抗体芯片技术的应用探讨

抗体芯片（antibody microarray，抗体微阵列），是蛋白质芯片的一种，是检测生物样品中蛋白表达模式的新方法。这种新技术可以在一次实验中比较生物样品中成百上千的蛋白质的相对丰度，将极大促进蛋白质组目前的研究状况。抗体芯片可以分析样品之间的差异；确定相应蛋白质的性质；分析细胞提取物或者血清蛋白质混合物；还可以进行生物化学平行分析；检测蛋白表达水平变化。     

微阵列技术的进展

基因组学和转录组学的研究，促进了高通量药物筛选的发展。目前，高通量药物发现已经转向关注蛋白质组学、糖原组学和代谢组学评价中存在的难题。微阵列技术是评价基因表达的主要工具，它们也被用于蛋白质和小分子筛选库。微阵列技术能帮助人们从更小体积的样品中获得更多的信息，使得低花费的高通量分析在药物发现过程中成为可能。蛋白质组学、糖原组学和组织阵列技术的发展将进一步帮助和促进药物发现过程的实现。     

药物靶标搜寻和验证方法的研究进展

药物靶标是寻找药物的基础，近年来新的药物靶标搜寻和验证方法不断出现。本文从基因、mRNA和蛋白质水平的角度综述了计算机方法、核酶、反义寡核苷酸、RNA干扰、基因芯片技术、抗体与胞内抗体、寡聚核苷酸适配子、多肽、化学发光辅助激光灭活、蛋白质组学和蛋白质微阵列在药物靶标搜寻及验证领域的应用新进展。     

应用蛋白质芯片技术检测血清自身抗体的初步探讨

目的研究应用蛋白质与抗原分子微阵列技术检测血清自身抗体。方法运用胶体金免疫金银染色法在氧化型琼脂糖凝胶膜结合戊二醛(GA)分子衍生的活性表面,制作蛋白质与抗原分子微阵列,建立检测血清自身抗体的方法。结果在未经选择的自身免疫病患者中[包括系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)和混合性结缔组织病(MCTD)],共检出有多种自身抗体阳性,其中抗ssDNA抗体、抗甲状腺球蛋白(TG)抗体、抗甲状腺过氧化切酶(TPO)抗体、子宫内膜抗体(EmAb)和类风湿因子(RF)等的检出频率较高;但心磷脂抗体(ACA)、抗肝细胞膜特异性脂蛋白(LSP)和抗精子抗体(AsAb)未检出1项阳性,经初步的方法学对比考证,与酶联免疫吸附试验(ELISA)测试结果有较好的重复性(结果一致性达90%)。结论本法敏感度高,结果直观且实验条件易于控制,为阵列芯片的可视化提供了一种很好的模式。     

直接进样液相色谱法在生物样品分析中的应用

生物样品基质复杂,在色谱分析前先要除去其中的蛋白质等大分子物质,以免损害色谱柱。常用的前处理方法多为离线操作,耗时费力,还会造成样品损失和污染,而直接进样的方法能减少前处理步骤,并能有效预浓缩和净化生物样品。这一过程可以通过柱切换技术实现自动化,尽可能地减少了生物样品的前处理步骤和潜在的样品污染,提高方法的重现性。本文对目前生物样品的液相色谱分析方法中样品自动化处理的进展进行了综述。具体集中于直接进样技术,如限进性填料和其他自动化在线固相萃取过程,还包括新兴的对样品更具选择性的自动化萃取相技术,如分子印迹聚合物。并对这些方法和潜在的应用前景进行了简要讨论。     

刘涛团队在内源蛋白质标记领域取得重要进展

<正>标记和可视化蛋白质是研究细胞生物学的基本工具,可以用于监测蛋白质动态变化和解析细胞内复杂相互作用,从而理解特定感兴趣蛋白质(protein of interest, POI)的细胞功能。荧光成像技术在活细胞中研究蛋白质定位、功能及互作方面发挥着巨大作用。目前,常用的标记方法都有一定的局限性,例如抗体染色不能应用与活细胞,而小分子化学探针又缺乏通用型。目前最常用的是基因融合(使用荧光蛋白、自标记酶或肽标签),然而该方法通常需要过表达编码POI的开放阅读框架(ORF),可能对蛋白质的正常表达、折叠、定位和功能造成干扰。     

基因芯片技术在医药学研究中的应用

基因芯片又称DNA芯片或DNA微阵列,属于生物芯片的一种.生物芯片是根据生物分子间特异相互作用的原理,将生化分析过程集成于芯片表面,从而实现对多肽、蛋白质及其他生物成分的高通量快速检测.因此,该技术一经问世,就受到了广泛关注,在医学领域的应用也取得了重要进展.     

一种简易的组织微阵列技术及其应用

组织微阵列又称组织芯片,是近年来新兴的一项生物芯片技术。它是将数十、数百甚至上千个小的组织片整齐地排列在某一载体上而成的微缩组织切片。1998年Kononen等在DNA微阵列的基础上,首先制作了乳腺癌的组织微阵列,并应用荧光原位杂交(FISH)、免疫组织化学和mRNA原位杂交技术研究了6种基因及其产物的表达状态。组织芯片具有高效、快速、成本低、信息含量高、实验误差小、自身内对照和可比性强的特点。我们尝试了组织芯片的制作,并在组织芯片上进行了HE染色和数种抗体的免疫组织化学染色,取得了一些体会。     

基于双向电泳技术的体液蛋白质组学研究进展

目前 ,蛋白质组技术被大量应用于临床和生物学研究各个领域 ,其中的大部分研究都在双向电泳技术的支持下展开。体液样品 (包括血浆、脑脊液、尿液等 )蛋白质的全面分析主要依赖于蛋白质组学分析。本文综述了基于双向电泳技术的体液蛋白质组学研究中样品制备、生物标志物探索、药物效应评价和化合物毒性分析等方面的研究进展     

抗体技术的研发现状与展望

伴随着抗体的发现和对抗体认识的不断加深,抗体技术的研究正在不断拓展,同时抗体技术的创新加速了新的抗体药物的研发和生产水平的提升.根据发展历程,抗体技术分为多克隆抗体技术、杂交瘤单克隆抗体技术和基因工程抗体技术3个阶段.目前,最新抗体技术主要有杂交瘤单克隆抗体技术、抗体文库展示技术、转基因动物技术和单细胞测序技术等,各有...     

毛细管电泳技术在研究生物分子间相互作用和药物筛选中的应用

毛细管电泳技术是八十年代初发展起来的一种新型分离分析技术。由于其分析时间短，样品消耗少，分离度高，应用灵活，能够在生理条件或者接近生理条件的缓冲液中运行等优点，广泛应用于研究生物分子间的相互作用。本文就毛细管电泳研究生物分子间相互作用的基本原理，及其在生物分子间相互作用和药物筛选中的应用进行了综述。对不同的分子间相互作用体系，如蛋白质-蛋白质／多肽，蛋白质-DNA／RNA，蛋白质-糖，抗原-抗体，蛋白质-药物，脂质体-蛋白质／药物等进行了论述。同时也探讨了毛细管电泳从组合化学库中筛选先导药物及其在药物筛选中的应用。     

~1H－NMR测定氨基酸单体

~１Ｈ－ＮＭＲ测定氨基酸单体苏甫，宋艳（华西医科大学药学院成都６１００４１）（四川省农科院成都６１００４１）针对蛋白质分子和临床检测样品的水溶性特点，以Ｄ２Ｏ为溶剂，对照部份标准氨基酸图谱。运用核磁共振技术，对人体必需和目前蛋白质中常见氨基酸进行检测?..     

组织微阵列技术研究进展

组织微阵列／组织微点阵（tissue microarray）又称组织芯片（tissue chip）,是将数百个或数千个小的组织片整齐排列在某一载体上而成的微缩组织切片。最早由Kononen等在1998年首次提出这一概念,是一种高通量检测技术。其特点是体积小,信息含量大;并可根据不同需要进行组合并制成各种组织微阵列。此技术可以高效率、快速和低消耗地进行各种原位组织学的研究和观察,并有较好的内对照及实验条件的可比性,从而解决了传统的病理技术操作复杂、自动化程度低、操作数量少和检测效率低等问题。组织微阵列技术的出现是病理学研究分子病理学领域的一个革命性里程碑,其制作方法及应用也随着科学技术的发展有了新的改变,现综述如下。     

湖北省HIV-2抗体确证及HIV-1和HIV-2血清学双重感染状况分析

目的 对HIV-2可疑样品进行确证,了解我省HIV/AIDS人群中HIV-1和HIV-2双重感染状况.方法 用新加坡Genelabs Diagnostics公司生产的HIV-2抗体确证试剂检测16份HIV-1抗体阳性并且有HIV-2特异性指示带的样品.结果 11份样品结果为HIV-2抗体阳性,3份样品为不确定,2份阴性.结论 我省可能存在HIV-1和HIV-2型双重感染者,需从分子生物学水平进一步验证.     

Isu Abxis将评估Crucell生产技术

根据一项包括了商业化许可选择权的协议，韩国一家私营生物技术公司IsuAbxis即将对Crueell的STAR技术，即涵盖产生重组蛋白质和人类抗体的技术进行评价。     

用于肿瘤治疗的单克隆抗体

利用抗体的特异性,可以对肿瘤进行导向治疗,第一种用于肿瘤的治疗性抗体已用于临床.目前正在开发新型改良抗体,并已在识别的新的靶抗原方面取得进展,包括基因组学和蛋白组学技术的应用.一些增强抗体疗效的方法也正在研究中.     

中国神经外科国际合作研究柔性高密度微阵列电极助力脑机接口首次"登顶"Science期刊

近日,北京天坛医院神经外科联合斯坦福大学化学工程系鲍哲南院士、天津大学化学系胡文平教授的团队,提出紧密贴合在脑干等不规则区域的柔性可拉伸高密度微阵列电极.这是目前世界上精度最高的柔性可拉伸微阵列电极,该技术在精准识别脑干等部位重要神经核团、神经传导束和肿瘤功能学边界方面具有重要的临床转化价值.     

NMM抗肿瘤DNA疫苗原液大肠杆菌菌体蛋白质残留量检测方法的建立与验证

目的 建立并验证检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白质残留量的双抗体夹心ELISA试验方法。方法 使用双抗体夹心ELISA试验方法检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白残留量,采用四参数logstic曲线进行回归分析,并对该方法的专属性、检测限、定量限、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等进行验证,验证通过对5批样品进行检测。结果 采用双抗体夹心ELISA试验方法进行大肠杆菌蛋白质残留量检测时,DNA疫苗原液无需进行稀释。NMM抗肿瘤DNA疫苗原液对大肠杆菌菌体蛋白质的检测无干扰及抑制作用,方法的专属性良好;本法检测限为0.41 ng/ml;定量限为0.98 ng/ml;该方法测定宿主菌蛋白质残留量在0～100 ng/ml范围内线性良好,R2≥0.9999;本方法重复性试验中宿主菌蛋白质含量RSD值均低于15%,中间精密度实验中样品吸光值RSD值低于10%,精密度结果良好。在检测线性范围内加入高、中、低3种浓度的大肠杆菌菌体蛋白,回收率均值为100.35%(n=9,RSD=3.58%);本方法检测实验条件发生微小变动时（不同人员、不同批次试剂盒）,对测定结果的影响...     

快速狂犬病酶免疫诊断技术的比较研究

在快速狂犬病酶免疫诊断(RREID)技术的发展过程中,对该技术以及荧光抗体试验(FAT)结果的初步评价是在来自人和多种动物(狐狸、狗、猫、反刍动物和马)的72份脑组织样品中进行的.随后,在加拿大、法国、联邦德国和美国,由6个实验室(其中4个是WHO狂犬病协作中心)进行的协作研究在更大规模上评价了RREID技术,共检测了来自27种动物的1253份脑组织样品,结果表明:RREID技术与FAT的结果符合率为97.4%.     

基因芯片及应用前景

１基本概念基因芯片 (ｇｅｎｅｃｈｉｐ)也叫ＤＮＡ芯片、ＤＮＡ微阵列 (ＤＮＡｍｉｃｒｏａｒｒａｙ) ,是指采用原位合成 (ｉｎｓｉｔｕｓｙｎｔｈｅｓｉｓ)或显微打印手段 ,将数以万计的ＤＮＡ探针固化于支持物表面上 ,产生二维ＤＮＡ探针阵列 ,然后与标记的样品进行杂交 ,通过检测交信号来实现对生物样品快速、并行、高效地检测或医学诊断 ,由于常用硅芯片作为固相支持物 ,且在制备过程运用了计算机芯片的制备技术 ,所以称之为基因芯片技术。２应用测序。基因芯片利用固定探针与样品进行分子杂交产生的杂交图谱而排列出待测样品的序列 ,…