回心草对脐静脉内皮细胞的保护作用及对分泌一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的:研究回心草水提取液及其含药血清对人脐静脉内皮活细胞数、内皮细胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NO合酶)的影响,探讨回心草抗动脉硬化的药理作用机制。方法:采用H₂O₂建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤模型。采用MTT法测定回心草提液对H₂O₂损伤的内皮细胞的吸光度(OD);采用经典Griess Reagent检测各剂量组细胞上清液中NO浓度,采用一氧化氮荧光检测探针DAF-FMDA(3-amino,4-aminomethyl-2′,7′-difluorescein,diacetate)检测细胞内NOS的活性。结果:H₂O₂12.5mmol·L^-1为最合适的细胞刺激浓度;回心草药液与H2O2损伤的血管内皮细胞共同孵育24h后,2.50mg·mL^-1、3.33mg·mL^-1浓度组与模型组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01);回心草水提液作用于内皮细胞,进行NO,NOS含量的测定,其中回心草2.50mg·mL^-1剂量组有显著作用(P<0.05)。结论:12.5mmol·L^-1的H₂O₂作用24h,可成功建立内皮细胞氧化应激损伤模型;回心草水提液直接作用于H₂O₂损伤的内皮细胞,2.50,3.33mg·mL^-1两个浓度组可以减轻内皮细胞的损伤;回心草2.50mg·mL^-1可增加NOS活性,促进NO的分泌。     

回心草心脏保护作用的活性部位筛选

目的探讨回心草各极性部位抗心律失常、抗心肌缺血及耐缺氧作用,初步筛选其活性部位。方法采用导联生理仪观察回心草不同极性部位对氯仿诱发小鼠室颤的作用;并采用常压耐缺氧、特异性心肌缺血、缺氧及小鼠断头模型,观察回心草各部位对小鼠存活时间的影响。结果回心草醋酸乙酯相低剂量和正丁醇相低剂量均可显著降低氯仿诱发小鼠室颤的发生率、延长心律失常出现时间;还可明显延长小鼠常压耐缺氧存活时间,并可使特异性心肌缺血、缺氧小鼠存活时间显著增加,其中醋酸乙酯相各剂量还可显著延长断头小鼠张口动作持续时间。结论回心草可提高小鼠耐缺氧能力,具有明显的抗心律失常、抗心肌缺血作用,其95%乙醇提取物的醋酸乙酯及正丁醇部分可能是有效活性部位。     

滇产回心草及回心康对异丙肾上腺素诱导大鼠急性心肌缺血的保护作用

滇产回心草（Rhodobryum roseum(Hedw)Limpr.)民间广泛用于治疗“心脏病”，为我省常用的民族药。采用异丙肾上腺素（ISO) 脉注射诱导大鼠急性心肌缺血的模型，以S－T段降低及∑ΔST为指标反映缺血程度，观察了回心草和回心康对大鼠急性心肌缺血的作用，结果表明回心草及回心康均使S－T段下移减轻（P＜0．01，P＜0．001），ΣΔST也显著减少，提示两药对急性心肌缺血均具有一定程度的保护作用，且有剂量依赖性。     

从氧化应激角度探讨回心康片心肌保护作用的机制

目的:从氧化应激角度探讨回心康片对心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的机制。方法:建立体外大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤模型。采用血清药理学方法,研究回心康片对细胞活力的影响;利用全自动生化分析仪测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽酶(GSH)、丙二醛(MDA)、的含量。结果:回心康片可明显提高缺氧复氧损伤心肌细胞的活力,与缺氧损伤组A值(0.488±0.023)比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);能降低LDH、CK、CKMB活性,降低MDA浓度,提高SOD及GSH活性。结论:抑制氧化应激是回心康片保护心肌细胞的作用机制之一。     

回心草化学成分研究

目的:研究回心草的化学成分。方法:回心草95%乙醇提取物依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇进行充分萃取,用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱反复对醋酸乙酯部位进行成分分离、纯化,通过波谱方法鉴定结构。结果:从回心草中共分离鉴定了8个化合物,分别为胡椒碱(1),咖啡酸甲酯(2),尿嘧啶苷(3),熊果酸(4),3β-羟基-5α,8α-氧桥-6,22-二烯(5),3β-羟基-5α,8α-氧桥-6,9(11),22-三烯(6),β-谷甾醇(7),胡萝卜苷(8)。结论:化合物1-6和8为首次从该植物分离得到。     

民族药滇产回心草及回心康对麻醉大鼠血流动力学的影响

滇产回心草为真藓科植物大叶藓（Rhodobryum roseum (Hedw)Limp.)的干燥或新鲜全草,回心康是以滇产回心草为主要原料研制的复方制剂。观察了回心草和回心康对麻醉大鼠血流动力学的影响。结果表明,回心草及回心康均能降低麻醉大鼠的血压,使收缩压,舒张压都显著下降,以1g/kg回心草（P＜0．01）和1g/kg及2g/kg回心康（P＜0．05,P＜0．01）为显著,未见心率加快,其降压作用具有降压效应平稳和持续时间较长的特点。     

民族药滇产回心草对大鼠实验性心肌缺血的保护作用

目的：研究滇产回心草的抗急性心肌缺血作用。方法：采用结扎大鼠冠脉造成心肌缺血的模型,动态观测Ⅱ导联心电图S－T段的变化,以S－T段上抬为指标反映缺血程度,同时检测LDH,CPK,SOD和MDA。结果：回心草显著减轻S－T段上抬,以2g/kg组为显著（P＜0．05）;其1及2g/kg均使心肌梗死范围缩小（P＜0．05,P＜0．01）;LDH和CPK也有所降低,以CPK降低为显著（P＜0．05）;回心草还使SOD显著提高（P＜0．05）;MDA明显降低（P＜0．01）。结论：回心草对大鼠心肌缺血具有一定程度的保护作用,此效应与其抗脂质过氧化作用有关。     

回心草治疗冠心病33例疗效观察

我部自1992年6月至1995年9月以来,选用草药回心草治疗冠心病33例,收到较好的临床效果,现总结报告如下。     

回心草防治兔动脉粥样硬化的实验研究

通过观察回心草防治兔食饵性动脉粥样硬化的作用,表明回心草具有明显降低高脂血症兔血清TC和LDL水平及TC/HDL比值,使粥样斑块面积明显减少,回心草治疗组斑块面积为57.70±19.89％,对照组为75.44±14.00％(P<0.05)。实验结果提示回心草具有明显降血脂及抗动脉粥样硬化作用。     

回心草对犬急性心肌缺血血液流变学的影响

观察了回心草注射液对犬急性心肌缺血区局部静脉血血液流变学的影响，结果：阻断冠脉血流后３０ｍｉｎ，高（２３０ｓ＾－１）、中（２３ｓ＾－１）、低（５．７５ｓ＾－１）切变率下全血粘度及血浆粘度升高，红细胞电泳时间明显自长，随着缺血时间的延长，以上指标持续上升，红细胞压积及纤维蛋白原浓度变化不明显。静脉滴注回心草注射液后，高、中、低切变率下全血粘度及血浆粘度、红细胞电脉时间均明显下降，红细胞压积、血浆纤维     

回心草提取工艺研究

目的:采用正交设计法,对回心草的提取工艺进行优化。方法:采用L9(34)正交试验,乙醇体积分数(A)、乙醇用量(B)、提取时间(C)作为3个因素,每个因素选择3个水平,以熊果酸转移率来确定最佳工艺条件。结果:B,A影响最大,C最小。结论:最佳提取条件是A1B3C2,即60%乙醇16倍量提取2次,每次2 h。     

HPLC测定回心草中对羟基桂皮酸的含量

目的:采用HPLC测定5个不同批号回心草药材中对羟基桂皮酸的含量.方法:采用DIKMA Platisil ODS C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相乙腈-1％乙酸水(20:80),流速1.0 mL· min-1,检测波长310 nm,柱温30℃.结果:对羟基桂皮酸在0.08～0.4 μg线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为95.7％ ～ 104.0％;5个不同批号回心草中对羟基桂皮酸的平均含量为0.111 5 mg·g-1.结论:该方法简便快速,分离效果好,灵敏度高,重复性好,可用于回心草药材的质量控制.     

宁夏枸杞总黄酮对H2O2损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的: 研究宁夏枸杞总黄酮对过氧化氢(H₂O₂)损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的保护作用及可能的机制. 方法: 采用H₂O₂诱导HUVEC氧化应激损伤模型.实验分为正常组、1 mmol·L^-1H₂O₂损伤模型组、枸杞总黄酮保护(100,200,400 mg·L^-1) 预孵育24 h组,以及阳性对照(维生素C 20 mg·L^-1)组,预孵育24 h.采用噻唑蓝(MTT)法检测枸杞总黄酮对1 mmol·L^-1 H₂O₂损伤 4 h细胞活性,测定细胞上清液中丙二醛(MDA),乳酸脱氢酶(LDH),超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO). 结果: 与正常组比较,H₂O₂损伤模型组MDA含量、LDH活性均增高,NO生成量、SOD活性明显下降,其差异均具有显著性(P<0.01).枸杞黄酮保护组MDA含量、LDH活性均下降,NO生成量、SOD活性较H₂O₂损伤模型组明显增高(P<0.01),MDA含量、LDH活性的下降程度,NO生成量、SOD活性的增高程度,与枸杞总黄酮呈剂量依赖性. 结论: 宁夏枸杞总黄酮对H₂O₂所致人血管内皮损伤有保护作用,其机制可能与宁夏枸杞总黄酮抑制损伤细胞的脂质过氧化,以及有效提高机体抗氧化酶的活性、清除自由基,促进一氧化氮(NO)的合成有关.     

回心草无糖颗粒对糖尿病合并冠心病心绞痛的疗效观察

目的:观察回心草无糖颗粒治疗糖尿病合并冠心病心绞痛的临床疗效.方法:采用随机双盲对照方法,将105例糖尿病合并冠心病心绞痛病人分为两组:回心草无糖颗粒组(治疗组,15 g/包,2次/d,每次1包,冲服,66例)和麝香保心丸组(对照组,3次/d,每次2丸,口服,36例).观察两组心绞痛发作频次、心电图、硝酸甘油停减率的变化.结果:心绞痛缓解总有效率:治疗组92.4％、对照组89.7％;心电图好转总有效率:治疗组57.6％、对照组43.6％(P＜0.05);硝酸甘油停减率:治疗组83.3％、对照组79.5％.结论:回心草无糖颗粒对糖尿病合并冠心病心绞痛病人有效,疗效与麝香保心丸相当(心电图好转更明显).     

半夏、掌叶半夏及禹白附凝集素蛋白的刺激性研究

目的:研究半夏凝集素(Pinellia ternata agglutinin,PTA),掌叶半夏凝集素(Pinellia pedtaisecta agglutinin,PPA),禹白附凝集素(Typhonium giganteum agglutinin,TGA)的刺激性作用。方法:SD雄性大鼠随机分为空白组,PTA,PPA及TGA高中低剂量组(300,200,100 mg.L-1),ip给药,4 h后处死大鼠,ip生理盐水,取腹腔液测中性粒细胞迁移数目,测定腹腔液中总蛋白,一氧化氮(NO),前列腺素E2(PGE2)的含量;家兔随机分为空白组,半夏,掌叶半夏及禹白附的凝集素组及毒针晶组,半夏,掌叶半夏及禹白附的针晶加其凝集素组,观察家兔眼结膜充血,水肿及分泌物,考察PTA,PPA,TGA的刺激性作用。结果:大鼠ip PTA,PPA,TGA后,与空白组腹腔液中性粒细胞迁移数目(633.33±233.81)×106/L比较,100 mg.L-1组PTA(1 083.33±116.9)×106/L,PPA(1 033.3±150.55)×106/L及TGA(1 133.33±103.28)×106/L均具极显著性差异(P<0.01),均可引起严重的中性粒细胞向腹腔迁移,且浓度升高,作用增强;大鼠腹腔液的总蛋白,NO及PGE2的含量显著升高,均可加重针晶刺激家兔眼结膜强烈水肿。结论:天南星科中具有刺激性毒性作用的半夏,掌叶半夏及禹白附所含凝集素蛋白具有刺激性作用,是其毒性刺激性成分。     

丛枝菌根真菌与哈茨木霉菌合用对连作丹参生长及质量的影响

该文探讨田间条件下丛枝菌根真菌(AMF)与哈茨木霉菌合用对丹参生长及质量的影响。采用田间小区试验来进行研究,使用HPLC测定丹参地上部分和地下部分有效成分含量,通过形态观察并计算根部发病率,并结合方差统计学方法对各指标的测定结果进行分析。结果显示,单独接种AMF以及AMF与哈茨木霉菌合用能够有效的降低连作丹参根部病害的发生率,其中AMF与哈茨木霉菌合用效果更佳,比CK组降低了61.50%。几种处理对丹参生物量影响没有显著差异,但都能提高丹参根部各种有效成分的含量。单独接种AMF以及AMF+哈茨木霉都能显著提高丹参根中丹酚酸B的含量(P<0.05),其中AMF对丹酚酸B促进作用最明显,提高了27.97%;接种AMF能显著提高丹参根丹参酮I和丹参酮ⅡA的含量(P<0.05),其中丹参酮I约提高了70.14%;丹参酮ⅡA约提高了51.42%。另外,单独接种AMF以及AMF+哈茨木霉均能显著提高丹参根中隐丹参酮的含量,提高了约30.67%。从而得出单独接种AMF以及AMF+哈茨木霉能够有效减低连作丹参病害的发生率,同时提高连作丹参药材的质量。     

梅花钻对乙醇引起小鼠肝损伤的保护作用

目的:研究梅花钻对乙醇引起肝损伤的保护作用。方法:将昆明种小鼠分为正常对照组、乙醇模型组、梅花钻(33.40,16.70,8.35 g·kg-1)剂量组,观察各组小鼠血清的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和肝匀浆中的丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)的含量,评价梅花钻对肝损伤的保护作用。结果:梅花钻高、中剂量组与乙醇模型组比较,ALT,AST,GST,MDA,TG降低(P<0.05或P<0.01),SOD明显升高(P<0.01)。结论:梅花钻对小鼠乙醇引起的肝损伤有保护作用。     

内毒素致小鼠SIRS模型建立及两种贯众醇提物对其保护作用的初步观察

目的:通过建立小鼠全身炎症反应综合征(SIRS)模型,研究中药贯众的不同品种对SIRS模型的保护作用。方法:BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组和贯众醇提物高、中、低剂量(4.68,2.34,1.17 g·kg-1)组,预防给药7 d后造模,5 h后检测小鼠肛温、呼吸频率、肺湿重/干重比、外周血白细胞计数以及糖脂代谢情况。结果:ip内毒素(LPS)6 mg·kg-1可致小鼠体温明显降低,外周血白细胞数减少,肺组织充血水肿,糖脂代谢水平降低。紫萁贯众和荚果蕨贯众可不同程度地影响LPS所致小鼠的肛温、肺干湿重、血清胆固醇和外周血白细胞数等异常改变,其中紫萁贯众作用更为明显。结论:ip LPS致小鼠SIRS模型成立,紫萁贯众和荚果蕨贯众醇提物对内毒素致小鼠SIRS有一定保护作用。     

杜仲对紫外线致ESF-1细胞光老化保护作用的研究

目的:研究杜仲抗紫外线致ESF-1细胞光老化作用,并初步探讨其作用机制。方法:杜仲70%乙醇提取物上D101大孔树脂制备不同浓度乙醇梯度洗脱部位,采用40 J.cm-2的UVA或70 mJ.cm-2的UVB照射ESF-1细胞后,立即加入不同浓度的杜仲50%乙醇洗脱部位,24 h后MTT法测定细胞活性,试剂盒法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量。结果:杜仲50%乙醇大孔树脂洗脱部位250,500 mg.L-1的给药浓度能使UVA诱导的光老化细胞活性明显增强(P<0.05),细胞培养液中LDH活力明显降低(P<0.05),其中250 mg.L-1的给药浓度能使细胞培养液中SOD活力明显升高(P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.05);125,250,500 mg.L-1的给药浓度能使UVB诱导的光老化细胞活性明显增强,其中125 mg.L-1的给药浓度能使细胞培养液中LDH活力明显降低(P<0.05),SOD活力明显升高(P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.05)。结论:杜仲50%乙醇大孔树脂洗脱部位对UVA和UVB致ESF-1细胞光老化具有良好的保护作用,推测其机制为通过提高SOD活力、加速氧自由基的清除和减少氧自由基的产生,使细胞的脂质过氧化损伤程度降低;同时,可能通过抗氧化作用,维持了细胞膜结构和功能的完整性,使LDH的漏出减少。