瘦素受体基因多态性与急性胰腺炎的相关性

目的 探讨瘦素受体(LEPR)基因多态性与急性胰腺炎(AP)的关系.方法 对46例急性胰腺炎患者(AP组)与45例正常体检者(对照组)采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分析LEPR基因A668 g、G3057A基因型和等位基因频率的分布及不同基因型患者血脂水平差异.结果 AP组与对照组比较,A668 g、G3057A基因型及A668 g等位基因频率在AP组和对照组间差异无统计学意义;G3057A等位基因A在对照组的分布频率低于AP组,差异有统计学意义.LEPR A668 g、G3057A位AG基因型携带者与GG基因型携带者血浆TG和TC水平差异无统计学意义(均P>0.05).结论 AP与LEPR基因型频率分布无明显相关性,而G3057A等位基因A可能与AP的发病相关.     

儿茶酚-O-甲基转移酶基因Val158Met多态性与乳腺癌易感性关系研究

目的研究儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因Val158Met多态性与乳腺癌易感性的关系。方法用人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green I荧光聚合酶链式反应法对96例乳腺癌患者(试验组)和116例健康志愿者(对照组)进行COMT Val158Met基因分型,分析2组各基因型和等位基因分布频率的差异。结果试验组和对照组的COMT Val158Met G等位基因分别为65.10%和71.98%,A等位基因分别为34.90%和28.02%,差异均无统计学意义(均P>0.05)。试验组和对照组的COMT Val158Met G/G野生纯合子基因型分布频率分别为38.54%和54.31%,A/G杂合子基因型分布频率分别为53.13%和35.34%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组和对照组的A/A突变纯合子基因型分布频率分别为8.33%和10.35%,差异无统计学意义(P>0.05)。相对于G/G基因型,试验组A/G基因型增加患乳腺癌风险(风险度为2.118,95%CI为1.189~3.744)。结论 COMT Val158Met基因多态性可能与乳腺癌易感性有关。     

TNF-α和HSP70-2基因多态性与急性胰腺炎的相关性研究

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α和热休克蛋白(HSP)70-2基因多态性与急性胰腺炎(AP)的相关性。方法运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RLFP)检测72例AP患者(AP组)和71例正常人(对照组)的TNF-α及HSP70-2基因多态性。结果 AP组与对照组的TNF-α基因型和等位基因比例间差异无统计学意义;AP组中,重型胰腺炎(SAP)和轻型胰腺炎(MAP)的TNF-α基因型和等位基因间差异无统计学意义。TNF-α和HSP70-2基因AA型与GA+GG型患者的白细胞、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶、三酰甘油、血糖差异均无统计学意义;AP组的HSP70-2基因GA+GG型患者比例高于对照组(69.4%vs 49.3%),AP组携带的G等位基因比例高于对照组(46.5%vs 31.7%),差异均有统计学意义。AP组中,SAP的GA+GG型比例高于MAP(81.0%vs 53.3%),差异有统计学意义;而G等位基因在SAP和MAP间无明显差异(P>0.05)。结论 TNF-α基因多态性与AP不相关,HSP70-2基因多态性与AP相关,携带G等位基因发生重症AP的可能性增大,可能是重症AP的易感因素之一。     

CYP3A4基因多态性与汉族小儿耐药性癫痫的关系

目的探讨耐药性癫痫的汉族儿童CYP3A4*18A、CYP3A4*1G与癫痫耐药的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,共检测西南地区238例儿童的CYP3A4*18A、CYP3A4*1G基因型频率和等位基因频率,其中耐药性癫痫(耐药组)83例、抗癫痫药物治疗有效(有效组)87例、健康儿童(正常组)68例。结果 CYP3A4*1G野生纯合子频率在耐药组、有效组、正常组分别为47%、45%、50%,突变杂合子频率分别为46%、49%、43%,突变纯合子频率为7%、6%、7%;等位基因野生型频率分别为70%、70%、71%,突变型频率分别为30%、30%、29%。3组基因型频率及等位基因频率差异均无显著意义(P>0.05)。CYP3A4*18A在耐药组中分布野生纯合子93%、突变杂合子7%,等位基因野生型96%、突变型4%;有效组、正常组野生纯合子100%,未发现突变。耐药组CYP3A4*18A多态性的突变杂合子基因型频率及突变型等位基因频率高于有效组,差异有显著意义(P<0.05),耐药组与正常组基因型频率及等位基因频率比较,差异无显著意义(P>0.05)。结论西南地区汉族儿童CYP3A4*18A基因多态性可能与癫痫耐药存在相关性,CYP3A4*1G基因多态性与癫痫耐药可能无相关性。检测CYP3A4*18A基因型也许是选择有效抗癫痫药物的方法之一。     

Toll样受体 4基因单核苷酸多态性与白内障发病的相关性研究

目的 研究Toll样受体4(TLR4)基因单核苷酸多态性（SNPs）与白内障发病的相关性。方法 收集皖南医学院第二附属医院2021年1—12月100例年龄相关性白内障（ARC）病例为观察组,86例年龄、性别相匹配的无亲属关系的健康志愿者为对照组,采用单碱基延伸法（SNaPshot）对TLR4两个SNPs位点rs4986790及rs4986791进行基因分型,检验两组2个SNPs基因型与等位基因频率,分离被研究对象外周血单个核细胞（PBMC）,酶联免疫吸附法（ELISA）检测其PBMC上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,分析其与ARC病人TLR4基因SNPs之间的关系。结果 Hardy-Weinberg平衡试验结果提示,两组病人TLR4基因rs7986790位点及rs4986791位点的基因型频率分布实际值与理论值符合Hardy-Weinberg遗传平衡（P>0.05）;观察组与对照组TLR4基因rs7986790位点基因型及其等位基因占比比较,差异有统计学意义（P<0.05）。rs7986790基因分型为GA及GG者PBMC上清液中TNF...     

Toll样受体4重组质粒及稳转HepG2细胞株的构建

目的 将Toll样受体(TLR4)野生型及突变型(包括单突变和双突变)基因分别转入HepG2细胞,建立稳定表达TLR4蛋白的细胞株.方法 PCR扩增用于合成TLR4的cDNA,设计引物应用PCR点突变的方法合成1196T及896G单突变质粒和TLR4-1196T,896G双突变质粒.经慢病毒包装后,将合成的pLVX-TLR4-Puro、pLVX-TLR4(A-G)-Puro、pLVX-TLR4(C-T)-Puro、pLVX-TLR4(A-G,C-T)-Puro质粒转染HepG2细胞.在细胞贴壁后加入嘌呤霉素进行筛选;Western blot检测各组细胞TLR4的表达量.结果 嘌呤霉素筛选出含有抗性基因的细胞,说明TLR4重组质粒成功转入细胞;Western blot结果表明TLR4在HepG2细胞中稳定过表达.结论 成功构建了4组TLR4过表达的细胞株,为研究TLR4基因多态性对HepG2细胞生物学功能的影响奠定基础.     

组织因子途径抑制物基因多态性在肺栓塞中的研究

目的探讨组织因子途径抑制物(TFPI)基因多态性与肺血栓栓塞症(PTE)的关系。方法选择PTE患者35例,健康对照组34名。采用聚合酶链反应(PCR/RT-PCR)检测PTE组和健康对照组TFPIC-399T、T-287C基因型及等位基因频率,结果经测序证实。结果 PTE组C-399T纯合突变型TT、杂合子突变型CT和正常纯合子CC与健康对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);T和C等位基因型频率与健康对照组比较差异无统计学意义。PTE组T287-C杂合子突变型CT、纯合突变CC和正常纯合子CC与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);T和C等位基因频率分布与对照组比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。结论 TFPI基因C-399T、T287-C多态性可能与PTE无相关性。     

ADAM33基因S2位点突变与COPD患者病程及年龄的相关性研究

目的探讨解整合素—金属蛋白酶33(ADAM33)基因S2位点多态性与慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病以及患者病程长短、年龄大小的相关性。方法对84例COPD患者(COPD组)和96例健康者(对照组),应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及DNA测序的方法,以对ADAM33基因S2位点多态性与患者病程及年龄进行分析。结果 COPD组ADAM33基因S2位点C/C和C/G基因型频率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。但C/C、C/G、G/G基因型频率与COPD病程长短、年龄大小比较均无统计学意义(P>0.05)。结论 ADAM33基因S2位点单核苷酸多态性(SNPs)与COPD相关;ADAM33SNPsS2突变可能为先天性基因突变。     

贵州地区汉族人群2型糖尿病肾病RANTES基因启动子多态性分析

目的探讨RANTES基因启动子-28C/G多态性与贵州地区汉族人群2型糖尿病并发肾病之间的关系。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP),检测143例2型糖尿病患者(53例单纯2型糖尿病患者,90例2型糖尿病合并肾病患者)和55例正常对照组RANTES基因启动子-28C/G基因型,并对各组间的等位基因频率与基因型频率进行检测分析。结果(1)正常对照组与2型糖尿病组相比,-28G阳性基因型频率和G等位基因型频率差异无显著意义(P>0.05)。(2)糖尿病肾病组与单纯糖尿病组相比,-28G阳性基因型频率和G等位基因型频率显著升高(P<0.05)。结论RANTES基因启动子-28G等位基因与贵州地区汉族人群2型糖尿病的发生无关,但可能是糖尿病肾病的易感基因。     

载脂蛋白AI基因多态性与冠心病和血脂关系的研究

目的 :探讨冠心病患者载脂蛋白(apo)AI基因多态性及其对血脂的影响。方法:应用聚合酶链反应对196例正常人和240例冠心病患者apoAI基因启动子多态性进行分析,扩增含apoAI基因启动子 -75bp 和第一内含子 83bp的DNA片段,限制性内切酶MspI酶切此片段,琼脂糖凝胶电泳分离基因多态性。结果:2组apoAI基因 -75bp 位点均为G/G基因型占优势,但冠心病组中A/A基因型显著低于对照组(P<0.05) ,2组间 -75bp 位点A、G等位基因频率差别无统计学意义。在男性冠心病患者中 ,A/A基因型携带者血清高密度脂蛋白(HDL)水平显著低于G/G基因型携带者(P<0.05)。2组 83bp 位点中基因型与等位基因频率差别均无统计学意义。结论:apoAI基因启动子( -75bp)MspI酶切位点的突变与冠心病有一定关联,在冠心病男性患者中,A/A基因型携带者与血清HDL的降低有一定相关性。     

重症AP患者外周血中单个核细胞Toll样受体4的表达及与血浆内毒素的关系

目的动态观察重症急性胰腺炎（SAP）患者外周血中单个核细胞Toll样受体4（TLR4）表达的变化,并探讨其与内毒素血症的关系。方法收集31例SAP患者和25例轻型急性胰腺炎（MAP）患者,SAP患者于入院后1、3、5、7、14、21d,MAP患者于入院后1、3、5、7d分别抽取外周静脉血,用RT-PCR法检测TLR4基因表达水平,同时用鲎试剂测定血浆内毒素水平。结果所有患者的血浆中均检出内毒素,与MAP组比较,SAP组内毒素在各个时期浓度都明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。与正常对照组比较,SAP患者在入院后1d外周血单个核细胞TLR4基因水平显著升高（P〈0.05）,达正常对照组的1.55倍,并持续较长时间。相关分析显示,SAP患者在入院后第3、5、7天TLR4mRNA与血浆内毒素水平变化趋势一致,两者呈正相关（P〈0.05）。结论 TLR4通路的异常可能在SAP的发病及炎性反应中均发挥一定作用,其诱生与内毒素刺激密切相关。     

全身炎性反应综合征与Balthazar-CTSI评分对急性胰腺炎预后评估的影响

目的探讨全身炎性反应综合征(SIRS)评分和Balthazar-CTSI评分对急性胰腺炎(AP)预后评估,并分析2种评分方法对AP预后评估的相关性。方法将195例AP患者分为轻症急性胰腺炎(MAP)组141和重症急性胰腺炎(SAP)组54例。通过SIRS评分和Balthazar-CTSI评分评分系统对2组AP患者SIRS发生率、病死率进行分析;同时分析SIRS评分与Balthazar-CTSI评分法对AP预后的相关性。结果 SAP组病死率和SIRS发生率均低于MAP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MAP组Bahhazar-CTSI评分>3分者为2例(1.42%)少于SAP组的15例(27.78%),差异有统计学意义(P<0.05)。按SIRS评分将AP患者分为5个等级,各等级组间Bahhazar-CTSI评分>3分者比较差异均有统计学意义(P<0.05)。相关分析表明,SIRS评分与Balthazar-CTSI评分具有一定相关性。结论 SIRS评分和Balthazar-CTSI评分均可用于评估AP患者的预后,且SIRS评分与Balthazar-CTSI评分对评估AP预后具有正相关性。     

锌指蛋白A20对大鼠急性重症胰腺炎LPS-TLR4信号通路的影响

目的 研究锌指蛋白A20对大鼠急性重症胰腺炎LPS-TLR4信号通路的影响.方法 采用5％牛磺胆酸钠溶液胰胆管注射诱发急性重症胰腺炎（SAP）大鼠模型,24只大鼠按数字表法随机分为三组.A组（假手术组）、B组（SAP模型组）、C组（SAP＋ LPS组）,每组8只.免疫组织化学法检测胰腺组织TLR4、NF-κBp65和p38MAPK的水平.结果 与A组相比,B、C组胰腺组织中锌指蛋白A20表达明显下降（t=17.234、19.698,均P＜0.05）,而TLR4、NF-κBp65和p38MAPK表达均明显增加（t=15.909、20.432、16.543、18.629、22.105、19.006,均P＜0.05）.C组与B组相比锌指蛋白A20表达明显下降（t=14.894,P＜0.05）,而TLR4、NF-κBp65和p38MAPK表达均明显增加（t=14.047、15.582、17.070,均P＜0.05）.结论 SAP时胰腺锌指蛋白A20的表达减少,对LPS-TLR4通路的抑制作用减弱,使胰腺损伤加重.     

高脂血症大鼠重症急性胰腺炎模型的建立及分析

目的建立高脂血症大鼠重症急性胰腺炎模型。方法SD大鼠脂肪乳剂灌胃2周建立高脂血症模型,逆行胰胆管注射3．5％牛磺胆酸钠诱发重症急性胰腺炎（SAP）模型。将雄性SD大鼠50只随机分为4组,即正常组（n=10）、HL组（n=10）、SAP组（n=15）、HAP组（n=15）。正常组均衡饲料饲养2周;HL组脂肪乳剂灌胃2周;SAP组逆行胰胆管注射3．5％牛磺胆酸钠溶液;HAP组脂肪乳剂灌胃2周＋逆行胰胆管注射3．5％牛磺胆酸钠溶液。检测各组的血清淀粉酶、三酰甘油及胆固醇水平,观察胰腺组织病理改变。结果SAP组及HAP组血清淀粉酶活性较正常组明显升高（P〈0．05）,胰腺组织出现水肿、出血及坏死改变;HL组血清三酰甘油、胆固醇值较正常组明显升高（P〈0．05）,胰腺组织无明显的炎症改变;HAP组胰腺组织病理改变较SAP组严重。结论自制脂肪乳剂灌胃2周结合逆行胰胆管注射3．5％牛磺胆酸钠溶液可成功建立高脂血症大鼠重症急性胰腺炎模型;高脂血症可加重重症急性胰腺炎大鼠胰腺的病理改变。     

尿胰蛋白酶原-2和肿瘤坏死因子-α在急性胰腺炎诊断及早期严重度评估中的意义

目的探讨尿胰蛋白酶原-2（Tps-2）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）在急性胰腺炎（AP）诊断及早期严重度评估中的价值。方法选取AP患者81例[60例重症患者和21例轻症患者],非急性胰腺炎患者40例作为对照。在入院后1h、24h、3d留取尿液做Tps-2测试,SAP组和MAP组在入院后1h、24h、3d、抽血测试TNF-α,并对结果进行对照分析。结果胰腺炎组81例中有77例Tps-2结果阳性,而对照组40例中仅3例阳性;SAP组和MAP组在入院后24h、3d检测TNF-α的水平比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论尿胰蛋白酶原-2可以很好诊断AP,肿瘤坏死因子-α动态检测可作为AP患者病情变化的指标,对AP早期严重度具有良好的预测作用。     

氯喹对AHNP肝损伤Toll样受体2/4表达的影响及作用机制研究

目的探讨氯喹对急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）肝损伤中促炎因子及Toll样受体2/4（TLR2/4）mRNA表达作用机制的影响。方法采用逆行胆碱牛黄胆酸钠（TAC）逆性建立AHNP肝损伤动脉模型,将36只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组（NC组）、胰腺炎组（SAP组）以及氯喹治疗组（治疗组）,每组12只。采用RT-PCR法测定各组大鼠不同时间点肝损伤TLR2/4 mRNA表达情况。结果 SAP组同一时间点肝腹水、胰腺病理组织评分及肝病理组织评分均高于NC组,NO水平低于NC组,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗组血清淀粉酶、ALT、AST、TNF-α水平显著低于SAP组,NO高于SAP组（P〈0.05）。SAP组3 h TLR2、TLR4水平、肝腹水、胰腺病理组织评分、肝病理组织评分显著高于治疗组,且在12 h达到最高峰。结论 AHNP肝损伤的发生及进展可能与TLR2/4 mRNA表达上调有关,氯喹可显著抑制AHNP肝组织中TLR2/4 mRNA的表达,减轻肝损伤。     

奥曲肽对重症急性胰腺炎患者血清炎性细胞因子的影响

目的研究奥曲肽对重症急性胰腺炎（severe acute panereatitis，SAP）患者血清白细胞介素-6（interleukin6，IL-6）、白细胞介素-8（interleukin8，IL-8）及肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α，TNF-α）等细胞因子的影响。方法48例SAP患者随机分成丹参治疗组及非丹参治疗组，每组24例；选择年龄匹配的20例健康志愿者为对照组。在患者入院24h内以及治疗4、7d后采静脉血并检测血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平。结果SAP患者3种炎症因子较健康志愿者均显著升高（P〈0．05）。奥曲肽治疗组与非奥曲肽治疗组入院时3种细胞因子差异无统计学意义（P〉0．05），治疗4、7d后两组SAP患者3种细胞因子均降低（P〈0．05），但奥曲肽治疗组下降更明显（P〈0．05）。结论奥曲肽可降低SAP患者的炎症性细胞因子。     

急性胰腺炎患者凝血功能测定的临床意义

目的:探讨分析急性胰腺炎(AP)患者凝血功能测定的临床意义。方法:选择于2011年8月～2012年7月在我院接受治疗的急性胰腺炎(AP)患者36例,通过全自动血凝分析仪检查患者的凝血功能,将急性胰腺炎患者设为AP组(细分为MAP组与SAP组),同时选择30例健康的体检人员设为对照组(NC),比较凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间国际标准化指数(INR)以及纤维蛋白原浓度(FIB)等方面的差异。结果:轻型胰腺炎组(MAP)与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05);重症胰腺炎组(SAP)与MAP组和NC组比较差异有统计学意义(P<0.05);存在多器官功能衰竭的急性胰腺炎患者与不存在多器官功能衰竭的急性胰腺炎患者比较差异有统计学意义(P<0.05);结论:重症急性胰腺炎患者PT、APTT、INR以及FIB值明显延长,可作为鉴别AP病情轻重及评估预后的参考指标。     

血清IL-6、PCT水平与急性胰腺炎严重程度的相关性研究

目的探讨血清促炎细胞因子白细胞介素-6（IL-6）及降钙素原（PCT）水平在早期评估急性胰腺炎（AP）患者严重程度及预后的价值。方法以28例重症急性胰腺炎（SAP）和36例轻症急性胰腺炎（MAP）患者为研究对象,另以47名健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IL-6及PCT水平,分析二者与患者Ranson评分、APACHEⅡ评分、BahhazarCT评分、血清生化指标及预后的关系。结果SAP组、MAP组、健康对照组血清IL-6水平分别为（531．37±168．67）pg／ml、（261．32±178．55）pg／ml、（15．31±3．15）pg／ml,三组间差异均有统计学意义（P均〈0．01）。SAP组、MAP组、健康对照组血清PCT水平分别为（4．22±2．84）ng／ml、（0．45±0．33）ng／ml、（0．12±0．11）ng／ml,三组间PCT值差异均有统计学意义（P均〈0．05）。血清IL-6和PCT水平与Ranson评分、APACHE11评分、BalthazarCT评分均呈正相关。结论血清IL-6和PCT水平与急性胰腺炎病情的严重程度和并发症显著相关。     

异丙酚对重症急性胰腺炎大鼠早期肺损伤的干预作用

目的：探讨异丙酚对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠早期肺组织损伤的干预作用。方法：健康成年雄性SD大鼠72只,按随机化原则分成9组,每组8只。即假手术组,重症急性胰腺炎30、60、120、360min组（SAP组：胰胆管逆行注入质量分数为5％牛磺胆酸钠溶液）和异丙酚30、60、120、360min组（造模后立即给予异丙酚150μg·kg·min^-1尾静脉持续注射）。剖杀各组大鼠,分别检测血清淀粉酶（AMY）、脂肪酶（LIP）的含量,计算肺、胰腺组织湿／干重比,并观察胰腺组织和肺组织的病理学改变。结果：异丙酚组大鼠360min时肺组织含水量明显减轻、病理积分明显降低（P均〈0．01）,但大鼠胰腺组织含水量及病理积分无明显改变（P均〉0．05）。结论：异丙酚可减轻重症急性胰腺炎大鼠早期肺组织的损伤程度,但不能减轻重症急性胰腺炎大鼠早期胰腺组织的损伤程度。