加味五味石膏汤对卵清蛋白致小鼠变应性鼻炎的作用

目的:考察加味五味石膏汤对卵清蛋白(Optical Variable Attenuator,OVA)所致变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)小鼠的治疗作用。方法:40只BALB/c雌性小鼠随机分为5组:空白对照组、OVA模型组、氯雷他定0.01 g/kg组、加味五味石膏汤5.46 g/kg、10.92 g/kg组。每组8只。除空白对照组外,其余均使用OVA制备AR模型。通过观察小鼠搔鼻和打喷嚏的行为,评估小鼠鼻部症状;采用HE及天狼星染色法观察鼻黏膜的炎症情况;采用ELISA法检测血清中免疫球蛋白E(Ig E)、肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)1β、IL-4和干扰素(IFN)γ的水平;采用Western Blot法检测鼻黏膜组织中转录因子T-bet和GATA-3蛋白的表达情况。结果:与空白对照组相比,AR模型小鼠的鼻部过敏症状较为明显,嗜酸性粒细胞的浸润显著,血清中Ig E、TNF-α、IL-1β、IL-4水平显著升高,IFN-γ水平显著性降低,而加味五味石膏汤5.46 g/kg、10.92 g/kg组能不同程度地显著改善小鼠的鼻部过敏症状,抑制血清中Ig E、TNF-α、IL-1β、IL-4的水平,增加血清中IFN-γ水平,增加鼻黏膜组织中T-bet的蛋白表达,降低GATA-3蛋白的表达量。结论:加味五味石膏汤对OVA所致小鼠AR具有治疗作用,与阳性药的治疗效果相当,其机制可能与调节Th1/Th2免疫失衡有关。     

玉屏风散对变应性鼻炎模型大鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的观察玉屏风散对变应性鼻炎(AR)鼻黏膜上皮细胞TLR4/NF-κB信号通路的影响,探讨其作用机制。方法采用卵清白蛋白致敏建立AR大鼠模型。实验大鼠随机分为正常组、模型组和玉屏风散低、中、高剂量组。采用AR行为学指标进行评分,HE染色观察大鼠鼻黏膜形态;ELISA测定大鼠血清白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-10、免疫球蛋白E(IgE)和干扰素-γ(IFN-γ)含量,Western blot、RT-PCR检测大鼠鼻黏膜Toll样受体4(TLR4)和核因子(NF)-κBp65蛋白和基因的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-4、IL-5、IgE含量显著升高,IL-10和IFN-γ含量显著降低(P0.01),鼻黏膜TLR4、NF-κBp65蛋白和基因表达显著升高(P0.01);与模型组比较,玉屏风散中、高剂量组大鼠血清IL-4、IL-5、IgE含量显著降低,IL-10和IFN-γ含量显著升高(P0.05,P0.01),鼻黏膜TLR4、NF-κBp65蛋白和基因表达显著降低(P0.05,P0.01)。结论玉屏风散可能通过调节模型大鼠TLR4/NF-κB信号通路及相关炎性因子,而起到治疗AR的作用。     

基于Notch1-Jagged1通路探讨鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎小鼠Th17/Treg的影响

目的 探讨鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎（AR）小鼠Notch1-Jagged1通路及辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）免疫失衡的影响。方法 将30只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组,每组6只。以卵清蛋白（OVA）为致敏原诱导建立AR模型小鼠,鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组每天分别给与鹿鹅鼻炎方0.5、1、2 g/kg 灌胃。通过行为学观察评估各组小鼠鼻部症状（打喷嚏、流鼻涕）改变;进行鼻灌洗液（NLF）细胞计数;观察各组小鼠鼻黏膜组织形态学变化并计算嗜酸性粒细胞、杯状细胞和肥大细胞数;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组小鼠血清中OVA特异性IgE（OVA-sIgE）、OVA特异性IgG（OVA-sIgG）水平以及NLF中白细胞介素（IL）-10、IL-17水平;Western Blot检测各组小鼠鼻黏膜中Notch1、Jagged1、视黄酸相关孤儿受体γt（RORγt）及叉头状螺旋转录因子3（Foxp3）蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠可观察到鼻黏膜上皮细胞显著增生和化生,纤毛脱落不完整,黏膜下层血管扩张明显,出现以嗜酸性细胞为主的炎性细胞浸润;经鹿鹅鼻炎方干预后,黏膜上皮损伤好转。与空白组比较,模型组小鼠末次滴鼻激发后10 min内喷嚏和抓鼻次数、鼻黏膜上皮厚度、嗜酸性粒细胞数、杯状细胞数、肥大细胞数、血清OVA-sIgE及OVA-sIgG水平、NLF IL-17水平、鼻黏膜RORγt、Notch1、Jagged1蛋白表达增加（P<0.05）,NLF IL-10水平、鼻黏膜Foxp3蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组比较,鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组小鼠末次滴鼻激发后10 min内喷嚏和抓鼻次数、鼻黏膜上皮厚度、嗜酸性粒细胞数、血清OVA-sIgE及OVA-sIgG水平、NLF、IL-17水平、鼻黏膜RORγt、Notch1、Jagged1表达降低,鼻黏膜Foxp3表达水平升高（P<0.05）;鹿鹅鼻炎方中、高剂量组鼻黏膜杯状细胞数、鼻黏膜RORγt蛋白表达降低,NLF IL-10水平升高（P<0.05）;鹿鹅鼻炎方高剂量组鼻黏膜肥大细胞数降低（P<0.05）。结论 鹿鹅鼻炎方干预AR小鼠的机制可能是通过抑制Notch1-Jagged1表达,恢复Th17/Treg免疫平衡实现的。     

玉屏风颗粒对变应性鼻炎大鼠Th17/Treg平衡及相关细胞因子的影响

目的研究玉屏风颗粒对变应性大鼠Th17/Treg免疫平衡的影响。方法采用OVA制备AR大鼠模型,大鼠随机分为正常组、模型组、氯雷他定组、玉屏风颗粒组(12、6 g/kg)。各组干预后评估大鼠AR行为学总分,HE和AB-PAS染色观察鼻黏膜组织病变情况,ELISA检测AR大鼠血清中的IL-17、TGF-β1水平,RT-PCR检测鼻黏膜组织中RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的表达,Western blot检测鼻黏膜组织中RORγt、Foxp3蛋白表达。结果与模型组比较,玉屏风颗粒组(12、6 g/kg)大鼠挠鼻次数、打喷嚏次数等行为学总分降低(P0.05);上皮细胞结构完整、少量炎症细胞浸润、杯状细胞化生明显减少;血清中的IL-17水平降低、TGF-β1水平升高(P0.05);鼻黏膜RORγt mRNA表达降低、Foxp3 mRNA表达升高(P0.05);鼻黏膜组织RORγt/Foxp3蛋白表达比例升高(P0.05)。结论玉屏风颗粒能明显改善变应性大鼠鼻黏膜炎性症状,其作用机制可能与调节Th17/Treg平衡及相关细胞因子有关。     

穴位注射对变应性鼻炎大鼠Th17/Treg相关转录因子及细胞因子表达的影响

目的:观察穴位注射对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜叉头状转录因子p3(Foxp3)和维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、血清白细胞介素-17(IL-17)表达的影响,从Th17/Treg平衡角度探讨穴位注射治疗AR的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位注射组、非经非穴组,每组8只。采用卵清蛋白致敏法复制AR模型。穴位注射组每隔3d于"印堂"和双侧"迎香"注射地塞米松、转移因子和利多卡因混合液各0.1mL,共4次。非经非穴组同样方法于大鼠左右臀部"后海"与"环跳"连线中点和左(或右)前肢腋窝直下5cm处注射。采用叠加量化记分法进行行为学评分,采用免疫组织化学法检测鼻黏膜中Foxp3和RORγt的表达,酶联免疫吸附法检测血清中IL-17的表达。结果:模型组症状评分高于正常组(P0.05),穴位注射组症状评分低于模型组和非经非穴组(P0.05),非经非穴组症状评分略低于模型组,但差异无具统计学意义(P0.05)。模型组较正常组鼻黏膜Foxp3阳性细胞率降低(P0.05),鼻黏膜RORγt阳性细胞率增高、血清IL-17表达升高(P0.05),Foxp3/RORγt比值下降(P0.05)。与模型组和非经非穴组比较,穴位注射组鼻黏膜Foxp3阳性细胞率增高(P0.05),鼻黏膜RORγt阳性细胞率、血清IL-17表达降低(P0.05),Foxp3/RORγt比值升高(P0.05)。大鼠鼻黏膜Foxp3表达与症状评分呈负相关(P0.05),鼻黏膜RORγt表达和血清IL-17表达与症状评分呈正相关(P0.05),鼻黏膜Foxp3/RORγt与症状评分呈负相关(P0.05)。结论:穴位注射可通过上调鼻黏膜Foxp3表达水平,下调鼻黏膜RORγt表达水平,纠正其失衡,并抑制IL-17产生,从而缓解鼻部炎性反应。     

玉屏风颗粒对过敏性鼻炎大鼠免疫因子的影响

通过免疫因子水平变化考察玉屏风颗粒(YPF)对卵蛋白(OVA)致大鼠过敏性鼻炎(AR)模型的治疗作用及机制研究。通过采用OVA 0.3 mg,Al(OH)330 mg及生理盐水l m L混合后腹腔注射,进行初次免疫,第15天鼻孔给予4%OVA 200μg(50μL)滴鼻进行加强免疫制作过敏性鼻炎模型,60只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、受试药玉屏风颗粒3个剂量组2.7,1.35,0.68 g·kg-1和阳性对照药鼻炎康0.4 g·kg-1,灌胃给药14 d后各组大鼠腹主动脉取血分离血清,放免法检测血清组胺(HIS)、免疫球蛋白E(Ig E)、白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,取鼻组织于10%甲醛中固定并检测鼻黏膜组织形态学变化。结果显示,玉屏风颗粒高、中剂量组大鼠血清HIS,Ig E,IL-4,TNF-α水平下降明显,具有统计学意义(P0.05,P0.01),鼻黏膜上皮细胞有轻度变性,少量炎性细胞浸润,坏死不明显。推断玉屏风颗粒改善过敏性鼻炎大鼠鼻组织病理变化,减轻OVA致AR过程中免疫因子的生成和释放,可能是治疗过敏性鼻炎的重要机制。     

基于PI3K信号通路探讨肺“俞募配穴”艾炷灸对哮喘小鼠RORγt/Foxp3表达的影响

目的:观察肺"俞募配穴"艾炷灸对哮喘小鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)中相关炎性因子含量及对肺组织中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响,并探讨其机制。方法:将60只雄性Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、LY剂组、电针组、艾炷灸组,每组12只。采用卵蛋白(OVA)致敏法复制哮喘小鼠模型。LY剂组予尾静脉注射PI3K抑制剂LY294002;电针组、艾炷灸组分别予电针、艾炷灸"肺俞""中府",1次/d,连续2周。ELISA法检测小鼠血清和BALF中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)含量,荧光定量PCR法及免疫组织化学法检测肺组织中PI3K、RORγt、Foxp3的mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清和BALF中IgE及IL-4含量、肺组织中PI3K及RORγt mRNA和蛋白表达明显升高(P0.01),血清和BALF中IFN-γ含量、肺组织中Foxp3 mRNA和蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,LY剂组、电针组及艾炷灸组血清和BALF中IgE及IL-4含量、肺组织中PI3K及RORγt mRNA和蛋白表达明显降低(P0.01,P0.05),血清和BALF中IFN-γ含量、肺组织中Foxp3 mRNA和蛋白表达明显升高(P0.01)。结论:肺"俞募配穴"艾炷灸能通过PI3K信号通路调节RORγt和Foxp3表达,从而减轻气道炎性反应,控制哮喘发作。     

脾虚型AR大鼠鼻黏膜白介素mRNA的活性表达

目的：观察脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素-2,4,6（IL-2,4,6,）mRNA的表达,探讨脾气虚与变应性鼻炎的病理相关性。方法以卵清蛋白法和卵清蛋白加饮食不节法分别建立大鼠变应性鼻炎模型（AR模型组）和脾气虚变应性鼻炎模型（脾虚AR模型组）,分别取鼻黏膜组织,RT-PCR检测IL-2,4,6,mR-NA表达水平,进行组间比较。结果IL-2mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-2mRNA的表达明显降低。IL-4mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.01、P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-4mRNA的表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。IL-6mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.01、P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-6mRNA的表达明显升高,但AR模型组升高更明显。结论变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织IL-2表达明显降低,IL-4,6表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。说明IL-2,IL-4,IL-6活性表达水平可能是脾虚型变应性鼻炎的一个重要因素。     

鼻敏感颗粒对变应性鼻炎小鼠炎症反应及相关蛋白表达的影响

目的观察鼻敏感颗粒对变应性鼻炎(AR)小鼠炎症反应的影响并探讨其机制。方法小鼠随机分成模型组、正常组、阳性对照组、鼻敏感颗粒低剂量组、鼻敏感颗粒中剂量组和鼻敏感颗粒高剂量组,除正常组外,其他各组小鼠制备AR模型,阳性对照组灌胃氯雷他定药液,鼻敏感颗粒低、中、高剂量组分别灌胃相应剂量鼻敏感颗粒药液。观察各组小鼠鼻部症状评分、鼻腔病理形态与病变评分,检测血清炎性因子含量,鼻黏膜GATA3、T-bet蛋白和mRNA相对表达量。结果给药7、14、28 d模型组小鼠症状评分较正常组显著升高,给药7、14、28 d阳性对照组、鼻敏感颗粒低、中、高剂量组小鼠症状评分较模型组显著降低,差异有统计学意义(P 0.05);和正常组相比,模型组小鼠鼻黏膜组织GATA3蛋白表达升高,T-bet蛋白表达降低;和模型组相比,阳性对照组、鼻敏感颗粒低、中、高剂量组小鼠鼻黏膜组织GATA3蛋白表达降低,T-bet蛋白表达升高,差异有统计学意义(P 0.05)。结论鼻敏感颗粒可显著缓解AR小鼠临床症状,降低血清炎性因子含量,其机制可能和改善Th1/Th2细胞失衡有关。     

儿茶素对变应性鼻炎小鼠Th17/Treg表达的影响

目的观察儿茶素(Catechin)对变应性鼻炎小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)表达的影响。方法将48只雌性Balb/c小鼠随机分为6组,即正常对照组,模型组,儿茶素低、中、高剂量组(75,150,300 mg·kg~(-1))和氯雷他定组(2.05 mg·kg~(-1)),每组8只。采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发构建变应性鼻炎小鼠模型。记录小鼠打喷嚏、挠鼻等鼻部症状积分;采用HE染色观察鼻黏膜组织病理改变;采用流式细胞微球芯片捕获技术(Cytometric Bead Array,CBA)检测肺组织匀浆液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)的含量;采用q PCR法检测鼻黏膜中Th17、Treg特异性转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、Forkhead家族转录因子3(Foxp3)m RNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组小鼠挠鼻、打喷嚏次数明显增加(P0.05),MCP-1、RANTES及RORγt m RNA表达量明显升高(P0.05),Foxp3 m RNA表达量明显降低(P0.05)。与模型组比较,儿茶素高剂量组可显著减少挠鼻次数,降低RANTES表达量(P0.05);儿茶素各剂量组均可明显减少打喷嚏次数和降低MCP-1表达量(P0.05);儿茶素中、高剂量组可显著降低鼻黏膜RORγt m RNA表达水平(P0.05),提高Foxp3 m RNA表达水平(P0.05)。结论儿茶素可有效缓解变应性鼻炎小鼠鼻黏膜炎性症状,可能与恢复Th17/Treg平衡有关。     

补肾平喘方对过敏性哮喘小鼠气道炎症改善效果的实验研究

目的:研究补肾平喘方对过敏性哮喘小鼠气道炎症的改善效果。方法:腹腔注射卵清蛋白(OVA)制备过敏性哮喘模型小鼠,随机分为补肾平喘方低、高剂量组(15、30g·kg~(-1)·d~(-1))、地塞米松组(1mg·kg~(-1)·d~(-1))、模型组(等体积生理盐水)。OVA攻击诱导致敏期间给与药物干预,连续8周。末次OVA攻击后,测定各组气道阻力、支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞计数、γ-干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、Ig E水平。行HE、AB-PAS染色分别观察气道炎性细胞浸润及肺组织黏液分泌情况。Western blot检测肺组织中NF-κBp65、IκBα、TLR4、Foxp3蛋白表达。结果:给药干预后,补肾平喘方可显著降低气道阻力及炎症细胞数量,同时可降低IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α、Ig E水平,下调p-NF-κBp65/NF-κBp65、p-IκBα/IκBα与TLR4蛋白表达,上调Foxp3蛋白表达。HE、AB-PAS染色结果显示补肾平喘方可减少炎性细胞浸润,抑制肺组织黏液分泌和杯状细胞增生,且呈剂量依赖性。结论:补肾平喘方可有效改善过敏性哮喘小鼠气道炎症,发挥平喘作用。     

穴位埋线对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜IFN-γ、IL-4的影响

目的:观察穴位埋线治疗变应性鼻炎(AR)大鼠的疗效,并从IFN-γ、IL-4方面探讨其作用机制。方法:将健康SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、西药组、穴位假埋线组、穴位埋线组。除空白组外,其余各组大鼠采用经改进后的卵蛋白注射及鼻黏膜刺激法制作AR模型,分别予不同治法。治疗末日在卵白蛋白激发后,观察30min,采集鼻中隔黏膜,采用免疫组化方法检测各组大鼠鼻黏膜组织IFN-γ、IL-4的表达情况。结果:模型组大鼠变应性鼻炎行为得分明显高于空白对照组(P0.05);西药组和穴位埋线组大鼠治疗后变应性鼻炎行为得分明显低于模型组(P0.05),而与空白对照组相当(P0.05),西药组和穴位埋线组疗效相当(P0.05);穴位假埋线组大鼠症状得分亦明显低于模型组(P0.05),但仍然明显高于空白对照组(P0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠鼻黏膜组织IFN-γ表达明显降低(P0.05),IL-4表达明显升高(P0.05);与模型组比较,西药组和穴位埋线组大鼠IFN-γ表达明显升高(P0.05),IL-4表达明显降低(P0.05);西药组和穴位埋线组大鼠鼻黏膜组织IFN-γ、IL-4表达无统计学差异(P0.05)。结论:穴位埋线能明显缓解AR大鼠变应性鼻炎症状(喷嚏、流涕、抓搔鼻部),其可能的机制是对AR大鼠鼻黏膜中IFN-γ、IL-4含量的调整。     

玉屏风散对肺气虚型变应性鼻炎转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的通过建立肺气虚型变应性鼻炎(AR)动物模型,探讨玉屏风散对肺气虚型变应性鼻炎转录因子T-bet/GATA-3表达影响,为益气固表法治疗AR提供基因分子水平的依据。方法采用烟熏法及卵清蛋白为过敏原对大鼠致敏,建立大鼠肺气虚-变应性鼻炎病证复合模型,并将大鼠分为对照组、AR组、AR+肺气虚组、AR+肺气虚治疗组,予相应药液灌胃。采用ELISA检测大鼠血浆中IFN-γ与IL-4的浓度;QRT-PCR检测血浆中GATA-3、T-bet mRNA的表达情况;HE染色观察大鼠鼻黏膜结构与炎症情况。结果 HE染色结果显示,AR组呈慢性炎症表现,黏膜上皮排列紊乱,部分区域坏死脱落;AR+肺气虚治疗组黏膜上皮细胞修复良好。与对照组比较,AR组IL-4浓度和GATA-3 mRNA表达明显升高(P0.05),T-bet m RNA表达明显降低(P0.05);与AR组比较,AR+肺气虚治疗组IL-4浓度和GATA-3 m RNA表达明显降低(P0.05),T-bet m RNA表达明显升高(P0.05)。结论玉屏风散通过抑制GATA-3,增强T-bet,从而调节Th1/Th2细胞因子平衡,对肺气虚型变应性鼻炎大鼠发挥治疗作用。     

升气壮阳汤超声雾化法对变应性鼻炎小鼠的作用研究

目的探讨升气壮阳汤超声雾化法对变应性鼻炎小鼠的干预作用及可能作用机制。方法选取SPF级BALB/c小鼠40只,随机取10只作为空白组,其余小鼠采用卵清蛋白+氢氧化铝免疫辅助剂构建变应性鼻炎小鼠模型,将成模小鼠随机分为模型组、氯雷他定组、升气壮阳汤组,每组10只。氯雷他定组给予氯雷他定药液灌胃,升气壮阳汤组给予升气壮阳汤超声雾化,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,均连续干预28 d。记录各组小鼠造模前及干预第7,14,28天鼻部症状评分,干预结束后检测各组小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、组胺、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-10(IL-10)、γ-干扰素(IFN-γ)水平,实时荧光定量PCR法检测各组小鼠鼻黏膜组织中GATA3、T-bet、Tim1、Tim3 mRNA表达量。结果干预第7,14,28天,模型组鼻部症状评分均明显高于空白组(P均<0.05),氯雷他定组和升气壮阳汤组均明显低于模型组(P均<0.05)。模型组血清IgE、组胺、IL-4、IL-5、IL-10水平及鼻黏膜组织中GAT3、Tim1、Tim3 mRNA表达量均明显高于空白组(P均<0.05),血清IL-2、IFN-γ水平及鼻黏膜组织中T-bet mRNA表达量均明显低于空白组(P均<0.05);氯雷他定组和升气壮阳汤组血清IgE、组胺、IL-4、IL-5、IL-10水平及鼻黏膜组织中GAT3、Tim1、Tim3 mRNA表达量均明显低于模型组(P均<0.05),血清IL-2、IFN-γ水平及鼻黏膜组织中T-bet mRNA表达量均明显高于模型组(P均<0.05)。结论升气壮阳汤超声雾化可减轻变应性鼻炎小鼠的症状,其作用机制可能与降低炎症因子表达,调控Th1/Th2动态平衡有关。     

基于MAPK信号通路分析中药凉血止嚏汤在过敏性鼻炎大鼠免疫调控中的作用机制

目的:研究中药凉血止嚏汤通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对过敏性鼻炎(AR)大鼠免疫调控中的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分成4组,每组10只,分别为:空白组、模型组、凉血止嚏汤组和鼻炎康片组(阳性对照)。观察各组大鼠鼻黏膜病理形态变化,使用流式细胞仪检测全血辅助细胞Th1、Th2细胞数目,采用酶联免疫吸附剂法(ELISA)测定血清中白细胞介素12(IL-12)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素5(IL-5)的含量,采用蛋白印记法(Western blot)检测鼻黏膜组织中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、蛋白激酶p38的表达。结果:凉血止嚏汤组和鼻炎康组全血中Th1细胞数量、血清中IL-12和IFN-γ水平较模型组显著上调,全血中Th2细胞数量、IL-4和IL-5以及鼻黏膜组织中ERK和p38磷酸化水平较模型组显著下调。结论:中药凉血止嚏汤可以通过影响过敏性鼻炎大鼠MAPK信号通路,调节AR大鼠的免疫功能。     

鼻炎喷剂对变应性鼻炎大鼠细胞因子IL-4、IFN-γ的影响

目的:通过研究鼻炎喷剂对变应性鼻炎(AR)模型大鼠血清细胞因子IL-4、IFN-γ含量的影响,探讨鼻炎喷剂治疗变应性鼻炎的作用机制。方法:采用卵蛋白(OVA)喷雾的方法致敏造成大鼠AR模型,经鼻腔给予鼻炎喷剂治疗后,分别用放免法及酶免法测定大鼠血清IL-4、IFN-γ的含量。结果:OVA致敏模型组动物血清IL-4含量升高,IL-4/IFN-γ也明显升高;鼻炎喷剂中剂量组和高剂量组血清IL-4含量降低,且各剂量组IL-4/IFN-γ均显著降低。结论:鼻炎喷剂治疗AR的作用途径之一是通过调节细胞因子平衡,从而减轻鼻黏膜变应性炎症。     

山柰酚对卵清蛋白诱导豚鼠过敏性鼻炎的保护作用

目的研究山柰酚对卵清蛋白诱导的豚鼠过敏性鼻炎的保护作用。方法将50只雄性豚鼠随机分为5组,即正常组、卵清蛋白模型组、山柰酚(5 mg/kg)组、山柰酚(20 mg/kg)组、氯雷他定(2 mg/kg)组。除正常组和卵清蛋白模型组外,其余各组在造模成功后连续7 d给药。通过记录豚鼠抓鼻和打喷嚏次数,评价过敏性鼻炎的症状;ELISA试剂盒检测豚鼠血清中组胺、免疫球蛋白Ig E、肿瘤坏死因子TNF-α和白细胞介素IL-4的水平;HE染色观察豚鼠鼻黏膜病理形态的改变;Western blot检测鼻黏膜组织中TNF-α和IL-4的表达量。结果山柰酚能明显改善豚鼠过敏性鼻炎的症状(P0.05),降低血清中组胺、Ig E、TNF-α和IL-4的水平(P0.05),降低鼻黏膜组织中TNF-α和IL-4的表达水平(P0.05)。在光镜下观察,山柰酚会明显减少嗜酸性粒细胞的浸润。结论山柰酚对卵清蛋白诱导的豚鼠过敏性鼻炎具有良好的保护作用。     

朝医麻黄定喘汤灌肠法治疗过敏性鼻炎小鼠的临床研究

目的:探讨麻黄定喘汤灌肠法治疗过敏性鼻炎小鼠的有效性。方法:将40只雌性BABL/c小鼠,随机分为5组,即正常对照组、鼻炎模型组、麻黄定喘汤灌肠组、麻黄定喘汤灌胃组、地塞米松阳性对照组,每组8只。用卵清蛋白及氢氧化铝干粉混合液激发制备AR小鼠模型,末次激发后各组采用对应的治疗方法使用不同的药物进行干预治疗,于末次药物干预24h后取小鼠鼻组织与腹主动脉的血清,采用ELISA法检测评估小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13以及IFN-γ的数值表达。结果:与正常对照组相比鼻炎模型组血清中IL-4、IL-5、IL-13的数值表达显著增高,IFN–γ含量显著降低(P0.05)。与鼻炎模型组比较,麻黄定喘汤灌肠、麻黄定喘汤灌胃组和地塞米松阳性对照组小鼠血清中IL-4、IL-5、IL-13的数值表达显著降低,IFN–γ含量显著增高(P0.05)。结论:朝医麻黄定喘汤灌肠治疗法可抑制过敏性鼻炎小鼠鼻腔炎性反应的发生。     

补肾温阳法诱导Foxp3+调节性T细胞在哮喘免疫治疗中的作用

目的探讨补肾温阳中药通过诱导转录因子Foxp3活化、调控调节性T细胞,而发挥对变应性哮喘的免疫治疗作用。方法80只BALB/c(白变种实验室老鼠)小鼠随机分成4组:对照组、哮喘组、中药干预组及中药+抗体干预组,用屋尘螨(HDM)变应原经腹腔注射致敏、滴鼻激发复制变应性哮喘样肺部炎症模型。中药干预组、中药+抗体干预组每只小鼠给予补肾温阳中药(用淫羊藿、巴戟天免煎颗粒配制500 ul灌胃qod,对照组给予500 ul NS。观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果;检测各组BALF上清细胞因子IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度及血清Ig E水平;分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Treg细胞;用实时荧光定量PCR检测Foxp3-m RNA。结果正常对照组、中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度分别高于哮喘模型组(P0.01)和中药+抗体干预组(P0.05);中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度低于正常对照组(P0.05);哮喘模型组BALF上清细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)浓度高于中药+抗体干预组(P0.05)。血清Ig E水平正常对照组、中药干预组均分别低于哮喘模型组(均为P0.01)及中药+抗体干预组(均为P0.05);中药干预组血清Ig E水平低于正常对照组(P0.05)。哮喘模型组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平较正常对照组、中药干预组均明显减低,差异有统计学意义(分别为P0.01,P0.05)。与哮喘模型组、中药+抗体干预组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平显著增高,差异有统计学意义(均为P0.05)。与正常对照组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平较低,差异有统计学意义(P0.01)。与哮喘模型组比较,中药+抗体干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平降低,差异有统计学意义(均为P0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3-m RNA、细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)均参与了支气管哮喘的发病过程,补肾温阳中药可通过上调CD4+CD25+调节性T细胞数量、诱导Foxp3-m RNA的表达与活化、降低血清Ig E水平及增加IL-10、IFN-γ、TGF-β1含量等机制来达到减轻哮喘炎症的作用。     

鼻沁滴鼻液对豚鼠过敏性鼻炎的影响

目的探索鼻沁滴鼻液对豚鼠过敏性鼻炎的影响。方法采用卵白蛋白(OVA)致敏法造模,将60只豚鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(麻苯滴鼻液)及鼻沁滴鼻液高、低剂量组。喷鼻给药4周后,行为学评分评价过敏性鼻炎症状严重度,HE染色观察鼻黏膜的组织形态学,ELISA检测血清免疫球蛋白(IgE)、白介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果与模型组比较,阳性组及鼻沁滴鼻液高、低剂量组过敏性鼻炎症状显著减轻(P0.05),鼻黏膜炎性细胞浸润显著减少,血清IgE、IL-4水平显著减低(P0.05),IFN-γ水平显著升高(P0.05)。结论鼻沁滴鼻液对过敏性鼻炎有较好的治疗作用,其机制可能与抑制IL-4、IgE水平和促进IFN-γ水平有关。