生长抑素预防猕猴肠缺血再灌注后的胰腺炎

目的观察肠缺血再灌注(intestinal ischemia reperfusion,IIR)对胰腺组织病理改变的影响及生长抑素(somatostatin,SST)的治疗作用。方法15只健康猕猴分为对照组、IIR组、SST组,每组5只。放免法检测外周血SST含量,酶比色法测定血清淀粉酶及脂肪酶,ELISA法检测血清及小肠黏膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平,镜下观察胰腺组织病理变化。结果IIR组外周血SST为(62.17±13.56)pg/ml,较对照组的(160.61±33.84)pg/ml显著减少(P<0.05),血淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、TNF-α也均显著升高(P<0.05),胰腺组织出现病理性改变。SST组血SST水平为(156.32±30.25)pg/ml,较IIR组显著升高(P<0.05),血淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、TNF-α均明显下降(P<0.05),胰腺组织病理改变减轻。结论SST可预防IIR所导致的胰腺病理损伤。     

猕猴肠缺血再灌注后器官组织病理及功能变化实验研究

目的动态观察猕猴肠缺血再灌注(IIR)后重要器官病理及功能变化。方法2005年1月至12月,四川大学华西医院人类疾病相关多肽研究室将15只猕猴随机分成正常对照及IIR2组。IIR组在失血基础上,夹闭5只猕猴肠系膜上动脉,持续1h后松夹恢复血液灌流,记录此后24h内动物的临床表现及心、肺、肝、肾的功能变化和脏器大体及组织病理改变。正常组除不夹闭肠系膜上动脉外,其余同IIR组。结果(1)IIR组瞬间即引起平均动脉压下降30%。14h后平均动脉压下降38.5%,波动幅度增加1.6倍;术前心率(95±13)/min,IIR组14h后显著加快至(193±51)/min,P<0.05;但所有猕猴心肌无明显组织病理改变。(2)在IIR组14h后呼吸频率由(30±3)/min增加到(59±17)/min,腹胀、小肠积气明显,肺、小肠炎性损伤明显。(3)IIR组尿量与IIR前[(33.3±27.2)mL/h]比较,IIR后24h尿量明显下降[(19.9±17)mL/h],P<0.05;血肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)分别升高31.6%和77.3%;丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)较IIR前均增加了2倍以上;肝、肾可见明显组织病理损伤。(4)外周血WBC与对照组比较差异无显著性,中性粒细胞(NEUT)百分比升高38%,体温持续<35℃。结论严重IIR持续1h可引起长时间有效循环血容量不足,其组织病理炎性损伤较早发生在富含免疫细胞的脏器,IIR后14h内可能是避免多器官功能障碍综合征(MODS)发生的重要治疗窗口。     

缺血再灌注损伤与急性胰腺炎

急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)的发病机制尚不明确, 通过动物实验及临床研究发现, 缺血再灌注损伤在其发病机制中具有重要作用.微循环障碍、自由基生成增多、细胞内钙超载, 炎性介质、白细胞及血小板的作用、肠源性内毒素血症等因素综合作用导致胰腺缺血再灌注损伤, 这可能是AP发病环节中的共同通路. 本文就胰腺缺血再灌注损伤的发生机制作一综述.     

生长抑素对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制探讨

目的：观察生长抑素对大鼠小肠缺血再灌注（ IR）的保护作用,并探讨其机制。方法将40只大鼠随机分为4组各10只,其中IR组、缺血组和再灌注组采用肠系膜上动脉夹闭—松夹闭的方法建立大鼠小肠IR模型,假手术组仅麻醉、剖腹、关腹。缺血组于缺血期、再灌注组于再灌注期均持续泵入生长抑素3．5μg／（kg· h）,IR组和假手术组均不泵入生长抑素。再灌注后1h取出小肠,采用γ-放射计数仪测定胰岛素从肠黏膜到浆膜的每分计数（ CPM）,采用ELISA法检测肠组织匀浆中的TNF-α、IL-1、IL-6。结果各组小肠组织TNF-α、IL-1、IL-6水平和CPM比较,IR组、再灌注组＞缺血组＞假手术组,P均＜0．05;IR组与再灌注组比较,P均＞0．05。结论缺血期应用生长抑素对小肠IR大鼠的保护作用最明显,可能与其减少炎性反应和降低肠黏膜通透性有关。     

猕猴肠缺血再灌注后肠道菌群变化与肠黏膜屏障损伤的关系

肠道菌群移位是多器官功能障碍的重要机制之一,但其与肠黏膜天然免疫有何关系?细菌移位究竟发生在大肠还是小肠?目前尚不清楚。目的:探讨肠缺血再灌注后猕猴肠道菌群的变化及其对机体的影响。方法:通过肠系膜上动脉钳闭——松开造成猕猴肠缺血再灌注损伤;细菌培养分析回肠和结肠菌群的变化;免疫组化SP法检测回肠组织中Toll样受体(TLR)2和TLR4的表达;HE染色观察猕猴肠道组织学改变;取门静脉血行血培养,观察菌血症发生情况。结果:猕猴肠缺血再灌注损伤后,回肠和结肠腔内细菌较对照组分别增加约2×106倍和1×102倍,均以大肠杆菌等需氧菌为优势菌群;回肠黏膜出血坏死损伤明显,结肠病变轻微;回肠黏膜中普遍表达TLR2和TLR4,以上皮细胞膜表达最为明显。IIR组大肠杆菌菌血症发生率为100.0%。结论:猕猴肠缺血再灌注后,回肠中大肠杆菌等需氧菌过生长,启动天然免疫,导致肠黏膜屏障受损和肠道菌群移位。     

缺血预处理对肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察肠缺血预处理（IPC）对缺血再灌注（I／R）损伤的保护作用．探讨IPC在肠I／R损伤中的作用机制。方法对大鼠肠系膜上动脉进行4次循环的5min夹闭／Smin开放（即IPC）,24h后实施缺血30min再灌注24h,制作I／R损伤模型。检测IPC后肠组织一氧化氮（NO）含量（以NO2^-／NO3^-代表）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量及观察肠肌间神经丛一氧化氮合成酶（NOS）阳性神经元的变化,检测血清NO及血浆二氨氧化酶（DAO）．采用Chiu评分法观察肠组织损伤情况。结果IPC后肠组织NO、SOD含量下降．而MDA含量明显升高,肠肌间丛NOS阳性神经元数明显降低,DAO水平明显降低,肠组织损伤程度明显减轻。结论IPC对I／R损伤有明显保护作用,其机理与灭活了氧自由基,降低NO含量有关。     

心脏缺血后再灌注损害

在心脏直视手术中,为了获得安静无血的手术野,需要暂时阻断冠状循环血流。如何在阻断冠状循环期间最大限度的减轻心肌细胞的缺血缺氧性损害以及提高心肌内能量贮备是近二十年来心肌保护研究的重点。其中心肌再灌注损害则又是心肌保护研究中受     

远隔器官缺血再灌注致肠损伤机制研究进展

缺血再灌注损伤是临床常见的病理生理过程。脑、肝脏、肢体、肾脏等缺血再灌注除导致器官本身损伤外,还可导致远隔器官如肠损伤。脑缺血再灌注致肠损伤机制与神经分泌功能异常、神经肽调节失衡、自由基损伤、血栓素和前列环素比例失衡、肿瘤坏死因子α作用等密切相关。肝缺血再灌注引起肠损伤的原因尚不完全清楚,其机制可能与内毒素刺激、氧自由基生成、炎症反应、线粒体损伤、钙超载等有关。当缺血肢体恢复血供后,在造成局部肢体损伤的同时,包括小肠在内的多组织器官亦可受到损伤,其机制主要与自由基生成、中性粒细胞活化、补体激活、细胞凋亡、一氧化氮作用减弱等有关。肾脏缺血再灌注致肠损伤的机制与自由基增多、炎症反应爆发、钙内流增多、细胞凋亡等多种因素有关。     

一氧化氮与肢体缺血再灌注后肺损伤

一氧化氮（NO）参与了肢体缺血再灌注后肺损伤，一方面内皮型NO减少参与了肺动脉高压的形成、引起器官的灌注量不足、促进“无复流”现象的发生，另一方面诱导型NO升 高则可能通过降低血管的反应性维持器官的灌注，抗血小板和白细胞聚集，参与中性粒细胞的呼吸爆发，发挥非特异性的免疫功能、清除氧自由基、抑制脂质过氧化等而起代偿性的保护作用。NO生成过多或不足也会对机体产生不利的影响。     

The effect of estrogen on hepatic microcirculation after ischemia/reperfusion

Background and aims Gender dimorphism in clinical manifestation of sepsis, hemorrhage, and trauma is still under investigation. Several experimental studies have indicated a protective effect of estrogen. Nonetheless, the effect of gender on hepatic ischemia/reperfusion remains controversially discussed, and the influence of estrogen is still unclear. In the present study, we investigated whether hepatic ischemia/reperfusion (I/R) injury is gender-dependent and if hepatic microvascular reperfusion injury can be prevented by estrogen. Materials and methods Eight female and eight male Sprague-Dawley rats were subjected to 90 min left lobar ischemia followed by 60 min reperfusion. Additional six males were pretreated with 17β-estradiol 24 h before I/R. Six female and six male rats served as nonischemic sham animals. By means of intravital microscopy, sinusoidal perfusion, leukocyte–endothelial cell interaction, and Kupffer cell activity were analyzed. Finally, arterial blood and liver tissue samples were taken for histomorphological analysis and liver enzyme determination. Results After hepatic ischemia/reperfusion, animals revealed a significant gender-specific impairment of hepatic microcirculation, whereas Kupffer cell depression, sinusoidal perfusion failure, leukocyte–endothelial cell interaction within post sinusoidal venules, and parenchymal liver cell damage were more pronounced in male animals. Pretreatment with estrogen caused a normalization of Kupffer cell dysfunction and an amelioration of sinusoidal perfusion failure and venular leukocyte–endothelial cell interaction. However, estrogen did not protect from manifestation of post ischemic parenchymal cell damage. Conclusion Hepatic ischemia and reperfusion generate a gender-specific occurrence of microvascular injury, which seems to be partially mediated by estrogen. However, additional factors may contribute to the initial post ischemic parenchymal cell damage. M. Burkhardt and J.E. Slotta equally contributed to this work.     

肠缺血再灌注时肠道菌群变化及胃肠多肽的作用

目的探讨肠缺血再灌注(IIR)后猕猴肠道菌群变化的原因。方法将10只健康成年猕猴分为对照组和IIR组,每组各5只。IIR组肠系膜上动脉夹闭60 min,松解再灌注24 h,造成缺血再灌注损伤。对照组行假手术。观察动物肠道大体形态改变,测定胃pH值;细菌培养分析回肠菌群的变化;免疫组化定位测定回肠局部胃肠多肽的分布,并用放射免疫分析法定量测定其水平变化,并在体外将胃肠多肽与肠道细菌共向孵育,观察两者有无相互作用。结果猕猴IIR损伤后,回肠内细菌较正常增加约106倍,以大肠杆菌等需氧菌为优势菌群;小肠明显充血扩张;胃内pH值由2.80±0.84增至7.20±0.84,伴有胆汁反流;全回肠组织中胃肠多肽(生长抑素、血管活性肠肽、P物质)明显增加,而黏膜中生长抑素及血管活性肠肽的浓度却减少;胃肠多肽与肠道细菌共同培养后,胃肠多肽的含量及细菌数量均无明显变化。结论猕猴IIR后,小肠细菌过度生长可能由小肠动力降低直接或间接导致。小肠肌间神经丛中的生长抑素及血管活性肠肽增加可能是此刻小肠动力降低的启动因素。     

生长抑素对急性坏死性胰腺炎大鼠胆碱能抗炎通路的影响

目的 探讨生长抑素(SS)对ANP大鼠血清乙酰胆碱酯酶(true choline esterase,TChE)和乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)及IL-6和TNF-α水平的影响.方法 将30只SD大鼠随机分成对照组、ANP组和SS组,每组10只.以胆胰管注入牛胆酸制备ANP模型,SS组于制模后即刻皮下注射SS 34μg/kg体重.检测各组血WBC、血糖及血清ALT、AST、LDH、淀粉酶、TNF-α、IL-6、TChE、ChAT含量.结果 ANP组血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较对照组明显升高,而血清ChAT则明显降低(P＜0.01);血清IL-6、TNF-α与ChAT呈负相关(r=-0.87,P=0.007;r=-0.96,P=0.000),与TChE呈正相关(r=0.98,P=0.000;r=0.89,P=0.004).SS组的血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较ANP组显著降低,而血清ChAT则显著升高(P＜0.01).3组血糖含量无显著差异.对照组、SS治疗组和ANP组血WBC、ALT、AST及LDH依次升高(P＜0.01).结论 SS可能通过增加ANP大鼠ChAT活性和降低TChE活性,减少IL-6、TNF-α分泌,从而减轻SIRS和脏器功能受损的程度.     

益生元对急性胰腺炎大鼠肠屏障功能的影响

目的 研究肠道补充益生元对急性胰腺炎肠上皮细胞紧密连接和屏障功能的影响.方法 Wistar大鼠腹腔注射左精氨酸建立AP模型,按随机数字法分组法分成对照组、AP组、益生元组.益生元组于造模前7 d开始给予益生元4 g·kg-1·d-1.建模后12 h处死大鼠,心脏取血检测血浆二胺氧化酶(DAO)活性,观察空肠病理变化、采用免疫组化方法检测紧密结合蛋白Occludin的含量.结果 AP组的血浆DAO活性为(7.29±0.68)U/L,显著高于对照组的(2.01±0.34)U/L(P＜0.01)和益生元组的(3.44±0.59)U/L(P＜0.05).AP组肠上皮occludin蛋白表达的灰度值为95.1±9.2,明显高于对照组的44.7±8.2和益生元组的59.7±7.8(P＜0.01).益生元组occludin表达也显著高于对照组(P＜0.05).结论 AP大鼠补充益生菌可增加肠上皮occludin蛋白表达,维持肠上皮紧密连接,维持正常的肠道通透性,从而达到保护肠黏膜屏障的效果.     

Non-occlusive mesenteric ischemia and its associated intestinal gangrene in acute pancreatitis

Background/Aims: Non-occlusive mesenteric ischemia (NOMI) has been defined as diffuse intestinal ischemia that often results in intestinal gangrene in the presence of a patent arterial trunk. The prevalence and nature of NOMI in acute pancreatitis was investigated. Methods: A total of 120 consecutive patients with acute pancreatitis managed in the Department of Surgery II, Kumamoto University Medical School, from April 1992 through December 2002, were investigated retrospectively. Among them, 60 patients had the severe form. Results: The overall mortality of acute pancreatitis patients was 8.3% (10/ 120). The prevalence and mortality of acute pancreatitis associated with NOMI were 6.7% (8/120) and 63% (5/8), respectively, while those of patients with NOMI-associated intestinal gangrene were 4.2% (5/120) and 100% (5/5), respectively. The mortality of patients with severe acute pancreatitis who did not develop NOMI was 10% (5/52). All patients with NOMI-associated intestinal gangrene quickly progressed and subsequently died of multiple organ failure. Plasma creatine phosphokinase (CPK) and lactate levels were elevated significantly in patients with NOMI. Conclusion: Acute pancreatitis associated with NOMI was extremely severe. If the plasma CPK and lactate levels are extremely high, NOMI should be suspected.     

丙氨酰谷氨酰胺对脑缺血再灌注损伤小鼠肠道通透性改变的影响

目的探讨丙氨酰谷氨酰胺(alanyl-glutamine,GLN)对脑缺血再灌注损伤小鼠肠道通透性改变的影响。方法选择普通C57BL/6雄性小鼠28只,喂养1周后随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组、溶剂对照组(生理盐水灌胃)、GLN干预组(GLN 0.02g/只灌胃),每组7只,假手术组仅充分游离右侧颈总动脉及其颈动脉分叉,不插入栓线,其他3组建立MCAO模型。采用氯化三苯基四氮唑染色评估脑梗死面积,流式细胞术检测循环单核细胞亚群比例,检测血浆脂多糖及D-乳酸盐水平,采用异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FD4)法间接检测肠道通透性变化。结果与假手术组比较,MCAO组、溶剂对照组及GLN干预组小鼠Ly6Chi单核细胞比例、血浆脂多糖及FD4水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。GLN干预组Ly6Chi单核细胞亚群比例[(61.13±7.50)%vs (74.43±4.50)%和(75.26±3.39)%]及血浆脂多糖[(2.88±0.32)EU/ml vs (4.23±0.57)EU/ml和(4.22±0.40)EU/ml]明显低于MCAO组与溶剂对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。GLN干预组D-乳酸盐水平及FD4水平较MCAO组与溶剂对照组降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠脑缺血再灌注损伤后GLN干预可有效缓解炎性反应,减轻脑损伤。