过氧化氢酶的肽片及其水解梭曼的活性

<正> 作者的早期工作已证明,过氧化氢酶(catalase)对梭曼有催化水解作用。本文进一步阐明过氧化氢酶的切割片段对梭曼(soman)和过氧化氢(H_2O_2)的水解作用。 过氧化氢酶经盐析和有机溶剂划分后用等电聚焦电泳分离纯化,再经HPLC DAD及SDS PAGE分离分析,证明为色谱及聚焦电泳单一区带,等电点为4.75～5.20,亚基分子量为58kD。酶的蛋白带和对两种底物的     

高效液相色谱法考察蒜酶活力测定中的影响因素

目的考察底物蒜氨酸纯度对蒜酶活力测定数值的影响,比较催化温度为25,35,37℃时蒜酶活力测定数值的差异。建立可行的蒜酶活力检测方法。方法采用高效液相色谱法,以蒜氨酸的减少量计算蒜酶活力。结果进行蒜酶活力测定时,底物蒜氨酸的纯度应不小于90%,确定蒜酶催化反应温度为35℃。结论建立了以95%蒜氨酸为底物,催化温度为35℃的蒜酶活力测定条件。     

氧化白藜芦醇对酪氨酸酶的抑制作用

目的研究氧化白藜芦醇对酪氨酸酶抑制的作用机制。方法将N-乙酰-L-酪氨酸代替酪氨酸作为底物,HPLC动态监测氧化白藜芦醇对酶催化生成多巴醌的影响;将对苯醌代替多巴醌,HPLC动态监测其对非酶催化生成多巴色素的影响;分别以左旋酪氨酸和左旋多巴为底物,在pH 6.8的磷酸盐缓冲体系反应后测定475 nm吸光度值,研究氧化白藜芦醇对酪氨酸酶催化反应进程和酶活性抑制的影响,计算酶的抑制动力学参数。结果氧化白藜芦醇对酪氨酸酶催化过程有抑制作用,对非酶催化过程有促进作用。对酪氨酸酶单酚酶、二酚酶均有抑制作用,半抑制浓度(IC50)分别为2.48μmol/L、0.020 mmol/L。结论氧化白藜芦醇对酪氨酸酶的抑制类型为可逆抑制中的非竞争性抑制。     

离子液体双相体系在生物催化中的应用

综述离子液体双相体系在生物催化中的应用研究进展,介绍其应用特点,并探讨现阶段研究中存在的问题。许多纯酶或全细胞中的酶均能在离子液体或由其与其他溶剂组成的两相体系中保持催化活性,离子液体也因此而成为生物催化反应研究的热点。     

药用酶活力测定的设计和方法选择的探讨

<正> 酶为一具有特殊催化能力的蛋白质类生物催化剂。药用酶即应用酶的这一特性使其作用于有机体而作为疾病的预防、诊断和治疗的一类药物。近年来,随着酶学和医药工业的迅速发展。酶类药物也有了新的进展,本文主要就酶类药物活力测定的设计和方法的选择,包括酶催化反应动力学法的设计原理、反应物或产物浓度变化的测定方法及酶催化反应中基本产物(指示剂)分析方法的选择等方面作一综述。一、酶活力测定动力学法的设计 (一)酶的活力和比活性药用酶不同于其他类药物,不能用百分含量表示。酶类药物一般用酶的活力单位(Emzymatic activity unit)和比活性(Specific     

pH值对酶活性影响的实验观察

酶（enzyme）是一种由生物体内活细胞产生的一种生物催化剂。细胞新陈代谢包括的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。酶催化化学反应的能力叫酶活性。酶的化学本质是蛋白质,具有两性电解质的性质,在一定溶液中可以发生解离作用。酶在水溶液环境中的解离状态和行为,都受到H＋的影响。酶活性中心功能基团的解离状态将直接影响到酶的活化以及酶与底物的亲和力,其会随着溶液的pH值改变而改变。因此,溶液的pH对酶催化反应的速度有明显的影响。     

固相酶、固相细胞在医药工业中的应用

酶是温和条件下进行高效催化反应的催化剂。日常生活中人们早就利用酶来催化各种反应,如曲制酱油、皮革脱毛、酿酒、制药甚至直接用酶治疗人的疾病。随着科学发展,越来越多的细胞的酶直接为工农业和医学广泛应用。酶的生产和应用时遇到下列问题:1.酶是一种蛋白质,一般对热、强酸、强碱、有机溶剂等都不稳定。在水溶液中,甚至在最适条件下也会很快失活;2.酶液只能和底物作用一次,经济上     

纯化的抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体对乙酰胆碱酯酶活性的影响(英文)

本文研究了Balb/c小鼠杂交瘤细胞分泌的抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体对电鳐电器官乙酰胆碱酯酶催化反应的影响及其机理。小鼠腹水抗体经蛋白A琼脂糖亲和层析分离纯化,达到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。酶联免疫吸附试验检测了11株单克隆抗体,滴度在1:5000～1:300 000范围内。在以乙酰胆碱为底物的催化反应中,3F3、2G8及1H11三株杂交瘤分泌的单克隆抗体对乙酰胆碱酯酶活性有明显的抑制作用,抑制作用随单克隆抗体用量的加大而增强。但在以乙酰靛酚为底物的催化反应中,仅3F3显示抑制作用。因而推论,3F3作用在乙酰胆碱酯酶的活力中心,而2G8及1H11可能作用在活力中心的邻近部位.乙酰胆碱酯酶的活力中心不仅是酶的催化部位,而且也是酶分子上的一个抗原决定簇.乙酰胆碱酯酶活力中心具有催化及诱导抗体产生的双重功能.     

医药用酶现状及需要讨论的问题——重点在于细胞色素C和消化酶

<正> 一、前言机体重要的生物学反应都是由酶催化的,因此,人们对酶的研究的巨大兴趣不仅是了解其催化反应的过程,而且还希望控制这些反应。当酶代谢紊乱时,给机体以相应的酶,作为药物就可达到治疗的目的。目前随着酶应用范围的扩大以及具有新的工业价值酶的开发,酶制剂的生产每年正以8％的速度递增。如以此速率增长,到八十年代中期,世界工业酶市场的销售额将达到60亿美元。日本已达到年销售医药用酶5.2亿美元。     

固定化生物催化剂制备药品的新进展

生物体内各种复杂的代谢反应都是在酶催化下进行的,由于酶的催化反应条件温和,专一性强,因此较一般化学方法为优。但也存在一些缺点,因此限制了它的推广应用。六十年代发展起来的固定化技术对它有很大的改进,易于分离和重复使用,稳定性也有所提高。不但能够降低成本,而且有利于工艺过程的控制和连续化,因此引起了很多研究者的关注。在七十年代前后有些单一酶的转化反应例如水解和异构化采用了固定化酶,其中固定化氨基酰化酶、葡萄