原位杂交法检测非甲─非庚型肝炎患者肝组积中新型肝炎病毒DNA

目的证实在非甲-非庚型病毒性肝炎患者肝组织中一种新型肝炎病毒（transfusion－transmittedvirus，TTV）的存在．方法采用地高辛素标记TTVDNA探针以原位杂交技术对51例血清学病毒标记非甲-非戊型、免疫组化检测肝组织中HGVNSS阴性的病毒性肝炎患者石蜡包埋肝组织进行了检测．结果各型病毒性肝炎肝组织中TTV基因的总检出率为27．5％，其中急性轻型肝炎的检出率为30．8％（4／13），急性重型肝炎（1／8，12．5％），亚急性重型肝炎（3／7，42．9％），慢性肝炎（2／6，33．3％），活动性肝硬变（2／9，22．2％），慢性重型肝炎（1／4，25％），原发性肝癌（1／4，25％）TTVDNA表达于肝细胞核或胞浆内，以核型多见．在急性肝炎，TTV阳性细胞弥漫分布于肝小叶内，慢性肝炎于汇管区附近较为密集，而在肝硬变病例，阳性细胞在假小叶内多呈片簇状不规则分布结论在不明原因病毒性肝炎患者血清及肝组织中TTVDNA的检出表明TTV为一种新型的肝炎病毒，TTV为一种嗜肝性病毒，在我国存在着TTV感染     

输血传播性病毒的流行病学及临床研究

目的:观察分析不同人群中TTV(transfusion transmitted virus)感染状况及相关临床意义。方法:在TTVORF1设计引物,建立巢式聚合酶链反应,检测不同人群中血清TTV DNA,并对比观察肝炎病人的临床表现。结果:29例健康人群,27例职业献血员,56例乙型肝炎,31例丙型肝炎和47例非甲～非庚型肝炎患者中,TTV DNA阳性率分别为6.9％、3.7％、23.2％、25.8％和42.6％。3种肝炎病人中,TTV DNA阳性和阴性组间4项主要临床指标无显著差异。结论:健康人群和职业献血员存在TTV健康携带者。非甲～非庚型肝炎患者TTV感染率最高。乙型和丙型肝炎患者重叠TTV感染较常见。3种肝炎病人中,合并TTV感染组与非感染组临床表现无明显差异。TTV的致病性尚待深入研究。     

成都地区新型肝炎病毒TTV的临床研究

目的了解成都地区是否存在新型肝炎病毒TTV感染，以及TTV感染后致病性探讨。方法对成都地区健康人群、非甲-庚型肝炎患者及甲-庚型肝炎患者采用PCR检测血清TTVDNA，并对单-TTV感染的急、慢性肝炎患者进行临床资料分析和随访。结果①成都地区健康人群中TTV DNA阳性率7．5％(3／40)，职业献血员中为21．9％(7／32)，非甲一庚型肝炎中为31．6％(42／133)。②单一TTV感染肝炎患者中76．2％(32／42)临床表现为急性肝炎，14．3％(6／42)慢性肝炎，7．1％(3／42)重型肝炎，2．4％(1／42)肝炎肝硬化。③随访观察单一TTV DNA急性肝炎12例，半年内临床症状及肝功能恢复正常，11例TTV DNA阴转，8．3％(1／12)TTV DNA持续阳性1年以上。随访慢性肝炎单一TTV DNA阳性4例，2例在2年内肝功恢复正常，TTV DNA阴转，另2例发展成重型肝炎和肝硬化，近期无死亡病例。结论①成都地区存在TTV感染。②单一TTV感染除可表现为健康携带和肝炎恢复期慢性携带状态外，可引起临床急性、慢性、重型和肝硬化等多种临床类型的肝脏病变，还可和其他已知的肝炎病毒形成二重或多重感染。研究结果支持TTV可能是另一种致肝损害的新型肝炎病毒，是至今原因不明的病毒性肝炎的病原学之一。     

236例肝炎患者TT病毒感染情况分析

目的 了解广东地区肝炎患者TTV感染情况及TTV感染与肝功能关系。方法 用巢式聚合酶链反应,检测本院236例住院肝炎患者中TTV DNA阳性情况,并检测其肝功能指标。结果 在236例肝炎患者中TTV DNA检出率为5.9％(14/236),其中非甲～庚型肝炎TTV DNA阳性率为14.3％(5/35),乙型肝炎中TTV DNA阳性率为4.4％(7/140),乙型肝炎中TTV DNA阳性及TTV DNA阴性患者各项生化指标无差异。结论 TTV DNA在非甲～庚型肝炎中检出率明显高于其他肝炎,说明TTV可能为部分非甲～庚型肝炎的致病原因,TTV DNA在乙型肝炎中检出率较低,可能为乙型肝炎病毒影响TTV存在。乙型肝炎合并TTV感染未明显加重病情。重型肝炎中未检测到TTVDNA。     

106例非甲～戊型肝炎临床分析

目的:探讨非甲～戊型病毒性肝炎的临床特点及其可能的致病因素。方法:通过对106例非甲～戊型病毒性肝炎患者的临床表现及生化检测来探讨其临床特点,对部分病例进行HGV RNA及TTV DNA检测来探讨可能的致病因素,并对其中4例病情持续波动超过6个月、HBsAb( )或HBsAb( )兼HBcAb( )的患者进行肝组织活检和采用肝组织免疫组织化学法(免疫组化)检测HBsAg和HBcAg。结果:106例非甲～戊型肝炎的临床表现、重症化比率与一般的病毒性肝炎相似,慢性化比率较一般的病毒性肝炎高,女性发病率较一般的病毒性肝炎高;男:女约为2:1。27例用PCR法检测HGV DNA为阴性,其中10例同时用PCR法检测TTV DNA也为阴性。4例HBsAb( )或HBsAb( )兼HBcAb( )的慢性肝炎患者,肝组织活检病理学改变与临床诊断相符,免疫组化显示HBsAg和HBcAg均阴性。结论:106例非甲～戊型肝炎的临床表现与一般的病毒性肝炎相似;慢性化、重症化比率较一般的病毒性肝炎高;女性发病率较一般的病毒性肝炎高;HGV、TTV可能不是非甲～戊型肝炎的主要致病因素;HBsAb( )者,肝组织内无HBsAg和HBcAg...     

非甲～庚型肝炎患者中TTV感染的调查

目的了解TTV在我院非甲-庚型肝炎患者中的感染状况。研究TTV感染对非甲-庚型肝炎临床表现的影响,探讨TTV在病毒性肝炎中的致病作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)斑点杂交法对我院108例非甲-庚型肝炎患者血清标本进行TTV DNA检测。结果非甲-庚型肝炎患者TTV DNA阳性率为14.8％(16/108),急、慢性肝炎及重型肝炎患者中TTV DNA的检出率无统计学差异。TTV阳性组与TTV阴性组肝脏临床及生化指标无显著性差异。结论TTV可能并非是导致肝脏功能损害的真正病原。     

徐州地区部分人群TTV感染的检测及分析

TTV为1997年底日本学者在输血后非甲～非庚型肝炎患者血清中发现的单链DNA病毒,基因组全长为3739个核苷酸.由于该病毒的存在与血清ALT升高密切相关,而被认为可能是继庚型肝炎病毒(HGV)之后发现的又一新型肝炎相关病毒.有报道,在供血员、不明原因的暴发性肝炎和急、慢性肝炎患者中均存在TTV感染.为了解徐州地区TTV感染状况,我们以套式聚合酶链反应(nested-PCR)扩增技术对部分人群血清进行了TTV DNA检测,现将结果报道如下.     

山东地区输血传播病毒(TTV)检测及部分基因克隆和序列测定

目的 了解TTV山东分离株感染状况及基因变异的情况。方法应用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测26例山东地区非甲-庚型肝炎和12例肝细胞癌患者血清中TTV DNA,并对阳性扩增的产物利用PCR技术直接克隆和测序,分析其基因变异的情况。结果26例非甲-庚型肝炎中11例TTV DNA阳性(42％)。对其中两株(TTVSD4、TTVSD5)部分基因克隆测序,并与日本株(ABOO8394)相比较,其核苷酸旬同源性为99.9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTV DNA阳性(25％),对其中一株(TTVSD6)部分基因克隆与测序,与日本株(ABOO8394)相比较,其核苷酸序列同源性为99％;TTV山东株三株间核苷核同源性均为99％。结论本研究证实山东地区非甲-庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染,TTV感染可能具有嗜肝性,而且可能与肝功能损害有关,是引起非甲-庚型肝炎的重要病原。     

单项抗-HBs阳性肝炎的临床与病理分析

目的 分析单项抗-HBs阳性肝炎的临床与病理特征,提高对单项抗-HBs阳性肝炎的认识。方法 对72例单项抗-HBs阳性肝炎患者进行肝炎病毒血清学检测、肝功能检查、血清HBV DNA检测及肝穿刺活组织病理和免疫组化检查。结果 72例患者除去4例脂肪肝和3例Dubin-Johnson综合征外,另65例中89.2％为慢性肝炎(58/65),其中慢性肝炎轻度占慢性肝炎79.3％(46/58)。与病理诊断比较临床诊断的正确率为61.1％,在慢性肝炎轻度则较高为71.7％。临床表现和肝功能变化与肝组织炎症活动度密切相关。3.2％的患者示肝内HBsAg或/和HBcAg阳性,而血清HBV DNA检测7.9％阳性。结论 单项抗-HBs阳性肝炎多为慢性肝炎,临床表现轻,炎症活动度和纤维化程度较轻,但体内仍可有HBV复制,仍可发展为肝硬化。肝穿刺病理及免疫组化检测有助于明确诊断。     

经输血传播病毒在肝外组织中的检测及其意义

目的 探讨经输血传播病毒（TTV）在肝及肝外组织的定位、分布及其意义。方法 采用PCR及原位杂交方法,对13例非甲－非庚型病毒性肝炎患者的尸解肝、胰、肾、脾、睾丸和心脏石蜡包埋组织中的TTV DNA进行了检测。结果 5例肝组织、3例肾脏及胰腺、腺脏组织各2例中检出了TTV核酸杂交信号,2例睾丸及心肌组织各检出1例,阳性信号主要定位于肝及肝外组织实质细胞的核内,这些肝外组织未见明显的病理损伤改变。PCR的检出率与原位杂交基本一致。结论 TT病毒能感染肝及肝外组织,肝外组织中的感染可能与TT病毒的再度感染及在不同人群中的较高感染率有关。     

TTV DNA在肝组织中表达研究

目的 探索TTV DNA在肝组织表达特点。方法 选择TTV DNA高保守区设计一对引物，采用PCR扩增法，以地高辛标记TTV ORF1部分基因序列，合成Gla，G2b两种亚型的双链TTV DNA探针。应用巢氏PCR法筛选出TTV DNA阳性的慢性肝炎、肝硬化、原发性肝癌病人的肝组织标本共60份，同时用两种探针进行原位杂交。结果 TTV DNA主要见于肝细胞、肝癌细胞的细胞核内，极少数肝细胞胞浆内TTV DNA呈弱阳性。TTV DNA阳性细胞在慢性肝炎、肝硬化、肝癌组织中均呈散在分布。肝癌组织与癌周组织中TTV DNA阳性细胞密集程度差别不明显。结论 TTV是一种嗜肝病毒，TTV DNA在被感染肝组织及肝癌的细胞核内表达及复制。     

山东地区输血传播病毒(TTV)检测和部分基因克隆及序列测定

目的：了解TTV山东分离株感染状况及基因变异的情况。方法：应用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测26例来自山东泰安、莱芜、济宁、菏泽、枣庄及临沂、日照地区非甲－庚型肝炎和12例肝细胞癌患者，其中HBV感染者5例，HCV感染者2例，HBV＋HCV＋HGV混合感染2例，HBV＋HCV＋TTV感染者1例，HGV＋TTV感染者1例，HEV＋HGV感染者1例。在这26例非甲－非庚型肝炎中有输血或输血制品、手术、拔牙、针灸、注射以及肝炎密切接触史17例。另12例肝癌中有输血、手术、拔牙、静脉注射史10例。检出血清中TTV DNA阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序，分析其基因变异的情况。结果：26例非甲－庚型肝炎中11例TTVDNA阳性（42．3％）。对其中两株（TTVSD4、TTVSD5）部分基因克隆测序，并与日本株（ABOO8394）相比较，其核苷酸序列同源性分别为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性（25．0％），对其中一株（TTVSD6）部分基因克隆与测序，与日本株（ABOO8394）相比较，苷核苷酸序列同源性为99％；TTV山东株三株间核苷酸同源性均为99％。结论：本项研究证实山东地区非甲－庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染、TTV感染可能具有嗜肝性，而且可能与肝功能损害有关，是引起非甲－庚型肝炎重要病原。     

陕西地区输血传播病毒的感染状况及部分基因序列分析

目的分析陕西地区不同人群中TVV(Transfusion transmitted virus,TTV)的感染情况及基因型。方法根据TTV ORFl区设计引物,建立巢式聚合酶链反应,检测不同人群中TTV-DNA。并对PCR阳性产物进行克隆、测序分析和同源性比较。结果 30例健康人群中,50例肝炎病人,40例非甲～非庚肝炎TTV-DNA阳性率分别为6.0％,22.5％,52.5％。对其中三组人群各任取1例(TTVSJ1、TTVSG2、TTVSF3进行PCR产物直接测序,其序列与日本株N22同源性分别为97.5％、97.8％和97.8％。结论陕西地区不同人群中均可有TTV感染存在;非甲～非庚型肝炎TTV-DNA阳性率占有较大比例;陕西地区TTV与日本株N22属同一亚型。     

急性非甲-庚型肝炎病人血清TTV DNA检测分析

目的为了解非甲-庚型肝炎的病原学感染状况,对献血员24例、急性非甲-庚型肝炎31例血清采用PCR技术进行输血传播病毒(TTV)检测。结果献血员TTV DNA阳性率为12.5％(3/24);急性非甲-庚型肝炎阳性率为41.94％(13/31),两者差异有非常显著意义(P<0.001)。结论 TTV除导致肝炎外还能以携带方式存在,深入研究TTV对肝炎和携带者的防治具有重要意义。     

TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测及临床意义

目的 研究TTV在非甲～庚型肝炎中的临床意义。方法 用聚合酶链反应(PCR)方法检测了50例非甲～庚型肝炎的TTV DNA。结果 在50例肝炎患者中,TTV DNA阳性检出率为28.O％(14/50)。结论 TTV感染可能是非甲～庚型肝炎的病因之一。     

非甲～庚型慢性肝炎患者中TTV检测及临床意义

研究TTV在非甲～庚型慢性肝炎患者中的感染状况及临床意义。采用巢式PCR法对 4 4例非甲～庚型慢性肝炎患者血清中TTVDNA进行检测 ,并与肝组织病理学结果比较。 4 4例中 ,TTVDNA阳性率为 2 7 3% (12 / 4 4 ) ,TTV阳性组肝组织损伤程度记分高于TTV阴性组 ,但差异无显著性 (P >0 0 5 )。TTV感染可能是导致非甲～庚型慢性肝炎肝组织病理损害的原因之一     

用微板核酸杂交—ELISA技术检测不同人群TTV感染状况

目的 用微板核酸杂交—ELISA技术检测皖北地区不同人群TTV感染情况。方法 用PCR法将病人血清标本中的TTV DNA扩增后,与两条特异性探针夹心杂交,通过酶联显色检测血清标本中的TTV DNA并进行分型。结果 TTV DNA在学生、血透患者、肝病患者中的阳性率分别为3.3％、16.7％和13.5％,前者与后两者比较差异均有显著性(P<0.05)。14例NA～NE肝炎的TTV DNA阳性率为14.3％。本地区流行的TTV可分为两个主要基因型,其中以Ⅰ型为主(66.7％),Ⅱ型次之(25％),少部分存在混合感染(8.3％)。结论 安徽省皖北地区一般人群、血透患者和肝病患者中均存在TTV感染,后两者为TTV感染的高危人群。TTV不是本地区NA～NE肝炎的主要病因。安徽省皖北地区流行的TTV的基因型以Ⅰ为主。     

山东泰安地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

目的 探讨山东非甲-庚肝炎和肝癌患者输血传播病毒(TTV)感染状况和基因变异情况。方法 应用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测26例山东泰安地区非甲-庚型肝炎和12例肝细胞癌(HCC)患者血清中TTVDNA，并对阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序，分析其基因变异的情况。结果 26例非甲-庚型肝炎中11例TTVDNA阳性(42．3％)。对其中两株(TTVSD4、TTVSD5)部分基因克隆测序，并与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性分别为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性(25．0％)，对其中一株(TTVSD6)部分基因克隆与测序，与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性为99％；TTV山东泰安三株问核苷酸同源性均为99％。结论 研究证实山东泰安地区非甲～庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染，TTV感染可能具有嗜肝性，而且可能与肝功能损害有关，是引起非甲～庚型肝炎的重要病原。     

非甲－非庚型肝炎肝组织中经输血传播病毒DNA的原位检测

目的探讨非甲－非度型病毒性肝炎患者肝组织中经输血传播病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ,ＴＴＶ）ＤＮＡ的表达。方法采用地高辛素标记ＴＴＶＤＮＡ探针以原位杂交技术对１９例血清学甲、戊型肝炎病毒标志物、免疫组织化学检测肝组织中ＨＧＶＮＳＳ均用性的急、慢性病毒性肝炎患者肝组织进行检测。结果１９例肝组织中６例检出ＴＴＶ基因阳性（３１．５８％）,其中急性轻型肝炎４例（３０．８０％）,慢性肝炎２例（３３．３３％）。ＴＴＶＤＮＡ表达于肝细胞核或胞浆内。在急性肝炎,ＴＴＶ阳性细胞弥漫分布于肝小叶内,慢性肝炎于汇管区附近较为密集。６例中５例患者有转氨酶增高。结论非甲－非庚型病毒性肝炎肝组织中ＴＴＶＤＮＡ的检出表明ＴＴＶ为一种新型的嗜肝性病毒。     

HBsAg阴性慢性乙型病毒性肝炎患者的临床与病理分析

目的研究HBsAg阴性慢性乙型病毒性肝炎患者的临床和病理特点,探讨其在不明原因肝病中的发病情况及临床意义。方法对62例HBsAg阴性不明原因反复肝功能异常的慢性肝炎患者用巢式PCR方法检测患者血清HBV—DNA,并行肝组织活检,免疫组化检测肝组织中HB—sAg和HBcAg,排除常见嗜肝病毒感染及其它原因的肝损害。结果62例HBsAg阴性不明原因肝炎患者中血清HBV—DNA阳性11例,其中2例荧光定量PCR阳性（2／62）,9例巢式PCR阳性（9／60）,阳性率为17．74％（11／62）,肝组织病理及免疫组化亦证实为慢性乙型病毒性肝炎。对照组2例阳性（2／25,8％）,两组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论HBsAg阴性慢性HBV感染是不明原冈肝病的主要原因之一。