自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗肝硬变的临床疗效研究

目的观察自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK细胞）治疗HBVDNA阳性肝硬化患者的近期疗效。方法CIK细胞在体外培养前后以及回输体内后检测CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋、CD56^＋、CD25^＋细胞以及mDC和pDC。治疗肝硬化患者,比较治疗前后病毒学指标及肝脏功能的变化。结果培养结束以及回输体内后,CD3^＋细胞、CD3^＋CD8^＋细胞、CD3^＋CD8^＋细胞较培养前显著升高,mDC和pDC在回输后也明显增高,肝脏功能较治疗前有所好转。所有患者均能耐受治疗。结论CIK细胞可明显提高免疫效应细胞数量,具有一定的抗病毒效应作用,毒副作用低。     

CIK 细胞治疗慢性 HBV DNA 阳性肝硬化患者对肝功能的影响研究

目的：研究与观察 CIK 细胞治疗慢性 HBV DNA 阳性肝硬化患者对其肝功能的影响。方法收治60例慢性 HBV DNA 阳性肝硬化患者,并给予输注 CIK 细胞治疗。于治疗前采集患者外周血,分离并培养、扩增 CIK 细胞,最后将提纯成功的细胞制成 CIK 制剂,通过静脉输液的方式回输至患者体内。结果 CIK 细胞可抑制乙肝病毒DNA 复制,患者肝功能较治疗前好转,转阴率达到13.33℅,应答总有效率为63.33℅;患者并发症较少,程度轻。结论CIK 细胞治疗慢性 HBV DNA 阳性肝硬化效果明显,应在临床推广和应用。     

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗中晚期胃癌的疗效

目的 评价应用细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)过继免疫治疗晚期胃癌的有效性.方法 用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,将诱导后的CIK细胞回输给晚期胃癌患者.采用流式细胞术分析CIK培养过程中与55例晚期胃癌患者治疗前后外周血中的T细胞亚群(CD3 ,CD4 ,CD8 )、CIK细胞(CD3 CD56 )及NK细胞(CD3-CD56 )的变化,并应用生化比色法与免疫分析技术检测患者治疗前后血清恶性肿瘤相关物质(TSGF)、胃癌相关抗原(MG7-Ag)、糖类抗原19-9(CA19-9)和癌胚抗原(CEA)含量.结果 CIK细胞对K562细胞的细胞毒活性在14～21 d时达峰值.CD3 CD56 细胞由起初的(0.7±0.4)%上升到14d的(31.6±5.5)%与21 d的(35.8±9.7)%.经CIK细胞治疗后患者的肿瘤标志物水平下降,而NK与T细胞亚群水平明显升高,且CIK升高尤为显著,同时提高了患者的生活质量.总缓解率61.8%.结论 用CIK细胞回输治疗晚期胃癌患者可提高患者的细胞免疫功能,并改善其临床体征,无明显毒副作用.     

细胞因子激活的杀伤细胞治疗晚期肺癌的研究

目的探讨细胞因子激活的杀伤细胞(CIK)过继性免疫治疗对晚期肺癌患者近期免疫指标及生活质量(QOL)的影响,并观察CIK细胞治疗的安全性。方法 41例晚期肺癌的患者,体外在富细胞因子——干扰素-γ(IFN-γ)及白细胞介素-2(IL-2)的环境下,经1周左右的时间培养、增殖CIK细胞,细胞数量达到(2～5)×109后分次回输给患者。分别于CIK细胞回输前1 d及回输结束后4周抽取患者的外周血,行T细胞亚群及NK细胞活性的检测,同时分别于CIK细胞回输前1 d及回输结束后至下一疗程前评价患者的Karnofsky(KPS)状态。该组患者治疗前后的免疫指标及KPS状态进行自身对比。结果 41例晚期肺癌患者行CIK细胞治疗后的CD3+CD4+百分率上升(P<0.05),CD3+CD8+百分率下降(P<0.05),CD3+CD4+/CD3+CD8+值上升(P<0.05),NK细胞百分率升高(P<0.05)。该组患者CIK细胞治疗后KPS评分提高率为75.6%。41例肺癌行CIK细胞治疗后,1例患者出现超过39℃的高热,1例患者出现皮疹,余患者未见明显副作用出现。结论 CIK细胞治疗能改善晚期肺癌患者近期细胞免疫功能,提高患者生活质量,且安全可靠,值得临床进一步的研究。     

CIK细胞治疗乳腺癌的临床疗效评估

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）体外细胞毒活性,并观察CIK细胞治疗乳腺癌的近期临床疗效、免疫学活性及副反应。方法35例乳腺癌患者经规范化治疗后,取外周血分离单个核细胞（PBMC）,体外诱导出CIK细胞培养后,观察CIK细胞表型,用MTT法测体外细胞毒活性;所有患者均接受一定剂量的CIK细胞过继免疫治疗,观察其近期临床疗效、免疫反应、不良反应。结果35例患者中,完全缓解24例,部分缓解6例,病情稳定1例,近期有效率为85．71％,疾病控制率为88．57％,无肿瘤进展时间为2～31个月,中位无肿瘤进展时间为15个月。细胞毒活性检测结果显示,当效靶比为16：1时,CIK细胞体外细胞毒活性为77．06±11．62。与CIK细胞回输前相比,患者CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋均有明显的升高（P〈0．001）。35例患者在输注CIK过程中1例出现一过性发热（37．5℃）反应。结论CIK细胞在乳腺癌免疫治疗中能诱导机体产生特异性的免疫反应,亦是新的杀伤肿瘤细胞的效应细胞,结合传统的手术和化疗,有较好的临床疗效。     

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗中晚期泌尿生殖系统肿瘤效果观察

目的评估细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells,CIK）治疗中晚期泌尿生殖系统肿瘤的效果。方法对成都军区昆明总医院2005年6月—2010年2月收治的仅接受过手术治疗的38例中晚期泌尿生殖系统肿瘤行CIK治疗,比较治疗前后机体免疫状态变化、疗效及毒性反应、肿瘤标志物及生活质量变化。结果 2个疗程后,38例外周血免疫指标CD3^＋、CD56^＋、CD3＋CD56^＋T细胞百分率均较治疗前显著增高（P〈0.05）;临床缓解率达94.7%;相关肿瘤标志物（癌胚抗原、癌抗原125、乳酸脱氢酶及前列腺特异性抗原）水平均较治疗前显著下降（P〈0.01）;生存质量Karnofsky评分较治疗前平均提高10-20分,提高率为94.7%,平均体质量较治疗前增加1-2 kg。结论 CIK疗法为中晚期泌尿生殖系统肿瘤患者提供了一种可以延长生存期、提高生活质量的有效方法。     

自体 CIK 细胞联合化疗二线治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的：观察自体细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）联合培美曲塞二线治疗晚期非小细胞肺癌的疗效。方法回顾性分析经病理学确诊的晚期非小细胞肺癌患者71例,一线化疗后复发或进展。随机分为2组,治疗组35例,采用 CIK 细胞联合培美曲塞单药化疗。患者每1个化疗周期结束后序贯1个周期的自体 CIK 细胞回输为1个疗程治疗,连续2个疗程;对照组36例,采用单药培美曲塞化疗,疗程为2周期。治疗结束后对2组的近期疗效、免疫功能、不良反应进行评价。结果治疗组客观缓解率（ORR）为48．57％,对照组为41．67％,差异无统计学意义（P ＞0．05）;治疗组疾病控制率（DCR）为85．71％,对照组为63．89％,差异有统计学意义（P ＜0．05）。治疗组 T 细胞亚群CD ＋3、CD ＋4、CD56升高,CD ＋4／CD ＋8比值上升,差异有统计学意义（P ＜0．05）;CD ＋8治疗前后变化不大（P ＞0．05）。在不良反应方面,治疗组白细胞减少、血红蛋白减少和胃肠反应发生率明显低于对照组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论自体 CIK 细胞回输安全,副作用小,与培美曲塞联合二线治疗晚期非小细胞肺癌可以提高近期疗效,减轻化疗不良反应,提高患者免疫功能,值得临床推广。     

放疗联合免疫治疗头颈癌的疗效观察

目的评价放疗联合细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞对头颈癌疗效。方法分离外周血单个核细胞体外定向诱导CIK细胞,扩增后回输。结果CIK组缓解率73.68%高于单独放疗组36.84%（P〈0.05）;CIK组细胞免疫水平好于单独放疗组为,其中CD3＋CD4＋T、CD3＋CD8＋T及CD4＋CD25＋T细胞免疫水平差异有统计学意义（P〈0.05）。结论放疗联合CIK细胞显著提高对头颈癌的疗效,增强免疫功能。     

输血对肠癌患者围术期细胞免疫功能的影响

目的探讨输异体全血、去白细胞红细胞血和羟乙基淀粉对围术期T淋巴细胞和自然杀伤（NK）细胞的影响。方法选择直肠癌或结肠癌手术患者36例,随机分为三组,每组12例。Ⅰ组输6％羟乙基淀粉5001000ml,Ⅱ组输全血300～450ml,Ⅲ组输去白细胞红细胞血300～450ml,分别于术前、术后1、3、7d抽取外周静脉血,用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋及CD56^＋。结果与术前相比,术后1、3d CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋及CD56^＋均显著降低（P〈0．05或P〈0．01）,术后第7天Ⅱ组CD3^＋、CD4^＋、CD56^＋显著降低,而Ⅰ组、Ⅲ组各指标接近术前水平。结论围术期输异体全血严重抑制机体的细胞免疫功能,去白细胞红细胞血和羟乙基淀粉对患者的免疫抑制轻,术后恢复快。     

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞体内外抗肺癌的实验效应研究

目的探讨树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）在体内外对肺癌的影响。方法正常人外周血单个核细胞经不同细胞因子作用后培养成DC和CIK细胞,单个核细胞经贴附塑料平皿获得单核细胞,加入GM-CSF,IL-4及TNF-a诱导获得DC,悬浮细胞加入IFN-g,24h后IL-1a,IL-2及CD3McAb诱导获得CIK,将A549制备成肿瘤细胞冻融物,作为肿瘤抗原刺激DC,并将DC与CIK细胞联合培养（DC＋CIK,负载抗原的DC＋CIK）,以CIK细胞单独培养作为对照。用流式细胞仪分析细胞表型,自体混合淋巴细胞反应和异体混合淋巴细胞反应检测其刺激T细胞的的增殖活性。Cytotoxicity TOX96体外杀伤实验测定体外细胞毒活性,同时用A549细胞系建立荷瘤裸鼠模型研究其体内抗肺癌活性。结果在培养的第15d,与负载抗原的DC共同培养的CIK与CIK细胞单独培养细胞相比,增殖速率明显提高[（23.4±2.3）倍vs（16.7±2.7）倍,P〈0.05],CD3＋CD56＋细胞表达水平也明显提高,[（64.3±3.6）%vs（43.9±2.1）%,P〈0.05],同时负载抗原的DC的CIK对A549细胞的体外下细胞毒活性增强,体内实验显示,与单独培养的CIK细胞相比,与负载抗原的DC共同培养的CIK,可明显抑制接种瘤细胞的裸鼠成瘤率,DC＋CIK与负载抗原的DC＋CIK在抗六效应上没有明显差异。结论 DC与CIK细胞共培养后可提高CIK细胞的增殖速率,提高CIK细胞表型的表达水平,增强CIK体内抗肺癌的活性。将来可作为一种临床有效的过继免疫治疗策略。     

热化疗对肺癌术后患者淋巴细胞绝对数值的影响

目的分析热化疗对肺癌术后的近期疗效及其对患者外周血淋巴细胞绝对数值的影响。方法采用流式细胞术检测36例肺癌术后患者热化疗前后外周血淋巴细胞绝对数值，并与正常对照作比较。结果患者热化疗前后淋巴细胞绝对数值均低于正常对照值（P〈0.05）。热化疗有效者总T细胞（CD3^＋）、辅助T淋巴细胞（CD3^＋,CD4^＋）、NK细胞（CD16^＋CD56^＋）均显著升高（P〈0．05），抑制T淋巴细胞（CD3^＋,CD8^＋）降低但差异无统计学意义（P〉0．05），B细胞（CD19^＋）变化不显著（P〉0.05）。热化疗无效者CD3^＋、CD3^＋,CD4^＋、CD16^＋,CD56^＋显著降低（P〈0．05），而CD3^＋,CD8^＋、CD19^＋变化不明显（P〉0．05）。结论肺癌患者免疫功能低下，有效热化疗能提高患者的淋巴细胞免疫功能。临床上对患者外周血淋巴细胞绝对数值的观察，有助于对患者的治疗进行监测。     

呼吸衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的相关研究

目的分析呼吸衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的特点、影响因素、临床意义及其治疗前后测定值的变化。方法采用免疫组织化学染色的方法测定100例呼吸衰竭患者CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋细胞的阳性细胞百分率、CD4^＋／CD8^＋比值以及患者治疗前后外周血中T细胞亚群水平,并与正常对照组进行比较分析。结果呼吸衰竭患者外周血CD3^＋、CD4^＋明显减少,而CD8^＋明显增加,CD4^＋／CD8^＋比值明显下降,与正常组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。呼吸衰竭治疗后CD3^＋、CD4^＋细胞、CD4^＋／CD8^＋比值较前升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论呼吸衰竭患者存在细胞免疫功能紊乱,检测患者外周血T淋巴细胞亚群表达对评估患者的细胞免疫功能及疾病的诊断具有重要的临床意义。     

NSCLC患者术后CIK细胞免疫治疗联合化疗疗效观察

目的评价细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）免疫治疗联合化疗治疗术后非小细胞肺癌（NSCLC）患者的近期疗效。方法选取82例Ib-IIIa期NSCLC患者,经手术治疗后随机分为两组,常规化疗组和CIK细胞治疗联合化疗组,每组41例。观察比较两组患者生活质量及外周血CD3＋,CD4＋,CD4＋/CD8＋比值,自然杀伤细胞（Na-ture-Kille）r比率以及Th1/Th2细胞因子水平免疫功能指标的变化。结果生活质量：CIK细胞治疗联合化疗组和常规化疗组生活质量总提高率分别为90.0%与73.2%,研究组患者生活质量高于对照组（P〈0.05）。免疫功能指标：CIK细胞治疗联合化疗组于CIK细胞治疗后2周,外周血CD3＋,CD4＋T细胞,NK细胞和CD4＋/CD8＋的比值、白细胞介素-2,干扰素γ水平较治疗前升高（P〈0.01）,于治疗后4周达高峰,此后逐渐回落;而Th2细胞因子于CIK细胞治疗后2周下降,治疗后4周降至低谷。CIK细胞治疗联合化疗组于CIK细胞治疗后2、4、8周CD3＋,CD4＋,CD4＋/CD8＋,NK细胞,IL-2,IFN-γ,白细胞介素-4和白细胞介素-10与常规治疗组各时点比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 CIK细胞免疫治疗联合化疗能增强NSCLC患者术后的免疫功能,改善其生活质量。     

苦参素对肝炎后肝硬化患者外周血T细胞亚群和肝纤维化指标的影响

目的观察苦参素对肝炎后肝硬化患者外周血T细胞亚群和肝纤维化指标的影响。方法选择40例乙型肝炎后肝硬化患者作为治疗组,予一般基础治疗并加用苦参素300mg口服,3次／d,疗程3个月,检测治疗前和治疗3月后外周血T细胞亚群CD4^＋和CD8^＋及肝纤维化指标的变化。另选择30例正常健康体检者作为对照组。结果与对照组比较,治疗组患者治疗前外周血CD4^＋明显减少,CD8^＋明显增加,CD4^＋／CD8^＋比值明显下降;治疗后,外周血CD4^＋明显增加,CD8^＋明显减少,CD4^＋／CD8^＋比值明显增加,肝纤维化指标透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PC Ⅲ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、层粘蛋白（LN）均较治疗前明显下降。结论肝炎后肝硬化患者存在外周血T细胞亚群紊乱;苦参素通过调节外周血T细胞亚群紊乱,提高细胞免疫反应,有效抑制HBV—DNA的复制,降低患者血清中肝纤维化指标水平,进而达到清除细胞内病毒、防治肝纤维化的目的。     

肝细胞肝癌患者围手术期免疫状况检测的临床意义

目的 研究肝细胞肝癌（HCC）患者手术前后免疫状况动态变化的临床意义。方法 163例肝细胞肝癌患者手术前及手术后5、10、15d外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^＋、CDl6^＋CD56^＋的变化用流式细胞仪检测,白细胞介素2（IL-2）活性用MTT比色法测定。结果 HCC组CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、CD8^＋CD28^＋、CDl6^＋CD56^＋及IL-2均明显低于良性肿瘤和正常对照组（P〈0．01）,CD8^＋高于对照组（P〈O．01）;肝硬化患者CD4^＋／CD8^＋及IL-2低于正常对照组（P〈O．05）;Ⅲ、ⅣA期肝癌患者CD4^＋／CD8^＋、CD8^＋CD28^＋、CDl6^＋CD56^＋及IL-2含量明显低于I、Ⅱ期（P〈0．01或P〈0．05）。肿瘤切除术后第5天,CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋、CD8^＋CD28^＋、CDl6^＋CD56^＋明显低于术前（P〈0．05或P〈0．01）,术后10dCD8^＋下降,CD4^＋／CD8^＋、CDl6^＋CD56^＋高于术前（P〈0．01）,免疫抑制逐渐恢复,但CD8^＋CD28^＋仍明显低于术前（P〈0．05）,术后15d未恢复至正常对照组水平,但低于肝硬化组（P〈0．05）。结论 HCC患者免疫抑制严重且出现早,术后早期免疫抑制程度加重,HOC围手术期免疫状况的检测对围手术期治疗有指导意义。     

胃癌患者手术前后细胞免疫功能的研究

目的观测胃癌术前后患者的免疫功能变化及探讨其临床意义。方法收集我科2003年7月～2006年7月的胃癌根治术患者32例，于手术前、术后7d，14d，采用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群及NK细胞数量，监测免疫功能的变化。取同期10例健康体检者作为对照组。结果胃癌患者手术前CD4^＋，CD4^＋／CD8^＋，NK和CIK显著低于对照组（P〈0．05）。术后7d，CD3^＋，CD4^＋，CD4^＋／CD8^＋及NK细胞仍然处于较低水平。术后14d，CD4^＋，CD4^＋／CD8^＋，NK细胞和CIK细胞有显著升高（P〈0．05），但仍比正常对照组低。结论胃癌患者免疫功能低下，术后免疫功能的恢复与肿瘤负荷减轻有关，但亦受到手术创伤的影响。     

CIK免疫治疗对肿瘤患者生活质量影响的观察

目的评价CIK过继免疫治疗后患者生活质量。方法按常规方法采集细胞,分离培养,10～15 d收获,对50例患者采用CIK细胞静脉输注治疗。结果 50例患者通过CIK细胞治疗后生活质量有不同程度的改善;培养后CIK细胞表型检测可见CD3+,CD3+CD56+细胞较培养前显著增加(P0.01)。结论 CIK细胞治疗肿瘤是一种安全有效的方法,能有效地改善病人的免疫力及生活质量,可成为继手术,放疗,化疗后的肿瘤治疗的重要辅助手段。     

CIK细胞杀瘤实验前后细胞表型与细胞毒性相关性研究

目的为了分析体外细胞因子诱导培养CIK细胞在体外杀瘤实验中的细胞表型变化与其杀瘤活性的相关性及为临床过继免疫治疗提供实验依据。方法采用体外诱导方法扩增培养正常人外周血淋巴细胞及单个核细胞,用CCK-8试剂检测培养14d的CIK细胞对SPC-A-1和BGC-823肿瘤细胞的细胞毒活性,应用流式细胞术测定杀瘤实验前后CD3＋等6种不同表型细胞百分率的变化。结果在与效靶比成正比的条件下,体外实验CIK细胞对两种肿瘤细胞的杀伤率都与CD3＋CD4＋,CD3＋CD4-CD8-细胞比例变化呈正相关（P〈0.05）,都与CD3＋CD25＋,CD3＋CD28＋,CD3＋CD25＋CD28＋细胞比例变化呈负相关（P〈0.05）,对SPC-A-1细胞的杀瘤率与CD3＋CD16＋CD56＋呈正相关（P〈0.05）。结论本研究表明靶细胞抗原在活化细胞中起重要作用,测定培养细胞活化相关表型可以间接监测其杀瘤能力,为临床CIK细胞过继免疫治疗的应用提供实验依据。     

尿毒症合并顽固性腹水低温超滤浓缩回输腹腔后患者免疫功能变化

目的：探讨尿毒症合并顽固性腹水低温下超滤浓缩回输腹腔对患者免疫功能的影响。方法：纳入41例尿毒症合并顽固性腹水住院患者，随机分为低温组（36℃）21例和常温组（37℃）20例进行腹水超滤浓缩回输治疗，并检测治疗当日和次日晨空腹血T淋巴细胞亚群及白细胞介素-2水平。结果：尿毒症合并顽固性腹水患者常温、低温腹水超滤浓缩回输腹腔治疗后CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、IL-2水平均明显高于治疗前（P〈0．01，P〈0．05，P〈0．01），但常温、低温组间比较CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋．IL-2水平差异无显著性。结论：腹水超滤浓缩回输腹腔能明显改善尿毒症合并顽固性腹水患者机体免疫功能，回输腹水的温度对患者体液和细胞免疫变化未产生明显的影响。     

化疗联合CIK输注对晚期NSCLC患者T细胞哑群及生存的影响

目的：探讨化疗联合细胞因子诱导的杀伤细胞（ cytokine induced killer ,CIK）治疗晚期非小细胞肺癌（ non small cell lung cancer,NSCLC）患者的近期疗效。方法将61例确诊的晚期非小细胞肺癌患者给予化疗联合CIK治疗,观察治疗前后外周血中T细胞亚群及细胞因子的变化和临床疗效,并观察其对1年总生存率和无进展生存期的影响。结果 CIK回输后患者CD3、CD8、CD56的比例较治疗前明显上调（P＜0．05）,且CIK输注可明显提高患者Th1类细胞因子IFN-γ和TNF-α的水平（P＜0．05）。治疗总体有效率为47．3％,临床获益率为67．3％。该研究患者的中位总生存期为10．3个月,1年生存率为22．9％,而无进展生存期7．2个月,1年无进展生存为14．0％。结论化疗CIK治疗能提高患者的免疫功能及生活质量,有望成为非小细胞肺癌有效的过继免疫治疗方法。