浙江省阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的　了解浙江省产超广谱 β-内酰胺酶 ( ESBL s)阴沟肠杆菌的基因型分型。方法　根据 Gen-Bank颁布的序列 ,设计 TEM、SHV、CTX- M- 1、CTX- M- 2、CTX- M- 8、CTX- M- 9、OXA- 2和 OXA- 10的通用引物 ,对 5 3株表型筛选为产 ESBL s的阴沟肠杆菌进行 PCR检测 ,并克隆测序。表型与基因型不符的菌株用改良的三维试验法进行检测。结果　结果显示 5 3株阴沟肠杆菌中 34株扩增到 SHV型、CTX- M- 1组、CTX-M- 9组 ESBL s基因型 ,最常见的基因型是 CTX- M型 ,共有 2 9株 ,占 5 4 .72 %。CTX- M- 1组以 CTX- M- 14最多见 ( 2 0株 ) ,其次为 CTX- M- 13( 3株 )和 CTX- M- 2 4 ( 3株 )。CTX- M- 9组均为 CTX- M- 2 2 ( 5株 )。SHV PCR扩增阳性有 6株 ,均为 SHV- 12。有 16株 TEM PCR扩增阳性 ,序列分析证实均为 TEM- 1型广谱酶 ,未发现TEM型 ESBL s。有 2株细菌同时产两种以上 ESBL s。结论　浙江省阴沟肠杆菌中 ESBL s基因型主要是CTX- M型。     

阴沟肠杆菌去阻遏持续高产AmpC酶和超广谱β—内酰胺酶（ESBLs）的检测

目的：去阻遏持续高产AmpC酶,或产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs),或同时高表达这两类酶,是阴沟肠杆菌对多种β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制。方法：建立了一种改良的酶提取物三维试验法,在常规NCCLS纸片扩散法基础上接种大肠杆菌ATCC25922,在头孢西叮药敏纸片周围放射性切出琼脂小槽,待测菌的粗酶提取物在槽内扩散,与头孢西叮纸片扩散相交。结果：由于AmpC酶水解头孢西叮,出现抑菌圈内生长细菌,这一现象能被加入槽内的邻氯活性,同样用头孢曲松取代头孢西叮纸片,用邻氯西林抑制槽内AmpC酶,可测出ESBLs,使用该法检测分别产AmpC酶、ESBLs的标准株和24株临床分离多重耐药的阴沟肠杆菌。结果各种标准株检测无误。24株阴沟肠杆菌中,14株去阻遏持续高产AmpC酶试验阳性,4相提并论产ESBLs试验阳性,5株此两类酶检测均阳性,1株此两类酶检测均阴性,原因待分析。结论：对于阴沟肠杆菌。这种改良的酶提取物三维试验法能较好地鉴别持续高产AmpC酶和ESBL的阴沟肠杆菌,并适用于临床常规检验。     

阴沟肠杆菌产超广谱β—内酰胺酶情况及耐药性监测

超广谱β-内酰胺酶是一类对包括第三代头孢菌素及氨曲南在内的β-内酰胺类抗生素具有水解作用的酶，由质粒介导的大多数肠杆菌科细菌均可产生ESBLs，常见于大肠埃希氏菌和肺炎克雷白氏菌，亦可见于阴沟肠杆菌，弗劳地枸橼酸杆菌，大多源于TEM-1，TEM-2和SHV-1的突变。为了解我院阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药状     

55株阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药分析

近年来,阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)已成为医院内感染的常见菌。本研究收集2006年3月至2007年3月鹤岗矿务局总医院分离的阴沟肠杆菌55株,用双纸片协同扩散法检测超广谱检测广谱β内酰胺酶(extended-spectrum be-ta-lac-tamases,ESBLs),用Kirby-Bauer法作药敏试验,以了解阴沟肠杆菌产ESBLs及耐药情况,并指导临床用药。1资料与方法1.1材料①临床菌株:2006年3月至2007年3月,由鹤矿集团总医院检验科提供从住院患者各种标本中分离的阴沟肠杆菌55株;②抗生素纸片:头孢曲松(CRO30μg),头孢他啶(CAZ30μg),头孢噻肟(CTX30μg),头孢呋辛(CXM30μg),氨曲南(ATM30μg),亚胺培南(IM10μg)阿米卡星(AK30μg),环丙沙星(CIP5μg),头孢泊肟(CPD10μg),头孢美唑(CMZ30μg),头孢哌酮/舒巴坦(CFP/SU75/30),阿莫西林/克拉维酸(AMX/CA20/10μg)为北京天坛药物生物技术开发公司产品;③M-H琼脂杭州天和生物有限公司。1.2方法①药物敏感试验:采用Kirby-Ba...     

阴沟肠杆菌感染154例耐药性分析

目的分析阴沟肠杆菌耐药机理及现状,指导临床合理应用抗生素。方法收集医院分离到的154株阴沟肠杆菌,采用湖南天地人生物科技公司提供的微生物生化药敏卡进行药敏检测;用双纸片协同扩散法检测超广谱β-内酰胺酶;通过改良酶提取物头孢西丁和头孢曲松三维试验检测AmpC。结果阴沟肠杆菌对临床常用抗生素呈高度耐药;产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同时产AmpC酶和ESBLs菌株中尤为严重,96%菌株对亚胺培南敏感。结论阴沟肠杆菌感染的治疗可根据药敏选用氨基糖苷类及喹诺酮类药物,感染严重者可采用碳青霉烯类抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌耐药性及基因型检测

目的 调查我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌株对临床常用抗生素的耐药情况及其ESBLs比基因型。方法 对2001年4月一2002年5月我院临床分离的40株产ESBL肠杆菌科细菌采用NCCLS推荐的琼脂平皿对倍稀释法测定对不同抗生素的MIC值，用针对TEM、SEV、CTX—M基因的特异性引物进行PCR及扩增确定ESBL基因型。结果 40株产ESBL菌株对第三代头抱菌素耐药率高，对头孢噻肟的耐药程度高于头孢他啶。对头孢哌酮/舒巴坦、头孢毗肟、环丙沙星、阿米卡星的耐药率分别为37．5％、57．5％、90％、52．5％。除2株菌外，其它38株菌对亚胺培南敏感。40株菌中携带SHV、TEM、CTX—M型ESBLs比的比率分别为87．5％、50％、40％。结论 我院产ESBL菌多重耐药现象严重，临床上需慎用酶抑制剂复合物及第四代头孢菌素，亚胺培南仍是治疗产ESBL菌感染的首选药物。我院存在CTX—M酶的流行，产ESBL菌绝大多数产SHV型酶，有24株菌同时产2种或3种酶。     

同时产CTX-M-22及TEM-1型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌耐药性分析

目的 了解临床分离阴沟肠杆菌株EC003产β-内酰胺酶的耐药特征和基因型。方法采用琼脂二倍稀释法对阴沟肠杆菌EC003进行MIC检测，酶提取物三维实验检测AmpC酶，双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），等电聚焦（IEF）电泳测定其等电点。以耐药质粒为模板进行PCR扩增，将β-内酰胺酶全编码基因克隆、表达，并对其扩增产物进行DNA序列测定和同源性分析。结果阴沟肠杆菌株EC003对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药，表型检测AmpC酶为阴性。ESBLs阳性，IEF显示该菌产两种p1分别为8．7及5．4的β-内酰胺酶。PCR扩增产物DNA测序证实为CTX-M-22、TEM-1型β-内酰胺酶全编码基因，产TEM-1的克隆菌株仅对青霉素类耐药，产CTX—M-22的克隆菌株对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药。对头孢噻肟的水解程度明显强于头孢他啶。结论临床分离阴沟肠杆菌株EC003同时产CTX—M-22和TEM-1型两种β-内酰胺酶，可导致对多数β-内酰胺类抗生素耐药。     

超广谱β-内酰胺酶CTX-M-3和SHV-12在临床分离阴沟肠杆菌中的流行

目的：了解临床分离的阴沟肠杆菌中产ESBLs菌株的发生率，流行特征以及ESBLs的表型和基因型。方法：1999年2月至2001年3月期间解放军总医院临床临床分离到106株阴沟肠杆菌，研究对象为其中对第三代头孢菌素或氨曲南敏感性减低的42株阴沟肠杆菌，通过等电聚焦电泳和接合试验分析ESBLs的表型特征；PCR扩增TEM型、SHV型和CTX－M型β－内酰胺酶的编码基因并对其进行DNA测序，以确定ESBLs的基因型，有杉ERIC－PCR分型方法分析我院产ESBLs阴沟肠杆菌的流行特征。结果：在42株对第三代头孢菌素或氨曲南敏感性降低的阴沟肠杆菌中，有25株产生ESBLs，占我院同期临床分离的全部阴沟肠杆菌的23．6％（25／106）。其中18株产CTX－M－3，7株产SHV－12，分别占同期我院临床分离的全部阴沟肠杆菌的17．0％（18／106）和6．6％（7／106），这是国内首次报道CTX－M－3和SHV－12在阴沟肠杆菌中广泛流行，产CTX－M－3或SVH－12的阴沟肠杆菌均呈多克隆构成模式，仅个别病区内发生过产CTX－M－3阴沟肠杆菌引起的小型克隆传播。结论：在临床分离的阴沟肠杆菌中，由ESBLs介导的耐药已经成为严重总是。ESBLs的基因型主要为CTX－M－3，而SHV－12也不少见。CTX－M－3和SHV－12在我院的流行主要由其编码基因在不同克隆株之间水平传播引起，克隆传播居次要地位。     

阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型调查

目的了解北京朝阳医院阴沟肠杆菌中产ESBLs的流行情况,并对携带的ESBLs基因型进行调查。方法采用表型筛选法对58株对第三代头孢菌素或氨曲南敏感性降低的阴沟肠杆菌进行检测。对20株初筛阳性的细菌进行琼脂稀释法药敏试验、等电点测定,并对β-内酰胺酶编码基因进行克隆测序。结果表型筛选法对58株阴沟肠杆菌检测的结果显示产ESBLs菌株的检出率为34.48%(20/58)。药敏结果显示,单独产生ESBLs的菌株对头孢西丁、头孢吡肟、哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的敏感率分别为100%、32.5%和87.5%。同时携带ESBLs和AmpC酶的菌株只对亚胺培南敏感。20株检测阳性的细菌中,14株ESBLs编码基因PCR结果阳性,分别为:SHV-2、SHV-2a、SHV-12、CTX-M-14和CTX-M-22型ESBLs。对另外6株进行粗酶等电点测定发现分别存在7.89、8.0、8.57等电点条带,并被克拉维酸抑制。结论产生超广谱β-内酰胺酶是造成阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素耐药的另一重要原因。     

阴沟肠杆菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶的产生情况及对临床常用抗生素的耐药特征,为临床治疗提供选药参考。方法应用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按NCCLS推荐的确证试验测定ESBLs和K-B纸片法测定药敏结果,采用头孢西丁纸片扩散法对阴沟肠杆菌进行产AmpC酶菌株筛;选,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。结果阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率为6.19%,并且所检测的7株产AmpC酶的阴沟肠杆菌均为同产ESBLs,目前,我们还未检测到单产AmpC酶菌株。AmpC酶阳性菌株与AmpC酶阴性菌株药敏结果显示：前者大多对头孢西丁、头孢唑啉、氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星呈高度耐药,而后者大多对上述药物敏感,两者有显著性差异（均P〈0.05）。头孢他啶、头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦呈中度耐药。两者对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦均为敏感。结论玉环地区阴沟肠杆菌产AmpC酶细菌检出率较高。产AmpC酶菌株多呈多重耐药;亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林他唑巴坦是治疗产AmpC酶菌株感染的较可靠药物。     

肠杆菌科产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性研究进展

肠杆菌科细菌是医院内感染的常见病菌,产生β-内酰胺酶是其耐β-内酰胺类抗生素的主要机制,近10余年该科细菌中不同种属细菌产生的超广谱β-内酰胺酶（ESBL）,能水解第三、四代头孢菌素及氨曲南,且常为多重耐药株,备受关注。ESBL被分为对酶抑制剂与耐药两大类,纸片扩散法胪肉汤稀释法可检测ESBL产生菌,所致感染可选碳青霉类、头霉素类、β-内酰胺类抗生素／酶抑制剂等治疗。     

临床分离14株高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌耐药表型研究

<正>近年来,由于第3、4代头孢菌素、碳青霉烯类及氟喹诺酮类等超广谱抗菌药物在临床上的广泛使用,使阴沟肠杆菌在其选择性压力下不断产生耐药性,多重耐药形势日益严峻。AmpC     

产"超-超广谱"β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药表型及基因分析

目的 首次分析本地区产超-超广谱β-内酰胺酶(super-spectrum β-lactamase,SSBLs)菌株的耐药性及分子流行病学现状.方法 收集自2008年1月～2009年6月本院从临床分离的对头孢西丁和头孢他啶耐药的革兰阴性杆菌105株,采用改良三维试验与质粒结合实验筛选产SSBLs菌株,通过药敏试验鉴定其耐药表型,运用PCR扩增检测其ESBLs基因型与AmpC酶基因型.结果 筛选出的2株产SSBLs菌株(1株阴沟肠杆菌和1株大肠埃希菌)均表现为多重耐药,仅对亚胺培南敏感.阴沟肠杆菌质粒编码的ESBLs基因型为TEM、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT;大肠埃希菌质粒编码的ESBLs基因型为SHV、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT.结论 本院存在产SSBLs革兰阴性杆菌引起的感染,但此类菌株尚未在本院传播流行,ACT型是SSBLs菌株质粒AmpC酶主要基因型.     

AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶在下呼吸道感染细菌检测中的临床研究

目的探讨下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β-内酰腔酶（ESBLs）的检出情况。方法 通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、单产ESBLs、同时产AmpC酶和ESBLs菌株。结果 280株革兰阴性杆菌耐药株中检出单产AmpC酶菌株43株，以阴沟肠杆菌检出率最高。单产ESBLs菌株134株，以肺炎克雷伯菌检出率最高。同时产AmpC酶和ESBLs菌株19株，以阴沟肠杆菌检出率最高。结论 正确区分ESBLs和AmpC酶，对临床选择性用药具有重要的意义。     

广州地区肠杆菌属高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶调查

目的了解广州地区临床分离的肠杆菌属高产AmpC酶及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况。方法采用头孢西丁和头孢曲松 氯唑西林三维试验。结果612株菌中初筛出381株可疑菌株进行检测,其中高产AmpC酶有88株(14.4%),产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)261株(42.6%),高产AmpC酶合并产ESBLs28株(4.6%);药敏分析亚胺培南对肠杆菌属耐药率最低为1.1%,头孢吡肟对高产AmpC酶菌株敏感性较高。结论应常规检测高产AmpC酶和ESBLs,强调临床合理应用抗菌药物。     

阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶的研究进展

阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶是对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制,所产β-内酰胺酶种类较多、特性各异,并在β-内酰胺类抗生素广泛应用的选择压力下,不断有新的β-内酰胺酶产生.文中对阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶(EsBLs、AmpC、碳青霉烯酶)耐药性的研究进展作了简要综述.     

肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 了解我院产超广谱β—内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的分离、分布情况及耐药特点，以便及时监控和治疗。方法 采用纸片扩散法，从533株肠杆菌科细菌筛选出产ESBLs菌株，并对产ESBLs菌株进行药敏实验。结果 533株肠杆菌科细菌产ESBLs菌株96株(18．0％)，以ICU病房分离率最高(29．5％)，产ESBLs细菌对第三代头孢菌素高度耐药(90．6％～92．7％)，对环丙沙星、庆大霉素和磺胺甲口恶唑／甲氧苄啶耐药率也较高(51．0％～88．5％)，对亚胺培南全部敏感。结论 纸片扩散法是一种方便、有效检测ESBLs的方法；治疗产ESBLs细菌引起的感染，可选用亚胺培南、头霉素类及含β—内酰胺酶抑制剂的复合第三代头孢菌素等敏感的抗生素。     

阴沟肠杆菌染色体介导的Ⅰ型酶检测及耐药性分析

阴沟肠杆菌是导致医院内感染的常见病原菌。早期的研究结果提示，染色体介导的Ⅰ型酶（AmpC酶）是导致阴沟肠杆菌对第3代头孢菌素耐药的主要原因。本研究采用Coudron等价值的三维试验方法对54株阴沟肠杆菌的Ampc酶产生情况进行了检测，并初步分析了其对抗生素的敏感性。现将结果报告如下。     

肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的：探讨我院产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肠杆菌的临床分布及耐药情况,为临床治疗和控制医院内感染及流行病学调查提供依据。方法：用生物梅里埃公司ATB细菌鉴定仪及药敏专家系统对ESBLs进行检测。并用NCCL推荐的确认试验进行比较。结果：产超广谱β内酰胺酶肠杆菌的检出率为49．26％,ESBLs阳性菌对多数抗菌药物的耐药率明显高于ESBLs阴性菌。结论：应用ATB专家系统能及时、有效的检测ESBLs。亚胺培南是治疗产ESBLs细菌感染的首选药物。