HCV单克隆抗体的制备及其应用的初步研究

目的:丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)感染已成为全球公认的健康难题,目前并没有很好的疫苗和特效药,尽早检出HCV感染者是实现丙型肝炎早期诊断、阻断传播的重要途径。方法:研究通过免疫Core-NS4B融合重组蛋白,制备抗HCV单克隆抗体,并获得5H5和4E7-HRP最优的抗体配对组合,检测120例血清,同时与HCV-RNA检测做比较。结果:阴性血清均未测出阳性,HCV阳性标测出23例阳性,检出率77%,HCV-RNA测出26例,检出率87%;HCV可疑标本测出15例阳性,HCV-RNA测出17例;单项ALT增高的标本测出2例阳性,HCV-RNA测出1例。结论:研究所获得的抗体能够用于HCV抗原检测,具有巨大的潜力,为建立HCV抗原检测试剂盒奠定了基础,为临床检测提供了实验依据。     

分娩方式对丙型病毒性肝炎母婴垂直传播的影响

目的 探讨丙型肝炎孕妇分娩方式对其新生儿丙型肝炎病毒(HCV)感染的影响,以降低新生儿HCV感染.方法 2010年1月-2011年12月行常规产前检查孕妇10 843例,筛查血清抗-HCV;凡抗-HCV阳性者列入研究对象,进行血清HCV-RNA检测,随访跟踪至产后,并对其新生儿抽取血样行HCV-RNA检测.结果 孕妇丙型肝炎感染率为1.42％,HCV-RNA阳性者66.88％,HCV母婴传播率为17.48％;HCV-RNA阴性者33.12％,无1例新生儿感染;抗-HCV阳性孕妇分娩方式与HCV母婴传播无关;HCV-RNA阳性孕妇剖宫产组HCV母婴传播率低于阴道分娩组(P＜0.05);HCV高病毒载量(HVL,HCV-RNA≥2.5×109拷贝/L)孕妇HCV母婴传播率高于非HVL组孕妇(P＜0.05),HVL孕妇分娩方式与新生儿HCy感染有关(P＜0.05),非HVL丙型肝炎孕妇的分娩方式与新生儿HCV感染无关.结论 仅抗-HCV阳性的孕妇,分娩方式不影响HCV母婴传播率,HCV-RNA阳性的孕妇,特别是HVL的丙型肝炎孕妇,剖宫产能降低HCV母婴传播,可适当放宽剖宫产手术指征.     

HCV-cAg、HCV-RNA及HCV-Ab联合检测降低丙型肝炎的误诊率

目的:探讨丙型肝炎病毒总核心抗原、丙型肝炎RNA及抗丙型肝炎病毒抗体联合检测在丙型肝炎诊断中的应用价值。方法:对62例丙型肝炎患者阳性和64例HCV-RNA阴性的健康对照组血液标本同时采用RT-PCR定量检测HCV-RNA,时间分辨免疫荧光分析法检测HCV-Ab,和ELISA法检测HCV-cAg。结果:HCV-cAg检测方法敏感性为32.25%,特异性为100%,HCV-Ab检测方法的敏感性是92.0%,特异性是68.8%,联合检测的敏感性是96.8%,特异性是68.8%。结论:联合运用HCV-Ab和HCV-cAg或HCV-Ab和HCV-RNA,能有效降低单独使用HCV-Ab检测的误诊率。     

丙型肝炎实验室诊断方法及相关指标的探讨

目的探讨丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)定量检测及抗丙型肝炎病毒(anti-HCV)检测在丙型肝炎病毒感染诊断中的价值,以及HCV感染对血脂代谢的影响。方法收集anti-HCV阳性丙型肝炎患者与正常健康人标本分别为40和84例,检测样本血浆中HCV-RNA,血清anti-HCV抗体、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、载脂蛋白AI(apoAl)、载脂蛋白B(apoB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、脂蛋白(a)[LP(a)]、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)与总胆红素(TBIL)等指标,并结合临床诊断对结果进行分析。结果 40例anti-HCV阳性患者中,HCV-RNA阳性率为66.7%,hs-CRP、apoAl、apoB、TG、TC、LP(a)、HDL-C、LDL-C、ALT、AST和TBIL的含量与正常健康人差异有统计学意义(P0.05)。结论 anti-HVC和HCV-RNA的联合检测,对于丙型肝炎的诊断及治疗具有重要的实用价值及临床意义,如与生化等指标同时检测,将会对临床更有意义。     

维持性血液透析患者丙型肝炎病毒感染的调查与分析

目的 调查与分析维持性血液透析患者丙型肝炎病毒(HCV)的感染及其亚型的分布初步状况.方法 收集210例血透患者的临床资料,采用ELISA法检测抗HCV抗体(IgM和IgG),采用RT-PCR方法检测HCVRNA,并进一步对抗HCV抗体IgM阳性的患者进行哑型测定.结果 210例血透患者中,抗HCV IgM阳性91例(43.3%),抗HCV IgG阳性87例(41.4%),HCV-RNA阳性105例(50.0%),≥1项指标阳性117例(55.7%),所有HCV指标均阳性81例(38.6%);血透患者3项HCV感染标志≥1项阳性组的肝功能指ALT、AST、LDH、γ-GT显著高于3项HCV感染标志全部阴性组;91例抗HCV lgM阳性感染者中单1型55例(64.4%),2型的9例(9.8%),3型的13例(14.2%),6型的7例(7.6%),1+6型的3例(3.2%),1+3型的4例(4.3%).结论 维持性血液透析患者丙型肝炎病毒感染率较高,其中单1型感染率最高,与国外报道大概一致.     

赤峰地区丙型肝炎病毒基因分型相关因素分析

目的了解赤峰地区慢性丙型肝炎患者丙型肝炎病毒基因分型情况,与传播途径,肝功及HCV-RNA之间的关系。方法采集门诊及住院患者血清HCV-Ab(+),HCV-RNA(+)标本479例,利用基因芯片技术进行基因分型检测,分析不同感染途径HCV基因型分布区别及不同基因型与HCV-RNA水平,肝功能的关系。结果发现1b型239例(49.9%),2a型229例(47.8%),2i型6例(1.25%),3b型2例(0.42%),2r型1例(0.21%),3a型1例(0.21%),1a型1例(0.21%)。输血史15例(5.22%),毒品注射史229例(47.81%),纹身3例(0.6%),穿耳孔2例(0.4%),手术史61例(12.73%),拔牙21例(4.38%),夫妻感染6例(1.25%)。肝功异常321例,肝功正常158例,肝功异常以2a型居多。HCV-RNA复制水平1b和2a型无明显差异。结论赤峰地区HCV流行株为1b型,主要感染途径为毒品注射史(包括少数静脉药隐者和大部分短期或偶尔毒品注射者,所应用毒品为安纳加)。HCV-RNA水平与基因型无关系,肝功能指标ALT、AST、GGT、TBi L等2a型与1b型无统计学差异。年龄﹥50岁的以1b型为主。     

珲春口岸出境人员丙型肝炎病毒感染情况分析

目的分析珲春口岸出境人员丙型肝炎病毒(HCV)感染情况,为控制丙型肝炎流行,制定防治对策提供科学依据。方法应用酶联免疫吸附试验检测出境人员血清中HCV抗体,对HCV抗体阳性者,进行流行病学调查。结果共检查出境人员15246人次,检测出HCV抗体阳性者541例,阳性率为3.55%,其中男性阳性率为2.66%,女性为5.06%。结论对出境人员进行HCV检测是控制丙型肝炎传播的重要环节,要加强有关丙型肝炎知识的宣传教育和预防干预措施。     

隆安县HBsAg携带者丙型肝炎病毒感染调查

目的了解隆安县HBsAg携带者丙型肝炎病毒感染的情况,以便采取相应防治对策。方法随机抽取隆安县12个乡镇30~50岁乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)携带者2 755人,用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)和乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)。结果在2 755份HBsAg阳性血清中检出抗-HCV阳性13份,HBsAg携带者重叠感染丙型肝炎病毒的阳性率为0.47%,HBsAg阳性组及HBV、HCV重叠感染组e系统无显著性差异。既往病毒性肝炎史对丙肝感染无影响,有输血史的丙肝感染率显著高于无输血史者。结论该县HBsAg携带者中存在少数丙型肝炎病毒重叠感染,输血史是丙肝感染的主要途径。     

慢性丙型肝炎患者血清抗-HCV和HCV-RNA与肝功能指标变化的临床意义

目的分析慢性丙型肝炎患者血清抗-丙型肝炎病毒(HCV)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)及肝功能指标的变化特点与临床意义。方法选择2012年1月-2017年4月玉环市人民医院收治的慢性丙型肝炎感染患者87例为研究对象,均留取外周静脉血,测定血清抗-HCV、HCV-RNA及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)水平的变化,并采用Pearson相关性分析分析HCV-RNA、抗-HCV与ALT、AST、GGT变化的关系。结果 87例慢性丙型肝炎患者抗-HCV阳性91.95%(80/87),HCV-RNA阳性66.67%(58/87);HCV-RNA低水平,中水平和高水平组ALT、AST、GGT分别为(56.21±20.53)U/L、(48.93±16.51)U/L、(45.74±6.52)U/L,(78.51±15.43)U/L、(60.73±9.82)U/L、(56.81±10.74)U/L和(104.61±30.82)U/L、(73.52±10.23)U/L、(57.92±11.31)U/L均高于HCV-RNA阴性组(P<0.05);HCV-RNA中水平组ALT、AST、GGT高于低水平组(P<0.05),HCV-RNA高水平组ALT、AST、GGT高于HCV-RNA中水平组(P<0.05);随着HCV-RNA载量的提升,抗-HCV S/CO≥1.0所占比例上升,但差异无统计学意义(P=0.085);抗-HCV检查结果S/CO≥1.0患者ALT、AST、GGT为(80.72±20.93)U/L、(65.23±10.64)U/L、(55.42±12.21)U/L均高于S/CO<1.0者(P<0.001);抗-HCV、HCV-RNA均与慢性丙型肝炎患者ALT、AST呈正相关(P<0.05)。结论慢性丙型肝炎患者血清抗-HCV、HCV-RNA阳性率较高,且均与患者肝功能指标AST、ALT的变化呈正相关,可作为反映患者肝组织损伤情况的重要依据,具有一定的临床意义。     

山东省泰安市青年人群乙肝病毒与丙肝病毒重叠感染调查分析

目的了解本地区青年中乙型肝炎病毒与丙型肝炎病毒重叠感染的情况。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中乙肝病毒和丙肝病毒的相应抗体。结果在3890份标本中共检测出116例HBsAg阳性的血清,其中抗—HCV IgG阳性为11份,阴性为105份,重叠感染的阳性率为9.48%。结论本市青年中存在乙、丙型肝炎的重叠感染状况,应加强两种病毒性肝炎的防治。     

联合检测丙肝病毒核心抗原和抗体在丙型肝炎早期诊断中的价值

目的:通过检测丙型肝炎抗体(HCV-Ab),同时对其进行丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)和丙肝病毒RNA(HCV-RNA)两项指标进行检测,探讨HCV-cAg检测在丙型肝炎早期诊断中的意义。方法:对104例HCV-Ab阳性标本及108例高危人群但HCV-Ab阴性标本(包括血液透析患者55例、医务人员20例和丙型肝炎病人的家庭密切接触者33例)及健康对照组同时进行HCV-cAg和HCV-RNA的检测。结果:104例HCV-Ab阳性组中,HCV-cAg阳性25例,HCV-RNA阳性27例;108例HCV-Ab阴性组中,HCV-cAg阳性2例,HCV-RNA阳性1例;健康对照组全阴性。结论:HCV-cAg和HCV-RNA在丙型肝炎早期诊断上无显著性差异,但HCV-cAg检测在临床的应用前景上具有更大的优势,故可在临床推广HCV-Ab和HCV-cAg联合检测,有条件者可联合检测HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA。     

入境外籍人员抗-HCV、HCV-RNA 与ALT相关性及监测分析

摘要:目的　掌握四川口岸入境外籍人群HCV感染情况及流行病学特征。探讨广东、深圳、云南、四川、辽宁口岸2010-2012年入境外籍人员抗-HCV阳性人员的抗-HCV、HCV-RNA载量及ALT三者的相关性,对口岸入境外籍人员更科学合理有效地开展丙肝传染病监测起好指导作用。方法　对2010-2012年监测的四川口岸入境外籍人群HCV阳性检出者流行病学资料进行统计学分析。收集五大国境口岸保健中心筛查的235例抗-HCV阳性的入境外籍人员血清样本,用酶联免疫吸附测定（ELISA）法进行抗-HCV复检,用实时荧光定量PCR法检测HCV-RNA,同时收集其丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测数据。数据采用SAS 9.13处理。结果　2010-2012年监测的四川口岸入境外籍人群HCV感染率是2.8‰,51～60岁年龄组,来华留学人员感染率最高。收集的235例抗-HCV阳性入境外籍人员血清标本复检后231例阳性,4例阴性。检出HCV-RNA阳性131例（占56.7%）,其中ALT异常89例（占67.9%）。100例HCV-RNA阴性中ALT异常25例（占25.0%）。随着HCV-RNA载量的升高,ALT异常率有增高趋势（χ2＝44.75,P＜0.01）。同时,ALT的均值随HCV-RNA载量的增加而升高（r＝0.973,P＜0.01）。结论　HCV-RNA检出率与方法学敏感性、HCV感染所处的临床阶段、抗病毒药物的应用密切相关。HCV-RNA载量与ALT水平呈明显相关性。入境外籍人群中51～60岁年龄组,来华留学人员阳性检出率最高,提示在今后口岸HCV防控与分子流行病学分析工作中,可考虑将其作为重点监测对象。     

HCV-RNA载量与抗HCV阳性率及ALT异常率的相关性分析

目的分析实时荧光PCR定量检测HCV-RNA载量与酶联免疫吸附法检测抗-HCV和丙氨酸转氨酶(ALT)水平之间的相关性。方法采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术和酶联免疫吸附实验(ELISA),对258例疑似HCV感染阳性的血清检测HCV-RNA和抗-HCV,并同时检测ALT。结果 258例样本中HCV-RNA的阳性率为64.7%(167/258),抗-HCV的阳性率为67.1%(173/258),ALT异常率为56.2%(145/258)。抗-HCV阳性率和ALT异常率随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 HCV-RNA载量与抗HCV(+)和ALT异常率均呈正相关性,三者联合检测可以大大降低HCV漏诊率。     

乌鲁木齐地区无偿献血者HCV感染及合并感染状况研究

目的 了解乌鲁木齐地区无偿献血者HCV感染及合并感染状况及流行病学特点,为减少HCV经血液传播,预防和控制HCV输血风险提供依据。 方法 收集2008年1月1日-2010年12月31日在乌鲁木齐血液中心献血者的一般资料及五项指标ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP血液检测结果。 结果 调查自愿无偿献血者共计140 665名,其中男性86 179名(61.27%),女性54 486名(38.73%),年龄范围18~55周岁。在所调查的140 665名无偿献血者中, 5 971名献血者血液检测不合格,不合格检出率为42.45‰,血液五项检测指标不合格率分别为HBsAg(4.55‰)、ALT(26.82‰)、抗-HCV(5.52‰)、抗-HIV(2.34‰)、抗-TP(4.09‰)。抗-HCV阳性率在性别、年度、学历、年龄分布上差异无统计学意义(均P＞0.05)。HCV与ALT、HBV、HIV、TP的合并感染率分别为0.66‰、0.11‰、0.05‰、0.06‰。logistic回归分析显示献血者HCV感染影响因素有职业、性别及重复献血次数等。 结论 在今后献血工作中,要加大对男性、初次以及未婚无偿献血者的筛查力度,建立一支固定、重复的无偿献血者队伍,才能不断提高血液安全。     

Vertical transmission of hepatitis C Virus: An epidemiological study on 2,980 pregnant women in Italy

The risk of mother-to-infant transmission of hepatitis C virus (HCV) varies according to the population studied and the tests used. Aim of the current study was to investigate HCV vertical transmission rate in children born to 30 HCV positive/HIV negative pregnant women in Italy. We investigated the potential vertical transmission of HCV by identifying HCV antibody seropositive pregnant women, by analyzing HCV-RNA in the peripheral blood using PCR and by prospectively following their offspring until 24 months of age. During the third trimester, 2,980 consecutive pregnant women were examined for anti-HCV antibodies by a second generation Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (EIA2) and re-assayed by a second generation Recombinant Immunoblot Assay (RIBA2). A total of 32 mothers (1.07%) were positive for EIA2 test; 30 out of 32 had a reactive confirmatory RIBA2 test for HCV All anti-HCV positive mothers were negative for HIV. These 30 mothers and their 30 babies formed the study cohort. Of the 30 anti-HCV positive mothers, 10 were also positive for serum HCV-RNA by PCR. All the babies born to the 30 anti-HCV positive mothers were initially negative for HCV-RNA (cord blood specimens), but three babies became positive at three months of age and remained positive thereafter. These babies had been born to 3 of the 10 mothers with viremia during the third trimester of pregnancy. These results suggest that HCV vertical transmission is possible in 10% of anti-HCV positives and in about 33% of the HCV-RNA seropositive mothers.     

Demonstration of HCV-RNA and HBV-DNA in the serum of HBsAg negative patients with hepatocellular carcinoma

Forty patients with chronic liver disease and HCC were analyzed for infection with hepatitis C (HCV) and hepatitis B (HBV) viruses. All patients were negative for HBsAg, 16 were alcoholics, 6 had previous blood transfusions and 18 had sporadic chronic hepatitis. Antibodies to HCV were determined by EIA 2nd generation. HBV-DNA was detected by PCR using primers of the precore region. Analysis of HCV-RNA was done with nested PCR amplifying the 5 non-coding region of the HCV genome, using primers complementary to nucleotides 1–20 and 305–320 and nested primers complementary to nucleotides 21–31 and 271–286 of the HCV-J1. Anti-HCV were positive in 35/40 patients (87.5%). HCV-RNA was detected by PCR in 34 patients (85%) all of them positive for the anti-HCV. HCV-RNA was detected in 70.5% of the alcohol abusers, in 100% of patients with history of transfusion(s) and 94.1% of patients with cryptogenic chronic liver disease. HBV-DNA was detected in only 2 patients. In conclusion, there is a high rate of HCV and a low rate of HBV viremia detected by PCR in Spanish patients with HCC HBsAg negative. No patient without anti-HCV presents HCV-RNA. Our results suggest that persistent HCV replication may play a role in hepatic carcinogenesis, as HBV-DNA could be found in only 5% of our HCC patients.This work was presented in part at the Biennial Scientific Meeting of the IASL (Brighton 1992) and at the 27th EASL meeting (Vienna 1992)     

海口地区丙型肝炎病毒基因分型研究

目的 为制定治疗方案提供参考,了解海口地区丙型肝炎病毒基因分型的特征.方法 选择2010年1月～2011年1月某院经临床检测HCV-RNA阳性的72例患者血清,回顾分析HCV测序分型结果、套式PCR结果,对照分析不同HCV-RNA阳性人群HCV基因分型及不同基因型HCV-RNA定量检测值.结果 本组共72份血清标本,基因型构成比次序依次为:1b型构成比为62.5％ (45/72);2a型构成比为29.2％ (21/72); 3a型构成比为8.3％ (6/72).不同HCV-RNA阳性人群HCV基因分型结果对照显示,差异无统计学意义(P＞0.05).1b型HCV-RNA定量检测值显著高于2a型和3a型(P＜0.05),2a型HCV-RNA定量检测值显著高于3a型(P＜0.05).结论 海口地区丙型肝炎病毒基因分型和国内多数地区相同,以1b型为主,2a型次之,同时基因分型也有助于了解患者体内病毒复制情况,为治疗提供参考.     

艾滋病合并感染现况及对CD4的影响研究

目的:研究艾滋病感染者和艾滋病人(HIV/AIDS)合并感染乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、梅毒(TP)的流行现况及对艾滋病抗病毒治疗的影响。方法:选取HIV/AIDS的病例采用ELISA法,分别对标本进行乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒抗体检测,艾滋病抗病毒治疗后患者的CD4+T淋巴细胞的观察。结果:719例HIV/AIDS合并感染乙肝的有80例(11.13%),丙肝46例(6.40%),梅毒114例(15.86%)。接受艾滋病抗病毒治疗的326例患者中,单纯HIV感染的有232例,其中T淋巴细胞CD4<300/mm3者110例,占47.41%;合并多重感染的HIV患者有94例,其中T淋巴细胞CD4<300/mm3的有49例,占52.13%;两组比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论:HIV合并感染TP、HCV和HBV率较高,易对T淋巴细胞CD4产生不同程度的影响。     

张家港市人群乙型和丙型肝炎血清流行病学调查

目的了解张家港市人群乙型肝炎和丙型肝炎病毒的感染状况,建立有效的防治措施。方法采用随机整群抽样的方法调查1岁以上各年龄组人群,对每名对象进行问卷调查,并采集血清检测HBsAg、抗-HBs和抗-HCV。结果张家港市人群HBsAg、抗-HBs和抗-HCV阳性率分别为5.15%、52.69%、0.31%。1~19岁组人群HBsAg阳性率为0.99%,20岁以上组人群阳性率为5.95%。男性HBsAg阳性率高于女性。有免疫史的人群HBsAg阳性率明显低于未免疫者和免疫史不详者。抗-HCV阳性率与年龄、性别无关。使用血制品的人群抗-HCV阳性率最高。结论乙肝疫苗纳入儿童免疫规划效果显著,需进一步做好成人乙肝疫苗接种工作;使用血制品仍是丙肝病毒感染的重要途径,其他传播途径也不可忽视。     

出入境人员丙型肝炎传染性及危险因子研究

目的了解出入境人员丙型肝炎(HCV)感染水平,研究HCV感染者的传染性及影响感染的危险因子。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查出入境人员抗-HCV,并对150份抗-HCV阳性血清采用实时荧光定量PCR法测定HCV RNA病毒载量,以性别、年龄、抗-HCV阴性、HCV RNA阴性、1∶4比例为匹配条件,选择600例为阴性对照组。采用单因素和多因素非条件Logistic回归分析。结果23781名出入境人员传染病监测体检中,检出抗-HCV阳性150例,检出率为0.63%。男女间感染HCV的几率均等;抗-HCV阳性率随年龄增长而升高,各年龄组间差异有统计学意义(χ2=86.065,P<0.001);外籍人员抗-HCV阳性率显著低于中国籍,两者差异有统计学意义(χ2=12.376,P<0.005);78.67%抗-HCV阳性者HCV RNA病毒处于复制状态,抗-HCV滴度≥1∶64感染者HCV RNA病毒载量均≥1.02×104copy/ml,各抗体滴度间病毒载量有显著性差异(χ2=136.593,P<0.001);经单因素回归分析发现,年龄、国籍、谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、直接胆红素(DBIL)、尿素(BUN)、总胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)等8个因子均有统计学意义,对这8个因子进行多因素Logistic逐步回归分析,年龄、ALT、LDL等3个因子进入模型。结论78.67%出入境人员HCV感染者具有传染性,抗-HCV滴度≥1∶64指标可作为HCV具有传染性的判断指标;影响HCV感染的危险因子有年龄、国籍、ALT、AST、DBIL、BUN、CHOL、LDL等8个。