近交系小鼠数量性状基因的定位克隆策略

许多影响人类健康的重大疾病如高血压、哮喘和肥胖等都是复杂性状相关疾病.模式动物小鼠作为复杂性状研究的重要遗传资源,至今已有2900个数量性状基因座(QTL)在小鼠中被初步定位,然而国内对于小鼠复杂性状相天基因研究的报道并不多.本文埘近交系小鼠在复杂性状研究中的优势以及利用近交系小鼠进行QTL初步定位和精细定位的策略进行了综述,并重点介绍小鼠QTL克隆所面临的挑战,提出利用合作杂交计划和野生小鼠资源解决QTL基因研究费时费力且定位分辨率低等一系列瓶颈问题的新思路.     

基因的定位克隆

基因的定位克隆谢久永，罗会元基因是生物性状与邀传病的决定因素，若将其从庞大的基因组（在人基因组中约有５００００～１０００００个基因）中分离出来，必有助于研究它编码的蛋白质的功能，８０年代初，主要是在基因的蛋白质产物已知的情况下，依蛋白质→ｍＲＮＡ→Ｄ...     

人类肥胖相关新基因LYRM1多克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备兔抗人LYRM1蛋白的多克隆抗体并对其进行初步鉴定。方法:预测LYRM1蛋白的抗原表位,设计并合成出一段由17个氨基酸组成的多肽,将合成肽与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联作为抗原,免疫新西兰大白兔,制备抗LYRM1蛋白的多克隆抗体,利用ELISA、Westernblot鉴定其效价及特异性,并将该抗体用于人脂肪组织LYRM1的表达检测。结果:制备了兔抗人LYRM1蛋白的多克隆抗体并证实此抗体效价较高、特异性较强。结论:采用人工合成多肽作为半抗原成功制备了人类肥胖相关新基因LYRM1的多克隆抗体。     

人类肥胖的遗传研究

最近对孪生子研究提示人类肥胖具有遗传性,但是在对被领养子女的肥胖研究中缺乏生物学父母的资料,也没有体重范围的研究,而难以支持遗传与肥胖的联系。作者们对1924～1947年期间丹麦领养登记的3580名中间,选择540例现在平均年龄为42岁的被领养者进行研究。凡是其生父母与领养父母有血缘关系者均被排除,而生父母与领养父母的体重资料均有据可查。据体格指数(body-mass index)—身高(米)/体重(公斤)~2,把研究对象分为4组:瘦(男16.0—20.1,女12.8—18.2)、     

肥胖基因及其产物

肥胖基因及其产物Ｌｅｐｔｉｎ在肥胖的发生中起重要作用，人们已定位克隆了ｏｂ基因并对ｏｂ基因及其调控序列，ｏｂ基因的产物及其功能，各种因素对ｏｂ基因及其产物表达的影响等方面作了深入研究，并提出了机体调节体重的可能途径。本就以上几个方面作一综述。     

肥胖基因及其受体

肥胖与Ⅱ型糖尿病、高血压、高脂血症等关系十分密切,近年来相继发现了肥胖基因(ob)及其受体(OB-R)。小鼠由于肥胖基因突变,导致肥胖表型的出现;而人体中肥胖基因的表达与肥胖呈正相关。小鼠中OB-R存在多种剪接形式,其中短胞内区形式的受体认为与肥胖有关,人体中有关受体的研究还很少。     

肥胖基因及其产物

肥胖基因（ｏｂｅｓｅｇｅｎｅ，ｏｂｇｅｎｅ）及其产物Ｌｅｐｔｉｎ在肥胖的发生中起重要作用，人们已定位克隆了ｏｂ基因并对ｏｂ基因及其调控序列、ｏｂ基因的产物及其功能，各种因素对ｏｂ基因及其产物表达的影响等方面作了深入研究，并提出了机体调节体重的可能途径。本文就以上几个方面作一综述。     

人类Y染色体基因及多态性的研究进展

人类Y染色体对男性性别的决定有着密切的关系，Y染色体的异常通常会导致各种遗传效应，因此对Y－DNA的研究日益引起人们的关注，本文就Y－DNA的研究方法、多态性、研究进展作一综述。     

高脂饮食肥胖模型小鼠脂肪组织受体相互作用蛋白140基因的表达

背景：受体相互作用蛋白140基因敲除小鼠可通过增加线粒体生物功能、脂肪酸氧化、氧化磷酸化等代谢途径来抵抗高脂饮食诱导的肥胖。 目的：构建高脂饮食致肥胖模型小鼠,观察脂肪组织受体相互作用蛋白140 mRNA表达水平变化及胰岛素抵抗的关系。 方法：将C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组和高脂饮食组,分别喂养14周后,测量2组小鼠体质量,选取高脂饮食组中体质量大于对照组小鼠平均体质量20%的小鼠作为肥胖组小鼠。 结果与结论：高脂饮食组小鼠中有12只符合标准计入肥胖组。肥胖组小鼠三酰甘油、总胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素水平和胰岛素抵抗指数均明显高于对照组(P < 0.05或P < 0.01);肥胖组小鼠脂肪组织中受体相互作用蛋白140 mRNA的表达高于对照组(P < 0.05);且小鼠脂肪组织受体相互作用蛋白140 mRNA表达水平与三酰甘油水平、胰岛素抵抗指数呈正相关(r=0.526,P < 0.05;r=0.465,P < 0.05),而与总胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素水平无相关性(P > 0.05)。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

长期高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏免疫相关基因的mRNA变化

目的探讨长期高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏免疫相关基因表达的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠分别高脂饲料喂养16周和38周,对照组给予普通饲料,测量体质量与血糖, HE染色检查肝组织病变情况。提取RNA,由华大基因北京基因组学研究所BGISEQ-500测序平台进行测序,原始序列数据参照GRCm38/mm10小鼠基因组进行比对和注释。利用火山图进行mRNA数据矩阵分析,找出显著调控的肝脏免疫相关基因,采用实时荧光定量PCR验证部分改变显著基因的数据。结果高脂饮食显著增加小鼠的体质量和血糖, HE染色显示高脂饮食小鼠肝脏脂质积聚。转录组学火山图显示,高脂饮食16周,在795个免疫相关基因中有157个免疫相关基因的表达水平显著变化。高脂饮食38周有235个免疫相关基因显著变化,然而大多数基因呈上调趋势。在发生显著变化的基因中,选择了6个基因来验证转录组的数据。高脂饮食16周时, CD36和PR结构域蛋白1(PRDM1)显著上调, CD276显著下调。高脂饮食38周, CXC趋化因子配体1(CXCL1)、 CD40、甲酰肽受体1(FPR1)均呈现显著上调。实时荧光定量PCR数据一般都遵循转录组数据的趋势。结论长期高脂饮食的小鼠肝脏免疫相关基因表达水平发生显著变化。     

人类干扰素的基因顺序

目前,对人类干扰素研究的兴趣集中在说明人成纤维细胞干扰素(F-IF)和白细胞干扰素(Le-IF)的基因顺序.这两种分子在体内抗病毒和抗肿瘤的能力,引起了人们的极大关注。虽然两种分子可以引起相似的生物学效应,但是靶细胞的专一性不同,因此抗体抵御其中的一种而对另一种无作用。也有证据表明,这两种蛋白质是由不同的mRNA分子所翻译。既然知道F-IF和Le-IF的顺序,这些区别的产生便逐渐明瞭。     

运动可以抑制肥胖基因

体能活动可以减少肥胖遗传倾向的影响。据美国WebMD医学新闻网(2011-11-09)报道,肥胖可能是遗传,但没有理由不运动。事实上身体活动能减少成年人肥胖基因(FTO)的影响。     

人类SRY基因的研究进展

人类ＳＲＹ基因的研究进展鄢波，张思仲早在１９８６年，Ｖｅｒｇｎａｕｄ和Ｐａｇｅ根据对性反转患者染色体的缺失分析，将染色体划分为７个区段，建立了Ｙ的缺失定位图，并认为睾丸决定因子基因定位于其中的Ａ区。此后Ｐａｌｍｅｒ等对３名ＸＸ男性的研究表图１ＳＲＹ基...     

人类胃泌素基因的结构

属于多肽类激素的胃泌素是胃酸分泌的主要调节因子。目前胃泌素基因已经从人DNA的基因文库中分离出,本文报道了该基因的分离,着重测定了其核苷酸顺序。作者对携带人胃泌素基因组的噬菌体基因文库进行筛选,得到有人胃泌素cDNA克隆的30个噬菌斑杂交。纯化这些噬菌斑后,DNA即能从所有30个克隆株中分离出,并能借助于South-ern方法对已被不同限制性内切酶消化了的DNA片段进行分析。而起始密码子或5＇端非编码区域的分     

人类DNA修复基因

ＤＮＡ损伤与修复是一种重要的生命现象，在维持基因组的稳定性方面及致癌、致突变过程中起着非常重要的作用。近几年来，随着部分人类ＤＮＡ修复基因被相继克隆和鉴定，人们已经在某些染色体不稳定综合征患者的体细胞中发现了有关基因突变，同时对肿瘤组织ＤＮＡ修复基因的检测也显示存在突变或表达异常，这些结果为揭示某些个体ＤＮＡ修复能力低下的分子机制及进一步筛查肿瘤易感者奠定了基础。本文简要地概述了人类ＤＮＡ修复基因的结构、功能、临床意义以及目前存在的问题和未来的研究方向。     

人类DNA修复基因

ＤＮＡ损伤与修复是一种重要的生命现象，在维持基因组的稳定性方面及致癌，致估变过程中起着非常重要的作用，近几年来，随着部分人类ＤＮＡ修复基因被相继克隆和鉴定，人们已经某些染色体不稳定综合征患者的体细胞中发现了有关基因突变，同时对肿瘤组织ＤＮＡ修复基因的检测也显示存在突变或表达异常，这些结果为揭示某些个体ＤＮＡ修复能力低下的分子机制及进一步筛查肿瘤易感者奠定了基础。本文简要地概述了人类ＤＮＡ修复基因的     

人类Ir基因研究进展

免疫反应的基因调控是一个引人瞩目的问题。Snell,Benacerraf和Dausset在这方面做出了杰出的贡献。目前积累的资料已证明免疫反应基因(Immune res-ponse gene,Ir gene)的存在和定位、Ir基因的核苷酸序列、Ir基因产物的结构组成及其在免疫调控中的作用等一系列问题。有关Ir基因的知识大部分来源于对小鼠的研究。近年来关于人类Ir基因研究的专题     

人类精浆及小鼠精于抑制NK活性的研究

精液免疫抑制物质可使妇女免罹过敏反应或不育,也可减少男性发生自身免疫反应。深入研究不仅有助于阐明带父体基因的受精卵为何不被排斥等正常生育机理,而且也可为寻找不育病因奠定基础.本文报道了人类精浆及其提取物在体内.外对NK活性的抑制效应;同时发现,同种小鼠精子经静脉注射或直肠灌注后也有抑制NK活性;以模拟同性恋活动方式,即肛门灌注人类精浆及其提取物或小鼠精子,发现抑制效应更为显著.     

人类ZFY基因自动测序及影响因素的探讨

目的建立一种较简便、敏感的对性连锁遗传病胎儿进行产前性别鉴定方法并探讨高温循环全自动测序中几个因素对测序鉴定ZFY基因结果的影响.方法自行设计ZFY引物并建立了巢式聚合酶链反应扩增男性特异性ZFY基因方法,计算机辅助设计的两对寡棱苷酸引物位于Y染色体短臂的Ucdo43保守区内;同时对DNA纯度、浓度和测序过程中水的质量对DNA自动测序结果的影响进行回顾性分析.结果结果表明在DNA纯度、浓度较低以及配制测序胶时所用纯水水质较差时,对测序曲线造成不同程度的影响,从而影响测序结果.结论提示该方法检测胎儿DNA是可行的,同时在DNA自动测序鉴定产物特异性时需使用高纯度高浓度的DNA和高质量的纯水,要想获得较长的测序片段,所用模板浓度不能太低.     

人类KIR基因PCR-SSP分型及家系研究

杀伤细胞免疫球蛋白样受体 (KIR )是NK细胞和某些T细胞表面表达的一组特异识别人类主要组织相容性抗原MHCI类分子的受体 ,对NK细胞效应功能的发挥起重要免疫调节作用。KIR由一组位于人类 19q13 4染色体上的多态性丰富的多基因家族所编码 ,其结构和功能具有多样性。每一个体含有不同种类和数目的KIR基因 ,而同一位点的等位基因又具有丰富的多态性 ,目前在低分辨率水平上 ,可检测到包括两个假基因在内的 18个所有已知基因。文章介绍我室建立的在KIR多基因家族多样性研究中所采用的PCR SSP基因分型方法以及单倍型的家系分析。