小鼠急性肺损伤时肺内CFTR和ENaC表达变化

目的：探讨CFTR氯离子通道和ENaC钠通道在内毒素诱发急性肺损伤小鼠肺内的表达变化。 方法：内毒素经小鼠气管内注入后诱发急性肺损伤,随后在24、48和72小时取肺组织进行分析,检测氯离子通道CFTR和钠通道ENaC的mRNA在肺内的浓度变化。肺泡液体清除率和湿干重比也在同样的时间点进行检测。 结果：小鼠急性肺损伤诱发后24小时时,CFTR氯离子通道在肺内表达显著降低（p<0.05）,48和72小时时也降低（p<0.05）。小鼠急性肺损伤诱发后24、48和72小时a－ENaC在肺内表达均显著降低（p<0.05）;同时ENaC另外两个?和r亚型在24和48h时表达显著降低（p<0.05）,而在72h时则恢复正常（p>0.05）。而在同样的时间点,肺泡液体清除率和肺湿干重比也出现类似的改变。 结论：内毒素诱发的急性肺损伤小鼠模型中,CFTR和ENaC在肺内表达均下降,与肺泡液体清除率和肺湿干重的变化一致。     

内毒素对大鼠肺内钠通道表达的影响

目的通过测定内毒素（LPS）对肺内钠通道（ENaC）表达的影响,探讨ENac在急性肺损伤（ALI）发病机制中的作用。方法16只雄性Wistar大鼠腹腔麻醉后随机分为对照组（Nc组）和内毒素组（LPS组）,分别静脉注射生理盐水8ml／kg、LPS 8mg／kg后6h处死。比较两组PaO2、肺病理切片肺水肿程度,Real-time PCR半定量检测肺组织钠通道α、β、γ-ENaC mRNA表达,免疫组化方法检测α-ENaC蛋白在肺内表达。结果LPS组肺病理切片可见间质增宽、水肿,中性粒细胞浸润,正常肺泡结构破坏。以Nc组α、β、γ-ENaC mRNA基因表达量为100％,则LPS组α、β、γ-ENaC基因相对表达量为28％、40％、59％。LPS组α-ENaC蛋白在气管上皮细胞、支气管腺体、血管内皮细胞的表达无明显下降,主要是肺泡上皮细胞表达下降。结论ENaC基因和蛋白表达下调可能是Au发生肺水肿的重要机制之一。     

骨髓间充质干细胞移植清除急性肺损伤大鼠的肺泡液体

背景:肺泡液体增多是急性肺损伤的重要病理生理改变,而修复受损的肺泡一毛细血管膜屏障是减轻肺水肿的有效途径.目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对内毒素诱导急性肺损伤模型大鼠肺泡液体的清除作用.方法:采用改良的Peister法分离培养大鼠骨髓充质干细胞,传至第3代制成单细胞悬液.将大鼠随机分为3组,急性肺损伤组和骨髓间充质干细胞干预组采用腹腔注射内毒素建立急性肺损伤模型.成功造模1 h后,干预组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液0.5 mL(细胞数1×106个),对照组和损伤组同法予以等量生理盐水.各组在尾静脉注射后6,24,48 h,检测肺泡液体清除率、肺水含量程度测定,观察肺组织病理变化.结果与结论:肺水含量程度测定湿干比肺损伤组在24 h点与其他组比明显升高(P＜0.05);细胞移植组湿干比在各时间点与肺损伤组比明显降低(P＜0.05).细胞移植组在各时间点肺泡液体清除率与肺损伤组比明显升高(P＜0.05).苏木精一伊红染色光镜观察,肺损伤组6 h点表现为毛细血管充血,肺泡腔内炎性细胞浸润,24 h点加重;细胞移植组6 h点肺泡腔内炎性细胞浸润较肺损伤组轻,24 h点继续减轻,48 h点基本接近正常对照组.提示,骨髓间充质干细胞移植可能通过能修复受损的肺泡一毛细血管膜屏障从而增加急性肺损伤大鼠肺泡液体清除.     

急性肺损伤时肺泡上皮Na+通道研究的进展

急性肺水肿是急性肺损伤(ALI)的重要特征,肺泡上皮主动液体清除功能是影响ALI肺水肿的重要环节[1].研究表明肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)是肺泡内液体主动转运的重要机制.肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)通过ENaC对肺泡腔的液体平衡进行调节[2-3].ALI导致肺水肿时,肺泡中的液体成分主要通过ENaC、Na+-K+-ATP酶(NKA) 和肺血管内皮细胞的水通道蛋白(AQP)重吸收.现主要对ALI时肺泡上皮ENaC的研究进展进行回顾.     

内毒素肺损伤小鼠肺内清道夫受体A表达的变化

目的 观察内毒素肺损伤发病中小鼠肺组织及肺泡巨噬细胞(AM)清道夫受体A(SR-A)表达的变化.方法 腹腔注射内毒素脂多糖(LPS)复制小鼠急性肺损伤模型,实验分为LPS致伤后0.5、1、2、4和8 h组及对照组,用小鼠AM株J774A.1细胞作体外实验,分为LPS作用后0.5、1、2、4和8 h组及无血清培养液对照组.用免疫组化及流式细胞仪观察分析小鼠肺组织及AM、J774A.1细胞的SR-A表达及分布.结果 LPS各组小鼠动脉血氧分压(PaO2)均明显低于对照组,且肺湿/干重(W/D)比值明显高于对照组(P均＜0.01).对照组小鼠肺组织除支气管上皮细胞、淋巴细胞无SR-A表达外,AM、肺血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、肺泡上皮细胞、中性粒细胞胞膜及胞质均有SR-A表达.LPS致伤后0.5 h即可观察到肺组织SR-A免疫组化染色弱于对照组,并且随着致伤时间延长,染色逐渐变浅,表明内毒素肺损伤发病中肺内SR-A表达减少.用J774A.1细胞作体外实验也发现类似结果,以4 h和8 h组降低最为显著.流式细胞仪检测AM及J774A.1细胞的SR-A表达与免疫组化染色结果相符,且细胞膜SR-A下降较细胞总SR-A显著.结论 内毒素肺损伤小鼠肺组织及AM的SR-A表达减少,其表达变化可能与内毒素作用有关.     

不同浓度异氟醚预处理对内毒素性急性肺损伤肺泡毛细血管通透性的影响

目的:比较0.5肺泡气最低有效浓度(MAC)、1.0MAC及1.3MAC3种浓度异氟醚预处理对内毒素诱导幼猪急性肺损伤肺泡毛细血管通透性的影响。方法:24头5~6周龄、9~14kg雄性幼猪随机分成4组,分别为LPS组、0.5MAC LPS组、1.0MAC LPS组、1.3MAC LPS组,每组6头。实验动物麻醉后行气管插管,接呼吸机机械通气后,分离左颈外静脉及左颈内动脉,放置中心静脉导管和Picco热稀释导管,用于输注液体及监测血流动力学、血管外肺水(EVLW)、肺泡毛细血管通透性指数(PVPI)、全心舒张末期容积(GEDV)。预处理组先经不同浓度异氟醚预处理30min,1h后,经中心静脉微泵输注20μg.kg-1内毒素(LPS),60min内输注完毕。待急性肺损伤形成后观察12h并处死实验动物。实验结束后留取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测总蛋白(TP)及肺组织测湿干重比(W/D)。结果:1.3MAC LPS组与LPS组相比,PVPI在急性肺损伤形成时(ALI0h)增加(P<0.05),在急性肺损伤形成后8h(ALI8h)、急性肺损伤形成后12h(ALI12h)显著增加(P<0.01);1.0MAC LPS组与LPS组相比,肺湿干重比(W/D)及BALF中总蛋白含量减少(P<0.05)。结论:1.0MAC异氟醚预处理可以降低内毒素诱导的幼猪急性肺损伤肺泡毛细血管通透性。     

细胞因子和水钠通道蛋白在急性肾损伤致肺损伤中的作用

目的 通过双肾动静脉夹闭建立急性缺血性肾损伤大鼠模型,观察大鼠肺病理生理的变化,观察上皮细胞钠通道蛋白(α-ENaC)和水通道蛋白1(AQP1)在急性肾损伤所致肺损伤中的作用.方法 健康雄性Wistar大鼠60只.体质量300～ 320 g,随机(随机数字法)分成健康对照组(A组),急性肾损伤组(B组),每组30只.造模后,处死大鼠,苏木素伊红(HE)染色检查肺组织病理变化,计算肺W/D比值,支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白质量浓度.检测肺组织中水通道蛋白1、肺上皮钠通道蛋白的质量浓度.测定血清及BALF中IL-6与TNF-α的质量浓度.结果 B组大鼠在实验后6h动脉血pH值开始下降,酸中毒逐渐加重,与A组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).B组与A组的氧分压各时间点之间相比差异无统计学意义(P＞0.05).与A组相比,B组在实验后2h肺泡灌洗液中蛋白水平、肺W/D值开始明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).B组实验后8h肺泡上皮肿胀,肺泡壁增宽,肺泡间质水肿明显,肺泡内可见炎症细胞、红细胞和蛋白渗出,表现出急性肺损伤的病理改变.B组在实验后2h血清及肺泡灌洗液中TNF-、IL-6的质量浓度开始增加,肺组织中AQP1、α-ENaC表达开始逐渐减少,与A组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 急性肾损伤早期肺泡上皮-内皮屏障功能已经受到了影响,急性肺损伤已经发生.急性肾损伤后早期体内TNF-α、IL-6含量明显增加,肺表达AQP1及α-ENaC的减少,可能是急性肾损伤早期引起肺损伤的原因之一.     

血管紧张素Ⅱ对大鼠肺泡上皮钠通道表达的影响

目的 探讨外源性血管紧张索Ⅱ (Ang Ⅱ)对大鼠肺泡液体清除及肺泡上皮钠通道(ENaC)表达的影响。方法 按随机数字表法将15只SD大鼠分为对照组、Ang Ⅱ组及Ang Ⅱ 1型受体阻滞剂ZD7155干预组,每组5只。Ang Ⅱ组和ZD7155干预组大鼠经左侧颈静脉置管后,微量泵持续泵入外源性Ang Ⅱ10 μg．kg-1．min-1;对照组泵入等量生理盐水。ZD7155干预组于泵入Ang Ⅱ前30 min经腹腔注射10 mg/kg ZD7155。6h后观察肺组织病理学改变;用伊文思蓝标记5％白蛋白法测定离体肺组织肺泡液体清除率(AFC);用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定ENaC mRNA表达,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)测定ENaC蛋白表达。结果 Ang Ⅱ组AFC较对照组显著降低[（6.16±3.01）％比(16.10±3.46)％,P＜0.01],ZD7155干预组AFC较Ang Ⅱ组显著升高[（10.60±2.05）％比(6.16±3.01)％,P＜0.05]。Ang Ⅱ组α-ENaC mRNA表达较对照组显著升高（0.663±0.068比0.236±0.030,P＜0.01）,ZD7155干预组α-ENaC mRNA表达较Ang Ⅱ组显著降低（0.386±0.061比0.663±0.068,P＜0.01）;β-ENaC及γ-ENaC的mRNA表达无明显差异。与对照组比较,Ang Ⅱ组α-ENaC蛋白表达显著增加(0.343±0.053比0.145±0.030,P＜0.01),β-ENaC和γ-ENaC的蛋白表达显著降低（0.286±0.038比0.512±0.055,0.144±0.040比0.460±0.066,均P＜0.01）;与Ang Ⅱ组比较,ZD7155干预组α-ENaC蛋白表达显著降低(0.228±0.045比0.343±0.053,P＜0.01),β-ENaC和γ-ENaC的蛋白表达显著升高(0.358±0.043比0.286±0.038,0.220±0.033比0.144±0.040,均P＜0.05)。结论 外源性Ang Ⅱ通过其1型受体途径调节ENaC基因及蛋白表达,减弱大鼠肺泡液体清除,加重肺水肿。     

地塞米松对急性肺损伤肺组织中foxml基因的作用

目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)内毒素所致的小鼠急性肺损伤(acute lung in-jury,ALI)时肺组织foxml转录因子和foxml基因表达及其在ALI中的保护作用,并观察地塞米松(dex-amethasone,DEX)对foxml基因表达和病情转归的影响.方法 72只健康小鼠随机(随机数字法)分为3组:对照组(A组,n=24),模型组(B组,n=24),地塞米松治疗组(C组,n=24).对照组小鼠腹腔注射0.9%生理盐水(0.3 mL).模型组小鼠腹腔注射LPS(5 mg/kg).地塞米松治疗组小鼠腹腔注射u)s(5 mg/kg),6 h后腹腔注射地塞米松(5 mg/kg),三组分别选取24 h,48 h,72 h三个观测点.免疫组织化学方法检测各组小鼠肺组织foxml蛋白的表达,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肺组织foxml基因的表达强度,并观察肺组织病理变化.结果 组间比较,在24 h,48 h,72 h时,模型组小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白均显著高于对照组(P<0.05),地塞米松治疗组小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白均显著高于模型组(P<0.05);组内比较,在48 h无论模型组和地塞米松治疗组小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白均达到高峰,48 h小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白显著高于72 h(P<0.05),72 h显著高于24 h(P<0.05).地塞米松治疗组和模型组比较,肺组织病理改变明显减轻.结论 在模型组和地塞米松治疗组,肺组织中foxml mRNA和foxml蛋白均明显增加.地塞米松通过促进肺组织中foxml mRNA和foxml蛋白表达,修复受损的内皮细胞和上皮细胞,减轻肺损伤的程度.     

间质胶原酶在高氧所致急性肺损伤中的表达

目的 研究间质胶原酶(interstitial collagenase)在高氧所致急性肺损伤发病过程中的作用,探讨急性肺损伤的发病机理.方法 将72只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、高氧24 h组、高氧48 h组、高氧72 h组,每组18只;正常对照小鼠呼吸室内空气,高氧小鼠置于密闭的氧气室(氧浓度＞95%).评价肺损伤程度;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学法测定肺组织间质胶原酶的表达及组织分布.统计分析采用单因素方差分析和q检验.结果 高氧能引起急性肺损伤;RT-PCR结果显示肺组织间质胶原酶mRNA表达量在暴露于高氧24 h后达(0.59±0.13)较对照组(0.07±0.01)明显增加(q≥3.15,P＜0.01),72 h达最高(0.68±0.12,q=3.78,P＜0.01);免疫组织化学研究显示间质胶原酶蛋白主要表达于气道上皮细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞和血管平滑肌细胞的胞浆中;间质胶原酶蛋白在气道上皮细胞的表达在高氧环境下24 h达(28.54±9.60)较对照组(13.48±4.32)明显升高(q≥2.62,P＜0.05),于48、72 h表达逐渐降低,分别为(20.32±5.68)和(15.24±4.65).结论 高氧能引起急性肺损伤伴间质胶原酶的表达增高,它们通过降解细胞外基质在高氧所致的急性肺损伤过程中发挥重要作用.     

雌孕激素在急性肺损伤中对钠离子通道α亚基的影响

目的 观察17-雌二醇、孕酮联合应用对急性肺损伤大鼠的肺上皮钠离子通道(rENaC)α亚基表达的影响,探讨雌孕激素联合应用在急性肺损伤(ALI)的肺水肿清除机制中的作用.方法 40只雌性未成年sD大鼠随机分为正常对照组(注射生理盐水8 mL/kg),急性肺损伤(ALl)模型组(经静脉注射油酸0.1 mL/kg),雌孕激素联合治疗组(在油酸注射前12、48 h皮下注射由雌孕激素按750:1比例混合的混合液).将每组大鼠分别在油酸注射后6 h处死取出肺组织进行干湿质量比、肺系数的测定,观察肺病理切片肺水肿程度,RT-PCR检测肺组织钠通道α-ENaC mRNA表达.结果 急性肺损伤模型组肺湿干质量比、肺系数较正常对照组显著升高(P<0.01).雌孕激素联合治疗组(12 h前给药)与ALI模型组比较上述指标均显著下降(P<0.05).肺组织病理学观察联合治疗组(12 h前给药)肺水肿程度较Au模型组明显减轻.α-ENaC基因在雌孕激素联合治疗组(12 h前给药)的表达与ALI模型组相比显著升高(P<0.05).结论 联合应用雌孕激素可以上调钠离子通道α亚基的基因表达,从而可能在肺水肿清除中起到一定作用.     

氢气饱和生理盐水对内毒素诱导的小鼠急性肺损伤的早期保护作用

目的:探讨氢气饱和生理盐水对内毒素(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的早期保护作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、氢气饱和生理盐水对照组(H2组)、内毒素损伤组(LPS组)、氢气饱和生理盐水治疗组(LPS+H2组),1或2 h后检测肺湿干重比、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)m RNA表达量。结果 :与正常对照组相比,LPS组的湿干重比显著增加(P<0.01),TNF-αm RNA表达量持续增加(P<0.01),IL-10 m RNA表达量在2 h时才增加(P<0.05)。与LPS组同一时间相比,LPS+H2组湿干重比降低(P<0.05),TNF-αm RNA表达量先降低(P<0.01),后差异无显著性(P>0.05),IL-10 m RNA表达量差异均无显著性(P>0.05)。结论:LPS诱导的ALI早期,腹腔注射氢气饱和生理盐水能够抑制促炎因子的早期表达,从而减轻内毒素诱导的小鼠急性肺损伤。     

囊性纤维化跨膜调节因子在小鼠胸膜腔液体转运中的作用

目的:探讨囊性纤维化跨膜调节因子(cystic fibrisis transmembrane conductance regulator.CFTR)在小鼠胸腔液体转运中的作用。方法:小鼠吸入麻醉后,胸膜腔内分别注入0.25ml等渗液体,分别予以异丙肾上腺素、CFTR激动剂CF-16和抑制剂CF_(mh)-172.在不同时间点回收胸腔液体,测量其容积。根据胸腔液体滤出率和吸收率变化,研究CFTR在胸腔液体转运中的作用。用RT-PCR检测ENaC和CFTR在胸膜上的表达情况。结果:小鼠胸膜上有ENaC和CFTR的表达,CFTR抑制剂CF_(mh)-172显著抑制异丙肾上腺素对于胸腔液体吸收的促进作用(P<0.01),激动剂CF-16不能显著增强异丙肾上腺素的这种作用(P>0.05)。结论:CFTR抑制剂可以显著抑制异丙肾上腺素对胸腔内等渗液体吸收促进作用,但是CFTR激动剂则没有明显作用。     

骨髓间充质干细胞移植对家兔急性肺损伤的保护作用

背景:急性呼吸窘迫综合征重要病理改变是肺泡一毛细血管膜屏障的损伤,以及所导致肺泡渗出液中富含蛋白质的肺水肿.骨髓间充质干细胞能够继续分化和不断自我更新,并最终分化为多种类型细胞,这有可能为治疗肺损伤提供一个新的途径.目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对内毒素诱发急性肺损伤模型兔的保护作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-10/2008-01在唐都医院中心实验室完成.材料:家兔20只,2只用于制备骨髓间充质干细胞,剩余18只随机分为3组:盐水对照组、肺损伤模型组、细胞移植组,6只,组.内毒素为Sigma公司产品.方法:Ficoll法分离培养兔骨髓间充质干细胞,传至第3代备用.肺损伤模型组、细胞移植组兔通过向气管内滴注内毒素建立急性肺损伤,急性呼吸窘迫综合征模型,造模成功30 min后,细胞移植组经右侧颈静脉注入骨髓间充质干细胞悬浮液2 mL(细胞数1×105),盐水对照组、肺损伤模型组同法给予等量生理盐水.主要观察指标:支气管肺泡灌洗液中性粒细胞数日、肺组织湿干比及蛋白含量,肺组织病理变化.结果:湿十比值升高提示肺水肿的存在,中性粒细胞数量增加提示较重的炎性反应存在,蛋白含量升高提示肺泡一毛细血管内膜屏障受损.移植48 h后与盐水对照组比较,肺损伤模型组支气管肺泡灌洗液中性粒细胞数目、蛋白含量均明显降低(P<0.01),湿干比明显升高(P<0.01);与肺损伤模型组比较,细胞移植组支气管肺泡灌洗液中性粒细胞数目、蛋白含量均明显升高(P<0.01),湿干比明显降低(P<0.01).苏木精一伊红染色结果显示,盐水对照组肺泡组织结构正常,肺损伤模型组肺组织出现典型的急性肺损伤改变,细胞移植组肺组织病理变化较轻.结论:利用骨髓间充质干细胞移植可显著减轻内毒素诱导的急性肺损伤.     

腹腔内注射骨髓间充质干细胞对急性胰腺炎小鼠相关肺损伤的影响及相关机制研究

目的研究腹腔内注射骨髓间充质干细胞(BMSC)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)小鼠肺损伤的影响,并进一步探讨其可能的机制。方法选取Balb/c小鼠作为研究对象,分为Sham组(注射0.9%氯化钠溶液),AP组(腹腔注射雨蛙素诱导AP模型)和AP+BMSC组(经BMSC治疗的AP模型),每组各8只。分别在AP诱导成功后12、24、48 h,收集小鼠血液并处死小鼠,测定不同组小鼠肺组织湿/干重比值,并用苏木精-伊红染色法评估小鼠肺组织病理变化,并检测3组小鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、淀粉酶(AMY)以及丙二醛(MDA)含量。结果与Sham组相比,AP组和AP+BMSC组小鼠在诱导建立AP模型后12、24、48 h肺组织湿/干重比值、血清淀粉酶、肺组织MPO以及血清TNF-α、IL-6、IL-10和丙二醛均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与AP组小鼠相比,AP+BMSC组小鼠在诱导建立AP模型后12、24、48 h肺组织湿/干重比值、血清淀粉酶、肺组织MPO以及血清TNF-α、IL-6、IL-10和丙二醛均显著降低,血清IL-10含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔内注射骨髓间充质干细胞可显著减弱AP引起的肺损伤,其作用机制可能与改善AP小鼠氧化应激及炎症反应水平有关。     

血清淀粉样蛋白A在百草枯中毒致小鼠急性肺损伤中的表达及意义

目的:观察血清淀粉样蛋白A1(SAA1)在百草枯中毒小鼠急性肺损伤的表达及意义。方法:SPF级健康雄性昆明小鼠随机分为对照组和中毒组。中毒组予一次性腹腔注射百草枯(20 mg/kg)复制染毒小鼠模型,对照组予注射等剂量生理盐水,24 h后处死小鼠并取材。检测小鼠肺湿/干重比,苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化,原位末端缺刻标记法观察细胞凋亡,酶联免疫吸附法检测小鼠血清SAA的表达情况,免疫荧光定量PCR法检测小鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达的情况。结果:与对照组相比,中毒组小鼠肺组织湿/干重比、肺组织炎症及细胞凋亡显著增加,血清SAA含量明显增多(P0.05);肺组织TGF-β1 mRNA的表达均增高。结论:SAA在百草枯中毒小鼠肺损伤中显著增高,参与其炎症过程,并在其病程进展中发挥重要作用。     

高氧所致小鼠急性肺损伤时一氧化氮合成酶的表达

目的探讨一氧化氮合成酶(INOS,eNOS)在高氧所致急性肺损伤发病过程中的作用.方法将54只小鼠置于密闭的氧气室暴露于＞95%的高氧,另18只小鼠呼吸正常空气作为对照组;分别于24、48 h和72 h取出小鼠,评价肺损伤程度同时进行支气管肺泡灌洗液细胞分类和计数;免疫组织化学测定肺组织iNOS和eNOS的表达及组织分布.结果高氧能引起急性肺损伤伴支气管肺汽灌洗液细胞总数、巨噬细胞、中性粒细胞数均明显增加;免疫组织化学研究显示iNOS和eNOS蛋白主要表达于气道上皮细胞、血管平滑肌细胞和巨噬细胞的胞浆中,它们在气道上皮细胞的表达在高氧环境下明显升高.结论在高氧环境下一氧化氮合成酶通过促进肺组织中一氧化氮合成从而在高氧所致的急性肺损伤过程中发挥重要作用.     

肺泡上皮钠离子通道在急性肺损伤模型差异表达的研究

目的研究肺泡上皮钠离子通道3种亚型在不同急性肺损伤模型中的差异表达。方法雄性SD大鼠40只随机分为对照组(Control组,n=10)和3种急性肺损伤模型:脂多糖诱导组(LPS组,n=10)、盐酸诱导组(HCL组,n=10)、机械通气组(VILI组,n=10)。分别检测各组支气管肺泡灌洗液蛋白浓度和白细胞计数、钠离子通道(ENaC)三种亚型(α、β、γ)mRNA的表达和蛋白的表达。结果支气管肺泡灌洗液蛋白浓度和白细胞计数LPS组、HCL组、VILI组,均明显高于Control组,差异有统计学意义(P0.05)。α-ENaCmRNA表达在LPS组和HCL组中明显降低,差异有统计学意义(P0.05),而α-ENaCmRNA表达在VILI组差异无统计学意义(P0.05)。β-ENaCmRNA表达各组比较差异无统计学意义(P0.05)。γ-ENaCmRNA在VILI组表达明显降低,差异有统计学意义(P0.05),而在LPS组和HCL组表达无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。α-ENaC蛋白表达在LPS组和HCL组明显降低(P0.05),而γ-ENaC蛋白表达在VILI组明显降低(P0.05)。结论急性肺损伤炎症反应过程中,肺泡上皮钠离子通道参与的亚型可能和特定的肺损伤类型相关。     

大黄对肠源性感染致早期肺损伤防治作用的机制探讨

目的:探讨大黄对大鼠腹腔感染致早期肺损伤防治作用的机制.方法:132只SD大鼠随机分为感染组(48只)、治疗组(48只)和对照组(36只),各组又分为6小组.采用大鼠盲肠结扎并穿孔(CLP)造成腹腔感染,治疗组每日在麻醉下经胃管灌注大黄1次.分别在术后0、24、48、72、96和120 h处死一小组大鼠,检测肺毛细血管通透性、肺湿/干质量比值及肺组织的内毒素和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析.结果:肺毛细血管通透性、肺湿/干质量比值、BALF的中性粒细胞百分率、肺组织的内毒素和TNF-α逐渐增加,时间越长越明显,但治疗组比感染组增加较慢、幅度较小.结论:大黄可防止内毒素进入肺组织,抑制肺内中性粒细胞的积聚和TNF-α释放,减轻肺的炎性反应.     

重症急性胰腺炎并发肺损伤促/抗炎症因子的变化及大黄附子汤的干预研究

目的观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎并肺损伤（SAP-ALI）时血清促/抗炎症因子的影响。方法健康长白猪,体重25～30kg,13头,随机分成三组：对照组（n=4）、重症急性胰腺炎肺损伤组（模型组,n=4）、大黄附子汤治疗组（治疗组,n=5）。其中模型组采用主胰管内逆行注入4%牛磺胆酸钠（1ml/kg）诱导SAP-ALI模型。三组均于术后即刻、术后6h、12h、24h、48h、72h取血,ELISA法动态检测血清中促炎因子（TNF-α和IL-1β）、抗炎因子（IL-4）浓度变化,同时动态比浊法测定血清内毒素（LPS）含量。术后72h处死动物,计算肺组织湿/干重比,观察胰腺与肺病理形态学变化。结果模型组6～72h血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度及肺病理组织学评分均较对照组明显升高（P〈0.05）,IL-4浓度在术后24h开始较对照组逐渐升高（P〈0.05）。治疗组各时间点血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度均较模型组明显下降（P〈0.05）,但血清IL-4浓度于术后12h出现明显升高,48h达到峰值。结论促炎因子（TNF-α、IL-1β）、抗炎因子（IL-4）及内毒素等共同参与了SAP-ALI的发病过程。大黄附子汤通过降低血清LPS水平,进而下调血清TNF-α及IL-1β表达,上调IL-4表达,减轻SAP-ALI的程度。