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中药何首乌总基因组DNA的提取 总被引:1,自引:2,他引:1
目的为获得高质量的何首乌总基因组DNA。方法采用CTAB法提取,对其提取方法进行改进。结果用改进的方法提取的样品DNA的OD260/OD280值在1.630~1.955之间,琼脂糖凝胶上主带清晰、降解较少,能完全被限制性内切酶EcoRⅠ和M seⅠ完全酶切,得到合适的AFLP指纹样式。结论改良的CTAB法提示提取何首乌DNA的理想方法,适合AFLP-PCR反应和其他分子生物学应用。 相似文献
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黄连药材DNA提取及RAPD反应体系的优化 总被引:8,自引:0,他引:8
目的探索黄连药材DNA的提取并对其RAPD反应体系进行优化。方法采用目前较为流行的苯酚法、CTAB法、高盐低pH值法,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确定黄连药材基因组DNA提取的最佳方法。结果CTAB法为黄连药材基因组DNA提取的最佳方法,建立了适合黄连药材的RAPD反应体系:25μL体系中内含1×PCRbuffer、2mmol/LMg2 、100~150μmol/LdNTP、20ng引物、40ng模板、1UTaq酶。结论CTAB法及黄连药材的RAPD反应体系可以用于黄连药材的RAPD分析。 相似文献
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目的 建立茴香的随机扩增多态DNA(RAPD)最佳反应体系.方法 正交设计及方差分析应用于建立RAPD反应体系的研究.结果 茴香的RAPD最佳反应体系为25μl的反应体系中,含10 × Buffer 2.5μl,2.0 m MdNTPs 3.0μl,2.0 U/μlTaq酶1.0 μl,2.0 μmol/L随机引物4.0 μl,30.0 ng/μl模板DNA30 ng,ddH2O 13.5μl.结论 正交设计及方差分析适用于茴香RAPD反应体系的建立. 相似文献
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目的:优化何首乌的半仿生提取工艺。方法:以二苯乙烯苷提取率为评价指标,在提取温度、提取次数,提取溶剂相同条件下,考察pH值、提取时间的影响,选用L9(34)表进行正交实验,确定最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺条件为:第1煎液pH为6,第2煎液pH为10,提取时间为2h。结论:何首乌最佳半仿生提取工艺二苯乙烯苷提取率高,方法简便,可为何首乌的提取提供参考参考。 相似文献
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目的:为蒙药小儿清肺八味新剂型的研制寻找最佳提取工艺.方法:采用L9(3^4)正交设计优取条件,以分光光度法测定各样品中主药红花的有效成分红花黄色素的含量,通过统计学分析确定蒙药小儿清肺八味的最佳提取工艺条件.结果:蒙药小儿清肺八味的最佳提取工艺条件为A2B3C3D2.即药材加入6倍量50%乙醇提取2次,每次1小时.结论:本实验为蒙药新剂型的研制提供了科学的依据. 相似文献
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半夏基因组DNA的提取及鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨不同DNA提取方法对半夏DNA质量及RAPD-PCR标记结果的影响。方法对用不同方法提取的DNA进行电泳、紫外吸收A260/A280和RAPD-PCR分析。结果不同方法提取的DNA质量和产率差异不显著,对RAPD结果无影响。结论半夏在DNA提取前加入氯仿对材料预处理,可获得较高质量的DNA进行PCR扩增。 相似文献
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目的:为蒙药前列畅新剂型的研制寻找最佳提取工艺。方法:采用L9(34)正交设计优化提取条件,以HPLC法测定各样品中阿拉塔-查根-其其格中有效成分绿原酸的含量,通过统计学分析确定蒙药前列畅的最佳提取工艺条件。结果:蒙药前列畅的最佳提取工艺条件为A3B1C2D3。即药材加入8倍量60%乙醇提取3次,每次1.5小时。结论:本实验为蒙药新剂型的研制提供了科学的依据。 相似文献
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正交设计法优化野菊花多糖的提取工艺 总被引:4,自引:3,他引:1
目的:优化野菊花多糖的提取工艺。方法:采用单因素试验和L9(34)正交试验法考察了提取时间、提取温度和料液比对野菊花多糖得率的影响。结果:影响野菊花多糖得率的主次因素为提取温度、提取时间及料液比。最佳提取工艺条件为提取温度90℃,料液比1∶20,提取时间为4 h。结论:在此最佳工艺条件下野菊花多糖得率为3.32%。 相似文献
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青天葵总DNA的提取与随机扩增多态性DNA反应条件的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立并优化青天葵样品总DNA提取方法及随机扩增多态性DNA(RAPD)反应.方法 采用改进的高盐低pH法提取青天葵鲜叶和药材样品,通过正交设计和均匀设计,改变反应体系和扩增程序优化随机扩增多态性DNA.结果 使用高盐低pH值法可较好地提取新鲜叶片的DNA,药材叶片含杂质较多,但都能用于RAPD.反应体系为:缓冲液2.0 μ1,0.5 μl dNTP(各2.5 mmol·L-1),0.8 μl Mg2+(25 mmol·L-1),0.5 μl引物(20 pmol·μl-1),0.2 μl Taq酶(5U·μ1-1),1 μl DNA(50 ng),1μl BSA(20 mg·ml-1),加双倍蒸馏水至20 μl.扩增程序为:94 ℃预变性3 min;94 ℃变性30 s,40 ℃退火30 s,72 ℃延伸60 s,40个循环;72℃延伸5 min.结论 建立并优化了的青天葵样品总DNA提取方法及RAPD反应体系. 相似文献
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正交设计研究文冠木总黄酮提取工艺 总被引:9,自引:0,他引:9
采用正交试验优选了文冠木总黄酮提取的最佳工艺,结果表明,最佳提取工艺组为A1B1C3D4,即加药材4倍量的45%乙醇,浸泡12h,回流提取3次,每次2h。该工艺省时,且得率较高94.53%。 相似文献
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目的:优选何首乌中二苯乙烯苷的提取工艺。方法:利用紫外分光光度法测定何首乌中二苯乙烯苷,运用正交试验设计,以二苯乙烯苷得率为考察指标,筛选最佳提取工艺。结果:何首乌中二苯乙烯苷的最佳提取工艺参数为:温度70℃,提取时间为80min,料液比1:7,乙醇浓度40%。 相似文献
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目的为心脑消栓颗粒剂的研制寻找提取工艺。方法采用L9(3^4)正交设计优化提取条件。高效液相色谱法测定样品中栀子苷的含量,通过统计学分析确定心脏消栓颗粒的最佳提取工艺条件。结果心脑消栓颗粒的最佳提取工艺条件为A2B3C3D1。即药材加入8倍量水浸泡12h提取3次,每次1h。结论本实验为该制剂的研制提供了科学的依据。 相似文献