中药何首乌总基因组DNA的提取

目的为获得高质量的何首乌总基因组DNA。方法采用CTAB法提取,对其提取方法进行改进。结果用改进的方法提取的样品DNA的OD260/OD280值在1.630~1.955之间,琼脂糖凝胶上主带清晰、降解较少,能完全被限制性内切酶EcoRⅠ和M seⅠ完全酶切,得到合适的AFLP指纹样式。结论改良的CTAB法提示提取何首乌DNA的理想方法,适合AFLP-PCR反应和其他分子生物学应用。     

正交设计优化制何首乌多糖提取工艺

目的：优化制何首乌多糖的提取工艺。方法：采用正交实验设计,以多糖的含量为评价指标,优化制何首乌多糖的提取工艺。结果：确定最佳提取工艺为：提取温度90℃、提取时间60min、提取次数3次、提取时的料液比1∶15。结论：提取工艺条件合理可行。     

黄连药材DNA提取及RAPD反应体系的优化

目的探索黄连药材DNA的提取并对其RAPD反应体系进行优化。方法采用目前较为流行的苯酚法、CTAB法、高盐低pH值法,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确定黄连药材基因组DNA提取的最佳方法。结果CTAB法为黄连药材基因组DNA提取的最佳方法,建立了适合黄连药材的RAPD反应体系:25μL体系中内含1×PCRbuffer、2mmol/LMg2 、100~150μmol/LdNTP、20ng引物、40ng模板、1UTaq酶。结论CTAB法及黄连药材的RAPD反应体系可以用于黄连药材的RAPD分析。     

正交设计在何首乌组织培养中的应用

用正交设计法考察了４种激素对何首乌嫩茎,叶诱导愈伤组织产生的影响。方差分析结果显示：２,４－Ｄ、ＩＢＡ作用极显著,６－ＢＡ作用显著,ＮＡＡ作用不显著,它们作用大小依次为：２,４－Ｄ〉ＩＢＡ〉６－ＢＡ〉ＮＡＡ,诱导何首乌愈伤组织产生的最佳激素配比为：ＭＳ＋２,４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１＋ＩＢＡ０．５。     

正交设计优化茴香随机扩增多态DNA反应体系的研究

目的 建立茴香的随机扩增多态DNA(RAPD)最佳反应体系.方法 正交设计及方差分析应用于建立RAPD反应体系的研究.结果 茴香的RAPD最佳反应体系为25μl的反应体系中,含10 × Buffer 2.5μl,2.0 m MdNTPs 3.0μl,2.0 U/μlTaq酶1.0 μl,2.0 μmol/L随机引物4.0 μl,30.0 ng/μl模板DNA30 ng,ddH2O 13.5μl.结论 正交设计及方差分析适用于茴香RAPD反应体系的建立.     

何首乌的半仿生提取工艺研究

目的：优化何首乌的半仿生提取工艺。方法：以二苯乙烯苷提取率为评价指标,在提取温度、提取次数,提取溶剂相同条件下,考察pH值、提取时间的影响,选用L9（34）表进行正交实验,确定最佳提取工艺。结果：最佳提取工艺条件为：第1煎液pH为6,第2煎液pH为10,提取时间为2h。结论：何首乌最佳半仿生提取工艺二苯乙烯苷提取率高,方法简便,可为何首乌的提取提供参考参考。     

正交设计优化逍遥软胶囊提取工艺

目的:优选逍遥软胶囊的提取工艺。方法:采用正交实验,以挥发油量和总皂苷含量为指标优选合理提取工艺。结果:柴胡、当归、白术、薄荷挥发油提取最佳工艺为药材加5倍水量,浸泡3h,提取5h。其他药味最佳提取工艺为药材加6倍水量,煎煮3次,每次0.5h。结论:工艺方法简单、稳定可行。     

正交设计优化小儿清肺八味最佳提取工艺

目的:为蒙药小儿清肺八味新剂型的研制寻找最佳提取工艺.方法:采用L9(3^4)正交设计优取条件,以分光光度法测定各样品中主药红花的有效成分红花黄色素的含量,通过统计学分析确定蒙药小儿清肺八味的最佳提取工艺条件.结果:蒙药小儿清肺八味的最佳提取工艺条件为A2B3C3D2.即药材加入6倍量50%乙醇提取2次,每次1小时.结论:本实验为蒙药新剂型的研制提供了科学的依据.     

半夏基因组DNA的提取及鉴定

目的探讨不同DNA提取方法对半夏DNA质量及RAPD-PCR标记结果的影响。方法对用不同方法提取的DNA进行电泳、紫外吸收A260/A280和RAPD-PCR分析。结果不同方法提取的DNA质量和产率差异不显著,对RAPD结果无影响。结论半夏在DNA提取前加入氯仿对材料预处理,可获得较高质量的DNA进行PCR扩增。     

正交设计优化蒙药前列畅最佳提取工艺

目的:为蒙药前列畅新剂型的研制寻找最佳提取工艺。方法:采用L9(34)正交设计优化提取条件,以HPLC法测定各样品中阿拉塔-查根-其其格中有效成分绿原酸的含量,通过统计学分析确定蒙药前列畅的最佳提取工艺条件。结果:蒙药前列畅的最佳提取工艺条件为A3B1C2D3。即药材加入8倍量60%乙醇提取3次,每次1.5小时。结论:本实验为蒙药新剂型的研制提供了科学的依据。     

正交设计优化桐花树多糖提取工艺

目的 优化桐花树多糖的提取工艺.方法 用正交实验法筛选最佳提取工艺,并用苯酚-硫酸法测定桐花树多糖量.结果 对桐花树多糖量影响因素的大小依次是提取温度、料液比、提取时间.结论 桐花树多糖最佳提取工艺为浸提温度90℃、料液比1:30、浸提时间3 h.     

中药肉桂基因组DNA的提取

目的:为获得能用于中药肉桂RAPD分析及其它分子生物学研究的高质量DNA,研究和改进几种DNA提取法.方法:先将样品与PVP和VitC共研碎,然后用Tris-HCl缓冲液洗涤样品,沉淀用改进的CTAB法、高盐低pH法和尿素法来提取DNA.通过电泳、紫外吸收A260/A280和PCR扩增检测所得DNA的产量和质量.结果:改进的CTAB法和高盐低pH法都能获得高质量的DNA进行PCR扩增,其中以改进的CTAB法效果最好.     

正交设计法优化野菊花多糖的提取工艺

目的:优化野菊花多糖的提取工艺。方法:采用单因素试验和L9(34)正交试验法考察了提取时间、提取温度和料液比对野菊花多糖得率的影响。结果:影响野菊花多糖得率的主次因素为提取温度、提取时间及料液比。最佳提取工艺条件为提取温度90℃,料液比1∶20,提取时间为4 h。结论:在此最佳工艺条件下野菊花多糖得率为3.32%。     

青天葵总DNA的提取与随机扩增多态性DNA反应条件的建立

目的 建立并优化青天葵样品总DNA提取方法及随机扩增多态性DNA(RAPD)反应.方法 采用改进的高盐低pH法提取青天葵鲜叶和药材样品,通过正交设计和均匀设计,改变反应体系和扩增程序优化随机扩增多态性DNA.结果 使用高盐低pH值法可较好地提取新鲜叶片的DNA,药材叶片含杂质较多,但都能用于RAPD.反应体系为:缓冲液2.0 μ1,0.5 μl dNTP(各2.5 mmol·L-1),0.8 μl Mg2+(25 mmol·L-1),0.5 μl引物(20 pmol·μl-1),0.2 μl Taq酶(5U·μ1-1),1 μl DNA(50 ng),1μl BSA(20 mg·ml-1),加双倍蒸馏水至20 μl.扩增程序为:94 ℃预变性3 min;94 ℃变性30 s,40 ℃退火30 s,72 ℃延伸60 s,40个循环;72℃延伸5 min.结论 建立并优化了的青天葵样品总DNA提取方法及RAPD反应体系.     

正交设计优化野菊花总黄酮的超声提取工艺

优化超声提取野菊花总黄酮的最佳工艺条件。采用正交设计试验,以野菊花总黄酮得率为指标,对乙醇浓度、超声温度、超声时间、料液比等因素进行优化。结果表明,各因素对总黄酮提取率的影响大小依次为:超声时间>超声温度>乙醇浓度>料液比。最佳工艺条件为:采用质量分数60%乙醇,料液比1∶30(g/mL),在60℃下,超声提取40min,在此最佳条件下,总黄酮得率为4.60%。     

正交设计研究文冠木总黄酮提取工艺

采用正交试验优选了文冠木总黄酮提取的最佳工艺，结果表明，最佳提取工艺组为Ａ１Ｂ１Ｃ３Ｄ４，即加药材４倍量的４５％乙醇，浸泡１２ｈ，回流提取３次，每次２ｈ。该工艺省时，且得率较高９４．５３％。     

何首乌二苯乙烯苷的提取工艺研究

目的:优选何首乌中二苯乙烯苷的提取工艺。方法:利用紫外分光光度法测定何首乌中二苯乙烯苷,运用正交试验设计,以二苯乙烯苷得率为考察指标,筛选最佳提取工艺。结果:何首乌中二苯乙烯苷的最佳提取工艺参数为:温度70℃,提取时间为80min,料液比1:7,乙醇浓度40%。     

正交设计优选烫伤喷雾剂提取工艺

目的：为烫伤喷雾剂剂型改革研究优选提取工艺。方法：以小檗碱、总生物碱、干浸膏得率为指标，采用正交实验优选烫伤喷雾剂提取工艺条件。结果：确定其工艺条件为：A3B3C3D2，即溶剂为8倍量95％乙醇，浸提时间为40min／次，提取次数为3次。结论：该工艺提取的有效成分含量高。     

正交设计优化心脑消栓颗粒最佳提取工艺

目的为心脑消栓颗粒剂的研制寻找提取工艺。方法采用L9（3^4）正交设计优化提取条件。高效液相色谱法测定样品中栀子苷的含量，通过统计学分析确定心脏消栓颗粒的最佳提取工艺条件。结果心脑消栓颗粒的最佳提取工艺条件为A2B3C3D1。即药材加入8倍量水浸泡12h提取3次，每次1h。结论本实验为该制剂的研制提供了科学的依据。