微小RNA-30c在肾癌组织中的表达及其临床意义

目的   探讨微小RNA-30c（miR-30c）在肾癌组织中的表达及其临床病理特征和预后关系。方法   收集本院2012年1月至2015年12月经手术切除的95例肾癌组织和82例癌旁组织标本,采用实时定量PCR（QPCR）检测以上组织中miR-30c水平,分析miR-30c表达与肾癌临床病理参数（性别、年龄、TNM分期、淋巴结转移、远处转移和T分期）及预后的关系,采用Cox回归模型进行多因素分析。结果  QPCR检测发现95例肾癌组织中miR-30c的表达水平为0.561±0.378,低于82例癌旁组织的1.220±0.820（P＜0.05）。肾癌组织中miR-30表达与性别、远处转移和年龄均无关（P＞0.05）,而与TNM分期、淋巴结转移和T分期均有关（P＜0.05）,其中Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移及T3～T4期的miR-30c相对表达量分别为0.422±0.219、0.442±0.299和0.408±0.194,均低于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移及T1～T2期的0.671±0.439、0.619±0.400和0.654±0.431（P＜0.05）;Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移及T3～T4期的miR-30c高表达率分别为21.43％（9／42）、16.13％（5／31）和19.44％（7／36）,均低于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移及T1～T2期的41.51％（22／53）、16.13％（26／64）和40.68％（24／59）,差异均有统计学意义（P＜0.05）。miR-30c低表达组的中位总生存期为37.0个月,短于高表达组（＞60.0个月）,差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox回归模型分析发现,TNM分期、淋巴结转移、远处转移、T分期及miR-30c表达均是影响预后的独立因素。结论   肾癌组织中miR-30c低表达,miR-30c参与肾癌的发生发展且与预后有关,其中miR-30c低表达者的预后较差,是影响预后的独立因素。     

晚期胃癌患者血浆微小RNA-7及其临床意义分析

目的 探讨晚期胃癌血浆微小RNA-7（miR-7）水平及其临床意义。方法 收集本院2013年6月至2016年6月的75例晚期胃癌患者及同期73例健康体检者的血浆标本,采用荧光实时定量PCR（QPCR）技术检测其miR-7水平,分析胃癌患者血浆miR-7水平与临床病理特征的关系,根据随访资料分析胃癌患者血浆miR-7水平与预后的关系。结果 QPCR检测发现,75例胃癌患者的miR-7水平为（0.351±0.258）,低于73例健康体检者的（1.088±0.464）,差异有统计学意义（P＜0.05）。胃癌患者血浆miR-7水平与性别、年龄、ECOG评分、肿瘤部位及病理类型均无关,与分化程度有关,其中低分化者的miR-7水平为0.254±0.155,低于高、中分化者的0.514±0.313,差异有统计学意义（P＜0.05）。全组的中位无疾病进展期（PFS）和生存期（OS）分别为6.6个月和10.5个月。miR-7高表达组（＞0.351）的中位PFS为7.1个月,优于低表达组（≤0.351）的5.8个月（P＜0.05）,两组中位OS的差异无统计学意义（10.3个月 vs. 10.6个月,P＞0.05）。结论 晚期胃癌血浆miR-7水平降低,且低水平的分化程度较低,miR-7高水平的中位PFS较好,该指标在胃癌的诊断及预后评估上有较好价值。     

miRNA-29s在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中微小RNA-29s（miR-29s）的表达水平及临床意义。方法 收集2012年1月至2015年12月收治的94例手术切除的NSCLC组织及71例癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR（QPCR）法检测上述组织中miR-29a、miR-29b和mi-29c的表达,比较NSCLC组织及癌旁正常组织中miR-29s的表达水平,Pearson相关分析NSCLC组织中miR-29a、miR-29b和miR-29c表达的相关性,分析NSCLC组织中miR-29s的表达与NSCLC临床病理特征（性别、年龄、TNM分期、组织学类型、分化程度、淋巴结转移及CEA水平）的关系,根据随访资料分析不同miR-29s表达水平与预后的关系。结果 QPCR结果显示,NSCLC组织中miR-29a、miR-29b和miR-29c的表达水平依次为0.413±0.025、0.609±0.039和0.161±0.013,均低于癌旁正常组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;NSCLC组织中miR-29a与miR-29b呈正相关（r=0.637,P=0.000）,miR-29a与miR-29c呈正相关（r=0.775,P=0.000）,miR-29b与miR-29c呈正相关（r=0.586,P=0.000）;NSCLC组织中miR-29s表达均与TNM分期有关,miR-29a与肿瘤大小及分化程度有关,miR-29b与分化程度有关,miR-29c与肿瘤大小有关。miR-29a（≥0.354）、miR-29b（≥0.586）和miR-29c（≥0.118）高水平者的中位总生存时间依次为16.4、16.4和16.7个月,均高于低水平者的11.5、9.8和10.5个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 miR-29s在NSCLC组织中表达降低,且均与TNM分期及预后有关,可能与NSCLC发生、发展有关,对NSCLC诊断及病情评估有一定价值。     

卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的水平分析及临床意义

目的 探讨卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的表达水平,分析3者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法 收集本院确诊的65例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本（卵巢癌组）,采用实时定量RT-PCR（qRT-PCR）法检测miR-29c、miR-133b及miR-1水平,收集对应卵巢癌患者的临床病理参数（年龄、临床分期、分化程度、组织类型及淋巴结转移）,同时选取32例正常卵巢上皮组织（正常组）和39例良性卵巢上皮囊肿组织（良性组）作对照,以正常组的各指标均数为界值,将卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平分为高水平组（＞正常组）和低水平组（≤正常组）,比较miR-29c、miR-133b及miR-1不同表达水平与卵巢癌临床病理参数的关系,同时分析卵巢癌组织中3者水平的关系。结果 卵巢癌组miR-29c水平高于正常组和良性组,而miR-133b和miR-1水平均低于正常组和良性组,差异有统计学意义（P＜0.05）;卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平均与分化程度有关,miR-29c水平与临床分期及淋巴结转移有关,而miR-133b亦与淋巴结转移有关,差异均有统计学意义（P＜0.05）;卵巢癌miR-29c水平与miR-133b和miR-1均呈负相关（r=-0.541、-0.361）,miR-133b与miR-1呈正相关（r=0.447）,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 卵巢癌患者组织中miR-29c呈高表达,miR-133b及miR-1呈低表达,与临床病理学特征有关,且在卵巢癌诊断中有一定的价值,可用于辅助卵巢癌的诊断和病情评估。     

宫颈癌组织中miR-183与GSPT1的表达及临床意义

目的 探讨宫颈癌组织中微小RNA (miR)-183与细胞周期G1到S期的转换1 (GSPT1)的表达及与预后的关系。方法 收集2014年1月至2016年12月接受根治性手术的91例宫颈癌患者。采用实时荧光定量PCR检测91例宫颈癌和癌旁组织中miR-183和GSPT1的表达。分析宫颈癌组织中miR-183与GSPT1表达的相关性,并采用生物信息学方法预测两者之间的结合位点。进一步分析miR-183和GSPT1表达与宫颈癌临床病理特征及预后的关系。结果 宫颈癌组织中miR-183的表达（0.521±0.065）低于癌旁组织（1.241±0.286）,差异有统计学意义（P=0.000）。宫颈癌组织中GSPT1的表达（2.034±0.374）高于癌旁组织（0.708±0.157）,差异有统计学意义（P=0.000）。宫颈癌组织中miR-183与GSPT1的表达呈负相关（r=-0.621,P=0.001）。生物信息学预测结果显示,GSPT1 mRNA第981至987碱基存在与miR-183相互作用的位点。宫颈癌组织中miR-183和GSPT1表达与FIGO分期、分化程度、肌层浸润和淋巴结转移有关（P＜0.05）,与年龄和病理类型无关（P>0.05）。全组1、3、5年无病生存率分别为86.8%、73.6%和61.5%。miR-183高表达组1、3、5年无病生存率分别为91.1%、86.6%和80.0%,优于miR-183低表达组的82.6%、60.9%和43.5%,差异有统计学意义（P=0.012）。GSPT1高表达组1、3、5年无病生存率分别为86.0%、60.4%和39.5%,低于GSPT1低表达组的87.5%、85.4%和81.2%,差异有统计学意义（P=0.007）。结论 宫颈癌组织中miR 183表达降低,GSPT1表达升高,两者共同促进宫颈癌进展,有望成为宫颈癌预后评估的标志物。     

胶质瘤miR-29c 表达异常减少及其对肿瘤细胞增殖的影响*

目的：探讨microRNA- 29c（miR-29c）在胶质瘤中的表达及其对细胞分裂周期蛋白42（CDC 42）的调控作用和对细胞增殖的影响。方法：用锁定寡核苷酸原位杂交法和免疫组织化学法检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29c和CDC 42的表达水平,实时荧光定量RT-PCR、Westernblot及MTS 法分别检测U87MG细胞中miR-29c 瞬时表达、CDC 42mRNA和蛋白表达及其对胶质瘤细胞增殖的影响。结果：各级别胶质瘤的miR-29c 表达水平均明显低于非肿瘤对照脑组织,且随肿瘤
级别升高而显著降低,各组间的差异均有统计学意义（P<0.001）。 而CDC 42表达水平则呈相反趋势,其表达水平随胶质瘤良恶性级别增加相应升高,除Ⅰ～Ⅱ级组与非肿瘤对照组之间外,其余各组间的差异均有统计学意义（P<0.001）。 与对照组相比,miR-29c 转染组的CDC 42mRNA（P<0.001）和蛋白表达水平（P<0.01）均明显降低。miR-29c 转染组细胞的增殖能力明显低于U87MG空白对照组和Scr转染组（P<0.05）。 结论：miR-29c 是胶质瘤的抑瘤miRNA,其表达水平可作为评价胶质瘤良恶性级别的重要参考指标。miR-29c 在胶质瘤中表达减少解除了其对靶基因CDC 42转录后水平的抑制作用,并导致肿瘤细胞无限增殖。表明miR-29c 表达异常减少可能是引起胶质瘤发生、发展的关键事件。     

宫颈癌组织的TNFAIP3和TNFAIP8水平及临床意义

目的探讨宫颈癌组织的肿瘤坏死因子α诱导蛋白(TNFAIP)3和TNFAIP8水平及临床意义。方法收集2015年9月至2018年9月的宫颈癌组织117例、正常宫颈组织49例和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织92例,采用实时定量PCR(QPCR)检测上述组织的TNFAIP3和TNFAIP8水平,比较不同宫颈组织的两者水平差异,分析两者与宫颈癌临床病理特征的关系,通过Kaplan-Meier Plotter数据库在线分析TNFAIP3和TNFAIP8与宫颈癌预后的关系。结果49例正常宫颈组织、92例CIN组织和117例宫颈癌组织的TNFAIP3水平依次为1.016±0.062、2.070±0.120和4.521±0.209,TNFAIP8水平依次为1.051±0.092、2.618±0.156和5.240±0.199,宫颈癌组织的TNFAIP3、TNFAIP8水平均高于正常宫颈组织和CIN组织,而CIN组织的两指标水平亦高于正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示宫颈癌组织中,TNFAIP3和TNFAIP8水平呈正相关(r=0.617,P<0.001)。TNFAIP3水平与年龄、病理类型、淋巴结转移和月经状态无关(P>0.05),而与肿瘤直径、分化程度、FIGO分期和浸润深度有关(P<0.05)。TNFAIP8水平与年龄、肿瘤直径、病理类型和月经状态无关(P>0.05),而与分化程度、FIGO分期、浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)。宫颈癌组织TNFAIP3水平与总生存期(OS)有关,而与无复发生存期(RFS)无关,其中低水平者的中位OS为45.73个月,长于高水平者的21.97个月(HR=1.83,95%CI:1.15~2.92),TNFAIP8水平与RFS和OS均无关(P>0.05)。结论宫颈癌组织的TNFAIP3、TNFAIP8水平升高,两者水平有助于判断宫颈癌的分化程度、FIGO分期和浸润深度,TNFAIP3水平还与预后有关,两者可能共同促进了宫颈癌的病情进展。     

miRNA-29c在鼻咽癌患者中的表达水平及其临床意义

目的：探讨 miRNA -29c 在鼻咽癌患者血清中的表达及其临床意义。方法：选取50例鼻咽癌患者及50例健康对照组,检测血清中 miRNA -29c 的表达量并分析其与临床病理资料及复发转移的相关性。结果：与健康人对比,鼻咽癌患者血清中 miRNA -29c 的表达量更低（P <0.05）。淋巴结转移的病例表达量明显降低,IV 期病例较 II - III 期病例表达量降低,EB 病毒阳性患者较阴性表达量降低（P <0.05）。与高分化鳞癌相比,低分化和中分化鳞癌组织中 miRNA -29c 的表达水平均明显下降（P <0.05）。2年内复发转移患者的miRNA -29c 表达量更低（P <0.05）。结论：miRNA -29c 低表达可能与鼻咽癌的发生、发展、侵袭转移相关。     

非小细胞肺癌组织中miR-449a／b／c的表达及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中微小RNA（miRNA）-449a/b/c的表达水平、临床意义及与预后的关系。方法 收集2013年1月至2015年12月收治的82例手术切除的NSCLC组织及69例癌旁组织标本,采用荧光实时定量PCR（QPCR）法检测以上组织中miR-449a/b/c的表达并比较3者在NSCLC组织及癌旁组织中的分布差异,Pearson相关分析NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c表达的相关性,分析NSCLC组织中miR-449a/b/c表达与临床病理特征（性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型和淋巴结转移）的关系,同时根据随访数据比较不同miR-449a/b/c表达患者的预后情况。结果 QPCR结果显示,NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的平均表达量依次为0.210±0.028、0.359±0.031和0.133±0.020,均低于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的表达均呈正相关,相关系数rmiR-449a/b、rmiR-449a/c和rmiR-449b/c分别为0.246、0.390和0.331（P＜0.05）;NSCLC组织中miR-449a/b/c表达均与TNM分期有关,miR-449a和miR-449c表达与肿瘤大小有关。全组中位总生存期（OS）为12.4个月,其中miR-449a低表达组和高表达组的中位OS分别为11.2个月和13.5个月（P＞0.05）,miR-449b低表达组和高表达组的中位OS分别为9.6个月和14.2个月（P＜0.05）,miR-449c低表达组和高表达组的中位OS分别为11.7个月和13.7个月（P＞0.05）。结论 miR-449a/b/c在NSCLC组织中表达降低,且均与TNM分期有关,miR-449b表达与预后有关,可能与NSCLC发生、发展有关,对NSCLC诊断及病情评估有一定价值。     

miR-30c在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-30c在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法:37例骨肉瘤组织标本均来自于2007年1月至2015年1月间在新疆医科大学第六附属医院住院接受治疗的骨肉瘤患者,实时定量PCR和原位杂交分析骨肉瘤组织中miR-30c表达情况。单因素和多因素分析miR-30c表达与骨肉瘤临床病理参数和预后之间的相关性。结果:实时定量PCR检测和原位杂交检测分析结果一致表明:骨肉瘤组织中miR-30c的表达水平显著低于正常骨组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;miR-30c低表达组肿瘤与更晚分期和中低分化程度、肿瘤复发有相关性（P＜0.05）;多元回归分析表明,miR-30c低表达与骨肉瘤患者生存期更短有关(P＜0.01);miR-30c低水平表达是骨肉瘤患者预后的一个独立危险因数。结论:miR-30c表达下调能够促进肿瘤进展,是预测骨肉瘤患者预后的可靠指标,miR-30c也具有成为骨肉瘤靶向治疗靶点的潜力。     

微小RNA-126和微小RNA-7在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨微小RNA-126（miR-126）和微小RNA-7（miR-7）在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达情况及其与ESCC临床病理特征、预后之间的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测116例ESCC组织和癌旁正常组织中miR-126和miR-7的表达差异,并对miR-126和miR-7表达情况与ESCC患者临床病理特征、预后的相关性进行统计学分析。结果miR-126不同程度低表达病例数为73（62．9％）,正常表达病例数为35（30．2％）,高表达病例数为8（6．9％）;miR-7不同程度低表达病例数为52（44．8％）,正常表达病例数为35（30．2％）,高表达病例数为29（25．0％）。miR-126和miR-7表达降低组无瘤生存期均较非降低组短（r=4．268,P〈0．05;x2=4．993,P〈0．05）;miR-126低表达与ESCC肿瘤位置、家族史和饮酒相关（Xz=14．564,P〈0．05,x2=5．691,P〈0．05;X2=4．971,P〈0．05）,与性别、年龄、分化程度、浸润程度、淋巴转移、吸烟不相关（均P〉0．05）;miR-7低表达与ESCC的临床病理特征均不相关（均P〉O．05）。结论miR-126和miR-7的低表达可能与ESCC患者预后相关,具有一定的临床检测意义。     

宫颈癌组织中miRNA-34c 的表达水平分析及其靶基因PLK4 的鉴定

目的：分析miRNA-34c 在宫颈癌组织中的表达水平并鉴定其新的靶基因。方法：利用荧光实时定量PCR（qRT-PCR）检测甘肃省妇幼保健医院34例宫颈癌和癌旁正常组织中miRNA-34c 表达水平。利用miRNA 靶基因预测数据库预测miRNA-34c 新的靶基因Polo 样激酶4（PLK 4）。 将含有PLK 4 的3‘UTR 片段荧光素酶载体分别与miRNA-34c 模拟物或阴性对照共转染HEK 293T 细胞,并检测其荧光素酶活性。在人宫颈癌细胞SiHa 细胞中分别转染miRNA-34c 模拟物或阴性对照,利用qRT-PCR法和Westernblot法分别检测靶基因的mRNA 和蛋白质的表达水平。结果：与癌旁正常组织相比,miRNA-34c 在宫颈癌组织中表达下调。在HEK 293T 细胞中,miRNA-34c 模拟物显著抑制荧光素酶的活性（P < 0.01）。 miRNA-34c 模拟物显著下调SiHa 细胞中PLK 4 的mRNA 和蛋白质的表达（P < 0.01）。 结论：miRNA-34c 在人宫颈癌组织中表达下调,且能与PLK 4 的3’UTR 结合并下调其mRNA 和蛋白质的表达。     

微小RNA-96对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1表达的影响

目的 探讨微小RNA-96（miR-96）对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1（SPIN1）表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96 模拟物（mimics）及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞（miR-96转染组和miR-96对照组）,以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时定量PCR（QPCR）检测各组转染48 h后细胞中miR-96的表达情况,MTT及流式细胞仪分别检测各组转染48 h后的增殖及凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测转染48 h后各组细胞的SPIN1 mRNA和蛋白水平,通过双荧光素酶靶标实验验证miR-96与SPIN1之间的关系。结果 转染48 h后未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的miR-96水平依次为1.068±0.053、1.175±0.084和2.434±0.088,miR-96转染组的miR-96水平高于其余两组,差异有统计学意义（P<0.05）;未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的增殖率依次为（99.633±5.059）%、（97.727±3.079）%和（62.023±5.425）%,凋亡率依次为（7.515±0.924）%、（8.123±1.247）%和（26.845±4.126）%,与其余两组相比,miR-96转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义（P<0.05）;未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的SPIN1 mRNA水平依次为0.965±0.046、0.917±0.044和0.549±0.039,SPIN1 蛋白水平依次为0.667±0.042、0.715±0.045和0.384±0.038,miR-96转染组的SPIN1 mRNA和蛋白水平均低于其余两组,差异有统计学意义（P<0.05）。miR-96抑制含有野生型SPIN1-3’UTR质粒细胞的荧光素酶活性,却对含有突变型质粒细胞的荧光素酶活性无影响。结论 过表达miR-96可抑制宫颈癌细胞的增殖凋亡并降低SPIN1表达水平,miR-96对SPIN1有靶向调控作用,可作为治疗宫颈癌的有效靶点。     

宫颈癌中c—erbB—2蛋白表达及临床意义

为了探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在宫颈癌中的表达及其临床意义，用免疫组化ＡＢＣ法观察了１０例正常宫颈组织，１６例慢性宫颈炎组织，１２３例宫颈鳞癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达。结果显示：宫颈鳞癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性表达（３４．１５％）显著高于正常（０／１０）及炎症组织（１８．７５％）（Ｐ＜０．０１），且ｃ－ｅｒｂＢ－２表达随临床期别升高而增加，其中Ⅲ期（５５．３６％）显著高于０期（０／３）、Ⅰ期（７．６９％）、Ⅱ期（１９．６１％）（Ｐ＜０．０１）；ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达与宫颈癌分化程度及存活率呈负相关。结果提示，ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白过度表达可能作为判断宫颈癌恶性程度及预后指标之一。