结核患者外周血单个核细胞培养液及外周血骨桥蛋白水平检测及其临床意义

国内外许多研究表明结核感染的发生与机体细胞免疫功能失衡有关,体内细胞因子及Th1/Th2应答平衡对结核病的进展、预后发挥重要影响作用.近年来国外研究发现一种与骨代谢密切相关的分泌型细胞外基质磷蛋白Ⅰ,又称骨桥蛋白Osteopontin,OPN)与结核病的发病有一定的关系[1].我们对44例结核患者外周血骨桥蛋白、IL-l8及IL-4水平进行检测,并与20例健康者进行对照,同时检测外周血单个核细胞经卡介苗刺激后培养上清液中OPN、IL-18、IL-4水平变化,以了解骨桥蛋白在结核发病中的作用.     

外周血单个核细胞EB病毒DNA检测的结果分析及临床意义

目的:分析外周血单个核细胞EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)的DNA检测的结果分析及临床意义.方法:选择2020年1月至2020年12月于本院疑似EBV感染进行诊疗的120例患者,进行EBV核酸采集提取,将已知EBV-DNA含量标本作为阳性对照,予以PCR检测.对比EBV-DNA在不同人群中的分布...     

外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒感染的研究进展

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染乙肝（ＨＢ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ），ＨＢＶ－ＤＮＡ以游离和整合型两种形式存在于ＰＢＭＣｓ内。在ＰＢＭＣｓ内复制与表达。研究ＰＢＭＣｓ内ＨＢＶ感染对于探讨ＨＢ的临床进程、治愈和指导治疗等均具有重要的意义。最近提出了一种与上述相反的观点，ＰＢＭＣｓ内有关的ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＲＮＡ是吸附的结果，而非病毒的复制。     

IL-2或IL-15协同结核分枝杆菌抗原诱导人外周血单个核细胞体外扩增细胞的特性比较

目的 分析白细胞介素2(IL-2)或IL-15协同结核分枝杆菌抗原(MTB-Ag)诱导人外周血单个核细胞(PBMC)扩增细胞的生物学特性。方法 采用MTB-Ag联合IL-2或MTB-Ag联合IL-15体外分别刺激正常人PBMC,培养至第12天时,经流式细胞术检测扩增细胞中γδT细胞、自然杀伤(NK)细胞和CD4+T细胞所占的比例,以及分析3种淋巴细胞扩增的绝对数量。同时用MTT法检测两组扩增细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结果 与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞中γδT细胞所占比例明显高于前者,NK细胞所占比例明显低于前者;而两组扩增细胞中CD4~+T细胞所占比例并无显著性差异。与2个刺激组中3种淋巴细胞数量的分析结果一致。并且MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞对不同肿瘤细胞均具有显著的杀伤活性,但与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,并无显著性差异。结论 IL-15协同MTB-Ag可高效诱导人PBMC产生以γδT细胞增殖为主的效应细胞,该扩增细胞在体外对肿瘤细胞具有显著的杀伤活性。     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞凋亡的检测及意义

目的研究激活诱导细胞死亡 (AICD)现象在乙型肝炎慢性化和重型化机制中的意义。方法分离 2 0例慢性 /慢性重型乙型肝炎病人与 10例健康献血员外周血单个核细胞 (PBMC) ,在 PHA的刺激下培养 72 h后收集细胞 ,经流式细胞仪检测凋亡。结果 PBMC凋亡率乙型肝炎组明显高于正常对照组 [(2 5 .48± 14.0 7) % vs(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1];慢性乙型肝炎组 [(30 .5 7± 13.43) % ]明显高于正常对照组 [(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1]和慢性重型乙型肝炎组 [(13.5 9± 6 .44 ) % ,P<0 .0 1];PBMC凋亡率乙型肝炎 HBe Ag(+ )组明显高于正常对照组 [(2 9.5 0± 12 .5 4) % vs(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1]。结论 AICD可能是形成 HBV慢性感染免疫耐受的一个重要机制。     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCVRNA检测及其临床意义

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中ＨＣＶＲＮＡ检测及其临床意义空军总医院传染科应用套式ＰＣＲ检测了８８例丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ；结果发现：慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于急性丙肝患者（Ｐ＜０．０...     

感染HBV外周血单个核细胞的研究进展

乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）于1966年被发现,属于嗜肝DNA病毒科,是全球传染性肝病的主要病因之一。现已证明HBV除肝细胞外还有泛嗜性,可存在于除肝脏以外的其他组织细胞中,外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcell,PBMC）也是其靶细胞之一。由于PBMC是T和B淋巴细胞、巨噬细胞、NK细胞等免疫活性细胞的集合体,其在机体免疫过程中具有重要作用,冈此在PBMC中发现HBVDNA及其对机体所产生的影响已引起国内外学者的广泛关注。现就近来感染HBV的PBMC相关研究进展进行综述。     

地高辛标记探针原位杂交法检测肝病患者外周血单个核细胞中TTV-DNA

为检测肝病患者外周血单个核细胞(PBMC)中TTV-DNA(输血传播病毒脱氧核糖核酸), 以TTV ORF1为模板, 应用地高辛(Dig)作为标记物, 经聚合酶链反应(PCR)制备探针, 建立原位杂交方法进行检测.结果显示: 血清TTV-DNA阳性组, 双链探针检测PBMC中TTV-DNA, 阳性检出率为58.06%(18/31); 血清TTV-DNA阴性组, 双链探针检测PBMC中TTV-DNA, 阳性检出率为27.59%(8/29).双链探针阳性者, 再以负链探针检测其复制情况, 阳性率为22.2%(4/18). 结论: TTV可感染PBMC并在PBMC中复制.     

外周血单个核细胞诱导培养破骨细胞

目的：从人外周血单个核细胞诱导培养获得高产量高纯度破骨细胞,为破骨细胞的体外研究提供丰富的细胞来源。 方法：从外周血分离单个核细胞贴壁培养,采用0.25％胰蛋白酶／0.02％EDTA联合消化,纯化后以RANKL和M-CSF加以诱导(A组),并与未经消化之传统方法（B组）比较。结果：与B组相比,A组可获得(1 426±204)个破骨细胞（P<0.05）,0.25％胰蛋白酶／0.02％EDTA联合消化可使破骨细胞纯化率达90％。诱导生成的破骨细胞TRAP染色阳性,功能试验显示具有噬骨能力。结论：联合消化结合RANKL/M-CSF诱导培养法可产生大量的破骨样细胞,方法简便而且经济实用。     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞的进一步研究

本文用三项不同技术 ,同时检测 2 0例慢性丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)中的ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ5抗原 ,以进一步了解ＨＣＶ感染ＰＢＭＣ的状况 ,并对不同方法的检测结果进行比较分析。1　病例来源　 2 0例慢性丙型肝炎患者为同济医大附属协和医院住院或门诊病人 ,男性 13例 ,女性 7例 ,年龄在 14～ 6 5岁之间。诊断依据 1995年全国传染病会议修订的标准。甲、乙、戊型肝炎病毒感染指标均阴性。 15例健康成人作为对照。2　方法　用ＲＴ ＰＣＲ检测血清ＰＢＭＣ中的ＨＣＶＲＮＡ ,试剂盒系浙江温州伊利康生物技术有限…     

活动性结核病患者外周血单个核细胞中结核分枝杆菌抗原特异性多能CD4+和CD8+T淋巴细胞的特征研究

目的 研究活动性结核病患者外周血单个核细胞中结核分枝杆菌抗原特异性多能T淋巴细胞细胞因子的分泌特征.方法 利用γ干扰素释放试验和多色流式细胞术分析了13例活动性结核病患者、11例肺部感染性/肿瘤疾病患者以及14例健康对照者外周血中结核分枝杆菌抗原特异性(ESAT-6和CFP-10)CD4+Th1和CD8+Tc淋巴细胞表达细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2的情况.结果 与肺部感染性/肿瘤疾病组和健康对照组相比:(1)活动性结核病组具有较低比例的分泌TNF-α+的CD4+Th1细胞、较高比例的分泌IFN-γ+和IFN-γ+TNF-α+IL-2+的CD4+Th1细胞;(2)活动性结核病组具有较高比例的分泌IFN-γ+TNF-α+IL-2+的CD8+Tc细胞.结论 实验结果提示活动性结核病患者中表达IFN-γ+TNF-α+IL-2+的多能CD4+Th1及CD8+Tc细胞,可能在区别活动性结核病与肺部感染性/肿瘤疾病方面具有一定的临床参考价值.     

IL-2或IL-15协同结核分枝杆菌抗原诱导人外周血单个核细胞体外扩增细胞的特性比较北大核心CSCD

目的分析白细胞介素2(IL-2)或IL-15协同结核分枝杆菌抗原(MTB-Ag)诱导人外周血单个核细胞(PBMC)扩增细胞的生物学特性。方法采用MTB-Ag联合IL-2或MTB-Ag联合IL-15体外分别刺激正常人PBMC,培养至第12天时,经流式细胞术检测扩增细胞中γδT细胞、自然杀伤(NK)细胞和CD4+T细胞所占的比例,以及分析3种淋巴细胞扩增的绝对数量。同时用MTT法检测两组扩增细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结果与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞中γδT细胞所占比例明显高于前者,NK细胞所占比例明显低于前者;而两组扩增细胞中CD4^+T细胞所占比例并无显著性差异。与2个刺激组中3种淋巴细胞数量的分析结果一致。并且MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞对不同肿瘤细胞均具有显著的杀伤活性,但与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,并无显著性差异。结论 IL-15协同MTB-Ag可高效诱导人PBMC产生以γδT细胞增殖为主的效应细胞,该扩增细胞在体外对肿瘤细胞具有显著的杀伤活性。     

细胞凋亡对尖锐湿疣患者外周血单个核细胞的影响

目的 :探讨激活诱导细胞死亡 (AICD)对尖锐湿疣患者细胞免疫功能的影响。方法 :分离CA患者和健康体检正常人的外周血单个核细胞 (PBMC) ,在PHA的刺激下体外培养 2 4小时后收集细胞和上清液 ,经流式细胞术检测凋亡细胞 ,采用酶联免疫吸附试验检测培养上清液IL 2及IL 10。结果 :发现CA组新鲜血PBMC的凋亡率很低和对照组相似 (P >0 0 5 ) ,培养 2 4小时后CA患者的外周血单个核细胞凋亡明显高于正常对照组 (P <0 0 0 1) ,CA患者的培养上清液IL 2浓度明显低于对照组 (P <0 0 0 1) ,而IL 10浓度显著高于对照组 (P<0 0 0 1)。结论 :AICD可能是引起尖锐湿疣患者细胞免疫功能低下的一个重要机制 ,在尖锐湿疣患者发病机制中起重要作用。     

慢性肝病患者外周血单个核细胞CD95抗原的检测意义

ＣＤ95 (Ｆａｓ)抗原与ＣＤ95配体(ＣＤ95Ｌ)是人体多种细胞表面的一种膜蛋白 ,目前已证实在细胞凋亡过程中ＣＤ95系统起了重要作用 ,并参与机体的免疫反应。ＣＤ95较广泛的分布于全身淋巴细胞及重要组织细胞 ,当这些细胞经活化后可诱导表达ＣＤ95抗原。ＣＤ95抗原在慢性肝炎患者肝脏组织中的表达已被广泛报道 ,并认为肝病患者肝细胞凋亡现象普遍存在。ＣＤ95Ｌ主要表达于活化Ｔ细胞和ＮＫ细胞 ,在肝脏组织中也发现有ＣＤ95Ｌ的表达。我们应用流式细胞术 (ＦＭＣ)对慢性肝炎患者外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)ＣＤ95抗原表达情况进行分析 ,旨…     

乙型肝炎血清诱导人外周血单个核细胞凋亡的检测及意义

本实验选取我院10例健康献血员(男6例,女4例,年龄20～45岁,平均年龄3340±696岁,甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒标志皆阴性,肝功正常)。ＨＢＶ阳性血清来自本科一慢性乙型肝炎患者,该患者血清病毒标志检测为ＨＢｓＡｇ( )、ＨＢｅＡｇ( )、抗ＨＢｃ( )、抗ＨＢｃＩｇＭ( ),经ＨＢＶ定量ＰＣＲ检测,含ＨＢＶ498×104拷贝/ｍｌ,无菌采集血清后80℃冰箱冻存,用前经56℃30ｍｉｎ灭活补体。抽取健康献血员静脉血8ｍｌ(肝素抗凝),用淋巴细胞分离液按常规分离外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ),将ＰＢＭＣ调成1×106/ｍｌ浓度,每孔接种1ｍｌ于12孔培养板上…     

聚合酶链反应检测结核分枝杆菌DNA诊断关节结核的临床评价

目的评价聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测关节结核标本结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)诊断关节结核的临床价值。方法对20份标准标本(5份结核分枝杆菌标准菌株、5份卡介苗和10份其它细菌标本)分别应用PCR盲法检测结核分枝杆菌DNA。对95例关节结核标本和98例非关节结核标本分别应用PCR检测结核分枝杆菌DNA。应用疾病诊断方法的临床评价原则对PCR诊断关节结核的敏感性、特异性和准确性进行评价。结果 (1)20份标准标本PCR检测中,结核分枝杆菌和卡介苗均为阳性,而其它细菌均为阴性;(2)95例关节结核标本中,PCR阳性78例、阴性17例;98例非关节结核标本中,PCR阳性9例、阴性89例;(3)PCR检测关节结核标本结核分枝杆菌DNA的敏感性为82.11%、特异性为90.81%、准确性为86.60%、阳性预测值为89.80%、阴性预测值为84.00%;(4)PCR整个检测过程自动化控制,可在3~6h内完成。结论 PCR是一种敏感、特异、快速、简便、无创、标本微量的关节结核标本结核分枝杆菌检测方法,对于关节结核的早期、快速诊断与鉴别诊断具有极其重要的临床价值。     

外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒核酸与细胞因子含量变化

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒核酸与血清细胞因子变化关系。方法：采用荧光实时PCR技术定量检测76例慢性乙型肝炎患者和15例健康者外周血单个核细胞中HBVDNA含量，用ELISA法定量检测血浆细胞因子(IFN-γ、TNF—α、IL-4、IL-6、TGF-β1、sIL-2R)水平。结果：①慢性乙型病毒性肝炎中细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、TGF-β1、sIL-2R)水平明显高于健康对照组；②单个核细胞HBVDNA阳性组IFN-γ、TNF-α含量明显低于阴性组，而sIL-2R含量则高于阴性组但无统计学差异，IL-4、IL-6、TGF-β1含量无差异；③随着PBMCs中HBVDNA含量升高，TNF—α含量逐渐降低，IL-4和sIL-2R含量逐渐升高，而IFN-γ，IL-6、TGF-β1含量无显著性变化。结论：外周血单个核细胞HBVDNA持续存在及含量变化与细胞因子相对异常有关，进而导致肝细胞损伤。     

流式细胞仪检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞CD58+细胞百分率的研究

目的应用流式细胞术检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)CD58+细胞百分率,并探讨其与乙型肝炎的关系.方法采用直接免疫荧光法常规提取PBMC,应用流式细胞仪分别检测43例HBV感染者及11例正常对照的PBMC CD58+细胞百分率,同时检测血清ALT、AST水平.结果乙型肝炎各组患者PBMC CD58+细胞百分率较正常对照组明显增高(P＜0.05);乙型肝炎患者PBMC CD58+细胞百分率与血清ALT、AST呈显著正相关.结论乙型肝炎患者PBMC CD58+细胞百分率与疾病严重程度及肝细胞损伤严重程度有关.