神经肽P物质对放射损伤皮肤成纤维细胞分泌功能及VEGF、bFGF、PDGF表达的影响

目的 探讨神经肽P物质（SP）对放射损伤皮肤成纤维细胞分泌功能及血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）表达的影响。方法 将对数生长期皮肤成纤维细胞HFF-1按照射剂量分为未照射组（0 Gy）,照射组（2 Gy、6 Gy、12 Gy、18 Gy）,SP干预组（0 Gy+SP、2 Gy+SP、6 Gy+SP、12 Gy+SP、18 Gy+SP）。照射后24 h,酶联免疫吸附试验检测培养基及细胞裂解液Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）、Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）、降钙素基因相关肽（CGRP）、VEGF、bFGF、PDGF表达情况;实时荧光定量PCR检测细胞VEGF、bFGF、PDGF mRNA表达。结果 与0 Gy组比较,培养基Col-Ⅰ、Col-Ⅰ/Col-Ⅲ及细胞内CGRP、VEGF蛋白在各照射组均升高;bFGF、PDGF mRNA在照射组（6 Gy、12 Gy、18 Gy）升高;Col-Ⅰ在6 Gy组培养基与细胞内一致高表达;Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、Col-Ⅰ/Col-Ⅲ、CGRP在18 Gy组培养基与细胞内均一致高表达。bFGF在照射组（12...     

结肠癌VEGF、bFGF的表达及其与微血管形成的关系

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF) ,碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在结肠癌组织中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法　采用免疫组化方法检测 4 0例结肠癌患者手术切除及石蜡包埋标本中VEGF、bFGF的表达 ,并以抗CD34单克隆抗体原显示血管内皮细胞 ,根据CD34表达阳性的血管内皮计数判定微血管密度 (MVD)。结果　VEGF在 70 2 % (2 9/40 )的结肠癌组织表达 ,bFGF在 6 0 5 % (2 6 /40 )肠癌组织中表达。VEGF阳性的结肠癌组织MVD为 38 2± 1 4 /高倍视野。VEGF阴性组织中MVO为 2 2 1± 2 2 /高倍视野 ,两者差异有显著性 (P <0 0 1)。bFGF阳性肠癌组织MVD为 34 1± 1 4 /高倍视野 ,bFGF阴性肠癌组织为 30 8± 2 6 /高倍视野 ,两者差异亦有显著性 (P <0 0 1)。结论　结肠癌组织VEGF、bFGF与MVD形成有一定相关性     

促卵泡激素和血管内皮生长因子在大鼠卵巢组织冷冻自体异位移植中的保护作用

目的：探讨促卵泡激素(FSH)和血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠卵巢组织冷冻自体异位移植后对卵泡内分泌功能的影响。方法 Wistar 大鼠30只随机分为 A、B、C 组,每组10只,A 组为新鲜卵巢组织移植,B 组和 C 组卵巢组织均直接覆盖玻璃化冷冻保存2周复苏后移植,但 C 组在移植前2 d 肌内注射 FSH 和 VEGF,连续用药5 d。移植6周后计算卵泡密度;检测大鼠血清中雌二醇(E2)水平;卵巢组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况,并测定子宫重量。结果 A、B、C 组移植后卵巢组织存活率比较差异无统计学意义(P >0．05)。 A、C 组卵泡密度、血清 E2水平、PCNA 阳性率和子宫重量均高于 B 组(P <0．05),A 组和 C 组比较差异无统计学意义(P >0．05)。结论大鼠卵巢组织冷冻复苏自体异位移植前注射 FSH 和 VEGF 可以有效提高卵泡存活率,有利于恢复卵巢内分泌功能。     

蜂毒素对人肝癌BEL-7402细胞增殖和VEGF、bFGF表达的影响

目的研究蜂毒素(Melittin,Mel)对人肝癌细胞株BEL-7402增殖及VEGF、bFGF表达的影响。方法应用MTT法检测Mel对人肝癌BEL-7402细胞增殖的影响;采用ELISA法和免疫细胞化学法检测VEGF和bFGF的表达。实时荧光定量PCR检测VEGF mRNA和bFGF mRNA的变化。结果 Mel可明显抑制BEL-7402细胞的增殖活性,且具有浓度和时间依赖性。经Mel作用24、48和72 h后的IC50分别为6.80、5.47和4.87 mg·L-1。Mel(2.0、4.0、8.0mg·L-1)作用24 h后,能明显降低BEL-7402细胞上清液中VEGF及bFGF的含量(P<0.05或P<0.01),并可下调VEGF和bFGF的蛋白表达(P<0.01)。荧光定量PCR检测显示,Mel能降低BEL-7402细胞VEGF mRNA和bFGFmRNA的转录水平(P<0.01)。结论 Mel具有抑制人肝癌细胞株BEL-7402增殖的作用,并可下调促血管生成因子VEGF和bFGF的表达,有可能阻碍肿瘤血管生成。     

症状性子宫肌瘤子宫内膜中VEGF、bFGF表达的实验研究

目的 研究子宫肌瘤子宫内膜中血骨内皮生长因子(VEGF)、成纤维生长因子(bFGF)的表达,揭示症状性子宫肌瘤子宫内膜内环境的改变.方法 将子宫肌瘤65例患者根据有无月经过多的症状分为2组(A组:症状性子宫肌瘤组;B组:无症状性子宫肌瘤组),各组再根据子宫内膜病理类型进行组内分型.C组:正常子宫内膜作为对照组共12例.用免疫组化技术检测VEGF、bFGF在3组子宫内膜中表达水平.结果 VEGF及bFGF在3组子宫内膜中均有表达,VEGF、bFGF在A组子宫内膜增生期、分泌期中的表达水平高于B组及C组同型子宫内膜,差异有显著性(P＜0.05);在A组单纯性增生过长和复杂性增生过长子宫内膜中的表达水平显著低于A组及B组、C组增生期, 差异有显著性(P＜0.01).在B组与C组同型子宫内膜中的表达水平,差异无显著性 (P＞0.05).A组增生过长、增生期和分泌期子宫内膜中VEGF表达水平与bFGF表达水平呈显著正相关(r=0.829,P＜0.05;r=0.798,P＜0.01;r=0.626,P＜0.05).结论 子宫内膜内环境异常是子宫肌瘤患者产生月经过多的原因.VEGF、bFGF作为促血管生成因子发挥着重要作用.     

子宫内膜异位症患者在位与异位内膜bFGF表达的意义

近年来,子宫内膜异位症(EM)发病率呈不断上升趋势,已成为妇科最常见的疾病之一.新的研究表明,血管生成在EM发生发展中起重要作用[1].碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种重要的促血管生成因子,在EM中的研究初见报道,且结果不一致.本研究采用免疫组织化学方法,检测bFGF的表达,结合临床资料进行分析,探讨EM患者在位内膜与正常子宫内膜在血管生成方面的差异,以及bFGF在EM发生发展中的作用和临床意义.     

PTTG、bFGF和VEGF在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨垂体瘤转化基因（PTTG），碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及血管内皮生长因子（VFGF）在子宫内膜异位症中表达及意义。方法应用免疫组织化学技术，检测48例子宫内膜异位症及30例正常子宫内膜组织中PTTG、bFGF及VEGF的表达水平。结果在子宫内膜异位症中，PTTG、bFGF及VEGF的阳性表达率分别是81．2％、77．1％及66．7％，其阳性率及表达等级均明显高于正常子宫内膜组织（P〈0．01）。三者均呈正相关关系。结论子宫内膜异位症中PTTG的表达明显高于正常子宫内膜组织，而高表达的PTTG可刺激bFGF和VEGF的表达，三者共同促使子宫内膜异位症的发展。     

MVD、VEGF和bFGF与口腔颌面部肉瘤分化程度的表达研究

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与微血管密度（MVD）在口腔颌面部肉瘤（OMFS）的表达及与肉瘤分化程度的关系。方法对经病理证实OMFS患者57例切片采用免疫组化S-P法检测VEGF、bFGF、MVD的表达,对其相互间关系及与肉瘤分化程度的关系进分析。结果VEGF、bFGF、MVD在高分化肉瘤和中低分化肉瘤差异有统计学意义（P〈0.05）;VEGF、bFGF在MVD计数〈28和MVD计数≥28中阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论MVD、bFGF和VEGF表达与OMFS组织分化程度有关,对于OMFS的恶性程度和预后具有重要参考价值;bFGF和VEGF阳性表达率与MVD相关,预示通过抑制或减少bFGF和VEGF,可降低肿瘤MVD。     

外源性bFGF、VEGF对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖分化影响的实验研究

目的制备大鼠脊髓损伤模型,研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)联合移植对内源性神经干细胞(ENSCs)是否具有促增殖分化作用。方法成年Wistar大鼠56只,随机分成四组:A组为生理盐水组(n=14);B组为bFGF组(n=14);C组为VEGF组(n=14);D组为bFGF、VEGF组(n=14)。用Allen法在T10节段制备大鼠脊髓损伤模型,损伤后立即分别给予生理盐水、bFGF、VEGF、bFGF和VEGF。术后各时间点BBB评分系统监测大鼠运动功能的恢复,并在术后21d取材,处死前24h腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),取损伤部位近远端各5mm脊髓组织,行HE染色,免疫组织化学法检测Brdu、巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况。结果 (1)损伤后21d,bFGF、VEGF合用治疗组BBB高于其它三组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)损伤后21d时,bFGF、VEGF治疗组组织形态学基本接近正常脊髓组织。(3)免疫组织化学结果:损伤后21d时,bFGF、VEGF治疗组,神经干细胞数量和神经元数量明显高于其它组(P<0.05)。结论联合移植外源性bFGF、VEGF对ENSCs增殖和向神经元方向分化具有促进作用,且二者具有协同作用。     

胰岛素对RF/6A细胞VEGF受体表达的影响

目的:探讨胰岛素对视网膜血管内皮细胞RF/6A血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)的表达及血管新生的影响.方法:分别用0、1和100 nmol/L的人胰岛素处理RF/6A细胞,采用MTS实验、细胞迁移实验、管腔形成实验分别检测胰岛素对RF/6A细胞增殖、迁移、管腔形成等生物学功能,RT-PCR、Western blot技术检测VEGFR的表达、磷酸化活性.结果:胰岛素可促进RF/6A的增殖、迁移、管腔形成(P＜0.05或P＜0.01),促进VEGFR2 mRNA的表达和VEGFR2蛋白的磷酸化(P＜0.05或P＜0.01).而对VEGFR1 mRNA表达的影响差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胰岛素可经VEGFR2信号促进RF/6A细胞血管新生,而VEGFR1信号可能不参与胰岛素诱导的RF/6A细胞血管新生.     

胎儿卵巢组织移植治疗卵巢性闭经的研究

目的:评价胎儿卵巢组织移植治疗卵巢性闭经的价值。方法:收集孕20周~24周治疗性引产女性胎儿标本,获取卵巢,经程序冷冻后保存,使用前快速复温,加入RPM1640培养液进行组织培养。2003年3月至2003年8月共有3例自愿受试者在我院接受了胎儿卵巢组织移植术,其中1例为卵巢功能不良,1例为先天性卵巢发育不全,另1例为双侧卵巢切除术。结果:胎儿卵巢组织冻存后快速复温,伊红染料排斥试验检测活细胞率可达到84.5%;组织培养后卵原细胞有成熟表现,部分生长为初级卵泡。卵巢组织移植后,2例有自体卵巢患者有周期性月经来潮,其中1例术后第4个月可观察到规则排卵。1例双侧卵巢切除患者潮热症状改善,雌激素水平上升,但不能达到生育年龄水平,月经周期未能恢复。结论:胎儿卵巢组织移植可有效的治疗卵巢内分泌功能不足。     

油菜花粉通过提高bFGF和VEGF水平改善小鼠雄激素源性脱发

目的 探索油菜花粉对小鼠雄激素源性脱发的改善作用并研究其作用机制。方法 设立空白组、模型组、阳性药组及给药组,通过脱毛后涂抹0.2%睾酮诱导建立小鼠雄激素源性脱发模型,采用市售5%米诺地尔为阳性药物,0.4 g·mL^-1油菜花粉油溶液为给药组,分别观察小鼠毛发生长速度。通过扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、病理组织HE染色观察小鼠毛发质量及毛囊情况。使用免疫荧光染色、免疫印迹试验检测皮肤中VEGF、bFGF水平,ELISA检测血清性激素及活性氧水平。结果 与模型组相比,油菜花粉能显著促进小鼠毛发生长,且能够改善小鼠毛发毛鳞片的状态。机制探究试验表明油菜花粉不能通过调节小鼠激素水平或抗氧化应激起到促进毛发再生作用,但油菜花粉可以提高造模部位皮肤血管生成相关因子bFGF和VEGF的表达。结论 油菜花粉可以促进雄激素源性脱发小鼠毛发再生,其作用机制可能是通过提高bFGF和VEGF水平,促进毛囊周围血管再生从而达到促进毛发再生作用。     

卵巢肿瘤血清VEGF水平和肿瘤组织中MVD的检测

目的:探讨卵巢肿瘤血清血管内皮生长因子(VEGF)水平和肿瘤组织中微血管密度(MVD)的表达与其临床病理的关系.方法:对45例卵巢恶性肿瘤、18例卵巢良性肿瘤及12例正常卵巢对照采用ELISA法检测血清VEGF的水平以及LAB免疫组织化学法测定其MVD.结果:①恶性肿瘤患者血清VEGF水平明显高于良性肿瘤和正常卵巢组织(P＜0.05);上皮性癌中晚期癌(Ⅲ期、Ⅳ期)的血清VEGF水平明显高于早期癌(Ⅰ期、Ⅱ期);②恶性肿瘤卵巢组织中MVD明显高于良性肿瘤和正常卵巢组织(P＜0.05).结论:VEGF和MVD可能参与卵巢恶性肿瘤的演化过程,对判断卵巢肿瘤良恶性程度有一定临床意义;血清VEGF可能成为上皮性卵巢癌一种新的肿瘤标记物.     

bFGF和VEGF在肝细胞癌血管生成中协同作用探讨

目的探讨bFGF和VEGF在肝细胞癌血管生成中有无协同作用。方法应用免疫组化SABC法,检测41例肝细胞癌(HCC)手术切除标本。结果bFGF、VEGF均与HCC血管生成有关(P<0.01,P<0.01)。bFGF、VEGF双阳性组、单阳性组及双阴性组MVD分别为(26.58±8.30)、(18.19±7.72)、(11.00±6.57),两两比较,双阳性组与单阳性、双阴性组间有显著性差异(P<0.01,P<0.001),而单阳性组与双阴性组间无显著性差异(P>0.05)。结论bFGF、VEGF在HCC血管生成中有协同作用。     

酮康唑对卵巢过度刺激综合征模型大鼠的血管内皮生长因子及肿瘤坏死因子的影响研究

目的:观察酮康唑对卵巢过度刺激综合征(OHSS)模型大鼠血管内皮生长因子(VEGF)及肿瘤坏死因子(TNFα、TNFβ)的影响。方法:将OHSS模型大鼠随机分为酮康唑治疗组、白蛋白阳性对照组、阴性对照组(生理盐水)及刺激组(绒毛膜促性腺激素)。各组给予相应药物作用后切取卵巢,采用免疫组织化学染色法观察VEGF及TNFα、TNFβ在卵巢中的表达并进行比较。结果:在4组卵巢细胞胞浆内VEGF均呈阳性,治疗组及阳性对照组VEGF表达显著低于阴性对照组和刺激组(P<0.05);治疗组与阳性对照组比较无显著性差异(P>0.05)。4组中TNFα、TNFβ表达无显著性差异(P>0.01或P>0.05)。结论:酮康唑可能通过降低VEGF水平而发挥治疗OHSS的作用。     

孕激素对在位内膜构建子宫内膜异位症裸鼠的影响

目的：比较雌激素（E组）与雌孕激素（E＋P组）两种体外培养条件对在位内膜构建裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型的影响。方法：将EMs患者的在位内膜碎片加入到含10％小牛血清的去酚红DMEM／Ham’s F-12培养液中，同时E组加入雌激素（10nmol／L），E＋P组加入孕激素（100nmol／L）及雌激素（10nmol／L）分别培养24h后接种于裸鼠腹腔。结果：E＋P组种植成功率高于E组，与E组比较病灶数目有增多趋势（Z=2．21，P=0．05），病灶直径减小（Z=2．24，P〈0．05）。免疫组化显示E＋P组培养后在位内膜腺体的表达无显著性改变，但PR、Ki-67表达有减弱趋势；成模的裸鼠异位灶腺体中Ki-67的表达也降低（Z=2．27，P〈0．05），PR有降低趋势。异位灶间质中微血管密度显著减低（Z=2．73，P〈0．05）。雌孕激素培养后获得的异位灶间质细胞增生，异位灶与周围组织接合更为紧密。结论：加入孕激素的体外培养条件不影响在位内膜成模，但血管生成、细胞增殖并未加强。     

Effects of Fecal Microbiota Transplantation on Composition in Mice with CKD

Background: Chronic kidney disease (CKD) is a renal disorder characterized by the accumulation of uremic toxins with limited strategies to reduce their concentrations. A large amount of data supports the pivotal role of intestinal microbiota in CKD complications and as a major source of uremic toxins production. Here, we explored whether fecal microbiota transplantation (FMT) could be attenuated in metabolic complication and uremic toxin accumulation in mice with CKD. Methods: Kidney failure was chemically induced by a diet containing 0.25% (w/w) of adenine for four weeks. Mice were randomized into three groups: control, CKD and CKD + FMT groups. After four weeks, CKD mice underwent fecal microbiota transplantation (FMT) from healthy mice or phosphate buffered saline as control. The gut microbiota structure, uremic toxins plasmatic concentrations, and metabolic profiles were explored three weeks after transplantation. Results: Associated with the increase of alpha diversity, we observed a noticeable improvement of gut microbiota disturbance, after FMT treatment. FMT further decreased p-cresyl sulfate accumulation and improved glucose tolerance. There was no change in kidney function. Conclusions: These data indicate that FMT limited the accumulation of uremic toxins issued from intestinal cresol pathway by a beneficial effect on gut microbiota diversity. Further studies are needed to investigate the FMT efficiency, the timing and feces amount for the transplantation before, to become a therapeutic option in CKD patients.     

左归丸对化疗性卵巢早衰小鼠卵巢组织中缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:研究左归丸对环磷酰胺(CTX)致卵巢早衰(POF)小鼠卵巢组织中缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨左归丸治疗化疗性POF的作用机制。方法:将72只小鼠按体质量随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇片组(阳性对照,0.000 13 g/kg)和左归丸低、中、高剂量组(13.65、40.95、122.85 g/kg),每组10只。除空白组外,其余各组小鼠均ip CTX复制POF模型,每天1次,连续20 d;并同时ig相应药物,每天1次,连续30 d。末次给药2h后,分别采用反转录-聚合酶链反应法和Western blot法检测卵巢组织中Cx43 mRNA和蛋白表达;并采用免疫组化法检测卵巢组织中Cx43蛋白的分布。结果:与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织中Cx43 mRNA及蛋白表达均明显减弱,卵泡与颗粒细胞中Cx43蛋白的分布明显减少(P<0.01);与模型组比较,戊酸雌二醇片组和左归丸中、高剂量组小鼠卵巢组织中Cx43 mRNA及蛋白表达均明显增强,卵泡与颗粒细胞中Cx43蛋白的分布明显增加(P<0.01)。结论:左归丸可上调CTX致POF小鼠卵巢组织中Cx43 mRNA及蛋白表达,增加Cx43在卵泡及颗粒细胞间的分布,改善缝隙连接功能,这可能是其治疗POF的作用机制之一。