亚砷酸对HepG2肝癌细胞周期及P27、CyclinD1表达的影响

目的观察亚砷酸对HepG2肝癌细胞周期及P27、CyclinD1表达的影响,探讨亚砷酸对HepG2肝癌细胞周期影响的可能机制。方法采用免疫组织化学及流式细胞检测方法研究了亚砷酸对HepG2肝癌细胞周期及P27、CyclinD1表达的影响。结果空白对照组、低剂量亚砷酸组(1.0mg/L)、中剂量亚砷酸组(1.5mg/L)、高剂量亚砷酸组(2.0mg/L)P27阳性细胞所占百分比分别为(22.80±6.94)、(25.60±7.41)、(28.00±5.21)、(31.20±4.98),低剂量组与空白对照组比较P<0.05,中、高剂量组与空白对照组比较P<0.01。空白对照组、低剂量亚砷酸组(1.0mg/L)、中剂量亚砷酸组(1.5mg/L)、高剂量亚砷酸组(2.0mg/L)CyclinD1阳性细胞所占百分比分别为(38.40±5.68)、(24.70±8.98)、(18.90±6.51)、(15.20±8.44),与空白对照组比较P<0.01。空白对照组、低剂量亚砷酸组(1.0mg/L)、中剂量亚砷酸组(1.5mg/L)、高剂量亚砷酸组(2.0mg/L)G1期细胞所占百分比分别为66.5%、70.6%、73.4%、77.5%。结论亚砷酸可影响HepG2人肝癌细胞周期,其机制可能是通过降低CyclinD1水平,上调P27蛋白水平而作用于G1-S限制点,使HepG2细胞不能通过G1-S限制点使其阻滞于G1期不能增殖。     

cyclinD/CDK4在肿瘤坏死因子α诱导的大鼠纤维母细胞样滑膜细胞中的表达及作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）促进滑膜细胞增殖的可能机制。方法将常规培养大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞随机分为正常对照组和10μg/LTNF-α刺激组,分别培养6、12、24h,流式细胞术检测cyclinD1/CDK4蛋白表达;免疫细胞化学检测PCNA蛋白表达。结果TNFα作用6～24hcyclinD1和CDK4蛋白相对表达量逐渐增加,与正常对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）;PCNA蛋白阳性信号均表达于滑膜细胞核内,随着作用时间延长,PCNA蛋白表达增强,阳性细胞数目呈时间依赖性增多。cyclinD1和CDK4蛋白表达与PCNA的表达呈正相关（r值分别为0.683和0.496,P〈0.01）。结论TNFα可能通过上调细胞周期调控蛋白cyclinD1/CDK4的表达促进滑膜细胞的增殖和分化。     

DNA结合抑制因子4在肿瘤发生发展中的作用

DNA结合抑制因子4(Id4)是Id转录因子的成员之一,Id4基因的表达受多种调控元件的调控,在正常组织及肿瘤组织中均有表达。Id4蛋白在细胞增殖,细胞分化及细胞凋亡的调控中起着重要的作用,并在肿瘤的发生和发展过程中起着不同的作用。     

DNA甲基化在肿瘤发生作用中的研究进展

表遗传学现象广泛地存在于各种生物中,表遗传现象形成的重要机制之一是DNA甲基化作用引起基因转录沉默。鉴于该重要机制,研究DNA甲基化水平的改变对肿瘤的发生、发展有重要的作用。经研究发现DNA甲基化改变可以引起细胞中C→T突变、抑癌基因的高甲基化、癌基因的低甲基化、错配修复基因异常以及诱导染色体不稳定导致肿瘤的发生。因此,通过探索肿瘤发生时DNA甲基化的变化特征,可为肿瘤治疗提供理论依据。     

DNA 甲基化在肿瘤发生中的作用

在肿瘤形成过程中,表观遗传学机制越来越受到重视。即DNA突变时核苷酸序列不变,通过碱基修饰的改变导致基因表达水平的变化。其中,一个重要机制就是DNA甲基化。 DNA甲基化就是在DNA复制后,DNA在甲基转移酶催化下将 S-腺苷甲硫氨酸（ SAM）上的甲基连接到DNA分子的腺嘌呤碱基或胞嘧啶碱基上,进行DNA修复的过程。负责DNA甲基化作用的酶称为 DNA 甲基化转移酶（ DNA Methyl-transferases, DNMTs ）。 DNA 甲基化主要发生在 CpG二核苷酸中的胞嘧啶［1］,它对于维持染色体结构的稳定性,保障基因组表观遗传信息在亲代细胞间的正确传递起着重要作用。除此之外,DNMTs还直接参与基因的转录抑制和DNA复制的正确起始等。人类DNA甲基化系统的功能异常将会导致胚胎发育异常,亦可诱发恶性疾病甚至肿瘤的发生。近年来,国内外开展了许多有关DNA甲基化的分子生物学及其作用机制的研究,本文就相关研究现状予以综述。     

Rb基因及细胞周期素D1在原发性卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义

目的研究卵巢上皮性肿瘤中pRb、cyclinD1的表达,探讨它们在卵巢肿瘤发生、发展中的作用并分析其临床意义.方法应用免疫组化S-P法检测pRb、cyclinD1在20例良性、9例交界性、31例恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达情况,分析其与临床病理指标的联系.结果 pRb的阳性表达率分别为良性卵巢上皮性肿瘤80%(18/20);交界性卵巢上皮性肿瘤66.67%(6/9);原发性卵巢上皮性癌58.06%(18/31).各组间差异无显著性(P＞0.05).恶性肿瘤组内pRb的表达与不同临床分期及淋巴结转移显著相关(P＜0.05).cyclinD1在良性、交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达率分别为15%(3/20),55.56%(5/9),54.84%(16/31).良、恶性肿瘤间差异有显著性(P＜0.05).在卵巢恶性上皮性肿瘤中cyclinD1表达与不同临床期别、不同病理分级及有无腹水,有显著性差异(P＜0.05).临床分期越高,病理分级越低,cyclinD1阳性表达率越高.结论 pRb在卵巢恶性上皮性肿瘤中的失表达,可作为估计卵巢肿瘤恶性程度和预后的指标之一,cyclinD1的表达有利于卵巢肿瘤性质的鉴别,在卵巢癌发生的分子机制中起作用.     

IV型胶原在甲状腺肿瘤发生发展中的表达

为研究IV型胶原在甲状腺瘤发生发展中的表达、收集甲状腺正常组织、甲状腺瘤组织、甲状腺瘤组织进行IV型胶原的免疫组织化学染色及光镜观察。结果显示，IV型胶原在甲状腺正常组织、甲状腺瘤组织、甲状腺癌组织中只表达于基底膜上，而且随肿瘤的发生发展与恶性程度增高表达增强，提示IV型胶原在肿瘤细胞的粘附、迁移等活动中发挥了重要作用。     

Ⅳ型胶原在甲状腺肿瘤发生发展中的表达

为研究 型胶原在甲状腺肿瘤发生发展中的表达 ,收集甲状腺正常组织、甲状腺瘤组织、甲状腺癌组织进行 型胶原的免疫组织化学染色及光镜观察。结果显示 , 型胶原在甲状腺正常组织、甲状腺瘤组织、甲状腺癌组织中只表达于基底膜上 ,而且随肿瘤的发生发展与恶性程度增高表达增强 ,提示 型胶原在肿瘤细胞的粘附、迁移等活动中发挥了重要作用     

涎腺黏液表皮样癌流式细胞术DNA含量检测及临床意义

目的探讨涎腺黏液表皮样癌的DNA含量、异倍体率与肿瘤组织分级关系。方法应用流式细胞术检测40例涎腺黏液表皮样癌及15例正常涎腺组织的DNA含量。结果涎腺黏液表皮样癌细胞的DNA含量、异倍体出现频率升高,且与肿瘤组织分级呈负相关,其DI值及DNA异倍体出现频率明显高于正常涎腺组织,具统计学意义（P〈0.05）。结论流式细胞术检测肿瘤细胞的DNA含量与倍体分析可用于涎腺黏液表皮样癌的诊断。     

甲状腺癌中p16和Rb蛋白表达及其意义

目的 探讨甲状腺癌中p16和Rb蛋白的表达、相互关系及其意义。方法 应用免疫组织化学SP法检测80例甲状腺癌患者组织中p16和Rb蛋白的表达情况。结果 p16和Rb总异常表达率，甲状腺腺瘤为12．5％；80例甲状腺癌中，低度恶性组为66．7％，高度恶性组为87．O％。p16阳性率，低度恶性组为64．9％(37／57)；高度恶性组为34．8％(8／23)。Rb阳性率，低度恶性组为68．4％(39／57)；高度恶性组39．1％(9／23)；癌组织分化越差，p16及Rb阳性率越低。P16和Rb蛋白均阳性的肿瘤术后复发转移率低。结论 甲状腺癌的发生发展与p16和Rb蛋白缺失有关：瘤组织分化程度越差，p16和Rb蛋白丢失越多；p16和Rb蛋白均阳性的肿瘤术后复发率转移率低p16和Rb蛋白的表达具有负相关关系，二者共同作用才能阻止瘤细胞的增殖。     

BP1与CyclinD1蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的本研究旨在探讨BP1和CyclinD1蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达情况以及意义。方法收集洛阳市中心医院2000年1月至2008年7月共51例行甲状腺乳头状癌癌手术切除标本和同期住院手术之22例良性甲状腺疾病及周围正常组织作为对照,采用免疫组化方法测定BP1蛋白和CyclinD1的表达,并结合临床资料对BP1蛋白差异表达与甲状腺乳头状癌病人临床病例参数的相关性进行分析研究。结果①BP1、CyclinD1在良性甲状腺疾病和正常组织组织中低表达,而在甲状腺乳头状癌组织中存在显著高表达（P〈0.0001）,二者在甲状腺乳头状癌中的表达呈正相关（kappa值为0.6095;P〈0.001）。②BP1和CyclinD1的高表达与甲状腺乳头状癌分期和淋巴结转移有明显相关性（P〈0.05）;BP1和CyclinD1高表达与甲状腺乳头状癌的病理亚型、性别及年龄未见明显相关（P〉0.05）。结论 BP1和CyclinD1表达上调可能参与调控甲状腺乳头状癌的发生、发展过程,并进而影响其生物学特点及预后。     

OCT4 和P27kip1 蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其相关性

目的研究OCT4 和P27kip1 蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其相关性。方法采用免疫组织化学方法对 24 例肾透明细胞癌标本OCT4 和P27kip1 的表达进行检测。观察OCT4 和P27kip1 在肾癌组织中的阳性表达百分比及细胞分布情况。考察OCT4 和P27kip1 在性别、年龄（＜60 岁和≥60 岁）及癌细胞有无转移间的表达水平差异。对两者进行相关性分析。结果肾透明细胞癌标本OCT4 和P27kip1 蛋白阳性表达分别为16 例（66.7%）和18 例（75%）, OCT4 蛋白高、中及低表达分别为8 例（33.3%）、5 例（20.5%）及3 例（12.5%）,主要在细胞质和细胞核中表达,另有少部分在胞膜中表达。P27kip1 高、中及低表达分别为3 例（12.5%）、6 例（25%）、9 例（37.5%）,阳性着色在胞浆和胞膜,少部分细胞核可表达。OCT4 和P27kip1 的表达水平在年龄、性别间差异无统计学意义,在肿瘤有无转移间差异有统计学意义（P < 0.05)。OCT4 和P27kip1 在肾癌中的表达呈负相关(rs=-0.408,P < 0.05)。结论OCT4 和P27kip1 呈负相关,采用抑制OCT4 表达或P27kip1 的降解,尤其是降低胞质中P27kip1 的表达,可作为基因治疗肾癌的一个新的的作用靶点。     

P16和cyclinD1在鼻咽癌及癌前病变中表达的临床意义

目的研究鼻咽癌及癌前病变组织中P16和cyclin D1蛋白的表达、相互关系及其意义。方法采用免疫组化EnVision法,分别检测60例鼻咽癌、28例癌前病变及30例鼻咽粘膜慢性炎组织中P16和cyclin D1蛋白的表达情况,分析两者在不同病变组织中的表达以及与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果P16蛋白在鼻咽粘膜慢性炎组织的表达率高达90％（27／30）,并随着病变进展,从癌前病变（不典型增生）至鼻咽癌,其阳性表达率呈下降趋势分别为64．3％（18／28）和28．3％（17／60）;其中癌前病变和鼻咽癌与鼻咽粘膜慢性炎组织比较有统计学意义（P〈0．05）,并且P16蛋白的低表达与临床分期和淋巴结转移有关。eyelinD1蛋白在鼻咽粘膜慢性炎、癌前病变和鼻咽癌组织的阳性表达率分别为10％（3／30）、57．1％（16／28）和63．3％（38／60）。其中鼻咽癌与鼻咽粘膜慢性炎组织比较有统计学意义（P〈0．05）,而鼻咽癌与癌前病变比较则无统计学意义（P〉0．05）,eyelinD1蛋白的过表达与临床分期和淋巴结转移无关。P16、eyelinD1蛋白的阳性表达率在鼻咽癌组织中呈负相关性（P〈0．05）。结论P16、eyclinD1在鼻咽粘膜癌变过程中起着重要作用,P16基因的畸变或缺失可能参与鼻咽癌的发生发展过程;eyelinD1的过表达是鼻咽癌发生的早期事件。     

CyclinB1、CDK1、P27在宫颈鳞癌组织的表达及其意义

目的探讨细胞周期蛋白(cyclinB1)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK1)及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物(CDKIs-P27)在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学SP法检测18例正常宫颈、19例宫颈上皮内瘤变(CIN)、56例宫颈鳞状细胞癌组织中cyclinB1、CDK1及P27蛋白的表达。结果 cyclinB1、CDK1在宫颈鳞癌及CIN中的阳性表达率明显高于在正常宫颈组织中(P<0.05),而P27在正常宫颈组织中呈高表达,在宫颈鳞癌及CIN组织中显著降低(P<0.05)。cyclinB1、CDK1在宫颈鳞癌组织中的表达与肿瘤组织学分级有关(P<0.05),P27表达与组织学分级、淋巴结转移有关(P<0.05)。宫颈鳞癌组织中cyclinB1与P27的表达、CDK1与P27的表达分别呈负相关关系(P<0.05)。结论 cyclinB1、CDK1及P27的异常表达在宫颈鳞癌的发生发展、转移中起重要作用。联合检测这些指标有助于判断宫颈鳞癌的生物学行为及转移潜能。     

脑胶质细胞瘤cyclin D1和Rb基因蛋白表达及临床意义

目的 通过检测脑胶质瘤中细胞周期调节蛋白 D1(cyclin D1)、视网膜母细胞瘤 ( Rb )基因蛋白表达,探讨 其在脑胶质瘤发生、生长和转移过程中,以及由低恶性度肿瘤向高恶性度肿瘤转化中的作用,为临床诊治和预后判断提供依据。方法 选用 54例Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤手术后存档蜡块标本为实验标本,选用 6例正常脑组织为对照。应用流式细胞术( FCM 分别定量检测 cyclin D1、 基因蛋白表达量。结果 ① Cyclin D1蛋白在各级星形细胞瘤中表达均增强,且 ) Rb阳性率均为 100%,但 cyclin D1蛋白的表达量( 值) FI随肿瘤恶性度的升高而明显增加。Cyclin D1蛋白表达量 FI值与病理组织学分级有明显相关性(P <0.01)② Rb 蛋白表达量( 值)在Ⅰ级和Ⅱ级星形细胞瘤中表达增强,但随肿瘤恶性度 ; FI的升高而降低,且与病理组织学分级无显著相关性。Ⅰ级和Ⅱ级 Rb 蛋白表达量与Ⅲ级和Ⅳ级相比,则有显著性差异 (P<0.01) 。结论 ① Cyclin D1蛋白在各级星形细胞瘤中均为阳性表达,且表达量随肿瘤恶性度的升高而显著增加,说明cyclin D1可能通过加快细胞增殖周期和增强肿瘤细胞的侵袭性,参与了肿瘤的形成和恶性度的演化;② Rb 蛋白在高恶性度星形细胞瘤均有不同程度的表达缺失,说明 R b 表达缺失导致 cycl     

自噬相关基因PTEN和Beclinl在乳头状甲状腺癌中的表达和意义

目的检测自噬相关基因PTEN和Beclinl在乳头状甲状腺癌中的蛋白表达,并探讨其与乳头状甲状腺癌发生、发展的相关性及意义。方法应用免疫组化染色法检测78例乳头状甲状腺癌和45例癌旁正常黏膜组织(距离癌组织>2cm)标本自噬相关基因PTEN和Beclinl的蛋白表达,并结合临床病理因素进行分析。结果乳头状甲状腺癌组织中PTEN和Beclinl的阳性表达率分别为41.0%和43.6%,显著低于正常组织的77.8%和73.3%(P<0.05);PTEN与乳头状甲状腺癌的包膜侵犯程度、淋巴结转移、性别、年龄无关(P>0.05);Beclinl与乳头状甲状腺癌的淋巴结转移有关(P<0.05),与包膜侵犯程度、性别、年龄无关(P>0.05)。PTEN与Beclinl在乳头状甲状腺癌中的表达呈正相关(r=0.532)。结论自噬相关基因PTEN和Beclinl在乳头状甲状腺癌组织中蛋白表达下调,并与肿瘤淋巴结转移有关。自噬活性的改变可能与乳头状甲状腺癌的发生、发展相关。     

周期素D1与p16蛋白及Rb基因在大肠癌中的表达及意义

目的研究cyclinD1（周期素D1），p16及Rb基因表达的蛋白产物在大肠癌组织中的变化及其意义。方法应用免疫组化S-P法，在55例原发性大肠癌中检测cyclinD1，p16及Rb基因蛋白产物的表达。结果cyclinD1蛋白表达阳性率为43．64％（24／55），p16蛋白阳性表达率为47．27％，Rb蛋白阳性表达率为76．36％；cyclinD1，p16及Rb阳性表达与正常结肠直肠黏膜组织之间有非常显著性差异（P〈0．01）；Rb失活与p16表达之间呈负相关关系（P〈0．01）；Rb蛋白表达与肿瘤分化呈反比（P〈0．01）；p16蛋白表达与大肠癌淋巴结转移有关（P〈0．01）；cyclinD1，p16及Rb蛋白阳性表达率在死亡组与生存组之间有显著性差异（P〈0．05）。结论大肠癌发生过程中，存在cyclinD1，p16及Rb蛋白表达的异常，p16、Rb及cyclinD1过度表达与患者的预后密切相关，对肿瘤预后评估有重要意义。     

c-erbB-2DNA在乳癌中的相关性研究

目的　探索 c- erb B- 2在乳癌中的表达及其与流式细胞仪 DNA的相关性。方法　运用免疫组织化学检测 70例乳癌 c- erb B- 2过度表达情况 ,同时行流式细胞仪 DNA检测。结果　 c- erb B- 2过度表达率为 30 %(2 1∶ 70 ) ,其中浸润性癌中 36 .4% (2 0∶ 5 5 ) ,非浸润性癌中 6 .7% (1∶ 15 )。 c- erb B- 2与 ER、PR呈强负相关 (P<0 .0 0 1) ,与 DNA倍体呈正相关 (P=0 .0 2 1) ,与 SPF呈正相关 (P=0 .0 139) ,与年龄、淋巴结状态、肿瘤分期无明显相关性 ,与 PF间无明显相关 (P=0 .0 6 17)。结论　 c- erb B- 2、DNA相关性研究阐释了乳癌的生物学特性 ,为术后辅助治疗提供了重要线索。     

食管癌、贲门癌和胃癌DNA倍体分析及其临床意义

目的 探讨食管癌、贲门癌和胃癌患者DNA倍体的临床应用价值。方法 应用流式细胞术测定100例上消化道恶性肿瘤患者癌细胞DNA含量，并进行DNA倍体和细胞周期各时相比例的分析。结果 食管癌、贲门癌和胃癌患者的异倍体率分别为33．3％、60．0％及73．7％；S期增高率分别为36．7％、70．0％及83．6％。腺癌明显高于鳞癌（P〈0．05），随病理分级的增高，异倍体率及S期异常率也呈增高趋势。结论 三种恶性肿瘤患者DNA倍体的分析，有助于了解肿瘤细胞的增殖情况及恶性程度，可为临床治疗和判断预后提供参考依据。