α-受体阻滞剂对老化球囊功能的保护作用

目的观察α-受体阻滞剂（络斯宝）对大鼠球囊功能老化的保护作用。方法健康Wistar雄性大鼠16只，分为：组1为正常对照组（12=5）；组2为老化组（12=5）；组3为老化＋络斯宝组（12=6）。老化模型采用D-半乳糖催老，剂量为120mg/kg，每日一次，腹腔注射，共计给药3个月；络斯宝的剂量为300μg／kg，每日2次喂服。造模完成后，记录颈髓硬膜表面短声诱发电位。结果组1大鼠电位正常引出；组2老化大鼠在105dBSPL水平均未引出脊髓膜表面短声诱发电位；组3有3只在105dBSPL水平正常引出电位，3只未引出电位。结论α-受体阻滞剂（络斯宝）对球囊老化有一定的保护作用。     

豚鼠耳石修复再生的超微结构及SPARC动态变化

目的观察豚鼠前庭耳石器受离心力高过载(高G)损伤后,其功能和形态学的变化及富含半胱氨酸的酸性分泌性糖蛋白(SPARC)在其再生过程中的作用。方法 40只豚鼠随机分为对照组(n=10)和离心力高过载组(高G组,n=30),高G组给予10G离心力刺激4min后,分别于刺激后当天、三天、七天(每组10只)断头处死取双侧椭圆囊行扫描电镜观察,并应用免疫组织化学染色方法观察SPARC在豚鼠前庭中的表达。结果 10G离心力作用5min后,76.67%(23/30)的豚鼠出现了耳石器损伤的阳性行为学症状,且所有阳性症状均在30min内消失。扫描电镜下显示:高过载后当天可见正常耳石形态消失,被大量球状物代替,三天时球状物逐渐矿化,七天时哑铃状耳石出现并与矿化球状物共存,此外各时期均可见各种耳石的变性。免疫组织化学染色发现高G组在10G刺激后不同时间SPARC染色均高于对照组(P<0.05),但高G组各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。左右耳未发现差别。结论离心力高过载刺激可造成前庭系统功能紊乱和耳石器结构损害,SPARC与耳石再生有关。     

单侧前庭功能丧失大鼠患侧前庭内侧核及小脑绒球中GLU-IR、GFAP、GABA B2的表达

目的 探讨单侧前庭功能丧失大鼠中枢代偿的机制.方法 将45只成年健康SD大鼠随机分为空白对照组(n=9)、生理盐水注射组(n=18)、模型组(n=18).每组大鼠随机确定实验耳侧别,空白对照组正常饲养,生理盐水注射组鼓室内一次性注射生理盐水0.1～0.2毫升/耳,模型组鼓室内一次性注射50％ 氯仿0.1～0.2毫升/耳...     

新霉素对大鼠前庭毛细胞损伤作用的实验研究

目的 研究新霉素对大鼠前庭毛细胞的毒性作用,为药物性前庭功能障碍动物模型的制备和相关研究提供参考.方法 将15只成年Wistar大鼠分为正常对照组(n=5)、新霉素组(n=5)和人工外淋巴液组(n=5),新霉素组大鼠在右耳通过耳蜗底转鼓阶打孔的方法在耳蜗内注入0.1%(g/100ml)新霉素5μl,人工外淋巴液组按同样方法注入人工外淋巴液5μl.正常对照组大鼠不做任何处理.处理3天后对动物进行颈髓硬膜外短声诱发电位(click-evoked potential on the surface of the cervical dura mater,CDM-CEP)检查和游泳试验以评价前庭功能;然后将动物处死,进行形态学观察.结果 3天后新霉素组大鼠的前庭毛细胞即出现严重破坏,并出现严重的前庭功能损伤.正常对照组大鼠的游泳时间为(4.0±0.71)8(3～5s,n=5),新霉素组大鼠的游泳时间为(10.2±1.64)8(8～12s,n=5),人工外淋巴液组大鼠的游泳时间为(4.4±1.14)s(3～6s,n=5);在短音(click)刺激下,正常大鼠引出CDM-CEP的阈值为(85±3.54)dB SPL(80-90 dB SPL,n=5),阈值时的潜伏期为(6.59±0.41)8(6.05～7.05s,12=5);新霉素组大鼠120dB SPL仍无法引出CDM-CEP;人工外淋巴液组大鼠引出CDM-CEP的阈值为(90±5.0)dB SPL(85-95 dB SPL,n=5),阈值时的潜伏期为(6.68±0.31)s(6.35～7.02s,n=5).结论 新霉素对大鼠前庭毛细胞具有极强的破坏作用,新霉素耳蜗内注射的方法可以制备理想的前庭功能障碍动物模型.     

γδT细胞受体拮抗剂治疗过敏性鼻炎动物的实验研究

目的 探讨高迁移率族蛋白框1(high mobility group box 1,HMGB1)阻滞剂和γδT细胞受体拮抗剂治疗过敏性鼻炎（AR）动物的实验研究。方法 取SPF级大鼠24只,随机分成4组,A组：为正常组,未行干预治疗;B组：OVA组;C组：HMGB-1阻滞剂（三氯化钆,GdCl3干预组）;D组：γδT细胞受体拮抗药（UC7-13D5）干预组。观察各组大鼠的鼻部症状,鼻黏膜的炎症情况及鼻黏膜内HMGB1、白细胞介素17(IL-17)、Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)以及外周血中HMGB、IL-17、TLR4。结果 正常组大鼠未见明显喷嚏和挠鼻,而OVA组大鼠则出现明显喷嚏和挠鼻现象。应用HMGB-1阻滞剂和γδT细胞受体拮抗剂均能控制AR大鼠鼻部症状,喷嚏和挠鼻可明显减少（P<0.05）,各组大鼠鼻黏膜组织标本HE染色结果显示,在OVA AR模型中,炎症细胞（包括嗜酸性粒细胞）浸润明显。HMGB-1阻滞剂和γδT细胞受体拮抗剂对减轻鼻黏膜气道炎症作用明显炎症细胞浸润明显减少（P<0.05）;各组鼻黏膜HMGB1、IL-17...     

鼓膜后上内陷袋及移植鼓膜的上皮移行

作者回顾了1877年Burnett首次描述鼓膜与外耳道的复层鳞状上皮移行能力以来的各家研究资料,并据以采用Stinson氏(1936)鼓膜脐上点一点印度墨标记以观察上皮移行情况,共观察50例(55耳)。其中有10例为正常耳作为对照组,15例(20耳)为鼓膜后上内陷袋组及25例为鼓室成形Ⅰ型术后组。观察结果:正常组(20耳)上皮移行速度平均为每天0.078mm;鼓膜后上内陷袋组20耳中16耳上皮移行向陷窝,每天0.12～0.7mm(平均0.32 mm),继之变慢移行到鼓环再到外耳道壁,另外2耳墨点沿陷窝下缘移行,1耳     

天麻素对单侧前庭功能丧失大鼠前庭内侧核中GLU-IR、GFAP、GABA B2表达及疗效的影响

目的 本研究观察单侧前庭功能丧失大鼠及经不同剂量天麻素治疗后前庭内侧核中GLU-IR、GFAP、GABA B2表达的变化.方法 将99只SD大鼠随机分为空白对照组(KBDZ组,n=9)、假手术对照组(JSSDZ组,n=18)、模型对照组(MXDZ组,n=18)、模型治疗组(MXZL组,n=54),KBDZ组正常饲养,J...     

插入式耳机在纯音听阈测试中的应用

目的　探讨标准插入式耳机的耳间衰减值。方法　将 75名年龄 12～ 6 8岁的一耳听力正常 ,另一耳重度到极重度感音神经性聋的受试者 (男 4 7名 ,女 2 8名 ) ,随机分为两组 ,分别以TDH - 39压耳式耳机 (n =4 6 )和ER - 3A标准插入式耳机 (n =2 9)进行耳间衰减值的测量及比较。结果　①ER - 3A插入式耳机的耳间衰减最大值为 10 5dB ,最小值为 5 5dB ,TDH - 39压耳式耳机的耳间衰减最大值为 90dB ,最小值为 4 5dB ;②对不同耳机组 ,不同频率的耳间衰减值进行双因素方差分析 (耳机×频率 ) ,两种耳机的耳间衰减的差异具有显著性 (F =6 8.5 2 6 ,P =0 .0 0 0 ) ,各个频率耳间衰减的差异也具有显著性 (F =10 .4 16 ,P =0 .0 0 0 ) ;③在插入式耳机组中 ,不同频率的耳间衰减值经单因素方差分析 ,其差异有显著性意义 (F =11.6 30 ,P =0 .0 0 )。结论　插入式耳机因为增大了耳间衰减 ,从而减少了交叉听力及超掩蔽的可能 ,在一定程度上可以解决传统的压耳式耳机难以解决的掩蔽问题     

前庭学

921369 前庭放射损伤扫描电镜观察的实验研究/范静平…∥上海医学。-1992,15(2)。-96～97 采用扫描电镜观察放射对前庭的影响,发现豚鼠听泡区40GYγ射线照射后,前庭耳石变形,囊斑和壶腹嵴毛细胞纤毛紊乱、倒伏、融化及脱落,少许毛细胞坏死。其病理改变类似耳毒性药物和噪声对前庭的损害。图2参3(原提要)     

天麻素对前庭功能障碍大鼠前庭内侧核组胺受体表达的影响

目的 观察天麻素对单侧迷路破坏(Unilateral labyrinthectomy,UL)后大鼠前庭内侧核(Medial vestibular nucleus,MVN)组胺受体H1、H2、H3亚型表达的影响,探讨天麻素对前庭功能损伤大鼠的干预作用及机制.方法 将99只健康SD大鼠随机分为空白对照组(n=9)、假手术组...     

延期神经再支配对大鼠失神经面肌功能的影响

目的 研究不同时间延期神经再支配对大鼠失神经面肌功能恢复程度的影响.方法 150只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、面神经损伤8周组(n=10)、面神经损伤16周组(n=10)、延期8周神经修复组(n=60)和延期16周神经修复组(n=60).以缝线结扎左侧面神经制造面神经损伤模型,分别于结扎后8周和16周行神经减压即延期神经再支配.采用诱发肌电图检测面肌动作电位最大振幅和潜伏期;采用肌肉Masson染色和神经干甲苯胺蓝染色,观察单位面积内肌纤维数目和平均直径、面神经有髓纤维数目.结果 面神经损伤组动物可见左侧面肌瘫痪,未见自发性恢复.延期8周神经修复组术后16周面肌功能恢复良好,面肌动作电位最大振幅可恢复至正常水平的75.55%,单位面积内有髓纤维数目、肌纤维数目和平均直径分别为正常值的72.26%(P＜0.05)、95.2%(P＞0.05)和93.79%(P＞0.05).而延期16周神经修复组术后16周面肌功能恢复差,单位面积内有髓纤维数目、肌纤维数目和平均直径分别为正常值的36.65%(P＜0.05)、69.33%(P＜0.05)和72.77%(P＜0.05).结论 适时延期神经修复可较好恢复面肌功能,虽然晚期神经修复效果差,但仍可恢复部分肌张力.     

三种鼠对脉冲噪音损伤敏感性的研究

目的 研究豚鼠、大鼠和小鼠对脉冲噪音暴露的敏感性。方法 共分6组,第1组豚鼠(n=5)给予160 dB SPL50次脉冲噪音暴露;第2组豚鼠(n=5)予160 dB SPL 100次脉冲噪音暴露;第3组豚鼠(n=5)给予160 dB SPL 200次脉冲噪音暴露;第4组豚鼠(n=6)给予160 dB SPL 400次脉冲噪音暴露。第5组10只Sprague-Dawley大鼠给予160 dB SPL 50次脉冲噪音暴露。第6组10只小鼠(Bagg Albino雌鼠与DBA雄鼠杂交)予160 dB SPL 50次脉冲噪音暴露。脑干诱发电位检测在脉冲噪音前,噪音后立刻、1 d、1、2、4周。结果 给予160 dB SPL50次脉冲噪音暴露后,大鼠和小鼠都显示暂时和永久的阈值漂移,豚鼠无暂时和永久的阈值漂移,给予160 dB SPL 400次脉冲噪音暴露后显示暂时和永久的阈值漂移。结论 豚鼠、大鼠和小鼠对脉冲噪音敏感性不同,豚鼠对脉冲噪音不如大鼠小鼠敏感,而大鼠比小鼠更敏感。     

大鼠内耳拟老化模型对卡那霉素耳毒性的易感性

目的 研究大鼠内耳拟老化模型对卡那霉素的易感性.方法 Wistar大鼠50只,随机分为4组,A组(半乳糖组,14只)5%D-半乳糖颈部皮下注射(150 mg·kg-1·d-1),共8周,继以生理盐水腹腔注射10 d;B组(半乳糖加卡那霉素组,14只)皮下注射半乳糖同A组,8周后,腹腔注射硫酸卡那霉素(500 mg·kg-1·d-1)10 d;C组(卡那霉素组,12只)前8周用生理盐水代替半乳糖,后10 d注射卡那霉素同B组;D组(空白对照组,10只)仅给予生理盐水注射.听性脑干反应(auditory brainstem respones,ABR)检测各组大鼠反应阈,比色法检测各组大鼠膜迷路谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)活性.利用巢式聚合酶链式反应技术检测内耳组织线粒体DNA4834 bp缺失突变的发生情况.结果 用药后A组大鼠线粒体DNA 4834 bp缺失突变发生率为100%(28耳/28耳),B组为92.86%(26 耳/28耳),C组和D组均无线粒体DNA 4834 bp缺失突变检出.A组GSH-PX活性为(59.07±8.70)U(-x±s,下同),B组(63.29±12.40)U,C组(136.67±9.53)U,D组(142.10±7.02)U;A组和D组之间差异具有统计学意义(P=0.000),A组和B组、C组和D组之间差异无统计学意义(P值分别为0.307和0.151).ABR阈值(峰值等效声压级)A组平均提高(5.36±3.08)dB,B组为(61.79±11.20)dB,C组为(34.17±4.69)dB,D组为(6.50±3.37)dB;A组和D组之间差异无统计学意义(P=0.398),B组和D组、B组和C组、C组和D组之间差异具有统计学意义(P值均为0.000).结论 D-半乳糖可以诱导大鼠内耳拟老化模型,内耳组织中线粒体DNA 4834 bp缺失突变率极高,该模型对卡那霉素耳毒性的易感性增强.     

耳蜗血管纹组织块的缘细胞培养

目的 :建立豚鼠耳蜗血管纹 (SV)组织块缘细胞 (MCs)的培养方法 ,为进一步研究药物耳毒性及其作用机制奠定基础。方法 :2 6只豚鼠按SV培养时间随机分成 4组 :2 4h组 (n =8) ;72h组 (n =8) ;>72h组 (n =8) ;对照组 (新鲜SV固定组 ,n =2 )。显微解剖数段连同螺旋韧带的SV组织块 ,置于 5 %CO2 / 95 %空气的二氧化碳恒温 (37℃ )培养箱中进行培养 ,分别进行形态学和组织学观察。结果 :培养 2 4hSV组织块保持良好活性 ,其组织学结构与新鲜固定的SV结构无明显差异 ;培养 72hSV组织块与新鲜固定的SV在组织学结构方面有显著性差异 ,不能观察到正常的SV结构 ,组织结构松散 ,缘细胞从组织块离心性生长出来 ;从SV组织块培养出的缘细胞能在培养皿内存活 13d。结论 :采用组织块培养技术 ,成功地建立了豚鼠耳蜗SV组织块的缘细胞培养方法 ;培养 2 4h的SV组织块光镜下保持了良好活性和正常组织学结构 ,可用来进一步研究药物耳毒性及其作用机制。     

120dB白噪声对C57BL/6J小鼠听力损失的观察研究

目的观察120d B宽频带白噪声对C57BL/6J小鼠听阈阈值、耳蜗基底膜毛细胞形态与带状突触数量的影响。方法:20只听力正常的5-6周龄C57BL/6J小鼠随机分为四组,3组实验组,分别为给予白噪声后立即测量组(0d)、噪声暴露后7天测量组(7d)、噪声暴露后14天组(14d);1组对照组。每组5只小鼠(n=10),实验组小鼠120d B白噪声暴露2h,0d组立即测量小鼠听阈,7天和14天应用相同方法测量小鼠听阈值,并计算出每只小鼠噪声暴露前后的阈移值。各组测量阈值后立即处死取耳蜗用4%多聚甲醛固定后进行免疫荧光染色和扫描电镜检查,观察小鼠带状突触与内外毛细胞形态变化并计数。结果噪声暴露2h后即刻组其各个频率5只小鼠(n=10)阈值均未引出,暴露后七天小鼠听阈部分恢复(P<0.01)。暴露后第14天,14天组各频率的听阈继续恢复,但与暴露前的差异较第7天比有所减小,但仍有统计学差异(所有P<0.01)。并且观察到带状突触明显减少,扫描电镜观察外毛细胞纤毛有倒伏粘连。结论 120d B白噪声噪声暴露2小时能够造成小鼠听力永久性阈移,外毛细胞明显损伤,带状突触数量明显减少。     

内毒素诱导的分泌性中耳炎动物模型建立及评价

目的 建立内毒素诱导分泌性中耳炎(secretory otitis media,SOM)动物模型,观察其动态病理改变,为探讨其发病机制奠定基础.方法 54只健康的SD大鼠,雌雄不拘,体重250 g～300 g.均以右耳为实验耳,左耳作正常对照.其中50只作光镜观察,随机分为实验组(脂多糖组,30只)及对照组(生理盐水组,20只).分别经听泡注入来源于绿脓杆菌的内毒素主要提取物一脂多糖35 μl和等量的生理盐水.两组分别于术后6小时、1天、3天、7天及14天各处死6只、4只大鼠取听泡用HE染色光镜下观察中耳黏膜各时间段的病理变化.另4只大鼠扫描电镜观察.各取2只右耳经听泡分别注入脂多糖35μl及生理盐水35μl,分别于3天及14天处死两组大鼠各1只,扫描电镜下观察咽鼓管鼓口处听泡黏膜黏液纤毛运输系统的超微改变.结果 光镜下脂多糖组术后6小时中耳黏膜上皮下间隙增厚,1天时增厚更显著并见炎性细胞浸润,中耳腔可见炎性细胞渗出.3天时上述改变达高峰.7天时仅见上皮下间隙增厚,且明显减轻.14天时基本恢复正常.柱状纤毛上皮区1天、3天可见纤毛部分消失,杯状细胞明显增生.咽鼓管内柱状纤毛上皮病变尤重,但上皮下间隙增厚不著.生理盐水组未见明显异常改变.扫描电镜可见脂多糖组3天时纤毛倒伏,脱落、集结成束;生理盐水组未见异常.结论 听泡注入内毒素诱导大鼠急性SOM成功率高,其病理改变3天达高峰,14天基本恢复.     

三种鼠对脉冲噪音损伤敏感性的研究

目的研究豚鼠、大鼠和小鼠对脉冲噪音暴露的敏感性。方法共分6组，第1组豚鼠(n=5)给予160 dB SPL 50次脉冲噪音暴露；第2组豚鼠(n=5)予160 dB SPL 100次脉冲噪音暴露；第3组豚鼠(n=5)给予160 dB SPL 200次脉冲噪音暴露；第4组豚鼠(n=6)给予160 dB SPL 400次脉冲噪音暴露。第5组10只Sprague-Dawley大鼠给予160 dB SPL 50次脉冲噪音暴露。第6组10只小鼠(Bagg Albino雌鼠与DBA雄鼠杂交)予160 dB SPL 50次脉冲噪音暴露。脑干诱发电位检测在脉冲噪音前，噪音后立刻、1d、1、2、4周。结果给予160 dB SPL 50次脉冲噪音暴露后，大鼠和小鼠都显示暂时和永久的阈值漂移，豚鼠无暂时和永久的阈值漂移，给予160 dB SPL 400次脉冲噪音暴露后显示暂时和永久的阈值漂移。结论豚鼠、大鼠和小鼠对脉冲噪音敏感性不同，豚鼠对脉冲噪音不如大鼠小鼠敏感，而大鼠比小鼠更敏感。     

大鼠耳蜗疆孔内听神经纤维的定量观察

目的 探讨定量观察正常SD大鼠疆孔内听神经纤维数量的方法.方法 取5只正常SD大鼠耳蜗(正常组),EPON812包埋后,沿蜗轴平面作半薄切片,甲苯胺蓝染色后光镜下观察拍照,用Adobe Photoshop图像处理软件处理图像.并采用计数单个完整疆孔内神经纤维数量均值及疆孔内神经纤维密度均值的方法分别对耳蜗底回起始段、底回末段及中回中段疆孔内的听神经纤维进行计数,对耳蜗各部位听神经纤维数目的差异进行方差分析.以同法对5只乌苯苷耳中毒SD大鼠(耳中毒组)疆孔内听神经进行了定量观察,以验证此法的实用性.结果 正常SD大鼠疆孔内的神经纤维数量在耳蜗底回起始段、耳蜗底回末段、耳蜗中回中段分别为22.78±7.15、130.12±50.73、58.66±9.12根,各部位的差异有显著统计学意义(F=195.15,P＜0.01);疆孔内听神经纤维密度(104根/mm2)在底回起始段、底回末段、中回中段分别为7.17±1.51、23.95±2.73、15.95±2.26,在底回末段的疆孔内神经纤维的数量多于耳蜗底回起始端和耳蜗中回中段(F=804.86,P＜0.01).耳中毒组耳蜗底回起始段、末段和耳蜗中回中段疆孔内神经纤维数量分别为13.63±12.34、80.69±24.42、54.94±8.79根,神经纤维密度(104根/mm2)分别为2.06±1.53、15.94±2.26、15.68±2.52,其中,耳蜗底回起始段和末段均明显少于相应的正常组(P＜0.01).结论 采用疆孔内神经纤维密度均值定量观察疆孔内听神经纤维的数量,其结果可靠且更稳定.     

前庭器官超微结构研究及结构图构建

目的通过扫描电镜观察小鼠椭圆囊、球囊、壶腹超微结构,研究分析并据此构建前庭器官新的结构示意图。方法选取3个年龄段小白鼠各10只,分别是年轻组≤2个月、中年组2~12个月、老龄组>12个月。分离出椭圆囊、球囊、壶腹,采用扫描电镜技术样品制备方法制备样品,应用扫描电镜进行样品观察。结果扫描电镜下可以得到:①椭圆囊斑及球囊斑不同层面图片:表面为堆积并相互黏附的"表面耳石",表面耳石下是无结构胶状质;底层表面耳石深入到无结构胶质层里;无结构胶质层下面是毛细胞纤毛及"纤毛间耳石"层,不同纤毛束之间均有纤毛间耳石存在,立于支持细胞表面,表面平坦;蜂窝状胶质物质联接无结构胶质层、纤毛间耳石及毛细胞纤毛。②壶腹超微结构的图片:嵴帽是无结构的胶状质与壶腹外侧壁紧贴,但较易分离,嵴帽和壶腹外侧壁之间有纤细的晶状体物质,在壶腹嵴两侧壁上也有纤细晶体物质(壶腹嵴表面耳石);不同的毛细胞纤毛之间有耳石结构的存在(壶腹嵴纤毛间耳石)。结论通过对前庭器官扫描电镜的观察,发现了椭圆、球囊斑及壶腹的新结构成分,由此构建出新的前庭器官超微结构示意图。     

慢性间歇性缺氧状态舌下神经核5-HT及5-HT 2A受体的变化

目的观察慢性间歇性缺氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)大鼠舌下运动神经元细胞的形态变化,及其相应神经递质5-HT及5-HT 2A受体和C-fos表达量的变化。方法将12只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠(8周龄,体重180~200 g)随机均分为CIH组和常氧对照组。CIH组低氧条件为舱内氧浓度在5%-21%之间循环,对照组氧浓度维持在21%。5周后观察舌下运动神经元细胞的形态改变、舌下神经核神经递质5-HT及5-HT 2A受体和C-fos的表达量。结果尼氏染色显示CIH组尼氏小体崩解,细胞质着色变浅。免疫组化显示CIH组5-HT、5-HT 2A受体和C-fos的表达量均高于对照组(P0.05)。结论 CIH导致5-HT及其结合位点5-HT 2A受体表达上调,使得舌下神经核对颏舌肌支配加强,颏舌肌活性增高,从而在清醒状态下维持咽腔开放。