DNA探针板杂交法检测临床标本中结核杆菌的应用

目的：在酶标板上进行ＤＮＡ探针杂交,评价其在检测临床标本中结核杆菌的应用价值。方法：收集７１份结核性标本和３２份非结核性标本,进行ＤＮＡ扩增,把扩增产物分别进行电泳和ＤＮＡ探针杂交,比较其结果。结果：７１份结核性标本电泳法阳性率为４５１％,ＤＮＡ探针法阳性率为６９０％;３２份非结核性标本二者均为阴性。结论：ＤＮＡ探针杂交可提高临床标本中结核杆菌的阳性检出率,是结核病早期诊断的一种新方法。     

聚合酶链反应结合DNA探针杂交在结核杆菌检测中的应用

应用PCR和Southern转移、光敏生物素标记DNA探针杂交技术进行了结核杆菌检测的应用研究。实验结果表明PCR结合探针杂交可将PCR敏感性提高100倍,但不影响其特异性。106例结核性痰标本PCR检测阳性率为46.2％,结合探针杂交达76.4％,涂片阴性的标本差异尤为明显,因而显著提高了结核阳性诊断变率。21例非结核性痰标本PCR和探针杂交未发现假阳性。对临床可疑而PCR阴性标本有必要合用DNA探针杂交。     

地高辛配基标记HBV DNA探针的制备和应用研究

应用随机引物法制备地高辛配基标记的 HBV DNA 探针,其检测灵敏度为0.1pg;以~(32)P-HBV DNA 探针为金标准,地高辛配基标记探针的敏感性、特异性和准确度分别为96.2％、98.7％和98.1％;在一20℃贮存,地高辛配基标记探针的灵敏度在12月内不变;探针回收重复使用4次效果不受影响;应用于斑点杂交检测1400余份血清标本及原位杂交检测200余份肝组织标本均取得满意效果。     

PCR法快速制作地高辛配基标记的人型结核杆菌DNA探针

该文探索了用PCR法快速制作地高辛配基标记的DNA探针的方法．证明可靠、安全、快速。对结核病防治而言，找到了一种优于结核培养的查菌方法；对其他需DNA探针的情况而言，该文探索到一种快速制作法。     

结核杆菌DNA聚合酶链反应技术的应用

结核杆菌ＤＮＡ聚合酶链反应技术的应用李秀珍莫英曼（贵阳医学院附院肺内科贵阳５５０００４）结核病是长期以来危害人类健康的常见病，以往结核病的实验室检查依赖于涂片和培养，现在由于免疫学和分子生物学在医学领域中的应用，使结核病诊断的准确性有了很大程度的提高...     

结核杆菌检测基因芯片的制备研究

目的 建立结核杆菌检测基因芯片的制备技术。方法 制备和标记靶基因，用点样仪将靶基因点于玻片介质上，并给点样后处理制成基因芯片，用扫描仪测定处理前后芯片上荧光强度的变化。计算DNA固定率，同时测定和比较两种不同破片，不同点样液和三种不同点样后处理方法的DNA固定率。结果 制备结核杆菌检测基因芯片，用醛基修饰玻片作为介质，用DMSO溶液作为点样液，点样后芯片处理以水合1小时再干燥30分钟为佳。结论 本研究所建立的结核杆菌检测基因芯片制备技术具有较高的效率和可靠的实用性能。     

人恶性疟原虫DNA探针的研究和现场应用概况

一、前言人类疟疾的诊断,50年代以前一般应用病人血涂片染色镜检法。60～70年代开始血清学方法的研究。1975年Grunster and Hogness首次建立Colong hybridization方法之后,DNA探针杂交法开始广泛应用于分子生物学、遗传学、医学方面的研究以及遗传病的传染病诊断和流行病学调查等。其原理是:利用已知标记的单链(变性)DNA为探针与被检样品中互     

结核杆菌检测基因芯片的制备研究

目的　建立结核杆菌检测基因芯片的制备技术。方法　制备和标记靶基因 ,用点样仪将靶基因点于玻片介质上 ,并经点样后处理制成基因芯片 ,用扫描仪测定处理前后芯片上荧光强度的变化 ,计算 DNA固定率 ,同时测定和比较两种不同玻片、不同点样液和三种不同点样后处理方法的 DNA固定率。结果　制备结核杆菌检测基因芯片 ,用醛基修饰玻片作为介质 ,用 DMSO溶液作为点样液 ,点样后芯片处理以水合 1小时再干燥 30分钟为佳。结论　本研究所建立的结核杆菌检测基因芯片制备技术具有较高的效率和可靠的实用性能     

结核分枝杆菌DNA两种提取方法比较

目的 :比较能够满足内切酶分析的结核分枝杆菌染色体DNA提取的两种方法 ,并结合实验室条件加以改进。方法 :称取结核分枝杆菌培养物 ,灭活后以溶菌酶和蛋白酶K消化后 ,分别以CTAB/NaCl和酚 /氯仿 /异戊醇 (2 5∶2 4∶1)抽提 ,无水乙醇沉淀 ,紫外分光光度计测定DNA的含量。结果 :酚抽提法和CTAB抽提法提取的基因组DNA的得率分别为0 47± 0 0 71,0 41± 0 10 (‰ ,W/W )。A2 60 /A2 80 的值分别为 1 83± 0 12 ,1 89± 0 0 72。结论 :用CTAB/NaCl抽提结核分枝杆菌基因组DNA均能满足内切酶及杂交操作的要求 ,酚抽提法得率稍高 ,但无统计学意义。CTAB法污染少 ,省时省材 ,可代替酚抽提DNA。     

结核分枝杆菌蛋白Rv0315的克隆表达及其抗原性研究

目的评价结核分枝杆菌重组蛋白Rv0315在结核病血清学诊断中的价值。方法采用常规分子克隆方法获得重组Rv0315蛋白,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测84份确诊结核病人血清和48份健康人血清中相应的抗结核抗体水平,并与结核分泌蛋白ESAT-6的检测结果进行比较。结果成功构建了重组蛋白Rv0315,其在E.coli BL21plysS（DE3）中主要以可溶性形式表达,分子量（30.3kDa）与预期相符,ELISA血清学活性评估显示其特异性和敏感性分别为94.0%（45/48）和35.7%（30/84）。结论重组蛋白Rv0315有望成为新的结核病血清学诊断候选抗原。     

结核分枝杆菌胞浆蛋白质抗原的制备与检测

将结核分枝杆菌（M．tuberculosis）H37Ra株苏通培养基培养物化学灭活，低温高速离心，超声波裂解，SephadexG－200柱层析，获得3个峰，制备了3种胞浆蛋白质抗原。经与结核分枝杆菌阳性参比血清、阴性参比血清及各种分枝杆菌高免兔血清的ELISA检测，并与PPD、聚合OT及菌体PP等抗原比较，结果表明：第二峰的胞浆蛋白质抗原的特异性最好。     

用生物发光技术对结核杆菌H_(37)Ra株进行快速药物敏感试验的研究

用生物发光技术对结核杆菌H_(37)Ra株进行快速药物敏感试验的研究。该法系将在改良罗氏培养基中培养3周的结核杆菌H_(37)Ra株经适当稀释后,移种于0.1％吐温80-综合苏通液体培养基中(加与未加抗生素),37℃培养4～5d,然后测定细菌ATP提取物BL(305)值。通过计算细菌生长抑制率,了解细菌对药物的敏感性.本法快速(4～5d),易于操作。     

笑肌、颧大肌、颧小肌的测量

目的探讨与笑相关的笑肌、颧大肌、颧小肌的解剖学规律 ,为颜面部整形美容提供解剖学依据。方法选取正常成年尸体 3 0例 ,解剖观察笑肌、颧大肌、颧小肌的形态 ,并测量其长度与夹角。结果颧大肌起自颧骨前面 ,止于口角皮肤 ,颧小肌起自颧骨 ,止于鼻唇沟下部附近皮肤 ,笑肌起自腮腺咬肌筋膜 ,止于口角皮肤 ;颧大肌、颧小肌、笑肌长依次为 5 5 .2± 2 .3mm、5 2 .3± 1 .8mm、5 0 .1± 1 .6mm ;笑肌、颧大肌、颧小肌长径与口裂间以及笑肌与颧大肌间的夹角依次为 8.9± 1 .1、3 2 .6± 1 .8、40 .1± 2 .5、2 4.6±2 .7度。结论为临床颜面部整形美容提供了解剖学依据     

结核分枝杆菌耐多药研究进展

近年来流行病学调查资料显示,我国的耐多药结核分枝杆菌形势日趋严峻,总耐药率为8.32%,其中初治涂阳肺结核为5.71%,高于世界卫生组织（WHO）估算的5.0%,复治涂阳肺结核为25.64%,接近WHO估算的26%,已成为全球耐多药结核分枝杆菌的高负担国之一。对此,有效地控制耐多药结核病的发生,关注结核病的管理和规范化治疗将成为推动医学领域革命性变化的动力。     

I-1-P反义ODN-壳聚糖纳米粒子的制备及对结核杆菌生长的抑制作用

目的 探讨应用纳米技术抑制分枝结核杆菌生长的可行性.方法 用复凝聚法制备1-1-P反义ODN-壳聚糖纳米粒子.在分枝结核杆菌菌株中分别加入不同量的自由ODN和壳聚糖-ODN纳米粒子,共同培养6周后观测细菌的生长情况.结果 制得的纳米粒子由(35.6±0.9)%的ODN和(64.4±0.9)%的壳聚糖组成.壳聚糖-ODN纳米粒子浓度为4μmol/L时.其对分枝结核杆菌的抑制作用为(2.8±0.1)CFU/ml.而自由ODN在浓度低于10μmol/L时,不能有效抑制分枝结核杆菌的生长.结论 壳聚糖-ODN纳米粒子比自由ODN对分枝结核杆菌的生长具有更强的抑制作用.     

结核菌耐药性检测方法的规范与空间质评

初步探索适合我国国情的结核菌耐药性检测的室间质量评价办法，促进其规范化、标准化。方 法：以ＷＨＯ结核菌耐药性检测室间评价方案为依据，制定我省该项工作的室间质量评价方案，选定４个基层实 验室为试点初步实施。结果：河南省参加 ＷＨＯ耐药监测室间质控正确率平均为８９％，本省质控试点的４个实验 室三批结果显示，正确率依次为６１．４％、７５．２％、８４．９％，Ｐ＜０．０５。结论：开展结核菌耐药性检测的室间质量评价 应由质控中心统一提供含药培养基。     

PCR技术应用于临床结核病的诊断研究

采用PCR(聚合酶链反应)技术,选择一对寡核苷酸引物,扩增的靶基因为克隆的PH_重组标准人型结核分枝杆菌2.4kb DNA。其基因片段是结核杆菌所特有,单一拷贝基因,与其他非典型分枝杆菌的基因无同源序列。研究结果表明:①扩增了人型和牛型结核杆菌标准株基因DNA 158bp 片段,而其他14种非典型分枝杆菌和金黄色葡萄球菌、脓杆菌 DNA 未扩增出相应产物.②10倍系列稀释人型结核菌 DNA,检测敏感性相当于10～50菌数/ml痰样。③60例临床肺结核病人痰样进行 PCR 技术检测和常规生物法测定比较,前者阳性率为58.3%,后者检测率11.70%。而20例非结核痰样用两种方法检测全为阴性。提示:PCR 技术诊断结核病快速、简易、特异、敏感、高效,是在基因水平上检测的一种新技术。