肾上腺皮质肿瘤神经内分泌学特性的初步研究

目的:探讨肾上腺皮质肿瘤的神经内分泌学特性.方法:对长征医院1999年6月至2005年6月收治的99例肾上腺皮质肿瘤患者进行回顾性分析.应用单克隆抗体免疫组化技术链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(S-P法)检测99例肾上腺皮质肿瘤组织中神经特异性烯醇酶(neuron specific enolase,NSE)、嗜铬素A(CgA)、突触素(Syn)的表达,收集患者的一般资料,包括患者年龄、临床症状、检验结果、病理类型等,进行统计学处理.结果:三种蛋白在肾上腺皮质腺瘤中均有大量表达,NSE阳性率为80%,CgA阳性率为48.9%,Syn阳性率为75.6%.在皮质腺癌中的表达率为 NSE 77.8%,CgA 22.2%,Syn 77.8%.在正常肾上腺组织中的表达率为 NSE 20%,CgA 0%,Syn 10%.NSE、CgA、Syn三种蛋白在肾上腺皮质腺瘤和肾上腺皮质腺癌之间的表达没有显著性差异(P＞0.05),但均比正常肾上腺组织明显升高(P＜0.05).结论:肾上腺皮质肿瘤无论腺瘤、腺癌,均表现出神经内分泌学特性,提示其发生与肾上腺皮质中的神经内分泌细胞的异常增殖有关.     

β-catenin和APC蛋白在甲状腺肿瘤中的表达及意义

目的：探讨甲状腺正常组织、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中β-catenin和APC蛋白的表达特征及其意义。方法；采用S－P（S－ABC）免疫组化法检测40例甲状腺腺瘤旁正常组织、40例甲状腺腺瘤和39例甲状腺癌手术标本β－catenin和APC蛋白的表达。结果：β－catenin在40例正常甲状腺组织中均为正常阳性表达，在40例甲状腺腺瘤中异常表达率为57.5%(23/40)，在39例甲状腺癌中异常表达率为100％（39／39）。APC蛋白在正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中正常阳性表达率分别为100％（40／40）、97.5%(39/40)和97.4%(38/39)。结论：β-catenin在正常甲状腺组织中均为正常阳性表达，在甲状腺腺瘤和甲状腺癌中呈异常表达，甲状腺癌异常表达率高于甲状腺腺瘤，两异常表达率有显差别（P＜0.005)。APC蛋白表达在甲状腺正常组织、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中未发现显差别（P＞0.05)。     

应用组织芯片技术研究A103和Inhibin α在肾上腺皮质腺瘤中的表达

目的：研究A103及Inhibinα在肾上腺皮质腺瘤中的潜在诊断价值并探讨组织芯片技术应用的可行性．方法：制备肾上腺组织芯片，含79例样本，其中正常肾上腺3例，肾上腺皮质腺瘤66例，肾上腺转移癌5例，嗜铬细胞瘤5例。用免疫组织化学Envision法检测A103及Inhibinα的表达。结果：免疫组织化学染色A103阳性率分别为正常肾上腺皮质100％(3／3)，肾上腺皮质腺瘤90．2％(55／61)，肾上腺转移癌0％(0／4)，嗜铬细胞瘤0％(O／4)；Inhibinα在正常肾上腺皮质中100％表达，阳性部位主要在网状带与束状带内层，肾上腺皮质腺瘤阳性率83.6％(51／61)，肾上腺转移癌O％(O／4)，嗜铬细胞瘤0％(0／4)．结论：A103及Inhibinα的联合应用对于肾上腺皮质腺瘤的诊断及其与其它肿瘤的鉴别诊断有较高价值。     

大肠腺癌组织中细胞核因子κB的表达及意义

目的：探讨细胞核因子κB（NF－κB）表达与大肠腺癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测NF－κB p65在52例大肠腺癌、21例大肠腺瘤及10例正常大肠粘膜中的表达情况。结果：52例大肠癌中34例NF－κB p65阳性，阳性产物主要定位于肿瘤细胞胞浆。21例大肠腺瘤中10例NF－κB p65阳性，10例正常大肠组织中NF－κB p65无1例阳性表达。NF－κB p65的表达与患的性别、大肠癌组织学分型、淋巴结转移、Dukes'分期无关。结论：NF－κB p65是大肠癌相关的一种癌蛋白；NF－κB p65蛋白表达可能是大肠癌形成的一个早期事件，它可做为大肠癌的一个新的潜在的诊断标志物。     

大肠癌中β-catenin、E-cadherin、c-mye和cyclinD1的表达及其临床意义

目的：探讨β-catenin、E-cadherin、C-myc和cyclinD1在大肠癌发生、发展过程中的作用。方法：应用免疫组织化学方法检测30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤、30例大肠腺瘤恶变及50例大肠癌组织中pcatenin、E-cadherin、c-myc和cyclinD1蛋白的表达情况。结果：大肠癌、大肠腺瘤恶变和大肠腺瘤的pcatenin胞浆和（或）胞核异位表达率分别为：62．0％、53．3％、30．0％，显著高于正常大肠黏膜（0％）（P〈0．01）；大肠癌pcatenin异位表达率显著高于大肠腺瘤（P〈0．01）。大肠癌、大肠腺瘤恶变、大肠腺瘤c—myc和cyclinD1阳性率分别为：56．0％、66．0％；60．0％、50．0％；46．7％、30．0％，显著高于正常大肠黏膜（0％、0％）（P〈0．01），大肠癌cyclinD1阳性率显著高于大肠腺瘤（P〈0．01）。大肠癌中pcatenin、E-cadherin膜表达缺失率分别为：46．0％、34．0％，显著高于大肠腺瘤（10．0％、6．67％）和正常大肠黏膜（0％、0％）（P〈0．01），二者膜表达缺失和cy—clinD1阳性表达与大肠癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关。大肠癌中pcatenin异位表达与c-myc和cyclinD1阳性表达呈正相关关系（r=0．63，P〈0．01；r=0．57，P〈0．01）。结论：pcatenin异位表达，激活癌基因c—myc和cyclinD1阳性表达是大肠癌发生中的早期事件，并与大肠癌的发生发展密切相关；pcatenin、E—cadherin膜表达缺失和cyclinD1阳性表达与大肠癌的侵袭、转移有关。     

14例神经内分泌癌的免疫组织化学及超微结构观察

报告14例神经内分泌癌（NECC），11例在肺，3例位于食管。12例为小细胞神经内分泌癌，2例系类癌。11例作了免疫组织化学染色。9例示NSE及CEA阳性，3例S—100蛋白及NF阳性。7例CK阳性，EMA阳性4例。4例进行透射电镜观察，均可见神经内分泌颗粒，2例见到张力原纤维及微绒毛，1例发现桥粒。胞浆内微囊及微小腺腔各1例。结果表明NECC起源于原始多能干细胞，具有向神经内分泌、腺或/和鳞形上皮异质性分化的特性。     

肾上腺皮质肿瘤Ki67表达和P16蛋白表达的相关性及意义

目的研究肿瘤增殖抗原Ki67和抑癌基因P16与肾上腺皮质肿瘤的关系。方法应用免疫组化方法检测68例肾上腺皮质肿瘤（腺瘤60例、腺癌8例）及9例瘤旁正常组织标本中Ki67及P16的标记指数（La—beling Index，LI）。结果Ki67在正常肾上腺组织不表达，在腺癌表达最高，腺瘤次之；P16在正常肾上腺组织表达最高，腺瘤次之，腺癌最低，Ki67和P16在肾上腺皮质肿瘤表达的结果相比较差异有显著性（P〈0．001），且存在负相关关系（r=-0．7136，P〈0．05）。Ki67的LI在肾上腺皮质腺瘤、腺癌的界定值（cut point）为4％；P16的LI在肾上腺皮质腺瘤、腺癌的界定值为12％。结论Ki67及P16的表达与肾上腺皮质肿瘤显著相关，肾上腺皮质肿瘤组织Ki67的LI〉4％和P16的LI〈12％时，提示为腺癌。联合检测Ki67和P16在肾上腺皮质肿瘤的表达对区别良、恶性肾上腺皮质肿瘤具有重要意义，可以作为早期诊断肾上腺皮质腺癌的生物学指标之一。     

P16蛋白表达与胃癌生物学行为的联系

目的 探讨P16蛋白表达与胃癌生物学行为的关系。方法 采用S－P免疫组织化学方法，检测51例胃癌组织中P16蛋白的表达，并与正常胃组织进行对比。结果 正常胃组织和胃癌组织中P16蛋白阳性表达率分别为100．0％（12／12）和39．2％（20／51），两组比较有非常显性差异（P＜0．001）。P16蛋白的阳性表达与胃癌分化程度、浸润深度无明显关系（P＞0．05），但在有淋巴结转移的胃癌中，P16蛋白的阳性表达率仅25．8％（8／31），而无淋巴结转移组P16蛋白的阳性表达率为60．0％（12／20），两组间有显性差异（P＜0．05）。结论 P16蛋白表达缺失与胃癌的发生及淋巴结转移有密切关系。检测P16蛋白表达可作为诊断胃癌及判断患预后的参考指标。     

神经元特异性烯醇化酶和突触素在人胚胎胃发育阶段的表达

目的探讨神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase, NSE）和突触素（synaptophysin, SYN）在人胚胎胃发育阶段的
分布规律及其表达意义。方法应用免疫组织化学法检测第2~4个月龄段,共16例人胚胎,胃壁组织内SYN和NSE的表达、分布
状况。结果第2~4个月胎龄段,NSE在人胚胎胃肌间神经丛内的神经细胞及神经纤维均呈强阳性表达;在粘膜下层,随着胎龄
的增大,NSE阳性表达细胞和纤维数量逐渐增多,在黏膜层NSE呈阴性表达。第2个月胎龄段,SYN在人胚胎胃肌间神经丛呈阳
性表达,在粘膜层内呈阴性表达;第3~4个月龄段,SYN在胃粘膜层、粘膜下层及肌间神经丛内均有阳性表达,随着胎龄增大,阳
性表达数量逐渐增多。结论人胚胎胃发育阶段,NSE和SYN在胃壁的阳性表达和分布不一致,均参与胃壁神经系统的发育过程。
     

NF-κB、COX-2在结肠癌及癌前病变中的表达及其临床意义

目的探讨核转录因子-κB（NF—κB）及环氧合酶-2（COX-2）在结肠癌及癌前病变的表达及其与临床特征之间的关系。方法通过免疫组织化学染色（Power VisionTM两步法）法检测15例溃疡性结肠炎、14例绒毛状腺瘤、17例重度不典型增生及74例结肠癌组织标本中NF—κB、COX-2的表达情况。结果COX-2在正常黏膜、溃疡性结肠炎、绒毛状腺瘤、重度不典型增生、结肠癌中阳性表达率分别为20．00％（2／10），46．67％（7／15），35．71％（5／14），47．06％（8／17），64．47％（49／76）；NF—κB在正常黏膜、溃疡性结肠炎、绒毛状腺瘤、重度不典型增生、结肠癌中阳性表达率分别为10．00％（1／10），53．33％（8／15），21．43％（3／14），47．06％（8／17），57．89％（44／76）；COX-2、NF—κB在结肠癌中的表达与肿瘤大小、肿瘤分期相关，与性别、年龄无关；在结肠癌肿瘤组织中，NF—κB与COX-2表达具有相关性（X^2=5．0552，P：0．025）。结论在炎症情况下，NF—κB持续表达可能导致COX-2过度表达，引起肠黏膜细胞过度增生，成为结肠癌形成的早期事件并在结肠癌的浸润和转移中起到重要作用，因而提示NF—κB可作为肿瘤防治新的靶点。     

肾上腺皮质肿瘤细胞中Fas、Fas-L、HLA-DR蛋白的表达及其意义

目的观察Fas、Fas—L、HLA-DR蛋白在肾上腺皮质肿瘤中的表达，探讨其在肾上腺皮质肿瘤免疫逃逸中的作用及意义。方法采用免疫组化SP法检测55例肾上腺皮质腺瘤和17例肾上腺皮质腺癌Fas、Fas—L、HLA-DR蛋白的表达，应用Mias99图像分析系统对检测结果进行分析。结果①Fas、HLA-DR在肾上腺皮质癌中表达减少，其阳性细胞率、平均吸光度值和阳性染色面积均明显低于肾上腺皮质腺瘤（P〈O．01）；②Fas-L在肾上腺皮质癌中表达增多，其阳性细胞率、平均吸光度值和阳性染色面积均明显高于肾上腺皮质腺瘤（P〈0．01）。结论①Fas／Fas-L系统与HLA—DR可能在肾上腺皮质肿瘤的免疫逃逸机制中发挥重要作用；②Fas、HLA—DR可作为判别肾上腺皮质良、恶性肿瘤的指标。     

Survivin在侵袭性垂体腺瘤中的表达及其与bcl-2、bax表达的关系

目的探讨凋亡抑制基因survivin在侵袭性垂体腺瘤中的表达，及其与bcl-2、bax蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（SP法），检测39例侵袭性垂体腺瘤瘤组织中survivin、bcl-2、bax蛋白的表达，与非侵袭性垂体腺瘤32例进行对照。结果侵袭性垂体腺瘤中survivin蛋白阳性表达率为61．5％，明显高于非侵袭性垂体腺瘤的阳性表达率21．9％（P〈0．01）；在侵袭性垂体腺瘤中survivin蛋白表达与bcl-2蛋白表达呈正相关（P〈0．01），而与bax蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论survivin可通过抑制肿瘤细胞凋亡，对侵袭性垂体腺瘤的发生、发展起重要作用，并与凋亡相关基因bcl-2、bax在侵袭性垂体腺瘤的发展中分别起协同和拮抗作用。     

凋亡相关基因P53、Bcl—2大肠癌中的表达及与预后的关系

目的：探讨大肠癌中凋亡相关基因P53、Bcl-2的表达与预后的关系。方法：应用S－P免疫组化技术对15例大肠粘膜，39例大肠腺瘤和88例大肠腺癌进行检测。结果：15例正常大肠粘膜，39例大肠腺瘤和88例大肠腺 癌中，P53阳性表达率依次增高，分别为0、10．3％、53．4％（P＜0．01）；Bcl-2阳性表达率依次降低，分别为93．33％，61．54％，35．23％（P＜0．01）。大肠癌P53表达在有淋巴结转移组明显高于无转移组（P＜0．01）；Bcl-2表达随机组织分级的降低而降低（P＜0．05）。88例大肠癌中，P53阳性表达的术后5年生存率为36．2％，明显低于阴性表达组的68．3％（P＜0．01；Bcl-2阳性表达的术后5年生存率为64．52％，明显高于阴性表达组的17．54％（P＜0．01），结论：P53和Bcl-2表达的检测有助于大肠癌的诊断及预后的判断.     

核因子κB在大肠腺癌及腺瘤组织中的表达

目的 :探讨核因子κB (NF κB)表达与大肠腺癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测NF κBp6 5在 5 2例大肠腺癌、2 1例大肠腺瘤及 10例正常大肠粘膜中的表达情况。结果 :5 2例大肠癌中 34例NF κBp6 5阳性 ,阳性产物主要定位于肿瘤细胞胞浆。 2 1例大肠腺瘤中 10例NF κBp6 5阳性 ,10例正常大肠组织中NF κBp6 5无 1例阳性表达。大肠腺瘤与大肠癌间NF κBp6 5的阳性表达率差异无显著意义。NF κBp6 5的表达与患者的性别、大肠癌组织学分型、淋巴结转移、Dukes分期无关。结论 :NF κBp6 5是大肠癌相关的一种癌蛋白 ;NF κBp6 5蛋白表达可能是大肠癌形成的一个早期事件 ,NF κBp6 5蛋白可能为大肠癌的一个新的肿瘤标志物     

神经内分泌标志物在无功能胰岛细胞瘤中的表达及意义

目的：研究神经内分泌标记嗜铬粒蛋白(CG)、突触素(Syn)和神经特异性烯醇化酶(NSE)在无功能胰岛细胞瘤中的表达及意义。方法：用链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶法(S-P法)对我院收治的1988-2001年间共14例无功能膜岛细胞瘤石蜡标本进行了嗜铬粒蛋白(CG)、突触素(Syn)和神经特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学研究。结果：14例无功能膜岛细胞瘤中NSE、CG和Syn的阳性表达分别有12、8和12例，阳性率分别为85．7％、51．7％和85．7％。除1例外，其余病例中3种激素至少有一种阳性表达。结论：CG、Syn、NSE在无功能胰岛细胞瘤中呈强阳性表达，是胰腺无功能膜岛细胞瘤的良好标记，联合检测有助于提高检测的敏感性。     

髓母细胞瘤中间丝蛋白及神经内分泌标志物表达的研究

采用免疫组化ＡＢＣ法对８２例髓母细胞瘤（ＭＢ）进行中间丝蛋白（ＧＦＡＰ、ＮＦ、Ｖｉｍ）和神经内分泌标志物（ＳＹＮ、ＣｇＡ）检测。结果显示ＭＢ８２例中，ＧＦＡＰ阳性７４例（９０．２４％）、ＮＦ阳性１７例（２０．７３％）、Ｖｉｍ阳性３３例（４０．２４％）、ＳＹＮ阳性６２例（７５．６１％）、ＣｇＡ阳性２２例（２６．８３％）。有８例肿瘤５种标志物均有表达，其余也有２种或２种以上标志物表达。标志物表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化及预后等因素之间无关（Ｐ皆＞０．０５）。提示髓母细胞瘤是具有不同中间丝蛋白及神经内分泌标志物表达的异质性肿瘤。这种表达可能是幼稚的原始神经外胚层组织胚胎发育过程中标志物表达的重演。     

伽玛刀治疗垂体腺瘤

目的评价研究伽玛刀治疗垂体腺瘤的效果，探讨影响其疗效的因素。方法总结67例垂体腺瘤的伽玛刀治疗与随访资料。其中PRL腺瘤37例，GH腺瘤10例，ACTH腺瘤2例，混合性腺瘤3例，无功能性腺瘤15例；肿瘤直径为6．2～39．0mm。采用1．5T磁共振定位，Gamma-Plan计划系统规划，等剂量曲线45％～60％，治疗实施周边剂量为9～35Gy，中心剂量为20～70Gy。结果随访3～26个月，肿瘤控制66例（98．5％），肿瘤缩小41例（61．2％），肿瘤完全消失2例（3．0％），内分泌症状改善47例（88．0％）。结论伽玛刀对于垂体腺瘤是一种安全有效的治疗方法，其疗效与腺体的类型、体积、照射剂量和MR／信号特征密切相关。     

Neuron specific enolase, p53蛋白和proliferating-cell nuclear antigen在肺癌组织中的表达及意义

目的：研究神经元特异性烯醇化酶（neuronspecificenolase，NSE）的表达，与p53蛋白和增殖细胞核抗原（prolif－erating－cellnuclearantigen，PCNA）表达的关系及意义．方法：用特异性鼠抗人单克隆抗体，按LSAB免疫组织化学方法检测石蜡包埋的肺癌标本中NSE，p53蛋白和PCNA的表达．结果：在小细胞性肺癌（SmallCellLungCancer，SCLC）中，NSE阳性表达者，PCNA标记指数（LabellingIndex，LI）高于NSE阴性者，而p53蛋白的表达与NSE的表达无关．在非小细胞性肺癌（non－smallcelllungcancr，non－SCLC）中，p53蛋白的表达和PCNALI均与NSE的表达无关．结论：在SCLC的发生及发展过程中，神经内分泌功能可能起了部分作用．而p53抑癌基因在SCLC的发生中并不起着重要的作用．     

51例非小细胞肺癌神经内分泌分化的研究

应用光镜、电镜及免疫组化方法对51例非小细胞肺癌的神经内分泌分化特征进行研究．结果表明，51例NSCLC中有27例具有神经内分泌分化特征，占总病例的52．94％。其中电镜发现有神经内分泌颗粒者13例（25．49％），神经内分泌特异性免疫级化标记（NSE和／或Leu-7）阳性16例（31．4％）。组织学类型主要是腺癌。本文还对具有神经内分泌分化特征的非小细胞肺癌的治疗和预后以及肺癌的起源和分类进行了探讨。     

大肠癌发生中突变型P53与hMLH1表达的关系

[目的]探讨在大肠癌发生过程中错配修复基因hMLH1对p53基因突变的影响。[方法]采用免疫组化SP法检测37例正常大肠黏膜、32例大肠腺瘤与165例大肠癌中P53及hMLHI蛋白的表达。[结果]（D正常大肠黏膜组、大肠腺瘤组与大肠癌组P53蛋白的阳性表达率分别为0％、21．9％与48．5％,三组间差异有显著性意义（P〈0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为100％、87．5％与87．3％,其中正常大肠黏膜组与大肠癌组的差异有显著性意义（P〈0．05）。②高中分化、低分化与黏液腺癌组中P53蛋白的阳性表达率分别为53．5％、17．6％与16．7％,其中前者与后两者的差异有显著性意义（P〈0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为90．8％、70．6％与50．0％,前者明显高于后两者（P〈0．05）。③在大肠腺瘤轻中度不典型增生和重度不典型增生组中P53蛋白的阳性表达率分别为18．5％与40．0％（P〉0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为92．6％与60．0％（P〈0．05）。④大肠腺瘤中随hMLH1蛋白的表达减少P53蛋白表达增多,但无明显相关性（P〉0．05）;大肠癌中两者的表达呈明显负相关（P〈0．05）。[结论]大肠癌发生过程中hMLH1基因的功能异常可能是p53基因突变的原因之一．