(230&;#177;15)g。方法：实验于2002-05／11在广东医学院药理教研究空完成。大鼠随机分成3组：假手术组，去卵巢组，复方炔诺酮组，每组8只，前2组采用体积分数为0．056的乙醇溶液5ml／(kg&;#183;d)灌胃，复方炔诺酮组采用炔诺酮60μg／(kg&;#183;d)和炔雌醇3．5μg／(kg&;#183;d)灌胃(实验用药剂量参照人的用药20～35μg雌激素+孕激素)。所有动物给药时间为90d。给药结束后取胫骨标本，采用全自动图像分析系统对胫骨近端次级骨小梁形成区进行破骨细胞和有关动静态参数的测量；另取肱骨标本用电感偶合等离子体直读光谱仪测定钙含量和测定羟脯氨酸含量。同时测定尿中的钙和羟脯氨酸的含量。主要观察指标：①各组大鼠骨小梁面积、骨小梁厚度、骨小梁数目、骨小梁分离度、破骨细胞周长的静态参数变化。荧光周长百分数、矿化沉积率、骨形成率动态参数变化。②血清碱性磷酸酶、骨和尿中钙含量和羟脯氨酸含量变化。结果：24只大鼠均进入结果分析。①去卵巢大鼠与假手术组大鼠相比，骨小梁面积百分数下降，骨小梁数目降低和骨小梁分离度增加，伴随明显的破骨细胞周长增加(P&;lt;0．01)；骨形成指标明显增加：荧光周长百分数和矿化沉积率增加(P&;lt;0．05)，骨形成率(BFR／BV)明显增加(P&;lt;0．01)。②复方炔诺酮组与去卵巢组比较，骨量和骨小梁数目增加，骨小梁面积增加82％和骨小梁数目增加83％(P&;lt;0．05)，骨小梁分离度降低51％(P&;lt;0.05)；破骨细胞周长降低52．5％(P&;lt;0．01)；同时骨有机质含量增加和尿羟脯氨酸排出量减少(P&;lt;0．05)。结论：炔诺酮和炔雌醇联合应用可防治去卵巢大鼠骨质疏松，增加骨量和骨有机质含量，且不明显抑制骨形成。实验提供的药物剂量参照人的用量，20～35μg雌激素结合一种孕激素，其效果良好时即可提供一种最好的骨保护作用。     

雌孕激素联合对去卵巢大鼠骨密度和骨形态计量学的影响

背景:雌孕激素联合治疗绝经后骨质疏松症不仅能减轻雌激素的不良反应,而且能增强疗效,越来越引起关注.目的:验证雌孕激素联合对去卵巢雌性SD大鼠骨密度和骨组织形态计量学的作用.方法:雌性SD大鼠随机分为5组.假手术组仅行开关术;其余各组大鼠双侧卵巢切除.雌二醇组和雌二醇+左炔诺孕酮组术后给予17β-雌二醇10 μg/(kg·d)灌饲,左炔诺孕酮组和雌二醇+左炔诺孕酮组术后给予18-甲左炔诺孕酮60 μg/(kg·d)灌饲,假手术组和卵巢切除组予等量生理盐水灌饲.实验12周后处死大鼠.采用DEXA骨密度仪测定全身骨密度,截取第4腰椎进行骨形态计量学静态参数和动态参数的测量,测定骨代谢生化指标.结果与结论:卵巢切除组和左炔诺孕酮组全身骨密度、股骨质量低于假手术组、雌二醇组和雌二醇+左炔诺孕酮组(P<0.05),雌二醇+左炔诺孕酮组和雌二醇组差异无显著性意义(P>0.05).与假手术组比较,卵巢切除组和左炔诺孕酮组骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量下降(P< 0.05),骨小梁分离度增加(P<0.05),骨矿化沉积率、骨表面积骨形成率、骨体积骨形成率和骨组织体积骨形成率增加(P<0.05).与卵巢切除组相比,雌二醇组和雌二醇+左炔诺孕酮组骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量上升(P<0.05),骨小梁分离度降低(P<0.05),骨表面积骨形成率和骨体积骨形成率降低(P<0.05).雌二醇+左炔诺孕酮组和雌二醇组上述指标比较,均差异无显著性意义(P>0.05).结果证实,17β-雌二醇和左炔诺孕酮联合应用可增加骨密度,降低骨转换率,且无明显抑制骨形成作用.     

黄芪和司坦唑醇复方制剂干预去卵巢骨质疏松症大鼠胫骨中段皮质骨及上段松质骨形态计量学参数的变化

目的：观察黄芪和司坦唑醇复方制剂对去卵巢骨质疏松症模型大鼠胫骨中段皮质骨和胫骨上段松质骨形态计量学参数的影响，并与己烯雌酚作用结果进行比较。 方法：实验于2005-05／12在广东医学院药理学实验中心完成。①选用SPF级3月龄Wistar雌性大鼠40只。按随机抽签法分为4组：假手术组、模型组、复方制剂组、己烯雌酚组，每组10只。假手术组行去卵巢假手术；其他3组均行去势手术（结扎子宫，削除卵巢），造成骨质疏松症模型。术后1d。假手术组及模型组、复方制剂组、己烯雌酚组分别以生理盐水、黄芪和司坦唑醇复方制剂（自制复方，生药含量为2kg／L）、己烯雌酚0．5g／L（广东华南药业集团，批号050103。1mg／粒）按大鼠5mL／kg灌胃给药，饲养8周后全部处死。②取大鼠胫骨上段松质骨和中段皮质骨硬组织包埋、切片、染色、图像分析松质骨、皮质骨形态计量学参数，即松质骨静态及吸收参数：骨小梁面积百分数，骨小梁数量，骨小梁分离度，破骨细胞数量，破骨细胞周长百分数；松质骨动态参数：骨小梁荧光周长百分数，骨矿化沉积率，骨形成率／组织参数、骨形成率／小梁面积和骨形成率／周长；皮质骨静态参数：皮质骨面积，皮质骨面积百分数，髓腔面积百分数，内骨膜面骨吸收参数；皮质骨骨形成动态参数：皮质骨内外骨膜荧光标记周长百分数，皮质内外骨膜骨矿化沉积率，皮质内外骨膜骨形成率。 结果：大鼠40只均进入结果分析。①4组大鼠皮质骨面积及其百分数、骨髓腔面积参数差异不明显。己烯雌酚组和复方制剂组大鼠内骨膜面骨吸收参数明显低于模型组（P〈0．05）。②复方制剂组大鼠皮质骨内、外骨膜骨形成参数均明显高于假手术组和模型组（P〈0．05-0．01）。己烯雌酚组皮质骨内骨膜骨形成参数明显低于模型组（P〈0．05-0．01），皮质外骨膜骨形成率明显高于模型组（P〈0．05）。③复方制剂组和己烯雌酚组骨小梁面积百分数和骨小梁数量明显高于模型组（P〈0．05-0．01），骨小粱分离度明显低于模型组（P〈0．05-0．01）。复方制剂组和己烯雌酚组破骨细胞数量和破骨细胞周长百分数均明显低于模型组（P〈0．01）。④复方制剂组大鼠胫骨上段松质骨形态计量学动态参数均明显高于假手术组（P〈0．05～0．01），与模型组比较，差异不明显（P〉0．05）。 结论：①实验8周时间内，黄芪和司坦唑醇复方制剂和己烯雌酚对骨质疏松症大鼠皮质骨内骨膜面骨吸收功能有明显抑制作用。②黄芪和司坦唑醇复方制剂能促进骨质疏松症大鼠皮质骨内、外骨膜面骨形成，而己烯雌酚无该作用.③黄芪和司坦唑醇复方制剂和己烯雌酚均能促进骨质疏松症大鼠胫骨上段松质骨骨小梁面积、数量和降低破骨细胞的吸收功能。④黄芪和司坦唑醇复方制剂和去卵巢手术均有促进骨形成的作用，而己烯雌酚无该作用。     

淫羊藿对去势雄性大鼠骨密度及骨结构性能的影响

背景:男性骨质疏松的研究起步较晚,治疗上缺乏公认有效的方法。中药淫羊藿具有补肾壮阳的功效,对免疫系统、骨骼以及生殖系统均有明显的调节作用,用于治疗骨质疏松。目的:观察淫羊藿对去势雄性大鼠骨密度及骨结构性能的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/2008-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院老年病实验室完成。材料:鼠龄15周健康雄性SD大鼠50只,体质量(340±10)g,用于制备骨质疏松模型。方法:50只大鼠随机数字表法分为对照组、模型组以及低、中、高剂量淫羊藿治疗组,每组10只;淫羊藿治疗组大鼠自造模后第2周开始用淫羊藿治疗12周,淫羊藿治疗剂量分别为:1.0,5.0,10.0g/(kg·d),对照组和模型组采用等量生理盐水。主要观察指标:12周后,行血尿生化、骨密度检查。对第4腰椎离体椎骨应用自制的SL22000骨疲劳损伤实验机进行疲劳损伤,行骨组织形态计量学检测。结果:50只大鼠均进入结果分析。①对照组、中、高剂量淫羊藿治疗组全身骨密度均高于模型组(P<0.05);模型组尿钙/肌酐、尿磷/肌酐、血核因子κB受体激活因子配体、尿羟脯氨酸/肌酐均高于其他各组(P<0.05),而血清碱性磷酸酶均低于其他各组(P<0.05);治疗组护骨素高于模型组(P<0.05)。②模型组骨小梁单位面积百分率均低于其他各组(P<0.05),其中对照组最高;而单位骨小梁面积百分率的微破裂长度均高于其他各组(P<0.05);对照组、中、高剂量淫羊藿治疗组单位骨小梁面积百分率的微破裂数目和椎体体积均高于模型组(P<0.05)。结论:去势后雄性大鼠应用淫羊藿可以防止骨量丢失并提高骨结构性能。     

肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴内分泌及钙调蛋白基因表达与淫羊藿总黄酮的干预

目的:观察淫羊藿总黄酮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴内分泌功能及钙调蛋白基因表达的影响。方法:实验于2003-10/2004-05在潍坊医学院药理实验室完成。选择健康成年雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组,即生理盐水组、模型组、淫羊藿总黄酮100,200mg/(kg·d)组,每组10只。生理盐水组给予生理盐水5mL/(kg·d),连用30d;模型组大鼠后肢肌肉注射醋酸泼尼松龙注射液10mg/(kg·d)造模,连续用药30d;淫羊藿总黄酮为中药淫羊藿的主要有效成分,淫羊藿总黄酮100,200mg/(kg·d)组大鼠在用醋酸泼尼松龙的同时于第12天开始分别灌胃给于淫羊藿总黄酮100,200mg/(kg·d)至30d。第30天先将各组大鼠静总动脉取血5mL,分离血清,应用放射免疫分析法测定各组大鼠的促甲状腺激素、甲状腺激素T3,T4含量。应用反转录-聚合酶链反应技术,测定其下丘脑、垂体、甲状性腺组织中钙调蛋白基因的表达。结果:40只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠血清促甲状腺激素、甲状腺素T3,T4含量比较:生理盐水组及淫羊藿总黄酮100,200mg/(kg·d)组大鼠血清中甲状腺素T3,T4含量均显著高于模型组(t=2.90～5.49,P<0.05～0.01);生理盐水组及淫羊藿总黄酮200mg/(kg·d)组大鼠血清中促甲状腺激素含量均显著低于模型组(t=2.33,2.23,P<0.05)。②各组大鼠下丘脑、垂体、甲状腺组织中钙调蛋白基因表达情况:模型组大鼠下丘脑、甲状腺组织中钙调蛋白基因表达均显著高于生理盐水组及淫羊藿总黄酮200mg/(kg·d)组(t=4.32～8.69,P<0.05～0.01),但脑垂体钙调蛋白基因表达的变化不明显(P>0.05)。结论:淫羊藿总黄酮可以促进肾阳虚大鼠甲状腺激素的分泌,较大剂量明显能抑制其促甲状腺激素的分泌,且对肾阳虚大鼠下丘脑、甲状腺组织中钙调蛋白基因的表达有显著的抑制作用。     

复方丹参对高脂大鼠模型骨形态计量学参数的影响

背景：复方丹参对抗泼尼松性大鼠的骨丢失具有抑制骨吸收作用,但对高脂血症所致的骨质疏松症效果如何未见报道。目的：通过骨形态计量学观察复方丹参对大鼠胫骨和腰椎骨丢失的防治作用。方法：用脂肪乳剂建立高脂血症骨丢失大鼠模型,30只SD大鼠随机数字表法分为3组,正常对照组、高脂乳剂组、复方丹参组,分别给予生理盐水、高脂乳剂、高脂乳剂和复方丹参,连续16周。结果与结论：与高脂乳剂组相比,复方丹参可使高脂大鼠胆固醇明显降低和高密度脂蛋白胆固醇明显升高,可以有效改善高脂乳剂导致的脂质代谢紊乱。复方丹参组的骨小梁面积百分数、骨小梁数量、成骨细胞贴壁长度百分率均增加（P〈0.05）,而骨小梁分离度、每毫米破骨细胞数、破骨细胞贴壁长度百分率均减少（P〈0.01）,反映骨形成及骨矿化的指标变化不明显;胫骨中段的皮质骨面积百分数增加（P〈0.01）,骨髓腔面积百分数减少（P〈0.01）,骨内外膜的形成和矿化均无明显变化;腰椎松质骨的骨小梁面积百分数、骨小梁数量、骨小梁宽度增加（P〈0.05）、而骨小梁分离度减少（P〈0.01）。提示长期高脂乳剂灌胃会导致大鼠骨量丢失,复方丹参能有效对抗高脂大鼠胫骨上段、中段骨、第5腰椎的骨丢失。     

去势大鼠骨质疏松发病过程中股骨骨小梁的微焦点CT研究

摘要 目的：应用微焦点计算机断层扫描（Micro-CT）研究大鼠去势后股骨松质骨骨微结构的改变及其改变规律。 方法：24只10周龄健康雌性SD大鼠随机分为两组：去势组与对照组,每组12只,去势组大鼠行去势即双侧卵巢切除术,对照组不作任何处理。去势后3月,经Micro-CT扫描股骨后,行三维重建,并进行股骨骨松质骨微结构相关参数定量检测。 结果：与对照组相比,去势组大鼠骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）及骨小梁数量（Tb.N）分别减小72.6%、39.0%和56.4%（P＜0.05）;骨表面积和骨体积比（BS/BV）、骨小梁分离度（Tb.Sp）及骨小梁模式因子（Tb.Pf）分别增加63.7%、354.2%和72.6%（P＜0.05）;而骨小梁平均骨密度（Tb.Mean）分别为(443.92±39.07）HU和(428.67±50.82）HU,无明显变化（P＞0.05）。 结论：去势大鼠股骨骨松质骨质量明显降低,骨小梁数量减少,骨小梁分离度增加,骨小梁平均骨密度无明显改变,提示大鼠去势后骨质疏松发病过程中,股骨松质骨微结构的改变是以骨小梁的破坏为基本单位进行的。     

甲基睾丸素、钙剂对损毁弓状核老年大鼠骨丢失的干预研究

目的：观察甲基睾丸素、钙剂对新生期损毁弓状核老年雄性大鼠的第三腰椎、股骨的体积骨密度，性激素水平及胫骨干骺端微结构变化的影响。方法：选用18只新生期雄性SD大鼠，按体重随机分成损毁弓状核老年大鼠组（MA）、自然衰老大鼠组（NA）、损毁ARC老年大鼠治疗组（MT），同等条件下饲养至820日龄，处死大鼠收集血清行T和E2放免检测，取左侧胫骨干骺端行骨组织切片及组织形态计量学分析等。结果：MA组大鼠L3、股骨的体积骨密度均下降，T和E2水平显著下降，与NA组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。与MA组比较，MT组大鼠L3、股骨的体积骨密度、T和E2水平明显增加，胫骨干骺端％Tb．Ar、Tb．N、Tb．Th明显增加。结论：损毁弓状核的老年雄性大鼠骨丢失加速．提示下丘脑弓状核参与骨质疏松形成的调控，应用甲基睾丸素、钙剂可以阻止损毁弓状核老年大鼠骨丢失的发生。     

羟乙膦酸钠对去睾丸大鼠不同部位骨骼的影响

背景:男性骨质疏松的预防越来越受到人们的重视.目的:建立去睾丸大鼠骨质疏松模型,通过骨形态计量学方法观察羟乙膦酸钠对不同部位骨骼的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2002-10/2006-09在广东医学院动物实验中心及骨生物学研究室完成.材料:3.5月龄SD雄性大鼠40只,体质量(299+22)g.羟乙膦酸钠,成都化学制药厂生产,批号:970101.甲基睾丸酮片,广州侨光制药厂,批号:990701.方法:将大鼠随机分成基础对照组、假手术组、去睾丸组、去睾丸加甲基睾丸酮组和去睾丸加羟乙膦酸钠组,每组8只.基础对照组在实验开始时处死.假手术组切开皮肤,暴露睾丸但不切除.其余大鼠按文献报道方法切除睾丸.假手术组和去睾丸组给予生理盐水,睾丸酮组给予甲基睾丸酮片1.8 mg/(kg·d),羟乙膦酸钠组给予羟乙膦酸钠36 mg/(kg·d),大鼠每只按5mL/kg灌胃给药,连续给药90 d.主要观察指标:测量胫骨上段、第5腰椎松质骨和胫骨中段皮质骨骨组织形态计量学参数.结果:与假手术组比较,去睾丸组大鼠胫骨上段和腰椎松质骨骨小梁面积百分率、骨小梁数量或骨小梁厚度减少(P<0.05和0.01),而骨小梁分离度、标记周长百分数、骨形成率、每毫米破骨细胞数均增加(P<0.05和0.01).与去睾丸组比较,羟乙膦酸钠和睾丸酮组大鼠胫骨上段和腰椎松质骨骨量均增加,而骨形成和骨吸收的参数均降低,羟乙膦酸钠组与睾丸酮组比较差异无显著性意义.各组大鼠胫骨中段皮质骨形态计量学参数均无明显变化.结论:羟乙膦酸钠能预防鼠造成的胫骨上段和腰椎松质骨丢失,但对胫骨中段皮质骨无明显影响.     

伊班膦酸钠对卵巢切除大鼠骨质疏松的干预效应

背景:双膦酸盐在临床绝经后妇女骨质疏松症防治中疗效显著,而伊班膦酸钠作为新型双膦酸盐制剂正逐渐成为研究热点。目的:通过观察卵巢切除大鼠骨量丢失的相关指标,探讨伊班膦酸钠干预卵巢切除大鼠骨质疏松的有效性,并与尼尔雌醇比较。设计:完全随机分组,对照动物实验。单位:复旦大学医学院骨代谢研究室。材料:选用SD雌性大鼠40只,鼠龄10～12个月。伊班膦酸钠由江苏原子医学研究所国家重点实验室提供。尼尔雌醇由上海第十二制药厂生产。方法:实验于1996-08/1998-06在上海医科大学放射医学研究所骨代谢研究室完成。采用随机抽签法分为4组,每组10只。假手术组:仅切除卵巢周围小块脂肪组织,手术3个月后每天灌胃生理盐水1mL/只;卵巢切除组、卵巢切除 伊班膦酸钠组、卵巢切除 尼尔雌醇组:均行双侧卵巢切除,3个月后分别开始灌服生理盐水、伊班膦酸钠0.5mg/(kg·d)水溶物、尼尔雌醇混悬液1mg/(kg·次)。给药组均于给药第1周灌药2次,以后每周1次,均给药90d。主要观察指标:取左侧股骨,测其干重、灰重,采用PE23110型原子吸收分光光度计测定骨钙含量。采用DPX-L型骨密度测定全身骨密度;采用SPA型单光子大鼠骨密度仪测右侧股骨全长1/2交界处的骨密度。采用AG22020KNA型万能材料试验机测定股骨抗弯力。采用动力学法由ENCORⅡ型自动生化分析仪测定血碱性磷酸酶活性,采用EDTA滴定法测定尿钙,采用苦味酸法测定尿肌酐;采用改良血尿羟脯氨酸测定法测定尿羟脯氨酸。计算骨小梁面积。结果:大鼠40只均进入结果分析。①骨干重、灰重和钙含量的改变:卵巢切除组大鼠骨干重、灰重和钙含量明显低于其他3组(t=13.58～52.98,P<0.05)。②股骨骨密度、抗弯力和全身骨密度的改变:卵巢切除组大鼠股骨骨密度和全身骨密度明显低于其他3组(t=3.31～5.61,P<0.05),而抗弯力与其他3组相近(P>0.05)。③血碱性磷酸酶及尿羟脯氨酸与肌酐、钙与肌酐比值的改变:卵巢切除 伊班膦酸钠组和卵巢切除 尼尔雌醇组大鼠尿钙与肌酐比值明显低于卵巢切除组(t=4.04,3.30,P<0.05),其他2项指标在各组间比较,差异无显著性意义(P>0.05)。④椎骨、胫骨骨小梁面积的改变:卵巢切除组大鼠椎骨骨小梁面积明显小于其他3组(t=2.22,2.41,3.45,P<0.05),而胫骨骨小梁面积仅卵巢切除 尼尔雌醇组明显大于卵巢切除组(t=2.45,P<0.05)。结论:SD大鼠卵巢切除3个月后出现明显的骨质疏松,伊班膦酸钠对卵巢切除骨质疏松模型大鼠骨量的丢失有显著抑制作用,且与尼尔雌醇作用相当。     

复方脑复康对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨密度及生物力学的影响

目的探讨复方脑复康对去卵巢(OVX)骨质疏松大鼠股骨骨密度及股骨生物力学的影响。方法40只6、7月龄雌性SD大鼠随机分为4组:假手术(Sham)组、OVX组、OVX+己烯雌酚(E)组和OVX+复方脑复康(F)组,每组10只。实行手术后,于术后第3天开始灌胃用药。90天后处死大鼠,取左侧股骨进行股骨骨密度和生物力学的测量。结果与Sham组比,OVX组股骨骨密度及生物力学指标明显下降,全股骨密度、弹性载荷和弯曲能量差异有显著性(P<0.05),而用己烯雌酚和复方脑复康能阻止这种变化;与E组相比,F组的这种阻止作用更为明显。结论复方脑复康能防治OVX造成的骨质疏松,增加骨密度,防止骨生物力学性能的受损,效果优于单独应用己烯雌酚治疗。     

西红花苷对去卵巢骨质疏松大鼠Wnt/β-Catenin信号通路的影响

目的分析西红花苷对去卵巢骨质疏松大鼠Wnt/β-Catenin信号通路的影响。方法选取10只健康SD大鼠为对照组,并选取45只健康SD大鼠建模。采用双侧卵巢切除法最终成功构建40只去卵巢骨质疏松SD模型大鼠,按照随机数字表法分为低剂量组、中剂量组、高剂量组、模型组,每组各10只,其中低剂量组每日给予20 mg/kg的西红花苷,中剂量组每日给予40 mg/kg的西红花苷,高剂量组每日给予80 mg/kg的西红花苷,模型组每日给予等量0.9%氯化钠溶液,对照组每日给予等量0.9%氯化钠溶液。各组大鼠连续12周均每日腹腔注射不同浓度西红花苷和等量0.9%氯化钠溶液。比较12周后各组大鼠各部位骨密度水平、血清骨保护素(OPG)、骨钙素(BGP)、钙离子(Ca²⁺)、磷离子(P³⁺)、碱性磷酸酶(ALP)水平、生物力学水平、Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白灰度值及mRNA相对表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠的血清OPG、Ca²⁺、P³⁺水平、腰椎、右股骨近端、左股骨近端的骨密度水平、股骨和腰椎...     

普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及血清白细胞介素6的影响

背景交感神经系统影响骨代谢的具体作用和机制不明确.目的探讨普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及对血清白细胞介素6(IL-6)水平的影响,研究B受体阻滞剂对骨质疏松的防治作用及机制.设计随机对照的实验研究.地点、材料和干预本实验在中国中医研究院基础所完成.将50只健康雌性未交配6个月龄SD大鼠随机分为5组①假手术组.②去卵巢(OVX)后雌激素治疗(O+E)组.③OVX后普萘洛尔治疗(O+P)组.④OVX后雌激素+普萘洛尔治疗(O+E+P)组.⑤OVX后安慰剂(OVX)组.OVX后l周开始经灌胃给予普萘洛尔、皮下注射17β-雌二醇,共12周.动物处死时留取第3～5腰椎、血清标本,进行骨密度分析及血清IL-6水平测定.主要观察指标各组大鼠椎骨骨密度及血清瘦素水平.结果O+P,O+P+E O+E组的骨密度较OVX组明显增高(P＜0.05),血清IL-6水平OVX组[(336.6±18.1)ng/L]较假手术组[(208.8±17.2)ng/L]明显增高(t=16.982,P＜0.01),O+E组[(252.7±16.3)ng/L],O+P组[(274.4±20.0)ng/L],O+P+E组[(222.9±16.5)ng/L]均明显低于OVX组[(336.6±18.1)ng/L](t=11.160,7.783,14.971,P＜0.01).结论普萘洛尔能使卵巢切除术后骨质疏松大鼠的骨密度改善,能有效地预防OVX大鼠的骨丢失,同时降低血清IL-6水平.     

雌二醇对铅中毒模型大鼠骨组织及骨代谢指标不能产生影响

背景:关于铅中毒能否引起骨质疏松症及雌激素对其治疗是否有效尚无共识。目的:观察雌二醇对去卵巢大鼠和铅中毒大鼠所致骨质疏松症的治疗效果。方法:雌性大白鼠100只等分成正常对照组、去卵巢模型组、染铅模型组、雌二醇+去卵巢组和雌二醇+染铅模型组。建模后1周雌二醇+去卵巢组和雌二醇+染铅模型组皮下注射雌二醇(100μg/kg),2次/1周,连续12周。结果与结论:在去卵巢模型组和铅中毒组中骨钙、骨磷、血钙及血磷均出现降低(P<0.01),血碱性磷酸酶升高(P<0.01),骨组织形态呈现骨质疏松的病理改变。雌二醇+去卵巢组的骨代谢生化指标血钙、磷、和碱性磷酸酶和骨组织形态均恢复正常,而雌二醇+铅中毒组的骨代谢生化指标和骨组织形态呈现骨质疏松未出现明显改善迹象。铅中毒组和雌二醇+铅中毒组的骨铅和血铅明显高于正常对照组(P<0.01)。说明铅中毒可引起骨质疏松的病理改变,雌二醇对去卵巢大鼠的骨质疏松症有良好治疗效果,而对铅中毒所致的骨质疏松症无明显疗效。