α-硫辛酸对AGEs作用下血管内皮细胞PD-L1表达的影响

目的探讨α-硫辛酸(LA)对糖基化终产物(AGEs)作用下的人脐静脉血管内皮细胞株(HUVEC)表面程序性死亡配体1(PD-L1)分子表达及培养上清液中可溶性PD-L1(sPD-L1)浓度的影响。方法实验分四组:正常对照组(C组:RPMI1640培养);糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)组[培养液分别为AGE-BSA50mg/ml(AG50组)、200mg/ml(AG200组)和400mg/ml(AG400组)];牛血清白蛋白(BSA)对照组[培养液分别为BSA50mg/ml(BG50组)、200mg/ml(BG200组)和400mg/ml(BG400组)];药物干预组[培养液分别为RPMI1640+200μmol/LLA(C+LA200组)、200mg/mlAGE-BSA+200μmol/LLA(AG200+LA200组)]。孵育72h后,检测各组HUVEC细胞表面PD-L1的表达及上清液中sPD-L1浓度的变化。结果不同浓度AGE-BSA作用细胞72h,PD-L1的表达及sPD-L1浓度较对照组显著升高(P<0.01),其效应呈现一定的浓度依赖性。在LA干预下,AG200+LA200组PD-L1表达及s...     

2型糖尿病患者单核细胞表面PD-L1的表达及其生物学意义

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)合并血管病变患者外周单核细胞表面负性协同刺激分子程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达变化及其生物学作用.方法 应用流式细胞术分析单纯糖尿病组(42例)、糖尿病合并大血管病变组(48例)、糖尿病合并急性冠脉综合症组(35例)和健康对照组(48例)外周血中单核细胞表面PD-L1分子的表达水平,同时检测各T淋巴细胞亚群表面程序性死亡受体1(PD-1)的表达;采用ELISA法检测各组血清中肿瘤坏死因子α(TNF-a)、γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子浓度.结果 与健康对照组相比,糖尿病三个组患者外周单核细胞表面PD-L1表达均显著增加(P<0.05),并与血管病变的严重程度呈正相关,而CD4+和CD8+T淋巴细胞表面PD-1受体的表达亦呈上调性表达(P<0.05).随着血管病变的进展,糖尿病患者外周1NF-α和IFN-γ水平呈增加的趋势(P<0.05).结论 T2DM患者外周单核细胞表面PD-L1表达上调在DM及合并大血管病变、急性冠脉综合症的发生和发展中发挥着一定的作用.     

Effect of advanced glycosylation end products on PD-L1 expression of hunan pancreatic cancer cells and its biological significance

目的 研究糖基化终产物( AGEs)对人胰腺癌细胞株Patu8988表面程序性死亡配体1(PD-L1)表达的影响,探讨AGEs诱导的肿瘤细胞对T细胞增殖的作用.方法 以糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)干预细胞株Patu8988为实验组,以牛血清白蛋白(BSA)为对照组,孵育72 h后用流式细胞术分析各组细胞表面PD-L1表达的变化;AGE-BSA诱导的Patu8988细胞与人T细胞共培养,72 h后用细胞增殖和细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测T细胞增殖.结果 AGE-BSA诱导72 h后,Patu8988细胞表面PD-L1的表达呈浓度依赖性升高(P＜0.05).肿瘤细胞经AGEs诱导后抑制T细胞增殖能力增强(P＜0.05),用抗PD-L1单抗阻断后抑制作用减弱(P＜0.05).结论 AGEs通过上调Patu8988细胞表面PD-L1的表达抑制T细胞增殖.     

PD-1与PD-L1在儿童骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的 探讨程序性死亡受体1(PD-1)与程序性死亡受体配体1(PD-L1)在儿童骨肉瘤组织中的表达水平及其临床意义.方法 选取2018年1月-2020年1月在医院接受外科手术治疗的24例儿童骨肉瘤患者作为研究对象,收集所有患者临床资料.采用免疫组化法检测瘤组织中的PD-1和PD-L1表达.分析PD-1和PD-L1表达与...     

慢性丙型肝炎患者免疫细胞PD-L1表达特点及临床意义

目的 观察慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面程序性死亡配体1(PD-L1)的表达水平以及与HCV RNA载量的关系.方法 流式细胞仪检测外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面PD-L1的表达,荧光定量PCR检测HCV RNA载量,基因芯片检测HCV基因型.结果 CHC患者外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面PD-L1的表达水平较健康人明显上调,与HCV RNA和ALT无相关性.结论 PD-L1在CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面的高表达,抑制免疫细胞清除HCV的能力,导致感染的慢性化.     

紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞表面PD-L1表达的影响

目的：探讨紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞程序性凋亡配体1( PD-L1)表达的影响及其机制。方法①将细胞分为紫杉醇组及紫杉醇联合蛋白激酶D(PKD)阻断药(G?6976),每组设4个浓度梯度,各5个复孔,分别加入对应浓度试剂,MTT法检测紫杉醇对TC-1细胞活力的影响及G?6976对紫杉醇IC50值的影响。②将细胞分为0.9％氯化钠溶液组及紫杉醇组,每组5个复孔,分别加入对应浓度试剂,免疫组化法检测紫杉醇对TC-1细胞PD-L1表达的影响。③将细胞分成阴性对照组、G?6976组、紫杉醇组、紫杉醇联合G?6976组4组,每组5个复孔,分别加入对应浓度试剂,免疫组化法检测紫杉醇、G?6976对 TC-1细胞 PD-L1表达的影响。结果紫杉醇组紫杉醇对 TC-1细胞的 IC50值为40μg·mL-1,紫杉醇联合G?6976组紫杉醇对TC-1细胞IC50值为38.9μg·mL-1,两组IC50值差异无统计学意义( P>0.05)。紫杉醇处理TC-1细胞24 h后PD-L1的表达为(88.48±13.44)％,显著高于阴性对照组(39.59±5.99)％(P<0.05)。紫杉醇联合G?6976处理TC-1细胞24 h后PD-L1表达为(79.7±4.7)％,显著低于紫杉醇组(96.8±2.5)％(P<0.05)。结论紫杉醇可增加TC-1细胞PD-L1表达,阻断PKD途径可显著抑制PD-L1表达增加的程度,紫杉醇可能是通过PKD途径发挥作用。     

抗菌药物对PD-1/PD-L1抗体免疫治疗有效性影响的研究

目的 为恶性肿瘤患者在使用免疫检查点抑制剂(Immune checkpoint inhibitors,ICI)期间,合理选用临床抗菌药物方案及改善ICI治疗临床结局策略上提供参考.方法 检索CNKI、万方、PubMed、Web of Science等数据库的国内外文献,对使用免疫检查点抑制剂期间使用抗菌药物的临床研究,...     

PD-L1在胃间质瘤的表达及其与临床病理的关系

目的探讨程序性死亡配体1(PD-L1)在胃间质瘤患者中的表达及其与临床病理的关系。方法收集33例胃间质瘤患者的手术标本,分别采用Western blot(10例)和免疫组化(23例)检测PD-L1蛋白在肿瘤组织与瘤旁正常组织中的表达,分析其与临床病理的关系。结果肿瘤组织中PD-L1蛋白的表达高于瘤旁正常组织;PD-L1蛋白的表达与核分裂象和突变基因型密切相关(P<0.05),而与其他病理指标如酪氨酸激酶生长因子受体蛋白、干细胞抗原和肿瘤大小等无明显相关(P>0.05)。结论胃间质瘤患者肿瘤组织的PD-L1蛋白表达高于瘤旁正常组织。PD-L1蛋白在胃间质瘤组织的表达增加可能通过基因突变及其下游途径参与胃间质瘤的发生、发展、侵袭和转移。     

NSCLC患者PD-L1表达对EGFR-TKIs疗效的影响

目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者程序性死亡分子1配体(PD-L1)表达对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)疗效的影响.方法 回顾性分析首都医科大学大兴教学医院收治的94例EGFR敏感突变的Ⅳ期NSCLC患者的临床资料,所有患者均接受 EGFR-TKIs靶向治疗30 d以上.根据 PD-L1表...     

肿瘤免疫检查点PD-1/PD-L1抑制剂的中药活性成分研究进展

肿瘤免疫治疗已成为新型的癌症治疗手段,有望彻底消除肿瘤。免疫检查点抑制剂,特别是程序性死亡受体-1（PD-1）和程序性死亡受体-配体1（PD-L1）抗体在多种实体瘤的治疗中取得很好的临床疗效,但是生物制剂存在免疫原性强、价格昂贵等缺点,因此,寻找免疫检查点小分子抑制剂成为未来肿瘤免疫疗法的新挑战。本文将综述近年发现的抑制PD-1/PD-L1表达的中药活性小分子及其对肿瘤免疫微环境的调控作用。     

糖基化终产物对人肾系膜细胞分泌白介素8的影响

目的　观察糖基化终产物 (AGEs)对人肾系膜细胞 (HRMC)分泌白介素 8(IL 8)的影响。方法　常规制备糖基化终产物 (AGEs BSA) ,干预体外培养的HRMC ,用ELISA法检测培养上清中IL 8浓度。结果　不同浓度AGEs BSA(16 0、32 0和 6 4 0 μg/ml)干预HRMC 4 8h ,上清中IL 8水平分别为 178 1± 15 6、4 75 4± 18 9和 2 4 85 2± 99 9pg/ml(P <0 0 1) ;AGEs BSA(6 4 0 μg/ml)干预HRMC4h后IL 8分泌量开始升高 (71 9± 9 2 pg/ml) ,并随时间延长 (8、2 4和 4 8h)进一步升高 ,分别为 5 4 6 6± 4 9 7、6 5 2 1± 4 2 8和 2 4 85 2± 99 9pg/ml(P <0 0 1)。 结论　AGEs BSA呈浓度和时间依赖方式增加HRMC分泌IL 8     

高级糖基化终产物对人单核细胞表达单核细胞趋化蛋白-1基因的影响(英文)

目的:探讨高级糖基化终产物(AGEP)对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因表达的影响。方法:以β-actin为内标,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测AGEP对人外周血单核细胞MCF-1 mRNA表达的影响,并对RT-PCR产物测序。结果:AGEP能增加人血单核巨噬细胞MCP-1基因的表达,在0-50mmol/L葡萄糖修饰浓度范围内,AGEP的作用呈明显的剂量依赖效应,80mmol/L葡萄糖修饰的AGEP作用稍降低。AGEP增加MCP-1的表达呈明显的时间效应。刚分离出来的新鲜单核细胞并不表达MCP-1 mRNA,12h已能检测到MCP-1的mRNA,24h达高峰,36h MCP-1的mRNA几乎检测不到。结论:AGEP能增加人血单核巨噬细胞MCP-1基因的表达。     

糖基化终产物对人肾小球系膜细胞细胞外基质金属蛋白酶促进因子基因表达的影响

目的 探讨糖基化终产物(AGEs)对人肾小球系膜细胞(HMRC)细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)基因表达的影响.方法 在培养的人肾系膜细胞(HRMC)中分别加入不同浓度AGEs干预24 h和同一浓度AGEs干预HRMC不同的时间点,以无血清培养基(DMEM)和相应浓度的牛血清白蛋白(BSA)为对照.RT-PCR法检测EMMPRIN mRNA的表达水平.结果 与对照组相比,经各浓度及各时间点AGEs干预后, HMRC的EMMPRIN mRNA水平与对照组相比有显著差异(P＜0.01),且随AGEs浓度以及干预时间增加,EMMPRIN mRNA水平也明显逐渐降低(P＜0.05).结论 EMMPRIN可能是AGEs所致糖尿病肾病的因素之一.     

槲皮素对体外糖基化终产物生成的影响

目的：应用体外蛋白质非酶糖基化反应系统．研究槲皮素对体外糖基化终产物(AGEs)生成的作用。方法：将药物加入G-BSA、GA-BSA、3-DG-BSA、post-Amadori糖化系统中，通过检测AGEs的生成水平，观察药物对不同途径、不同糖基化阶段的AGEs生成的影响。结果：槲皮素对G-BSA、GA-BSA、3-DG-BSA糖化系统中AGEs的生成有显著抑制作用；对post-Amadori反应体系中AGEs的牛成抑制作用不明显。结论：槲皮素可能只是非酶糖基化反应早，中期阶段的抑制剂，而对于后期阶段的作用不理想。     

糖基化终产物对培养大鼠主动脉平滑肌细胞二酰基甘油的影响

目的:研究糖基化终产物(AGEP)对主动脉平滑肌细胞信号转导环节之一二酰基甘油(Dia)的影响和维生素E、氨基胍对Dia水平的干预作用.方法:采用放射酶标记、薄层层析、放射自显影技术测定细胞中Dia含量.结果:AGEP-BSA孵育的平滑肌细胞Dia水平在15 s和10min出现两个峰值,对照组和AGEP-BSA 50,11,200 mg·L~(-1)作用SMC的Dia水平分别为(220 ±15)pmol~(-1),(328±15)pmol·L~(-1),(662±33)pmol·L~(-1)和(940±43)pmol·L~(-1). Dia水平也随AGEP-BSA糖基化的程度和修饰BSA的糖浓度增加而增高.维生素E和氨基胍可明显减弱AGEP刺激平滑肌细胞Dia水平升高的效应.结论:AGEP-BSA能升高培养的大鼠血管平滑肌细胞中的Dia水平,维生素E和氨基胍能明显抑制这一效应.     

Effect of protocatechualdehyde on receptor for advanced glycation end products and TGF-beta1 expression in human lens epithelial cells cultured under diabetic conditions and on lens opacity in streptozotocin-diabetic rats

Advanced glycation end products and transforming growth factor-beta (TGF-beta) have been implicated in the development of diabetic complications such as cataract. The diverse metabolic effects of protocatechualdehyde (PCA, 3, 4-dihydroxybenzaldehyde) include the inhibition of aldose reductase and oxidation, two processes that are involved in the development of complications in diabetic patients. Here, the potential therapeutic effects of PCA in the treatment of diabetic complications were studied by determining this compound's ability to inhibit the formation of advanced glycation end products-bovine serum albumin (BSA) and the expression of receptor for advanced glycation end products and TGF-beta1 in human lens epithelial cells cultured under diabetic conditions. In addition, the ability of PCA to suppress lens opacification in streptozotocin-diabetic rats was analyzed. PCA significantly reduced advanced glycation end products-BSA formation in vitro and was more effective than aminoguanidine. In human lens epithelial cells, PCA significantly inhibited the induction of receptor for advanced glycation end products protein and mRNA expression by the receptor for advanced glycation end products-specific ligand S100b. Moreover, PCA inhibited high glucose- or S100b-induced TGF-beta1 protein and mRNA expression as well as nuclear accumulation of phosphorylated Smad2/3. In streptozotocin-induced diabetic cataract in rats, oral administration of PCA (25 mg/kg body weight) for 8 weeks significantly ameliorated the development of lens opacity (cataract) with effect on glycemic control. These results suggest that PCA is of therapeutic interest with respect to the prevention of diabetic complications such as diabetic cataract.     

Effects of advanced glycosylation end products on proliferation and cytosolic free calcium in cultured rat aortic smooth muscle cells

目的：研究糖基化终产物（ＡＧＥＰ）对主动脉平滑肌细胞增殖的影响及其与［Ｃａ２＋］ｉ的关系．方法：采用同位素掺入法分别测定ＤＮＡ和蛋白质合成；Ｆｕｒａ２ＡＭ测定［Ｃａ２＋］ｉ．结果：ＡＧＥＰ以浓度、时间相关的方式促进［３Ｈ］ＴｄＲ与［３Ｈ］Ｌｅｕ掺入细胞，随ＡＧＥＰ作用时间、糖化时间延长，掺入率增加明显．ＡＧＥＰ增加［Ｃａ２＋］ｉ，与时间、浓度相关，但随ＡＧＥＰ作用时间延长（４０分钟后）而有所降低，ＢＳＡ修饰中葡萄糖浓度的增加，糖基化时间延长，［Ｃａ２＋］ｉ也呈上升趋势．结论：ＡＧＥＰ刺激平滑肌细胞增殖，并与细胞［Ｃａ２＋］ｉ浓度增加有关．