秦皮乙素经p70S6K/4E-BP1信号通路抑制人结肠癌细胞增殖和迁移的作用机制研究

摘要：目的:探讨秦皮乙素经核糖体蛋白S6激酶/4E结合蛋白-1（p70S6K/4E-BP1）信号通路抑制人结肠癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法:设HCT116细胞组、氟尿嘧啶组(20μg·ml-1)、秦皮乙素低(40μg·ml-1)、高(80μg·ml-1)剂量组,置于CO2培养箱（37℃、5%CO2、2%O2、93%N2）。以上各组每孔设6个平行样,培养72 h。培养结束后,MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,Transwell Chamber测定迁移水平,RT-PCR法及WEST-BLOT法测定细胞p70S6K、4E-BP1mRNA与蛋白表达水平。结果:氟尿嘧啶组、秦皮乙素低、高剂量组存活率、穿膜数、P70S6K、4E-BP1 mRNA和蛋白水平显著低于HCT116细胞组,细胞凋亡率显著高于HCT116细胞组（P<0.05）。秦皮乙素低、高剂量组存活率、穿膜数、P70S6K、4EBP1 mRNA和蛋白水平显著高于氟尿嘧啶组,细胞凋亡率显著低于氟尿嘧啶组（P<0.05）。秦皮乙素低、高剂量组间各指标差异有统计学意义（P<0.05）。结论:秦皮乙素能抑制结肠癌HCT116细胞增殖、迁移,诱导HCT116细胞凋亡,其机制与秦皮乙素抑制p70S6K、4E-BP1mRNA和蛋白表达有关。     

萝卜硫素对结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成及miR-34a/Notch1信号通路的影响

摘要：目的:探讨萝卜硫素对结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成及miR-34a/Notch1信号通路的影响。方法:设结肠癌HT-29细胞组、氟尿嘧啶组(20.0μg·ml-1)、萝卜硫素低(100.0μg·ml-1)、高(1 000.0μg·ml-1)剂量组,置于37℃、5%CO2的环境中培养72 h,培养结束后,细胞计数试剂盒-8测定法测定细胞增殖能力,Giemsa溶液染色细胞计算集落总数,BD Matrigel基质培养测定结肠癌HT-29细胞相对总血管长度、相对总血管数目,流式细胞仪测定凋亡率,RT-PCR法及Western blot测定miR-34a、Notch1 mRNA及Notch1蛋白水平。结果:与结肠癌HT-29细胞组比较,氟尿嘧啶组、萝卜硫素低、高剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）;随着萝卜硫素剂量的增加,萝卜硫素各剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）;与氟尿嘧啶组比较,萝卜硫素各剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著升高（P<0.05）,凋亡率显著降低（P<0.05）。结论:萝卜硫素能抑制结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成,并能促进HT-29细胞凋亡,其机制与萝卜硫素抑制miR-34a、Notch1基因和蛋白的表达有关。     

葛根素经p53/GLIPR1途径调节膀胱癌UMUC-3细胞增殖及侵袭的机制研究

摘要：目的:探讨葛根素经p53/GLIPR1途径调节膀胱癌UMUC-3细胞增殖及侵袭的机制。方法:设膀胱癌UMUC-3细胞组、氟尿嘧啶组(80. 0μg·ml-1)、葛根素低、高剂量组(剂量分别为60. 0μg·ml-1、120. 0μg·ml-1),置于CO2培养箱（37℃、5%CO2、2%O2、93%N2）培养72 h。细胞培养结束后,测定各组UMUC-3细胞增殖水平、侵袭能力、凋亡率水平以及p53、GLIPR1基因蛋白水平。结果:氟尿嘧啶组、葛根素低、高剂量组吸光度（A）值、存活率水平、克隆形成数目、穿膜数、p53 m RNA、蛋白水平低于UMUC-3细胞组（P<0. 05）,凋亡率、GLIPR1 m RNA、蛋白水平高于UMUC-3细胞组（P<0. 05）;葛根素低剂量组A值、存活率水平、克隆形成数目、穿膜数、p53 m RNA、蛋白水平高于氟尿嘧啶组（P<0. 05）,凋亡率、GLIPR1 m RNA、蛋白水平低于氟尿嘧啶组（P<0. 05）;葛根素高剂量组A值、存活率水平、克隆形成数目、穿膜数、p53 m RNA、蛋白水平低于氟尿嘧啶组（P<0. 05）,凋亡率、GLIPR1 m RNA、蛋白水平高于氟尿嘧啶组（P<0. 05）。结论:葛根素通过抑制p53 m RNA、蛋白的表达,促进GLIPR1 m RNA、蛋白的表达进而抑制膀胱癌细胞的增殖及侵袭,促进膀胱癌细胞的凋亡。     

二甲双胍通过阻断Src/STAT3信号通路诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的实验研究

摘要：目的:探讨二甲双胍通过阻断Src酪氨酸激酶（Src）/信号转导及转录激蛋白3（STAT3）信号通路诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的机制。方法:设MGC803细胞组、氟尿嘧啶组(100. 0μg·ml-1)和二甲双胍低(80. 0μg·ml-1)、高(160. 0μg·ml-1)剂量组,各组细胞置于CO2培养箱（37℃、5%CO2、2%O2、93%N2）。以上各组每孔设6个平行样,培养72 h。培养结束后,细胞计数试剂盒-8（CCK-8）测定细胞活力,结晶紫染色测定单克隆形成数目,Transwell室测定侵袭能力,FACScan流式细胞仪测定细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR（RT-PCR）及蛋白质印迹法（West Blot）测定p-SRC、p-STAT3 m RNA和蛋白水平。结果:氟尿嘧啶组和二甲双胍组的吸光度（A）值、存活率水平、克隆形成数目、穿膜数、p-SRC、p-STAT3 m RNA及蛋白表达水平显著低于MGC803细胞组（P<0. 05）,凋亡率显著高于MGC803细胞组（P<0. 05）。二甲双胍低剂量组的A值、存活率水平、克隆形成数目、穿膜数、P-SRC、P-STAT3 m RNA、蛋白表达水平显著高于氟尿嘧啶组（P<0. 05）,凋亡率显著低于氟尿嘧啶组（P<0. 05）。二甲双胍高剂量组与氟尿嘧啶组比较差异无统计学意义（P>0. 05）。结论:二甲双胍能抑制胃癌MGC-803细胞增殖,促进胃癌MGC-803细胞凋亡;其机制与二甲双胍抑制P-SRC、P-STAT3 mRNA和蛋白的表达有关。     

白花丹提取物对高糖诱导的肾小球系膜细胞纤维化及miR-155/SOSC1轴的影响

摘要：目的:探讨白花丹提取物对高糖诱导的肾小球系膜细胞纤维化及mir-155/SOSC1轴的影响。方法:设大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1对照组（不含D-葡萄糖）、高糖组(25 mmol·L-1D-葡萄糖)、白花丹提取物低、中、高剂量组(25 mmol·L-1D-葡萄糖并分别加入白花丹提取物,使白花丹提取物终浓度为10.0,100.0,1 000.0μg·ml-1),以上各组置于CO2培养箱（37℃、5%CO2、2%O2、93%N2）,各组每孔设6个平行样,培养72 h。各组细胞培养结束后,MTT法测定各组细胞活力,膜联蛋白VFITC/PI染色测定各组细胞凋亡水平,流式细胞仪分析各组细胞周期水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法及免疫印迹（Western-Blot）法测定mir-155、SOSC1基因及SOSC1蛋白水平。结果:高糖组吸光度（A）值、存活率水平、G1期、mir-155、SOSC1 mRNA、SOSC1蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.05）,细胞凋亡率显著低于对照组（P<0.05）;白花丹提取物各剂量组A值、存活率水平、G1期、mir-155、SOSC1 mRNA、SOSC1蛋白表达水平显著低于高糖组（P<0.05）,细胞凋亡率显著高于高糖组（P<0.05）;随着白花丹提取物剂量逐渐增加,白花丹提取物各剂量组A值、存活率、G1期、mir-155、SOSC1 mRNA、SOSC1蛋白表达水平逐渐降低,细胞凋亡率逐渐升高（P<0.05）。结论:白花丹提取物能抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞纤维化,其机制与白花丹提取物通过抑制mir-155/SOSC1/NLRP3炎症途径的激活有关。     

芹菜素对人肺癌H1975细胞增殖、凋亡、转移及IGF-1R/Akt信号通路的影响

摘要：目的:探讨芹菜素对人肺癌H1975细胞增殖、凋亡和转移及胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）/蛋白激酶B（Akt）信号通路的影响。方法:设H1975细胞组、氟尿嘧啶组(100μg·ml-1)、芹菜素低(100μg·ml-1)、高(200μg·ml-1)剂量组,以上各组每孔设6个平行样,培养72h。MTT法、结晶紫染色测定细胞增殖、克隆形成数目,Transwell细胞培养室评估细胞迁移,流式细胞仪测定凋亡水平,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法及蛋白免疫印迹（WEST-BLOT）法检测IGF-1R、Akt基因和蛋白表达水平。结果:与H1975细胞组比较,氟尿嘧啶组、芹菜素低、高剂量组的光密度（OD）值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高（P<0.05）。与氟尿嘧啶组比较,芹菜素低剂量组的光密度（OD）值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白升高,凋亡率降低（P<0.05）;芹菜素高剂量组OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高（P<0.05）。与芹菜素低剂量组比较,芹菜素高剂量组的OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高（P<0.05）。结论:芹菜素能明显抑制人肺癌H1975细胞增殖、凋亡和转移;其机制与芹菜素抑制IGF-1R、Akt mRNA和蛋白的表达,进而抑制了IGF-1R/Akt信号通路的激活有关。     

吡柔比星与表柔比星膀胱灌注预防浅表膀胱癌术后复发的疗效比较及护理体会

目的探讨吡柔比星与表柔比星膀胱灌注预防浅表膀胱癌术后复发的疗效比较及护理体会.方法 选择68例浅表膀胱移行细胞癌患者,随机分为吡柔比星组和表柔比星组.分别予以吡柔比星或表柔比星定期膀胱灌注化疗1年.观察并比较两组患者的复发率、复发时间及并发症的发生率,并回顾了治疗护理方法.结果 随访12～66月,平均34.2±8.4个月,吡柔比星组的复发率明显低于表柔比星组,复发时间明显长于表柔比星组(均P＜0.05).吡柔比星组发生并发症5例,表柔比星组发生并发症3例,两组并发症的的发生率比较无明显的统计学差异(P＞0.05).两组患者治疗期间复查血常规、肝肾功能均无明显异常.结论 吡柔比星预防浅表性膀胱移行细胞癌术后复发的疗效优于表柔比星,不良反应较少,而配合相应的心理护理、术后规律的灌注化疗,可取得较满意疗效.     

HPLC波长切换法同时测定心舒宁片中有效成分的含量

摘要：目的:建立HPLC波长切换法时测定心舒宁片中槲皮素、葛根素、山柰素、异鼠李素、毛冬青皂苷B2、毛冬青皂苷A1、毛冬青皂苷B1和冬青素A的含量。方法:采用Inertsil ODS-C18色谱柱（250 mm×4. 6 mm,5μm）,流动相为甲醇-0. 4%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1. 0 ml·min-1,进样量为10μl,柱温为25℃,检测波长为360 nm（槲皮素、山柰素、异鼠李素）、250 nm（葛根素）、210 nm（毛冬青皂苷B2、毛冬青皂苷A1、毛冬青皂苷B1、冬青素A）。结果:槲皮素、葛根素、山柰素、异鼠李素、毛冬青皂苷B2、毛冬青皂苷A1、毛冬青皂苷B1和冬青素A的线性范围分别为10. 406～208. 120μg·ml-1,15. 426～308. 520μg·ml-1,2. 358～47. 160μg·ml-1,5. 352～107. 040μg·ml-1,2. 688～53. 760μg·ml-1,6. 620～132. 400μg·ml-1,5. 784～115. 680μg·ml-1,21. 604～432. 080μg·ml-1（r≥0. 999 4）;平均加样回收率为98. 4%～101. 3%（RSD<2. 0%,n=6）;精密度、重复性、稳定性（24 h）试验的RSD<2. 0%（n=6）。结论:所建立的方法稳定、可靠,可用于心舒宁片的质量控制。     

基于CX3CL1/CX3CR1轴探讨槲皮素对大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

摘要：目的:基于人趋化因子Fractalkine （CX3CL1）/人趋化因子Fractalkine受体（CX3CR1）轴探讨槲皮素对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的抑制作用。方法:设VSMC细胞组、西拉普利组(100.0μg·ml-1)、槲皮素低、高剂量组(槲皮素终浓度分别为100.0,200.0μg·ml-1);各组每孔设6个平行样,培养72 h。培养结束后,CCK-8溶液试剂测定细胞增殖水平,结晶紫染色测定单克隆形成数目,流式细胞仪分析细胞凋亡水平,RT-PCR法及Western-Blot法测定细胞CX3CL1、CX3CR1基因和蛋白水平。结果:与VSMC细胞组比较,西拉普利组、槲皮素低、高剂量组吸光度（A）值、存活率、单克隆形成数目、CX3CL1、CX3CR 1mRNA和蛋白表达水平降低,而凋亡率升高（P<0.05）。与西拉普利组比较,槲皮素低剂量组A值、存活率、单克隆形成数目、CX3CL1、CX3CR1 mRNA和蛋白表达水平升高,而凋亡率降低（P<0.05）;槲皮素高剂量组A值、存活率、单克隆形成数目、CX3CL1、CX3CR1 mRNA和蛋白表达水平降低,而凋亡率升高（P<0.05）;且槲皮素高剂量组A值、存活率水平、单克隆形成数目、CX3CL1、CX3CR1 mRNA和蛋白表达水平低于槲皮素低剂量组,而凋亡率高于槲皮素低剂量组（P<0.05）。结论:在100.0～200.0μg·ml-1的范围内,槲皮素能抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖,促进大鼠血管平滑肌细胞凋亡;其机制可能与槲皮素能抑制大鼠血管平滑肌细胞CX3CL1、CX3CR1 mRNA和蛋白表达水平进而抑制CX3CL1/CX3CR1轴的激活有关。     

桂龙咳喘宁胶囊HPLC指纹图谱研究及7个活性成分的测定

摘要：目的:建立桂龙咳喘宁胶囊的指纹图谱,并进行多成分定量分析,为评价其质量提供依据。方法:采用Kromasil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为235 nm（芍药内酯苷、甘草苷、芍药苷）、275 nm（肉桂酸、甘草素、桂皮醛、甘草酸铵）,柱温为30℃。通过相似度对12批次桂龙咳喘宁胶囊指纹图谱进行质量评价,并对指认的7个指标成分进行定量测定研究。结果:12批桂龙咳喘宁胶囊指纹图谱标定了共有峰21个,通过与混合对照品比较指认了其中7个指标成分,利用相似度软件对12批样品指纹图谱进行分析,各批样品相似度均在0.99以上。芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、肉桂酸、甘草素、桂皮醛和甘草酸铵线性范围分别为2.020～40.400μg·ml-1（r=0.999 4）、62.024～1240.480μg·ml-1（r=0.999 8）、7.244～144.880μg·ml-1（r=0.998 6）、1.206～24.120μg·ml-1（r=0.999 2）、1.050～21.000μg·ml-1（r=0.998 6）、0.100～2.000μg·ml-1（r=0.999 0）、15.064～301.280μg·ml-1（r=0.999 8）。结论:所建立的方法灵敏度高,专属性强,可用于桂龙咳喘宁胶囊的质量控制。     

右美托咪啶通过调控HIF-1α、Cyclin D1表达对食管癌细胞增殖的影响

摘要：目的:探讨右美托咪啶通过调控缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1）表达对食管癌细胞增殖的影响。方法:设食管癌ECA109细胞组、氟尿嘧啶组(200.0μg·ml-1)、右美托咪啶低、高剂量组(100.0,200.0μg·ml-1);以上各组每孔设6个平行样,培养72 h。各组细胞培养结束后,细胞计数试剂盒-8（CCK-8）测定细胞增殖能力、Giemsa溶液染色计算菌落总数、Transwell小室测定法测定细胞迁移能力、Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒测定细胞凋亡水平、RT-PCR法及West Blot法测定细胞HIF-1α、Cyclin D1基因和蛋白水平。结果:与食管癌ECA109细胞组比较,氟尿嘧啶组、右美托咪啶低、高剂量组光密度（OD）值、存活率、克隆形成数目、相对迁移率、HIF-1α、Cyclin D1 mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）,凋亡率升高（P<0.05）;且各指标变化与右美托咪啶剂量呈正相关（P <0.05）。结论:右美托咪啶能明显抑制食管癌ECA109细胞增殖、迁移,促进其凋亡,其机制可能与右美托咪啶明显降低Cyclin D1、HIF-1α基因、蛋白的表达水平有关。     

Sirt1激动药白藜芦醇对低氧诱导视网膜病变小鼠Notch1通路的影响

摘要：目的:探讨沉默信息调节因子（Sirt1）激动药白藜芦醇对低氧诱导视网膜病变小鼠Notch1通路的影响。方法:120只BALB/cJ小鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、阳性对照组(羟苯磺酸钙,20 mg·kg-1)、白藜芦醇低(20 mg·kg-1)、中(40 mg·kg-1)、高(80 mg·kg-1)剂量组,每组20只。除正常对照组外其余各组小鼠置于低压舱,其大气压为406 mmHg,氧分压为85 mmHg,连续7 d期间阳性对照组和白藜芦醇各剂量组灌胃给予相应药物,模型组给予相同体积的生理盐水;正常对照组无任何处理措施。实验结束后,RETI-port视觉生理系统记录振荡电位（OPs）潜伏期、幅值,FACSCalibur检测小鼠视网膜细胞凋亡水平,RT-PCR法检测小鼠视网膜Sirt1、信号转导及转录激活蛋白3（STAT3）、Notch1 mRNA表达水平,ELISA法检测小鼠视网膜Sirt1、STAT3、Notch1蛋白表达水平及血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果:与模型组比较,阳性对照组及白藜芦醇组各剂量组小鼠网膜OPs幅值、Sirt1 mRNA及蛋白表达水平显著升高,网膜细胞凋亡数目、OPs潜伏期、STAT3、Notch1 mRNA及蛋白表达水平,VEGF、IL-6、TNF-α水平显著降低（P<0.05）,且白蔾芦醇组各组呈剂量相关性（P<0.05）。白藜芦醇低、中剂量组与阳性对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。Sirt1 mRNA及蛋白与STAT3 mRNA及蛋白、Notch1 mRNA及蛋白、VEGF、IL-6、TNF-α的负相关关系明显（P<0.05）。模型组视网膜各层细胞排列紊乱,结构不清晰,可见炎症细胞浸润,外核层细胞脱落神经节细胞紊乱,血管内皮细胞增生;阳性对照组及白藜芦醇高剂量组小鼠视网膜结构有明显改善。结论:白藜芦醇能减轻低氧诱导视网膜病理损伤,其机制与白藜芦醇通过Sirt1依赖性方式抑制STAT3、Notch1诱导的细胞因子VEGF、IL-6、TNF-α的过度表达有关。     

扁蒴藤素通过下调integrin β1抑制肺癌A549细胞侵袭、迁移

摘要：目的:研究扁蒴藤素下调整合素β1（integrinβ1）对肺癌A549细胞侵袭、迁移的影响。方法:体外培养肺癌A549细胞,完全培养液稀释后扁蒴藤素终浓度分别为0,5,10,20,40,80μg·ml-1继续培养48 h,检测450 nm下各孔细胞光密度（OD）值,并计算半抑制浓度(IC50)。实验分为空白对照组、扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂（HMIβ1-1）组、扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组。空白对照组仅添加培养液,扁蒴藤素组添加终浓度为25.39μg·ml-1扁蒴藤素的培养液,integrinβ1抑制剂组添加终浓度为10μg·ml-1HMIβ1-1的培养液,扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组在扁蒴藤素组基础上添加10μg·ml-1?HMIβ1-1。Transwell检测细胞侵袭和迁移情况;划痕实验检测细胞迁移情况;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测细胞中integrinβ1 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹检测细胞中integrinβ1、纤维粘连蛋白（FN）、基质金属蛋白酶2（MMP2）蛋白表达情况。结果:与0和5μg·ml-1扁蒴藤素相比,10,20,40,80μg·ml-1扁蒴藤素OD值依次降低（P<0.05）,IC50为25.39μg·ml-1。与空白对照组相比,扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂组侵袭、迁移细胞数量、划痕愈合率、细胞中integrinβ1 mRNA和蛋白水平、FN、MMP2蛋白水平显著降低（P<0.05）;与扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂组相比,扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组侵袭、迁移细胞数量,划痕愈合率、细胞中integrinβ1 mRNA和蛋白水平、FN蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:扁蒴藤素可下调integrinβ1从而抑制肺癌A549细胞侵袭、迁移。     

UPLC法同时测定五味沙棘散中7个成分的含量

摘要：目的:建立超高效液相色谱（UPLC）法同时测定五味沙棘散中7个成分含量的方法。方法:色谱柱为AQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm,1.8μm）,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 ml·min-1,检测波长为250 nm、370 nm,柱温为30℃,进样量为1μl。采用统计分析软件对含量测定结果进行聚类分析与主成分分析。结果:栀子苷、甘草苷、槲皮素、异鼠李素、甘草酸、木香烃内酯和去氢木香内酯检测质量浓度线性范围分别为49.53～445.80μg·ml-1、5.86～52.74μg·ml-1、8.35～75.12μg·ml-1、11.80～106.20μg·ml-1、16.74～150.70μg·ml-1、41.73～375.60μg·ml-1、60.23～542.20μg·ml-1（r≥0.999 2）;平均加样回收率分别为98.6%,98.9%,98.8%,99.0%,99.0%,98.9%,99.3%,RSD分别为0.3%,0.2%,0.1%,0.4%,0.3%,0.3%,0.2%（n=9）。同一厂家产品质量具有较高的稳定性,不同厂家样品存在一定差异。结论:本法简便、准确、重复性好,可用于五味沙棘散的质量控制,提示厂家在生产过程中要加强对沙棘膏和木香质量的控制,为五味沙棘散质量提高提供参考。     

金匮肾气丸对肾小球肾炎大鼠免疫调节作用及机制研究

摘要：目的:研究金匮肾气丸对肾小球肾炎大鼠的免疫调节作用及其可能机制。方法:采用尾静脉注射多柔比星建立肾小球肾炎大鼠模型,并将造模成功的30只大鼠随机分为3组:模型组、金匮肾气丸高(2.16 g·kg-1)、低(1.08 g·kg-1)剂量组,每组10只同时以10只未造模大鼠组成正常对照组。造模后,金匮肾气丸各剂量组分别灌胃给与相应剂量药物,正常对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水。末次给药后,检测24 h尿蛋白、血清尿素氮、肌酐、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、C反应蛋白（CRP）等炎症因子及CD4+、CD8+等T淋巴细胞的表达水平用免疫组化法检测脾脏组织中CD4+、CD8+细胞蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白、血清尿素氮、肌酐、TNF-α、IL-6、CRP水平和CD8+细胞数量、CD8+/CD4+比值、CD8+细胞蛋白表达显著升高,CD4+细胞数量和蛋白表达显著降低（P<0.05）;与模型组比较金匮肾气丸各剂量组大鼠24 h尿蛋白、血清尿素氮、肌酐、TNF-α、IL-6、CRP水平和CD8+细胞数量、CD8+/CD4+比值、CD8+细胞蛋白表达显著降低,CD4+细胞数量和CD4+细胞蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论:金匮肾气丸对肾小球肾炎具有治疗作用,其机制可能与调节炎症细胞因子水平、调节脾脏CD4+、CD8+细胞表达有关。     

苦豆碱对宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡的影响

摘要：目的:考察苦豆碱（ALO）对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞,采用CCK-8法检测ALO对Hela细胞增殖的影响,实验设置对照组（不作给药处理）以及ALO浓度分别为80,90,100,110,120,130μg·ml-1的实验组,给药时间设置为24 h和48 h。采用流式细胞术检测ALO对Hela细胞凋亡的影响,根据CCK-8结果,设置实验分组为:对照组、ALO低(90μg·ml-1)、中(110μg·ml-1)、高(130μg·ml-1)浓度组; Western blot法测定ALO对Hela细胞中凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）和周期蛋白G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1）相对表达量的影响,实验分组同流式细胞术。结果:与对照组相比,ALO各浓度组细胞在培养24和48 h后,增殖抑制率显著升高（P<0.05或P<0.01）,各实验组细胞凋亡均明显增多（P<0.05或P<0.01）,各实验组ALO作用于Hela细胞48 h后,均能够显著增加凋亡蛋白caspase-3的表达（P<0.01）,下调细胞周期蛋白表达量（P<0.01）,各指标变化呈剂量和时间依赖性。结论:ALO能够明显抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,同时抑制周期蛋白表达,进一步抑制细胞增殖。并促进其凋亡蛋白的表达,进而促进凋亡。     

顶空气相色谱法同时测定硫酸阿扎那韦原料药中8种有机溶剂残留量

摘要：目的:建立同时测定硫酸阿扎那韦原料药中8种有机溶剂残留量的方法。方法:采用顶空气相色谱法,色谱柱为DM-624毛细管柱,程序升温:起始温度40℃,维持22 min,以100℃·min-1的速率升温至120℃,维持10 min;进样口温度为200℃,氢火焰离子化（FID）检测器;检测器温度为250℃;载气为高纯氮气,分流比为10∶1;柱流速为3.0 ml·min-1,顶空平衡温度为70℃,平衡时间为30 min,顶空进样体积为1 ml。结果:异丙醇、正庚烷、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二氯甲烷、甲醇、异丙醚和丙酮检测质量浓度线性范围分别为1.00～700.00μg·ml-1（r=0.997 9）、0.167～700.00μg·ml-1（r=0.996 7）、0.20～700.00μg·ml-1（r=0.998 3）、0.72～100.80μg·ml-1（r=0.999 0）、1.20～84.00μg·ml-1（r=0.998 8）、0.378～420.00μg·ml-1（r=0.998 2）、0.167～14.00μg·ml-1（r=0.998 2）、0.20～700.00μg·ml-1（r=0.998 7）;平均回收率分别为98.26%（RSD=2.67%）,100.1%（RSD=2.08%）,102.6%（RSD=1.88%）,100.1%（RSD=0.55%）,99.67%（RSD=1.08%）,98.58%（RSD=1.17%）,104.1%（RSD=1.93%）,100.7%（RSD=0.53%）（n=9）。结论:该方法操作简单、准确、专属性强、耐用性好,可用于硫酸阿扎那韦原料药中8种有机溶剂残留的同时测定。     

基于miR-9/NF-κB信号通路探讨丙泊酚对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响

摘要：目的:基于微小RNA-9（miR-9）/核因子-κB（NF-κB）信号通路探讨丙泊酚对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:设鼻咽癌细胞（CNE-2Z）采用细胞组、顺铂组(7.5μg·ml-1)、丙泊酚低、高剂量组(25,50μg·ml-1),以上各组每孔设6个平行样,培养72 h,培养结束后,采用四唑盐（MTT）法及Giemsa溶液染色测定细胞增殖及克隆形成数目,Transwell腔室系统测定侵袭迁移水平,流式细胞仪测定凋亡水平,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法及蛋白免疫印迹（WB）法测定miR-9、NF-κB mRNA和蛋白水平。结果:与CNE-2Z细胞组比较,顺铂组、丙泊酚低、高剂量组吸光度（A）值、存活率、克隆形成数目、穿膜数、miR-9、NF-κB mRNA和蛋白水平显著降低,凋亡率显著升高（P<0.05）;与顺铂组比较,丙泊酚低、高剂量组A值、存活率、克隆形成数目、穿膜数、miR-9,NF-κB mRNA和蛋白水平显著升高,凋亡率显著降低（P<0.05）;丙泊酚剂量组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论:丙泊酚可抑制鼻咽癌细胞增殖,促进其凋亡;其机制与丙泊酚抑制miR-9、NF-κB mRNA和蛋白表达进而抑制miR-9/NF-κB信号通路激活有关。     

HPLC法测定苯巴比妥钠注射液中苯巴比妥含量及5种有关物质

摘要：目的:建立苯巴比妥钠注射液中苯巴比妥含量及5种有关物质的HPLC法。方法:采用Phenomenex Luna C18（250mm×4.6 mm,5μm）色谱柱以醋酸钠溶液（取醋酸钠6.6 g、3 ml冰醋酸至1 000 ml水中,调pH至4.5±0.1）-甲醇（60:40）为流动相流速为1.0 ml·min-1,检测波长为220 nm,柱温为30℃,进样量20μl。结果:苯巴比妥的线性范围为9.97～997.00μg·ml-1（r=1.000 0）,杂质A、杂质B、杂质C、苯丁酰脲、巴比妥酸的线性范围为1～1 000μg·ml-1（r值范围0.999 9～1.000 0）;苯巴比妥的检出限为2μg·ml-1;杂质A检出限为0.2μg·ml-1;杂质B、苯丁酰脲、巴比妥酸检出限为0.5μg·ml-1;杂质C检出限为1μg·ml-1。苯巴比妥、杂质A、杂质B、杂质C、苯丁酰脲、巴比妥酸的回收率分别为100.56%,96.21%,99.39%,99.46%,101.54%,102.83%,RSD分别为0.36%,0.86%,0.37%,0.32%,0.53%,0.64%（n=9）。结论:该方法重复性好,专属性强,可以更加有效控制苯巴比妥钠注射液的质量。     

半枝莲醇提取物调控circ＿0092283/miR-198对结直肠癌细胞克隆形成和凋亡的影响

摘要：目的:探讨半枝莲醇提取物（EESB）对结直肠癌细胞HCT-116克隆形成和凋亡的影响及可能机制。方法:HCT-116细胞分为不同剂量(0,200,400,800μg·ml-1)EESB组、circ0092283小干扰RNA（si-circ0092283）组、小干扰RNA阴性对照（si-NC）组、400μg·ml-1?EESB+circ0092283过表达载体（pcDNA-circ0092283）组、400μg·ml-1EESB+miR-198抑制剂（anti-miR-198）组,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹（Western Blot）法检测细胞中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）蛋白表达,实时定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测circ0092283和miR-198表达。收集30例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织,培养HCT-116和肠上皮细胞HIEC-6,RT-qPCR法检测组织和细胞中circ0092283和miR-198表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证circ0092283和miR-198调控关系。结果:不同剂量(200,400,800μg·ml-1)的EESB作用于HCT-116细胞或干扰circ0092283表达后,HCT-116细胞克隆形成数和细胞中Bcl-2蛋白表达降低（P<0.05）,细胞凋亡率和细胞内Bax蛋白表达升高（P<0.05）。结直肠癌组织和HCT-116细胞中circ0092283呈高表达,而miR-198呈低表达。circ0092283靶向负调控miR-198。EESB抑制circ0092283表达,而促进miR-198表达;过表达circ0092283或抑制miR-198表达可降低EESB对HCT-116细胞克隆形成、细胞凋亡和Bal、Bax蛋白表达的影响。结论:EESB可能通过调控circ0092283/miR-198轴降低结直肠癌HCT-116细胞的克隆形成能力,并促进HCT-116细胞凋亡。